医学微生物学培训课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,医学微生物学,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,医学微生物学,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,医学微生物学,*,医学微生物学,朊 粒,山东大学医学院 赵蔚明 教授,2,医学微生物学,本章重点与难点,1.,朊粒的定义。,2.,PrP,C,与,PrP,Sc,的主要区别。,3.,朊粒的抵抗力。,4.,何谓朊粒病？主要的人和动物朊粒病医源性,CJD,的危险因素及预防原则。,3,医学微生物学,朊粒,（,prion,）,Prion,(,朊粒,又称朊病毒）,*宿主细胞基因编码的构象异常的朊蛋白,*不含核酸，具有自我复制能力和传染性,*引起人和动物传染性海绵状脑病,（,TSE,s,）,4,医学微生物学,普鲁西纳,（,S.B.Prusiner,）,1982,年美国学者普鲁西纳首次证实羊瘙痒病致病因子的本质是一种不含核酸的传染性蛋白颗粒（,proteinaceous infectious particle,），命名为,prion,。荣获,1997,年诺贝尔生理学或医学奖。,1997,年,盖达塞,（,D.C.Gajdusek,）,50,年代末，美国学者盖达塞克证明库鲁病是人类第一个由“慢病毒”感染所致的传染性疾病，荣获,1976,年诺贝尔生理学或医学奖。,1976,年,TSEs,/Prion,研究中的诺贝尔奖获得者,5,医学微生物学,一、,生物学性状,*,prion,在电镜下呈纤维状或杆状，称羊瘙痒病相关纤维,（,SAF,）,。,*,在某些,TSEs,的脑组织中,prion,可聚集形成光镜下可见的淀粉样蛋白斑块。,SAF,6,医学微生物学,一、,生物学性状,*,prion,的本质,：,异常折叠的朊蛋白,*朊蛋白,（,prion protein,PrP,）,：,由宿主细胞,PrP,基因编码产生,人类,PrP,基因,(PRNP),位于,第,20,号染色体,小鼠,PrP,基因,(Prnp),位于第,2,号,染色体,7,医学微生物学,PrP,C,与,PrP,SC,*,细胞,PrP,基因编码产生细胞朊蛋白,（,cellular prion protein,PrP,C,），,PrP,C,以,螺旋为主，对蛋白酶,K,敏感，无致病性。,*某些条件下，,PrP,C,构象异常变化，形成具有致病作用的羊瘙痒病朊蛋白,（,scrapie prion protein,，,PrP,Sc,），,PrP,Sc,以,折叠为主，对蛋白酶,K,有抗性，具有致病性与传染性。,8,医学微生物学,PrP,C,与,PrP,Sc,的主要区别,Prp,c,prp,sc,分子构象,-螺旋占42，,-折叠仅占3,-折叠占43，,-螺旋占30,蛋白酶,K,的消化在非变性去污剂中,敏感,可溶,抗性,不可溶,存在部位,正常及感染动物,感染动物,致病性,无,有致病性与传染性,9,医学微生物学,PrP,C,和,PrP,S,c,的空间结构模式图,10,医学微生物学,PrP,C,与,PrP,Sc,*,PrP,C,与,PrP,Sc,由同一染色体基因编码，两者的氨基酸序列完全一致，根本的差别在于它们空间构象上的差异。,11,医学微生物学,模板学说（,PrP,Sc,增殖机制示意图）,PrP*,PrPC,PrP*/PrPSC,PrPSC+PrPSC,外源性,prion,PrPC,PrP*,PrP*/PrPSC,PrPSC+PrPSC,PrPc,：突变的,PrPc,13,医学微生物学,抵 抗 力,p,rion,对理化因素有,很强的抵抗力,*,抵抗蛋白酶,K,的消化作用,*,标准的高压蒸气灭菌,（,121.3,20,min,）,不能破坏,p,rion,，需高压蒸气灭菌,134,、,2,h,，才能使其失去传染性,*,对辐射、紫外线、及常用消毒剂有很强的抗性,14,医学微生物学,二、致病性,*,prion,病：人和动物慢性退行性、致死性中枢神经系统疾病，即,传染性海绵状脑病,（,TSEs,）,。,*,prion,病的共同特点：,潜伏期很长（数年至数十年）,一旦发病呈进行性发展最终导致死亡,脑组织变性坏死（无炎症反应）,不能诱导感染宿主产生免疫反应,具有传染性,15,医学微生物学,人和动物的,p,rion,病,人类,Prion,病,动物,Prion,病,库鲁病,(kuru disease),羊瘙痒病,（,scrapie of sheep and goat）,克雅病,(creutzfeld-Jakob disease,CJD),水貂传染性脑病,(transmissible,mink encephalopathy,TME),格斯特曼综合征,(,Grestmann-Straussler syndrome,GSS,),鹿慢性消瘦症,（,chronic wasting disease of deer，CWD）,致死性家族失眠征,(,fatal familial insomnia,FFI,),牛海绵状脑病,(bovine spongiform encephalopathy,BSE),变异型克雅病,(variant CJD,v-CJD),猫海绵状脑病,（,feline spongiform encephalopathy,FSE）,16,医学微生物学,人类,prion,病,*,库鲁病：通过食尸的宗教仪式而感染，已杜绝。,*,克,-,雅病,（,CJD,）：,（,1,）散发性,CJD,：较常见，病因不明。,（,2,）家族性,CJD,：与遗传有关（,PrP,基因突变）。,（,3,）,医源性,CJD,：,Prion,污染临床诊疗过程导致个体间传染。,*,变异型克,-,雅病,(v-CJD),：源于疯牛病的,Prion,感染人体。,*,GSS,和,FFI,：,较罕见，与遗传有关（,PrP,基因突变）。,17,医学微生物学,疯牛病相关的,v-CJD,与病牛接触或进食病牛肉是人类,v-CJD,最主要的发病原因,Mad Cow Disease,18,医学微生物学,v-CJD,病人大脑组织切片,示,海绵状,病变,淀粉样蛋白沉淀,19,医学微生物学,*,免疫组化：确诊的方法。标本需先处理以破坏,PrP,C,，然后再用,PrP,单抗染色，可在组织切片中直接显示,PrP,S,c,。,*,Western blot,：确诊的方法。将脑组织样本匀浆、处理（破坏,PrP,C,）、电泳、转印至硝酸纤维膜，用,PrP,单抗检测,PrP,S,c,。,病原学确诊,检测致病因子,PrP,S,c,20,医学微生物学,*,ELISA,：,适用于大批量样品的筛查。,*基因分析：协助诊断遗传性,prion,病。,*,蛋白质错误折叠循环扩增技术,(PMCA),：灵敏度高，用于检测血液等体液中,PrP,S,c,。,21,医学微生物学,防治原则,*,医源性,P,rion,病的预防,可疑患者的手术器械、血液、体液等污染物须彻底灭菌,（,1mol/L NaOH,处理,1h,后，再高压灭菌,134,，,2h,），彻底销毁含,P,rion,的动物尸体、组织块或注射器等用品。,严禁退行性中枢神经系统疾病患者捐献组织器官。,医护人员及实验室人员应严格遵守安全操作规程。,22,医学微生物学,防治原则,*,BSE,及,vCJD,的预防,禁止用动物骨肉粉作为饲料添加剂喂养牛羊等反刍动物。对从有,BSE,国家进口的牛或牛制品，必须严格地进行特殊检疫。,23,医学微生物学,思考题,何谓,Prion,？,Prion,可导致人和动物哪些疾病？,比较,PrP,C,与,PrP,SC,的主要区别。,如何预防医源性,P,rion,病？,24,医学微生物学,中英文关键词,朊粒 （,prion,）,传染性海绵状脑病 （,transmissible spongiform encephalopathies,，,TSEs,）,细胞朊蛋白 （,cellular prion protein,PrP,c,）,羊瘙痒病朊蛋白 （,scrapie prion protein,，,PrP,S,c,）,库鲁病 （,kuru disease,）,克,-,雅病 （,creutzfeld-Jakob disease,CJD,）,变异型克,-,雅病 （,variant CJD,v-CJD,）,羊瘙痒病 （,scrapie of sheep and goat,）,牛海绵状脑病 （,bovine spongiform encephalopathy,BSE,）,25,医学微生物学,课外阅读资料目录,1 Brooks GF,Jawetz,Melnick&Adelbergs,MEDICAL MICROBIOLOGY 25th Edition,2,洪涛主编，传染性与非传染性痴呆症，科学出版社，,2011-03,3,徐耀先主编，分子病毒学，湖北科技出版社，,2000-01,4,黄文林主编，分子病毒学,(,第二版,),，人民卫生出版社，,2006-12,26,医学微生物学,