微生物纯培养和显微技术001

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,第二章 微生物的纯培养和显微技术,微生物学,1,微生物的纯培养和显微技术,重点：微生物的分离和纯培养技术，常 用的菌种保藏方法。细菌、放线菌、霉菌、酵母菌的形态特征。,2,第一节微生物的分离和纯培养,一、,无菌技术,概述,（1）培养物：,微生物学中，在人为规定的条件下培养、繁殖得到的微生物群体称为培养物。,（2）,纯,培养物和纯培养的概念：微生物学中，将由一个细胞（或一种微生物）繁殖所得到的后代称为纯培养物。对微生物这种纯种的培养，称为微生物的纯培养。,（3）无菌技术：在分离、转接及培养纯培养物时防止其被其它微生物污染的技术称为无菌技术。,3,一、无菌技术,11微生物培养的常用器具及灭菌,常用器具：试管、玻璃烧瓶、平皿等,注：所有器皿使用前都要灭菌！,培养基：培养微生物营养物质。,注：配制好后要,及时,灭菌。,常用的灭菌方法：高压蒸汽灭菌、,干热灭菌,4,试管及斜面培养物,5,培养皿,6,三角烧瓶,烧杯,玻璃吸管,7,高压蒸汽灭菌（P,153,）,8,干热灭菌,9,一、无菌技术,12接种操作,接种：在无菌条件下，用接种环或接种针等工具把微生物从一个器皿转接到另一个器皿，叫做接种。是最常用的基本操作。,10,无菌箱和超净台,无菌操作环境,11,常用工具,12,接种方法：烧环冷却开管沾菌和塞管开另管涂菌塞管火焰烧环,要点：在火焰上方或附近,13,斜面接种时的无菌操作,(1)接种灭菌 (2)开启棉塞 (3)管口灭菌 (4)挑起菌苔 (5)接种 (6)塞好棉塞,14,二、用固体培养基分离纯培养,概述,菌落：,由单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度后，形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体。,菌落的大小、形状、边缘状况、质地、光泽、颜色及透明度等是微生物分类、鉴定的重要依据。,菌苔：,固体培养基表面众多菌落连成一片，呈片状， 这就是菌苔。,平板：,即培养平板，指盛有固体培养基的平皿。,15,16,17,18,二、用固体培养基分离纯培养,21纯种微生物的分离,：,在自然界中，各种各样的微生物总是混杂在一起的，要研究和利用某一微生物，就必须把它同其他微生物分开，才能得到只含有同一种微生物的纯种微生物。这种方法叫纯种微生物的分离,22纯种微生物的分离方法,稀释到平板法,涂布平板法,平板划线分离法,稀释摇管法,19,1. 稀释倒平板法（pour plate method）,先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释（如1:10、1:100、1:1,000、1:10,000.），然后分别取不同稀释液少许，与已熔化并冷却至50左右的琼脂培养基混合，摇匀后，倾入灭过菌的培养皿中，待琼脂凝固后，制成可能含菌的琼脂平板，保温培养一定时间即可出现菌落。如果稀释得当，在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落，这个菌落可能就是由一个细菌细胞繁殖形成的。随后挑取该单个菌落，或重复以上操作数次，便可得到纯培养。,20,2. 涂布平板法,其做法是先将已熔化的培养基倒入,无菌,平皿，制成无菌平板，冷却凝固后，将一定量的某一稀释度的样品悬液滴加在平板表面，再用无菌玻璃涂棒将菌液均匀分散至整个平板表面，经培养后挑取单个菌落,由于将含菌材料先加到还较烫的培养基中再倒平板易造成某些热敏感菌的死亡，而且采用稀释倒平板法也会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中间缺乏氧气而影响其生长，因此在微生物学研究中更常用的纯种分离方法是涂布平板法。,视频,21,思考：两者的结果有什么不同？,22,平板划线分离法,23,平板划线分离法,24,划线分离结果,25,4、厌氧微生物的分离,稀释摇管法,26,三、用液体培养基分离纯培养,稀释法：适用于原生动物和藻类的分 离和培养。,特 点：高度稀释、多做平行对照。,思考：有什么缺陷性？,有些目的微生物尤其是含量较少的微生物往往被稀释掉！,此时可采用单细胞分离法。,27,四、单细胞分离,显微分离法单细胞,分离法,用毛细管提取单个原生,动物个体,用显微操作仪分离单个细菌,适用于分离混杂微生物中弱势群体。,单细胞分离器,28,五、选择培养分离,选择培养分离：,根据微生物的营养、生理、生长条件等特点，通过选择培养进行微生物的分离与纯化技术。,29,五、选择培养分离,抑制大多数其它微生物的生长；,使待分离的微生物生长更快；,使待分离的微生物在群落中的数量上升，,方便用稀释法对其进行纯化。,微生物群落中数量占,少数,的微生物的分离纯化：,（没有一种培养基或一种培养条件能够满足自然界中一切生物 生长的要求，在一定程度上所有的培养基都是选择性的。）,使待分离的微生物生长“,突出,”；,直接挑取待分离的微生物的菌落获得纯培养。,30,五、选择培养分离,1. 利用选择平板进行直接分离,待分离的微生物生长，其它微生物的生长被抑制,高温下培养：分离嗜热细菌；,培养基中不含,N：,分离固氮菌；,培养基加抗生素：分离抗性菌；,31,五、选择培养分离,1. 利用选择平板进行直接分离,待分离的微生物的生长特征明显不同于其它微生物,颜色反应：分离特定的菌株；,牛奶平板：分离蛋白酶产生菌；,利用特定细菌的滑动特点进行,分离纯化；,32,51用选择培养基进行直接分离,选择培养基,：在培养基中加入某种化学物质，以抑制非需要菌的生长，促进需要菌的生长，这种培养基叫选择培养基。,高氏一号培养基加10%酚数滴，抑制其它菌的生 长，分离出放线菌,马丁氏培养基加链霉素以抑制其它菌生长，分离出真菌。,33,蛋白酶产生菌的分离,34,具有氨苄青霉素抗性,的大肠杆菌,35,五、选择培养分离,52,富集培养：,不同微生物间的有不同特点，根据这些特点,制定特定的环境条件,，使需要的微生物生长旺盛，数量增加，从而更容易分离到该微生物。,加富培养基：,一般指在培养基内加入额外的营养物质，使需要的微生物营养更充分，生长的更快，这种培养基叫加富培养基。,土悬液培养基+硫磺分离出硫杆菌,土悬液以羟基苯甲酸为唯一碳源的培养基分离出能降解羟基苯甲酸的微生物。,36,2. 富集培养,从自然界中分离到所需的特定微生物,特定的环境条件,仅适应于该条件的微生物旺盛生长,待分离微生物在群落中的数量大大增加,37,2. 富集培养,富集培养是微生物学家最强有力的技术手段之一。营养和生理,条件的几乎无穷尽的组合形式可应用于从自然界选择出特定微,生物的需要。,根据微生物的特殊要求，从自然界分离出特定已知微生物种类；,分离培养在特定环境中能生长的微生物；,38,六、二元培养物,纯培养物：,只含有一种微生物的培养物叫做纯培养物。,混合培养物：,含有两种以上微生物的培养物叫做混合培养物。,二元培养物:,只含有二种微生物的培养物而且是有意识的保持二者之间的特定关系的培养叫做二元培养物。,例如：寄生于细菌细胞内的病毒与细菌一起培养,。,39,获得微生物纯培养的方法比较,40,方 法,特 点,应 用,固体培养基分离,稀释倒平板,菌落分离较为均匀,进行微生物计数结果相对准确.但操作相对麻烦,热敏感菌有时易被烫死,而严格好氧菌也可能因被固定在培养基中生长受到影响,这3种方法可用于所有能在固体培养基表面形成菌落的微生物的纯培养分离.并且,通过选用适当的选择平板及培养条件,可直接分离各种具有特定生理特征的微生物.和厌氧罐或厌氧手套箱技术结合,这3种方法也可用于获得各种厌氧菌的纯培养,涂布平板法,操作相对简单,是较常使用的常规方法.但有时会因涂布不均匀使某些部位的菌落不能分开,进行微生物计数时需对稀释和涂布过程的操作特别注意,否则不易得到准确的结果.,平板划线法,操作简单,多用于对已有纯培养的确认和再次分离（不能计数）,稀释摇管法,稀释倒平板法的一种变通形式,但由于菌落形成在琼脂柱的中间,观察和挑取都相对困难,在缺乏专业的厌氧操作设备的情况下对严格厌氧菌进行分离和观察,41,方 法,特 点,应 用,液体培养基分离,稀释法,工作量大,是否获得微生物的纯培养需依靠统计学的推测,不能或不易在固体培养基上生长的微生物进行纯培养分离或数量统计,富集培养,一般不能直接获得微生物的纯培养,在通过富集培养使原本在自然环境中占少数的微生物的数量大大提高后,需再通过平板法进行相应微生物纯培养的分离和检测,1)根据某种微生物的特殊生长要求按照意愿从自然界中对这种微生物进行有针对性的有效分离;2)分离培养出由科学家设计的特定环境中能生长的微生物,尽管我们并不知道什么微生物能在这种特定的环境中生长,显微操作,单细胞(孢子)挑取,分离过程直观,可靠,但对仪器和操作技术要求较高,多限于高度专业化的科学研究.而挑取的微生物单细胞或孢子需经固体或液体培养后才能获得其纯培养物,从样品中直接分离所需的微生物细胞或孢子,获得其纯培养,42,七、微生物的保藏技术,菌种保藏目的：给微生物一特定的条件，使其不污染、不改变特性而存活下来。,菌种保藏原理：用人工方法降低微生物的代谢强度，限制微生物的生长和繁殖，使其处于休眠状态。,43,理想的菌种保藏方法应具备的条件,(1),经长期保藏后菌种存活健在；,(2)保证高产突变株不改变表型和基因型，特别是不改变初级代谢产物和次级代谢产物生产的高产能力。,(3)菌种保藏的基本措施是低温、干燥、真空。,七、微生物的保藏技术,44,在一定时间内使菌种不死、不变、不乱,基本要求：,基本方法：,生活态,休眠态,培养基传代培养,寄主传代培养,冷冻,干燥,斜面、平板,液氮、低温冰箱,沙土管、冷冻真空干燥,七、微生物的保藏技术,45,由于微生物的多样性，不同的微生物往往对不同的保藏方法有不同的适应性，因此，在具体选择保藏方法时必须对被保藏菌株的特性、保藏物的使用特点及现有条件等进行综合考虑。,对于一些比较重要的微生物菌株，则要尽可能多的采用各种不同的手段进行保藏，以免因某种方法的失败而导致菌种的丧失。,七、微生物的保藏技术,46,国际重要菌种保藏机构,47,中国菌种保藏单位,48,七、微生物的保藏技术,菌种保藏方法：,71传代培养保藏隔绝空气，低温保藏，在规定时间内进行移接。,49,七、微生物的保藏技术,冷冻保藏-保护剂+菌种,零下196度速冻保存，或-70度冷冻室保存，-20-30度普通冰箱冷冻室保存。,注：适当速冻，快速升温,冷冻保藏为保藏微生物菌种的最简单而有效的方法。,通过冷冻，使微生物代谢活动停止。一般而言，,冷冻温度愈低，效果愈好,。为了获得满意的冷冻结果，通常应在培养物中加入一定的,冷冻保护剂,。冷冻保藏时温度要求在-20以下，同时应认真掌握好冷冻速度和解冻速变。,冷冻深藏的缺点之一是培养物运输较困难。,50,冷冻保藏种类,A 普通冷冻保藏技术(-20),B 超低温冷冻保藏技术(-60一-80),C 液氮冷冻保藏技术,51,A 普通冷冻保藏技术(-20),将液体培养物或从琼脂斜面培养物收获的细胞,分接,到试管或指管内，然后贮藏于一冰箱的冷藏室中，或于温度范围在-5-20的普通冰箱(-20)中。,或者，,将菌种培养在小的试管或培养瓶斜面上，待生长适度后，将试管或瓶口用橡胶塞严格封好，同上置于冰箱中保存。,用此方法可以维持若干微生物的活力12年。,应注意的是经过一次解冻的菌株培养物不宜再用来保藏。,保藏过程中应注意控制保藏温度，培养瓶或试管应严格密封。,这一方法虽简便易行，但不适宜多数微生物的长期保藏,52,B 超低温冷冻保藏技术(-60-80),要求长期保藏的微生物菌种，一般都要求在-60以下进行保藏。,在超低温冷藏柜中保藏菌种的一般方法是：,1离心收获对数生长中期至后期的微生物细胞；,2用新鲜培养基重新悬浮所收获的细胞；,3加入等体积的20甘油或10二甲亚砜；,4混匀后分装入冷冻指管或安瓿中，于-70超低温冰箱中保藏。,5.如果待保藏菌种生长在斜面上，则可用含10甘油的新配制液体培养基洗涤收获。超低温冰箱的冷冻速度一般控制在1-2min。若干细菌和真菌菌种可通过此保藏方法保藏5年而活力不受影响,53,C 液氮冷冻保藏技术,冷冻保护剂,在液氮冷冻保藏中，最常用的冷冻保护剂是二甲亚砜和甘油，最终使用浓度一般为甘油10、二甲亚砜5。所使用的甘油般用高压蒸汽灭菌，而二甲亚砜最好为过滤灭菌。,54,七、微生物的保藏技术,干燥保藏砂土管保存法和冷冻真空干燥保藏法,其他：纸片保藏法、薄膜保藏法、寄主保藏法等,55,第二节 显微镜和显微技术,一、显微镜的种类及原理,决定显微观察效果的两个重要因素,1.分辨率：指能辨别两点之间最小距离的能力,2.反差：指样品区别于背景的程度,56,第二节 显微镜和显微技术,普通光学显微镜,分辨率(,最小分辨距离,sni,n为玻片到物镜介质的折射率；,为物镜镜口角的半数，它取决于物镜的直径和工作距离。,n sni叫作数值孔径。不同介质的折射率：空气为n=1.0 ；水；香柏油,。,57,分辨率(,最小分辨距离,sni,58,-1500,59,60,第二节 显微镜和显微技术,暗视野显微镜,聚光镜中央有挡光片，照明光线不直接进人物镜，只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜，因而视野背景是黑的，物体边缘是亮的。,可观察 4200um的微粒子，分辨率比普通显微镜高50倍。,61,原理：暗视野显微镜是利用丁达尔光学效应的原理，在普通光学显微镜的基础上改造而成。暗视野显微镜聚光器使光源的中央光束被阻挡。不能直接通过标本进入物镜。从而使光路改变，倾斜的照射在标本上，标本遇光发生反射，散射的光线进入物镜，因而标本明亮，视野是黑暗的。,62,适用范围：常用来观察未染色的透明样品，利用黑暗视野提高样品与背景之间的对比。只能看到物体的存在，运动和表面特征。不能辨别物体的细微结构,63,使用方法,把暗视野聚光器装在显微镜的聚光器支架上。,(2),选用强的光源，但又要防止直射光线进入物镜，所以一般用显微镜灯照明。,(3),在聚光器和标本片之间要加一滴香柏油，目的是不使照明光线于聚光镜上面进行全反射，达不到被检物体，而得不到暗视野照明。,(4),升降集光器，将集光镜的焦点对准被检物体，即以圆锥光束的顶点照射被检物。如果聚光器能水平移动并附有中心调节装置，则应首先进行中心调节，使聚光器的光轴与显微镜的光轴严格位于一直线上。,(5),选用与聚光器相应的物镜，调节焦距，找到所需观 察的物像。,64,暗场显微镜的要求,要求载玻片和盖玻片必须无疵痕和灰尘,物镜前透镜必须清洁无尘,载玻片和盖玻片厚度必须绝对符合要求,65,人血细胞,66,67,第二节 显微镜和显微技术,相差显微镜,当光线通过标本时，由于直射光和衍射光的光程不同，就会是光波相位发生改变而产生,相位差,。相差显微镜具有环状光阑和相差板，能将光,相位差转变,为人的肉眼可以察觉的,振幅差（明暗差），,从而使原来的透明物体表现出明显的明暗差异。对比度增强。因此可以在不染色的情况下，观察到细胞的细微结构。,68,用途：观察未经染色的玻片标本,69,70,1.4 微分干涉相差显微镜(DIC),无色透明活体标本的细微结构,图象呈浮雕状的立体感,观察效果更加逼真,71,1.4.1 原理,通过特制的棱镜将偏振光分解相互垂直，强度相等的光束，光束载极近的两点（小于显微镜的分辨率）上通过被检物体，从而在相位上略有差别，使图象呈现出立体三维感觉。,1.4.2 特点,可以使被检物体产生三维立体感觉,观察效果更直观,无须特殊物镜，与荧光观察配合更好,可以调节背景和物体的颜色变化而达到理想的效果。,72,73,74,75,拟南芥根,76,轮虫,77,虱性车轮虫,78,79,荧光显微镜,荧光显微技术：把标本用不同的荧光素作标记，在荧光显微镜下，经过紫外线照射，标本会在黑暗背景下表现出有光亮的物体。使标本更便于观察。,80,特点：光源为短波，被样品,吸收后发出可见光。,不同荧光素激发波长,不同可见光的颜色不,同。,81,用于观察能激发出荧光的结构。,DNA 呈蓝色， 微管呈绿色,82,主要特点： 分辨率高；图像色彩鲜艳；观察方便。,83,1.6 透射电子显微镜,用电子波代替光源，最短波长的可见光=450nm；而电磁波的波长最短可以达到。所以，电镜的分辨率远高于光学显微镜。,84,85,第二节 显微镜和显微技术,扫描电子显微镜（SEM）,电子枪发出电子束被磁透镜会聚成极细的探针，在样品表面进行扫描，电子束探针扫描到的地方可以,激发样品表面放出二次电子,，二次电子的多少与样本表面的立体形状有关。二次电子由探测器收集并被闪烁器变成光信号，再经光电倍增管和放大器再编成电压信号来控制荧光屏上电子束的强度。,86,扫描式电子显微镜下的花粉粒,扫描式电子显微镜,酵母菌,人类精子,87,扫描隧道显微镜（STM）,88,二、显微观察样品的制备,光学显微镜的制样,活体观察：,运动能力、摄食特性、及生长过程中的形态变化等动态过程 。,89,A.压滴法：将菌悬液加在载玻片上，加盖玻片观察,90,B 悬滴法：盖玻片上加一滴菌悬液，倒置在凹玻载片上观察。,91,C.菌丝埋片法：将无菌玻璃纸铺在平板上，涂布放线菌或霉菌孢子，培养后将玻璃纸置于玻片上直接观察,92,菌丝和分生包子,93,二、显微观察样品的制备,染色观察：一般微生物个体小而无色透明，细胞结构的折光率与背景相差很小，在光学显微镜下，很难看清细胞的微细结构。通过对微生物染色，借助颜色的反衬作用，提高观察样品不同部位的反差，从而提高对细胞微细结构的观察效果。,94,二、显微观察样品的制备,染色的一般步骤：,涂片干燥固定染色水洗干燥镜检（油镜）,95,二、显微观察样品的制备,固定的目的：,一、是杀死细菌,二、是使菌体粘附于玻片上,常用的固定方法有：,一、火焰加热法,二、化学固定法,96,细菌的染色方法,97,革兰氏染色,姬姆萨染色,结核菌的抗酸染色,细菌的芽孢染色,98,有荚膜细菌的负染色,酵母菌美蓝染色,（活菌无色，死菌蓝色）,99,第三节 显微镜下的微生物,微生物类型：细胞型和非细胞型两类,细胞型微生物：细菌、古生菌、真核微生物,非细胞型微生物：病毒、类病毒、朊病毒,100,第三节 显微镜下的微生物,一、细菌形态：,球状,杆状,螺旋状,101,第三节 显微镜下的微生物,球菌,淋病球菌图片,102,第三节 显微镜下的微生物,双球菌,肺炎双球菌,103,第三节 显微镜下的微生物,葡萄球菌,104,链球菌,105,球菌(coccus),四联球菌(tetrad),106,球菌(coccus),八叠球菌(sarcina),107,大肠杆菌图片,杆菌,108,有鞭毛的杆菌,杆菌,109,绿脓杆菌单鞭毛,杆菌,110,梭状芽孢杆菌,杆菌,结核杆菌,蜡样芽孢,杆菌,乳酸杆菌,双歧杆菌,破伤风杆菌,111,球杆菌,链状杆菌,双杆菌,单杆菌,112,杆菌(bacillus),不同杆菌的大小、长短、粗细很不一致。,炭疽芽胞杆菌 3-10 m,大,中,大肠埃希菌 2-3 m,小,布鲁菌 0.6-1.5 m,113,114,115,柄 细 菌,116,杆菌(,bacillus,),杆菌的形态多样,双歧杆菌,117,炭疽杆菌,118,大肠杆菌裂殖,119,梭状杆菌（破伤风）,120,变形杆菌,变形杆菌广泛存在于,水、土壤腐败,的有机物以及人和动物的,肠道,中，为,条件致病菌,，多为继发感染，如慢性中耳炎、创伤感染等，也可引起膀胱炎、婴儿腹泻、食物中毒等。,变形杆菌可引起,败血症,，病死率较高。,变形杆菌呈明显的,多形性,，有球形和丝状形，为周鞭毛菌，运动活泼。在固体培养基上呈扩散生长，形成,迁徒生长现象,。,培养物有特殊臭味，在血琼脂平板上有溶血现象。能迅速分解尿素。,121,螺旋状（弧菌）,弧形霍乱菌,幽门螺旋杆菌,122,弧菌：,菌体只有一个弯曲，其程度不足一圈，形似,C,字或逗号，鞭毛偏端生。,螺旋菌：,菌体回转如螺旋，螺旋数目2-6环。鞭毛二端生。细胞壁坚韧，菌体较硬。,螺旋体：,螺旋数目大于6环，,菌体柔软，无鞭毛，大多数是致病菌。,螺旋菌形态,123,菌体只有一个弯曲，其程度不足一圈，形似“C”字或逗号，鞭毛偏端生。,霍乱弧菌,124,螺旋菌：,菌体回转如螺旋，螺旋数目和螺距大小因种而异。鞭毛二端生。细胞,壁坚韧，菌体较硬。,125,螺旋菌,126,影响细菌形态的 因素,培养时间、,培养温度、,培养基成分、,浓度、,pH,值,127,头发和手指上的细菌,128,放线菌,129,130,第三节 显微镜下的微生物,12古生菌的形态,古生菌与细菌有类似的形态，它们大多都生活在生存条件十分恶劣的极端环境里。,如隐蔽热网菌是最耐热生物之一，它的最适生长温度为105度。,131,真核微生物,132,酵母菌,133,出芽生殖中的啤酒酵母,134,黑曲霉,135,黑曲霉,136,真菌（脚气病）,137,青霉的帚状结构,138,大型真菌,黄裙竹荪,虫草,猴头菇,银耳,灵芝,双孢菇,139,病毒,SARS病毒,艾滋病毒（左：病毒体，右：结构图）,噬菌体,禽流感病毒电镜图,140,禽流感病毒攻击人体健康细胞照片,一串蓝色小球正在攻击健康的人类粉色细胞。这些高清晰照片是科技摄影师伦纳特尼尔松利用高倍电子扫描显微镜摄制而成。这是H5N1型禽流感病毒首次在媒体亮相。,141,朊病毒,142,作业,1、解释名词,无菌技术：在分离、转接及培养纯培养物时防止其被其它微生物污染的技术称为无菌技术。,纯,培养物和纯培养的概念：微生物学中，将由一个细胞（或一种微生物）繁殖所得到的后代称为纯培养物。对微生物这种纯种的培养，称为微生物的纯培养,接种：在无菌条件下，用接种环把微生物从一个器皿转接到另一个器皿，叫做接种,143,第二章作业,菌落的概念：由单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度后，形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体叫菌落。,菌苔：固体培养基表面众多菌落连成一片，呈片状，这就是菌苔。,平板：即培养平板，指盛有固体培养基的平皿,144,第二章作业,纯培养物：只含有一种微生物的培养物叫做纯培养物。,混合培养物：含有两种以上微生物的培养物叫做混合培养物。,二元培养物:只含有二种微生物的培养物叫做二元培养物。,145,条件致病菌：,是在一定条件下，正常菌群中的细菌也能使人患病：由于机体的防卫功能减弱,引起自身感染。例如皮肤粘膜受伤（特别是大面积烧伤）、身体受凉、过度疲劳、长期消耗性疾病等，可导致正常菌群的自身感染；由于正常菌群寄居部位的改变，发生了定位转移，也可引起疾病。例如大肠杆菌进入腹腔或泌尿道，可引起腹膜炎、泌尿道感染。因此，这些细菌称为条件致病菌。,返回,146,迁徙生长现象：,变形杆菌在固体培养基上呈扩散性生长,形成以菌接种部位为中心的厚薄交替,同心圆型的层层波状菌苔,这种现象称为迁徙生长现象.,返回,147,148,