组织胚胎学绪论 人卫7版

,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,普通高等教育国家级十一五规划教材 组织学与胚胎学理论课件,组织学,第1章 绪论,石玉秀,中国医科大学,1,一、组织学的研究内容,组织学（histology）：研究机体,微细结构,及其,相关功能,的科学。,组织,上皮组织,结缔组织,肌肉组织,神经组织,细胞,细胞间质,器官和系统,（细胞外基质）,2,细胞：是机体形态结构与功能的基本单位。,组织：由细胞和细胞间质(又称细胞外基质),组成的群体结构，是构成机体器官的,基本成分。,器官：具有一定的形态结构，并执行特定的,生理功能。,系统：由一些结构连续、功能相关的器官组合而,成，完成连续的生理活动。,细胞,-组织-器官-系统,3,人体器官分类组织学特征,实质性,器官,中空性,中央：大空腔,表面：被模,如：消化腺、淋巴器官 、,内分泌腺、肾脏等,。,如：心血管、消化管、呼吸道等,内部：实质行使功能,管壁：分34层,4,组织学结构观察,组织学,结构,光镜结构用光学显微镜观察的结构,（LM）,(light microscope ,LM 简称光镜),电镜结构电子显微镜下观察的结构,（EM）,(electron microscope, EM简称电镜）,又称超微结构(ultrastructure),5,二、组织学的研究方法和常用技术,(一)光学显微镜技术,1、常用组织切片标本制备技术,石蜡切片术,取材和固定; 脱水和包埋;,切片和染色; 封片。,其他；火棉胶包埋, 冰冻切片,涂片,铺片,磨片等,6,苏木精,伊红,碱性染料,酸性染料,染成红色,（嗜酸性）,细胞核中的染色质、细胞质中的核糖体,细胞质,细胞间质成份,染成蓝色,（嗜碱性）,常用染色方法：HE染色,（Hematoxylin）,（Eosin）,HE染色,7,嗜碱性：可使细胞核内的染色质,及细胞质内的核糖体等,结构染成蓝紫色。,嗜酸性：可使多数细胞的细胞质,染成粉红色。,中性： 与两种染液亲合力都不强。,组织结构的嗜色性,嗜碱性,嗜酸性,8,A 嗜银性 B 嗜铬性 C 异染性,其它染色方法,9,普通光学显微镜,是观察组织细胞微细结构最常用的工具，,分为,光学部分,机械部分,起放大作用,光镜的分辨率约为,可放大1500倍左右,（light microscope ，LM ）,10,几种特殊显微镜术,（1）相差显微镜,(phase contrast microscope),用于观察生活细胞,和末经染色细胞的,形态结构。,神经干细胞培养,11,(2),荧光显微镜 (fluorescence micrscope),是用以观察,细胞、组织内,荧光物质的分布。,神经球,12,(二),共焦激光扫描显微镜,共焦激光扫描显微镜,(confocal laser scanning microscope,，,CLSM),由激光光源、共焦成像扫描,系统、电子光学系统和微机,图象分析系统四部份构成。,可对样品进行断层扫描重建,三维图像，进行体视学分析；,测定细胞内pH、钙浓度等；,更精确地检测、识别，,组织细胞的微细结构及其变,化。CLSM又称细胞CT。,CLSM,13,CLSM,图像,Human neuronal precursor cells,CLSM海马MR、GR共存,14,(三),电子显微镜技术,（electron microscope, EM）,透射电镜 (transmission electron microscope,TEM),观察细胞内部结构,分辨率为0.1-0.2nm,可放大几万几十万倍,扫描电镜（scanning electron microscope,SEM),观察组织或细胞表面的立体结构,冰冻蚀刻（freeze etching method）,观察细胞断裂表面形态结构,分析电镜 X射线显微分析术（Xray microanalysis）,研究细胞、组织内元素种类分布和含量,15,透射电镜与照片,TEM,淋巴细胞,16,扫描电镜与照片,SEM,17,冰冻蚀刻细胞,冷冻断裂肾小球右下线粒体,冰冻蚀刻照片,18,分析电镜X线微区分析图片,分析电镜,X线微区分析,19,糖类显示法,PAS反应：,过碘酸希夫反,应,(periodic acid Schiff reaction，PAS)：,检测组织或细胞中有无多糖存在。,原理：,多糖,PA,氧化,醛,Schiff,试剂,紫红色沉淀,(四)组织化学和细胞化学技术,PAS反应阳性部位即表示多糖和蛋白多糖的存在,PAS阳性小肠上皮,20,组织细胞化学染色图片,酶细胞化学神经元ACP酶阳性,脂类显示法,苏丹,脂类显示法,苏丹,锇酸,髓鞘染色,核酸显示法,21,利用抗原（antigen, Ag），抗体（antibody）特异,结合的原理，用已知抗体检测未知抗原的一种方法。,免疫细胞化学原理,22,免疫细胞化学标记物,23,免疫细胞化学PAP法,24,免疫细胞化学ABC法,25,(五),免疫组织化学与细胞化学技术,免疫组织化学术(immunohistochemistry),是将免疫学原理与组织化学技术,相结合建立的新技术，,根据抗原与抗体特异性,结合的特点，检测组织,细胞内某种多肽、蛋白质,等大分子物质的存在与分布。,人鼻粘膜上皮棘细胞细胞间桥TM阳性,26,(六)原位杂交术,原位杂交(in situ hybridization),是一种敏感性高、特异性强的，,能在组织细胞原位进行的核,酸分子杂交技术。,常用的标记物有两种：,1、放射性同位素，,如,3,H、,14,C、,32,P、,35,S、,125,I，,2、为非放射性物质，,如地高辛等。,非放射性原位杂交,海马GAP43 mRNA,27,(七)放射自显影术,放射自显影术(autoradiograph),旨在追踪某些物质在体内、组织,或细胞中的分布与代谢径路。,放射自显影,甲状腺,125,I,同位素注入,取材,制标本,涂核乳胶,暗室曝光,显影、定影,染色,LM观察,28,(八)组织培养和组织工程,组织工程基本方法示意图,A获取组织 B分离、培养种子细胞,C制备三维支架,D将种子细胞种植于支架,E将细胞-支架复合物植入组织缺损处,细胞培养神经干细胞培养,29,(九)组织细胞定量术,1显微分光光度术,应用显微分光光度计(microspectrophotometer)对组织和细胞内化学成分进行定量分析。,2形态计量术,运用数学和统计学原理对组织细胞内各种成分的数量、体积、表面积等的测量 。目前多应用图像分析。,3流式细胞术,应用流式细胞仪进行细胞定量分析和细胞分类研究。,30,三、组织学的学习方法,1.理论联系实际,2.结构与功能关系,3.断面与立体的关系,4.建立动态变化的概念,5.善于总结，掌握规律,31,