非小细胞肺癌患者EGFR基因检测课件

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,NSCLC,患者,EGFR,基因突变检测,腺癌的驱动基因,LCMC,(,美国,),MSN,(,法国,),中国,日本,EGFR,17%,13%,40%,50%,KRAS,22%,28%,7%,15%,ELM4-ALK,7%,2%,7%,5%,BRAF,2%,2%,2%,1%,HER2,1%,1%,NA,3%,PIK3CA,1%,1%,4%,NA,PTEN,NA,NA,6%,NA,MET,扩增,1%,1%,5%,4%,Nil,46%,33%,29%,22%,Kris ASCO 2019 Planchard ELCC 2019 Wu JSMO 2019 Mitsudomi JCCO 2019,97%,的基因突变互相排斥,单个突变数,ALK,AKT,BRAF,EGFR,HER2,KRAS,MEK1,MET,NRAS,PIK3CA,ALK (38),X,1,2,1,1,AKT (1),X,BRAF (9),X,1,EGFR (89),X,1,3,HER2 (3),X,KRAS (114),X,1,1,MEK1 (2),X,1,1,MET AMP (3),X,NRAS (2),X,PIK3CA (6),X,Kris MG. et al. ASCO 2019, Abstract # CRA7506,.,4,高加索人腺癌各基因构成比图,5,中国人肺腺癌各基因构成比图,关于,“,驱动基因,”,近,50% NSCLC,驱动基因已经被发现,双基因同时突变罕见,对已知的靶点，已有很多上市或在研的药物,驱动基因突变状态与人种、性别、病理类型、吸烟状况等有关，不同类型用药不同。,NSCLC,基因检测的意义,基因检测决定了分子靶向治疗,2019,年我国制定了,:,中国非小细胞肺癌患者表皮生长因子受体基因突变检测专家共识,EGFR,基因突变检测的临床意义,EGFR-TKI,一线治疗,必须,进行,EGFR,基因突变的检测，国内外均推荐,EGFR,基因突变阳性的,NSCLC,给予,EGFR-TKI,一线治疗,优势人群不代表个体：,尽管在女性、亚裔、不吸烟或少吸烟、腺癌,EGFR,基因突变发生频率较高，但在鳞癌、腺鳞癌，甚至,SCLC,中也可检测到,EGFR,基因突变。,EGFR,基因突变检测的临床意义,EGFR,突变不同类型疗效也不一样，,19-del,较,L858R,疗效好,检测的必要性,EGFR,基因突变检测的临床意义,化疗,能改变,EGFR,突变状态,264,例一线化疗的,bIV,期,NSCLC,患者的血,DNA,标本，,EGFR,突变率在化疗后显著降低（,23.1%,对,34.5%,，,P,1,毫升。如需长途运输，加入乙醇浸泡,60,分钟以上。为符合托运要求，可付运前可离心后倒掉试管内的乙醇，倒入所提供的标准试管，拧紧盖子，常温运输，确保,3,天内到达。,EGFR,检测方法,目前公认有两种：测序法和,ARMS,法（等位基因特异,PCR+,荧光探针）,EGFR,检测方法,测序法,ARMS,法,敏感度,1030%(,变异,),10.1 %(,变异,),发现突变,已知和未知,已知,石蜡包埋组织成功率,低,高,假阳性（交叉污染）,多,少,假阴性,多,少,检测流程,复杂漫长，污染多,简单快速,仪器成本,高,低,试剂成本,低,略高,EGFR,检测方法,北京协和张静报道：,82,例,NSCLC,直接测序法中,24,例无结果，,ARMS,法均有结果，且,16,例检测到变异,中华病理学杂志，,2019,37,（,5,）,有结果,变异率,测序法,70.7%,（,58/82,例）,43.1%(25/58,例）,ARMS,法,100%,（,82/82,例）,51.2 %(42/82,例）,关于胸水,EGFR,突变的检测,Cancer Sci. 2019;97(7):642-8.,Int J Cancer. 2019;119(10):2353-8.,Chang Gung Med J. 2019;29(4):373-9.,Br J Cancer. 2019;95(10):1390-5.,J Cancer Res Clin Oncol. 2019;136(9):1341-7.,国内外胸水标本,EGFR,检测的研究,作者,国家,/,地区,病例数,EGFR,突变率（,%,）,Kimura H,日本,24,33%,Soh J,日本,61,26%,Hung MS,台湾,29,41%,Kimura H,日本,43,25.6%,Jian G,中国,32,28.1%,用胸水检测肿瘤,EGFR,突变需要敏感方法,用胸水中细胞及无细胞液均可检测,EGFR,突变，且检出率基本相同,目前缺少胸水与肿瘤组织直接对比（配对样本检测）数据，故对其敏感度与特异性尚无结论,胸膜转移和胸水的对比研究,本研究的目的：探索胸腔积液与胸膜转移灶,EGFR,突变检测的一致性，从而判断当存在胸膜转移灶时，胸液,EGFR,基因突变状态检测的价值。,收集,2019,年,4,月,-2019,年,12,月间就诊于上海长海医院呼吸科符合入组条件患者的胸液标本及相应的胸膜转移病灶组织，共,35,对样本。,研究步骤,胸膜转移灶样本采集,电子胸腔镜在局麻下进行胸腔镜检查术,镜下见病灶后以活检,4-6,块组织，,10%,中性福尔马林固定，后包埋成蜡块,每例蜡块切取,10-12,片,5m,厚连续切片，切片在,37,烘箱内烤片,3h,后常温保存,研究步骤,胸腔积液样本采集,每例患者同时收集胸水,100-200ml,，常温静置,30min,后取上清,15ml,，,-80,保存，为待检测的胸液上清；,在去除上清液后，将剩余沉淀物室温,1000g,转速离心,10min,，包裹细胞沉淀，常规固定、包埋并切片（具体同胸膜转移灶标本），为待检测的胸液沉淀；,每例蜡块切取,10-12,片,5m,厚连续切片，切片在,37,烘箱内烤片,3h,后常温保存。,胸膜活检组织,EGFR,突变状况,病人数,EGFR,突变,突变率,%,P,男性,18,6,33.3,0.094,女性,17,11,64.7,有吸烟史,10,1,10,0.007,无吸烟史,25,16,64,胸液沉淀与相应胸膜转移灶,EGFR,突变的比较,胸膜组织,EGFR,突变,胸液沉淀,EGFR,突变,+,-,合计,+,12,4,16,-,2,8,10,合计,14,12,26,符合率为,73.1%,胸液上清与相应胸膜转移灶,EGFR,突变的比较,胸膜组织,EGFR,突变,胸液上清,EGFR,突变,+,-,合计,+,14,2,16,-,3,16,19,合计,17,18,35,符合率为,85.7%,胸液上清与相应沉淀,EGFR,突变的比较,胸液沉淀,EGFR,突变,胸液上清,EGFR,突变,+,-,合计,+,12,1,13,-,4,9,13,合计,16,10,26,符合率为,80.8%,胸液,EGFR,突变检测率的比较,敏感性,特异性,例数比,百分数,例数比,百分数,胸液沉淀,12/14,85.7%,8/12,66.7%,胸液上清,14/17,82.4%,16/18,88.9%,胸液沉淀,+,上清,16/17,94.1%,14/18,77.8%,结 论,以,ARMS,方法检测胸液中,EGFR,突变状态，与经胸腔镜取得的组织标本中的,EGFR,突变状态吻合率高；,临床上可以通过检测胸液，尤其是结合胸液上清和沉淀,EGFR,突变状况，来指导,EGFR-TKIs,的治疗。,对于晚期,NSCLC,患者，明确,EGFR,突变状态至关重要,胸液检测,EGFR,，结果确切，取材方便，切实可行,通过胸液检测,EGFR,，对临床治疗具有重要价值，值得推广,谢谢大家！,