从微生物的角度探讨卫生纸卫生的卫生

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,一、提出我们要讨论的问题,两千年前由蔡伦发明纸，改变了书写的历史。十九世纪，开始以木浆制纸。人类很多伟大的发明都是在无意识中创造出来的，卫生纸的发明也是如此。在将近一百年前的二十世纪初，美国史古脱纸业公司买下一大批纸，因运送过程中的疏忽，造成纸面潮湿产生皱折而无法使用。面对一仓库的无用的纸，大家都不知如何是好，该公司负责人亚瑟,史古脱却产生了一个想法，他想到在卷纸上打洞，变成容易撕下成一小张一小张的纸张。史古脱将这种纸命名为“桑尼”卫生纸巾，卖给火车站、饭店、学校等放置于厕所中，因为相当好用而大受欢迎，并慢慢普及到一般家庭中，同时为公司创下了许多利润。,然而随着卫生纸的需求越来越多，人们对它的要求也不断提高。卫生纸早已成为人们日常生活中不可缺少的部分。那么，卫生纸到底卫不卫生，对我们的健康有什么影响呢？,所以我们讨论的问题为：从微生物的角度探讨卫生纸的卫生问题？由于卫生纸的种类较多，我们这次讨论的主要是厕用卫生纸,为了回答上述问题，我小组通过参照,国标,GB20810-2006,设计实验如下,二、实验培养基、试剂与器材,1,、培养基与试剂,：,一、样品制备：生理盐水,二、细菌菌落总数的检测：营养琼脂、,三、大肠菌群的检测,1,、乳糖胆盐发酵管,2,、伊红美兰琼脂培养基,3,、乳糖发酵管,4,、革兰染液,四、金黄色葡萄球菌的检测,1,、,7.5,NaCl,肉汤,2,、血平板,3,、甘露醇发酵试验：甘露醇发酵培养基,4,、血浆凝固酶实验：兔血浆；生理盐水,五、溶血性链球菌的检测,1,、营养肉汤,2,、血平板,3,、链激酶实验：草酸钾血浆；灭菌生理盐水；氯化钙,4,、杆菌肽敏感试验：,0.04,单位杆菌肽纸片，已知阳性菌株；血平板,2,、需要的器材,天平、烧杯、电炉、刻度吸管、接种环、酒精灯、玻片、恒温培养箱、恒温水浴锅、无菌平皿、剪刀、三角烧瓶、显微镜、高压蒸汽灭菌锅等。,三、实验经费预算,根据国标,GB20810-2006,，,我们的实验经费大概为：,570,元（这是以一整瓶培养基的价钱计算的，因为我们所用培养基一般都是实验室常用的，而且我们所用的量很少，实验室以后还可以接着用，其实际的费用应该比这个低。其可行性应该比较高）,四、实验室的检验,一、样品的采集与处理：,从一提卷子中，称量样品,10g 1g,，减碎后加入到,200ml,灭菌生理盐水中，充分混匀，得到一个生理盐水样液。,二、菌落总数的检验,1,、操作步骤：,将上述样液自然沉降后取上清液接种,5,个平皿，每个平皿中加入,1ml,样液，然后用冷却至,45,左右熔化的营养琼脂,15-20ml,，倒入平皿内，充分混匀。待琼脂凝固后翻转平皿，置,35 2,培养,48h,，然后计数菌落数（,当平板上菌落数超过,200,时应稀释后再计数,）。,2,、结果报告：,菌落呈片状生长的菌落不宜采用，计数符合要求平板上的菌落按下式计算结果：,X=A*K/5,式中：,X,细菌菌落总数，单位为菌落形成单位每克,(CFU/g),A5,块琼脂培养基平板上的细菌总数，单位为菌落形成,单位每克,(CFU/g),K,稀释度,当菌落数在,100,以内时，按实有数报告，大于,100,时，采用两位有效,数字。如果样品菌落总数超过标准规定的,10%,，按以上程序进行复检，,当两次实验结果的平均值都达到标准的规定，则判定被检样品合格，其,中有任何一次结果平均值超过标准规定则判定被检样品不合格,。,三、大肠菌群的检验程序,样液,5ml,初发酵,(,乳糖胆盐发酵管）,选择产酸产气的,阳性管，平板分离,（,EMB),35 2 18-24h,观察,EMB,上可疑菌落,其可疑菌落为：紫红色或黑紫色，圆形边缘整齐、表面光滑湿润带有金属光泽,35,2,18-24h,挑取可疑,菌落进行,革兰染色镜检,阳性菌落染色特性为：革兰阴性杆菌，散在排列，有一部分呈长丝状,复发酵,（乳糖发酵管）,结果观察与,报告,凡乳糖胆盐发酵产酸、产气，乳糖发酵管产气，典型大肠菌落特点的革兰阴性无芽孢杆菌可报告阳性,四、金黄色葡萄球菌的检验程序,增菌,（,7.5%,氯化钠,肉汤培养液）,35,2,，,24h,平板分离,（血琼脂平板）,35,2,24h,革兰染色镜检,挑选可疑菌落,金黄色大而凸起，圆形、表面光滑、周围有溶血团,甘露醇发酵实验,如镜检结果为：排列成葡萄状，无芽孢与荚膜的菌落则应进行以下实验,样液,5ml,发酵甘露醇,产酸者为阳性,血浆凝固酶试验,（玻片法、试管法）,结果报告,先用玻片法，如样品和生理盐水均出现了凝集现象则再做试管法,五、溶血性链球菌的检验程序,5ml,样液,+50ml,营养肉汤,接种血平板,352,24h,观察菌落特征,典型菌落为灰白色，半透明或不透明，针尖状突起，表面光滑，边缘整齐，周围有无色透明溶血环,取典型菌落进,行革兰染色镜检,若为革兰阳性，且呈链状排列的球菌,链激酶实验,杆菌肽敏感试验,结果报告,镜检为革兰阳性链状排列球菌，血平板上有溶血环，链激酶及杆菌肽敏感试验阳性者，则可报告检,出,352,24h,六、结果记录与评价,表,2,、卫生纸微生物指标标准规定,微生物,单位,结果,细菌总数,CFU/g,大肠菌群,金黄色葡萄球菌,溶血性链球菌,微生物,单位,规定,细菌总数,CFU/g,600,大肠菌群,不应检出,金黄色葡萄球菌,不应检出,溶血性链球菌,不应检出,表,1,、卫生纸微生物指标检测结果,七、实验安排,根据检验内容与程序，我们的实验安排大,致如下：,第一天：,配制所需要的培养基，准备所需的试剂与器材，,样品液的制备，菌落总数测定，大肠初发酵，金黄,色葡萄球菌的增菌，溶血性链球菌的增菌,第二天：,对阳性的检测菌进行平板分离,第三天：,对平板上的可疑菌进行革兰染色镜检，及进一步的,确证实验,第四天：,观察最终结果，检验结果的记录与报告,THE END,谢谢大家！,