肿瘤生物治疗本科

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,肿瘤的生物治疗,中山大学肿瘤防治中心 生物治疗中心,丁 娅,概念,肿瘤的传统治疗模式,手术,放射治疗,化学治疗,肿瘤生物治疗：用生物来源的制剂或调节生物反应的制剂治疗肿瘤的方法,肿瘤生物治疗的主要途径,调节细胞生物学行为：,增殖、凋亡、分化、血管生成、侵袭、转移等,调节宿主免疫反应,恶性肿瘤的生物学行为特征,自我满足的生长信号,对生长抑制信号不敏感,逃避凋亡,无限复制的潜能,诱导血管生成,侵袭和转移,免疫逃逸,免疫逃逸,免疫监视假说,免疫编辑假说,肿瘤生物治疗的特点,具有肿瘤特异性（高度选择性）,作用机理及毒副作用与常规治疗不同,不容易产生耐药,毒副作用较小,肿瘤生物治疗的分类,细胞因子,免疫效应细胞,肿瘤疫苗,免疫刺激剂,基因治疗,单克隆抗体,小分子靶点药物,细胞因子（cytokine, CK）,CK的分类（按作用方式）,调节天然免疫的CK：,TNF-,IL-1，IL-6，IL-10，趋化因子等,调节获得性免疫的CK：,IL-2、IL-4、IFN-、TNF-等,作用于造血系统的CK：,EPO、TPO、G-CSF、GM-CSF、IL-11、IL-3等,CK的特点,低分子量蛋白质,非特异性结合,自限性和短效性,高效性,多源性,多效性,网络性,CK的抗肿瘤作用机制,诱导免疫效应细胞的激活、增殖与分化，增强免疫效应细胞的功能与活性,抑制肿瘤病毒的增殖和肿瘤细胞的分裂,促进肿瘤细胞抗原递呈和共刺激分子表达,直接杀伤肿瘤细胞或诱导肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤血管生成，诱导肿瘤细胞分化,CK临床应用举例,IFN-：高危皮肤黑色素瘤的术后辅助治疗,IL-2：晚期黑色素瘤的姑息治疗,EPO、TPO、G-CSF、GM-CSF、IL-11等：放化疗后骨髓抑制的支持治疗,CK的毒副反应,流感样症状（多数CK）：寒战、发热、肌痛、头痛、乏力等,毛细血管渗漏综合征（IL-2，IL-11）：低血压、浆膜腔积液、组织水肿等,胃肠道反应（IFN）：恶心、食欲减退、呕吐等,神经精神症状（IFN）：抑郁、躁狂、人格改变等,血液学毒性（IFN）：白细胞减少，血小板减少，贫血,肝肾功能损害（IFN）,骨痛（G-CSF）,诱发自身免疫反应（IFN等）,免疫效应细胞,免疫效应细胞治疗,过继性免疫效应细胞治疗，adoptive cellular immunotherapy,ACI,通过分离技术获取患者自身免疫细胞，在细胞因子的诱导下，体外大量扩增出具有高度抗肿瘤活性的免疫细胞，再回输到患者体内，达到增强肿瘤患者的免疫功能和抗肿瘤的目的,免疫效应细胞分类,非特异性：NK,CIK,LAK等,特异性：CTL,TIL等,中山大学肿瘤医院生物治疗中心开展的细胞免疫治疗项目,CIK、DC、D-CIK、NK、DC-T,细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine induced killer cells, CIK）,人外周血单个核细胞在体外用多种CK（如抗CD3-McAb, IL-2,IFN-,IL-1等）共同培养一段时间后获得的一群异质细胞,兼具T淋巴细胞强大的抗肿瘤活性和NK细胞的非MHC限制性杀瘤优点,增殖速度快，杀瘤活性高，杀瘤谱广，对多种耐药肿瘤细胞同样敏感,能以不同机制识别肿瘤细胞，通过直接的细胞质颗粒穿透封闭的肿瘤细胞膜进行胞吐，达到对肿瘤细胞的裂解,能分泌IL-2、IL-6、IFN-等多种抗肿瘤的CK,对正常细胞无毒性作用，被认为是新一代抗肿瘤过继免疫治疗的首选方案,CIK,细胞的制备,PBMNC 0.5-510,7,（50ml blood）,24 个175cm的培养瓶,IFN,IL-2,CD3 mAb,IL 1,12-14 days 11.510,10,肿瘤浸润淋巴细胞,（Tumor infiltration lymphocytes,TIL）,浸润在肿瘤组织中具有抗肿瘤效应的淋巴细胞,从实体瘤组织分离的TIL在体外经IL-2激活后可大量扩增,TIL来自肿瘤组织区域，可特异识别自体肿瘤，具有特异的MHC限制性溶解肿瘤活性,TIL对IL-2的依赖性较小,动物实验表明，其体内抗肿瘤效应比常规LAK强50-100倍,TIL对某些实体瘤治疗已取得疗效,TIL细胞由于杀瘤谱窄，制备困难，及在收集过程中可能导致的功能改变而限制了其临床应用价值,细胞治疗临床研究的困难,个体化制备，难以产业化，缺乏投入,免疫方案的变量（抗原、佐剂、细胞因子、效应细胞类型等）等多，难以确定最佳免疫方案进行III期临床试验,缺乏能指示临床转归的(免疫)检测指标，RECIST、WHO标准不适用,辅助治疗，研究周期长,难以重复,现阶段难以获得高级别的循证医学证据,肿瘤疫苗,概念,肿瘤疫苗,：,利用肿瘤抗原，通过主动免疫方式诱导机体产生特异性抗肿瘤效应,激发机体自身的免疫保护机制,达到治疗肿瘤或预防复发的作用,属于主动免疫治疗,抗原佐剂,肿瘤疫苗分类,蛋白/多肽疫苗,抗独特型抗体疫苗,病毒疫苗,DNA疫苗,以树突细胞为基础的肿瘤疫苗,全细胞肿瘤疫苗,肿瘤疫苗设计策略,选择合适的肿瘤抗原,选择肿瘤抗原的给予方式,树突状细胞（DC）,DC,的制备,BMDC,TNF, IL-4,GM-CSF,成熟的DC,68 days,TNF, IL-4,GM-CSF,PBDC,肿瘤抗原,DC疫苗在实体瘤治疗中的策略（1）,抽50ml-60ml外周血,分离单核细胞，体外诱导DC细胞,DC细胞负载自体肿瘤抗原，通过静脉回输给病人或经皮下注射,经肿瘤抗原负载DC细胞刺激自体T细胞,产生抗肿瘤免疫应答,DC疫苗在实体瘤治疗中的策略（2）,DC细胞负载自体肿瘤抗原并与自体的淋巴细胞混合，,刺激自体T细胞产生CTL,抽50ml-60ml外周血,分离单核细胞，体外诱导DC细胞,回输,CTL,直接杀伤肿瘤肿瘤细胞,免疫刺激剂,生物反应调节剂（Biological response modifiers, BRM）,一类具有广泛生物学活性和抗肿瘤活性的生物制剂,作用机制：干扰细胞生长、转化或转移的直接抗瘤作用，或激活免疫系统的效应细胞及其所分泌的因子,主要包括细胞或化学因子、细菌类生物反应调节剂、微生态型生物反应调节剂、真菌多糖类生物反应调节剂等,BRM临床应用举例,卡介苗,（,BCG,）,能导致,CK,的分泌和,DC,的激活,临床常通过皮肤划痕法和皮内注射法，膀胱肿瘤可采用膀胱内灌注,短小棒状杆菌（,Corynebacterium Parvum, CP,）,G(+)厌氧杆菌，具有免疫佐剂的作用,激活M，增强溶酶体活性，诱导IFN和提高,NK,细胞活性,多糖类：香菇多糖、云芝多糖等,能刺激单核巨噬细胞的增殖，增强T和NK细胞活性,免疫组织和细胞提取物：胸腺素、转移因子，免疫核糖核酸等,来源于免疫组织（胸腺、脾、淋巴结）和外周淋巴细胞,促进T细胞分化成熟和增强T 细胞对抗原的应答反应，增强CTL和NK细胞活性,协助T细胞功能低下者免疫功能的恢复，以及宿主抗病毒感染和抗肿瘤,基因治疗,概念,通过对人体遗传物质进行修正、补充或改造以达到治疗疾病的目的，或将遗传物质导入人体组织或细胞所进行的疾病治疗,目前只能用于人体体细胞 ！,基因治疗的策略,基因替换,基因修饰,基因添加和补充,基因封闭,目的基因,免疫相关基因,抑癌基因和癌基因,抗血管生成基因,自杀基因,其它基因,基因导入方法,非病毒载体：,裸DNA直接注射,脂质体共转染,受体介导基因导入,病毒载体系统：,逆转录病毒载体,腺病毒载体,腺相关病毒载体,单纯疱疹病毒载体,痘病毒载体,基因治疗临床应用举例,今又生,重组人P53腺病毒,安柯瑞,E1B缺陷腺病毒,单克隆抗体,抗体的基本结构,抗体的生物学功能,特异性结合抗原,活化补体,Fc段介导的效应功能,调理作用,ADCC作用,继发细胞代谢变化和生物活性物质的释放,免疫调节,介导转运功能,免疫调节,抗体的发展,第1代：多克隆抗体,第2代：单克隆抗体,第3代：基因工程抗体,抗体融合蛋白,a.,d.,c.,f.,e.,b.,j.,i.,h.,g.,鼠源性单克隆抗体的人源化,人/鼠嵌合抗体（chimeric antibody）,人源化抗体 （humanized antibody）,全人源化/人抗体（human antibody）,a.,b.,c.,d.,CDR,VH,VL,CL,CH,抗肿瘤治疗的抗体,非结合型抗体（裸抗体）,结合型抗体,非结合型抗体的抗肿瘤作用机制,免疫效应：CDC,ADCC（如利妥昔单抗、曲妥珠单抗等）,阻断和中和靶分子的生物学活性 （如贝伐单抗等）,干预信号传导（如利妥昔单抗、曲妥珠单抗等）,免疫调节（如CTLA-4单抗）,非结合型抗体临床应用举例,名 称,主要靶点,类型,适应症,Rituximab，Mabthera （利妥昔单抗，美罗华）,CD-20,人/鼠嵌合抗体,B-NHL,Trastuzumab，Herceptin （曲妥珠单抗，赫赛汀）,HER2/neu,人源化抗体,乳腺癌,Cetuximab，Erbitux,（西妥昔单抗，爱必妥）,EGFR,人/鼠嵌合抗体,CRC,NSCLC,HNSCC,Bevacizumab，Avastin （贝伐单抗，阿瓦斯汀）,VEGF,人源化抗体,CRC NSCLC乳腺癌,结合型抗体,“生物导弹”：由裸抗体与导向药物结合而成,治疗策略,放射免疫治疗,抗体导向化疗治疗,免疫毒素治疗,抗体导向酶前体药物治疗,结合型抗体临床应用举例,名 称,主要靶点,类型,适应症,Zevalin,（,90,Y-,ibritumomab tiuxetan）,CD-20,放射性物质标记的鼠源性抗体,B- NHL,Bexxar,（,131,I,-,tositumomab),CD-20,放射性物质标记的鼠源性抗体,B-NHL,Campath-1H (Alemtuzumab),CD-52,人源化抗体,CLL,影响抗体治疗的因素,目标抗原,抗体特征,肿瘤的异质性，血供状态等,宿主因素,小分子靶点药物,多靶点多激酶抑制剂：索拉非尼 同时抑制肿瘤细胞增殖和肿瘤血管生成,抑制：酪氨酸激酶受体VEGFR-2、 VEGFR-3、 PDGFR-b、 FLT-3和 c-KIT,丝氨酸/苏氨酸激酶C-Raf (Raf-1)和B-Raf,小分子靶点药物临床应用举例,名 称,主要靶点,适应症,Gefitinib（Iressa）,EGFR-TK,NSCLC,Erlotinib （,Tarceva）,EGFR-TK,NSCLC,Imatinib （Gleevec）,Bortezomib（Velcade),Bcr/Abl, c-kit, PDGFR,蛋白酶体,CML,GIST,MM,Sorafenib（Nexavar）,C-Raf，B-Raf，,VEGFR,PDGFR、 FLT-3，c-KIT,RCC,HCC,Sunitinib （Sutent）,VEGFR、PDGFR、 FLT-3, KIT, FMS,RCC, GIST,肿瘤治疗已进入生物治疗，特别是分子靶向治疗时代,肿瘤的发生与发展涉及多因素多阶段,肿瘤的预防和治疗同样涉及多学科多手段,肿瘤问题的最终解决只有依靠综合治疗,应用生物治疗应注意选择合适的肿瘤类型、时机和合理的方法,肿瘤的,生物治疗还有许多未知空间有待探索,结 语,谢 谢！,