实验题目血红蛋白测定与红细胞计数(精品)

,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,实验题目：血红蛋白测定与红细胞计数,检验诊断学教研室 张群智 教授,实验目的要求：,通过血红蛋白测定、红细胞计数实验要求：,1,、掌握红细胞计数、血红蛋白测定的原理、方法及注意事项。,2,、掌握血细胞计数板的结构,一、血红蛋白测定,(Hemoglobin,简称,Hb,),（氰化高铁血红蛋白法）,【,原理,】,血红蛋白中的亚铁离子（,Fe2+,）被高铁氰化钾氧化成高离子（,Fe3+,），血红蛋白转化成高铁血红蛋白，高铁血红蛋白与氰离子（,CN-,）结合，生成稳定的氰化高铁血红蛋白。用光电比色计在,540nm,波长比色。从,HicN,参考液制作的标准曲线上读取血红蛋白克数。,【,操作,】,取试剂,5,毫升加入血液,20ul,混匀置,5,分钟后用,721,光电比色仪，,540nm,波长，试剂为空白调,0,点比色，读取光密度，查标准曲线得结果。,红细胞计数,(red blood cell,简称,RBC),显微镜直接计数,(,试管法,),【,原理,】,一定量的血液经一定量等渗性稀释液稀释后，充入血细胞计数池中显微镜下计数,一定容积内的细胞，,再换算成每升标本的细胞数报告。,【,操作方法,】,l,、取红细胞稀释液,2.0ml,毫升，放入一小试管内。,2,、用血红蛋白吸管吸血至,l0ul,处。,3,、擦去管尖外部余血将血液迅速轻轻吹入盛有红细胞稀释液的试管内，吸上清液嗽洗吸管,2-3,次，立即摇匀。,4,、用玻棒取混悬液少量，充入计数池内。,5,、待,23,分钟，让红细胞完全下沉后，将计数板平放在显微镜台上，用低倍镜观察，如红细胞分布均匀即可换高倍镜进行计数。,红细胞计数的区域,:,中心大方格中的,5,个中方格,(,正中一个和四角各一个,),。,计数原则,:,数上不数下，数左不数右的计数原则即凡压在中方格边线,(,双线,),上的红细胞，只计上侧与左侧线上的细胞，而压在下侧与右侧线上者不计入。,【,计算,】,红细胞数,/L=5,个中方格内红细胞数,51020110,6,或,红细胞数,/L=5,个中方格内红细胞数,10010,12,式中,5 5,个中方格换算成,1,个大方格,10 1,个大方格容积为,0.1ul,，换算成,1.0,uL,。,201,血液的稀释倍数,10,6,由,u1,换算成,L,【,注意事项,】,1,、吸管、试管要注意清洁、干燥以防溶血，操作迅速避免血液凝固，如有血凝块应重新采血。,同时做血红蛋白测定，白细胞计数和分类计数，在采血时应先做血膜再做红细胞，然后做白细胞，血红蛋白检验，避免红细胞破坏。,2,、充液：,充液前，红细胞复液要充分摇匀，红细胞悬液注入计数池内要求分布均匀，不可有气泡，亦不可有多余液体外溢。,3,、质量控制：,中方格内红细胞分布应均匀，健康成人每中方格红细胞数约为,80100,个，各中方格内之红细胞相近，如悬殊过大,(,超过,10,个细胞以上的,),应重混匀再充填。,报告方式：,Hb,：,g,L,RBC:l0,12,/L,