组织学与胚胎学绪论上皮

Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,1,组织学,与胚胎学,2,组织学与胚胎学,Histology and Embryology,3,第一章 组织学绪论,Chapter1,Introduction of Histology,1、组织学、组织、嗜酸性、嗜碱性的概念,2、组织学学习方法要点,3、石蜡切片术和超薄切片术的基本原理,4、 HE,染色法,本章重点,5,绪论(,Introduction),I.,什么是组织学,(,Histology)?,组织学是研究人体,正常细微,结构及其相关功能的科学。,细胞、组织、器官、系统,A.,微观结构,:,1. 光学显微镜,(,Light microscope，LM):,计量单位是,微米,(,m ),。,(1,m =0.001 mm),。,2.,电子显微镜,(Electron microscope，EM):,计量单位是,纳米,(nm ),。,(1 nm =0.001,m),。,6,光学显微镜基本结构,：,1.,照明灯(,Lamp),2.,聚光器(,Condenser),3.,载物台和切片夹(,Mechanical stage and specimen retainer),4.,推进器(,Mechanical stage adjustment knob),5.,物镜(,Objectives),6.,粗细螺旋(,Course and fine focus knob),7.,目镜(,Oculars),8.,照相机等接口(,Connection to camera, etc.),7,几种特殊的光学显微镜,相差显微镜（phase contrast microscope）,倒置相差,显微镜,（inverted phase contrast microscope）,荧光显微镜(fluorescence microscope),暗视野显微镜（dark field microscope）,共聚焦激光扫描显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM),偏光显微镜,8,图,19,免疫组织化学（荧光素标记）,毛细血管内皮细胞呈,vWF,阳性,9,10,B.,相关功能,: 微观结构和其功能,相适应,，,反之亦然,。,C.,人体结构的4个层次,:,1. 细胞,(,Cell):,人体结构的基本结构和功能单位。,2. 组织,(,Tissue):,由一群结构和功能相同或相似的细胞(及其细胞间质)构成。人体内有4种基本组织：,上皮组织，结缔组织，肌组织和神经组织。,3. 器官,(,Organ):,由组织有机地结合起来而构成。,4. 系统,(,System):,由结构相似且功能相关的器官构成。,11,人啊，认识你自己！,在科幻电影,阿凡达,中，人通过脑电波控制可以掌控克隆外星人“阿凡达”的躯体。,“,阿凡达”异体操控成真,科幻电影,阿凡达,中，人通过脑电波控制可以掌控克隆外星人“阿凡达”的躯体。美国科研人员,18,日报告说，他们首次在猴子身上实现了这种异体操控，这一成果有助于未来帮助瘫痪者重新控制自己的身体。,12,II.,为什么要学习组织学,?,1.,组织学又叫,微观解剖学,(,Microanatomy),，是,解剖学,知识的进一步完善。,2.,结构是功能的基础，学好组织学是学好,生理学,(,Physiology),的基础。,3.,只有了解正常结构，才能学习其异常变化。因此组织学是,病理学,(,Pathology),的基础。,13,III.,怎样学习组织学,?,A. LM,技术,:,分辨率,(,Resolution),是指能够分辨相邻两点之间的,最小距离,。,LM,的分辨率约为,m,。,1.,切片,(,Section),: 将组织切薄使,光线可以透过,。,a.,取材、固定,(,Fixation),: 为,保存,新鲜组织的微观结构，尽快将组织浸入到酒精，甲醛，苦味酸，,Bouins,液或,Zenkers,液等固定剂中。,14,b.,石蜡包埋,(,Paraffin embedding),:,* 脱水,(,Dehydration),: 用浓度逐渐升高的,酒精 (70100%),将组织中的水完全置换出来。,* 透明,(,Clearing),: 用,二甲苯,完全置换出酒精。,* 浸蜡,(,Infiltration),: 在6062,C,时，用,液态石蜡,完全置换出二甲苯。室温时,石蜡凝固,成固态，内含待切组织。,15,c.,切片: 用切片机将组织切成,1,20,m,厚,的蜡片，然后将其放到温水上，待其完全展开后，,裱到,有粘附剂的载玻片上。,16,除切片外，还有其他处理组织的方法：,* 铺片,(,Whole mount),: 用于很薄的组织，如肠系膜。,* 磨片,(,Ground section),: 用于很坚硬的组织，如骨和牙。,涂片,(,Smear),: 用于液态组织，如血液，精液和唾液。,火棉胶切片,（,celloidin section,）,：,较硬组织、时间长。,冰冻切片,(,frozen section,）,：,保持酶活性、迅速诊断。,17,2. 染色,(,Staining),: 染料可以将微观结构显示不同的颜色以便观察鉴别。在染色前，需要,脱蜡入水,，因为染料是水溶性的。,18,图,7,HE,染色,（左上）苏木精（左下）伊红,（下）染好的切片脱水后加盖玻片,19,a.,最常用的染色方法是,苏木素,(,Hematoxylin,H),伊红,染色(,Eosin,E),，简称,HE染色,。,*,苏木素是,碱性,染料，,蓝紫色,，可以使,细胞核及细胞质中的核糖体,着色。被苏木素着色的结构本身为,酸性,，具有,嗜碱性,(,Basophilic),。,20,*,伊红是,酸性染料,，,粉红色,。可以将大多数细胞的,细胞质及细胞间质,染成粉红色。,被伊红着色的结构本身为,碱性,，具有,嗜酸性,(,Acidophilic),。,*,不易被苏木素和伊红着色的结构具有,嗜中性,(,Neutrophilic),。,21,肥大细胞的颗粒被甲苯铵蓝(一种蓝色染料)染成紫红色,b.,如果某结构显示的颜色和染料本身的颜色不同，该结构具有,异染性,(,Metachromasia),。,c.,如果某结构能将银离子还原成银原子，并吸附银原子而使自身显示棕黑色，该结构具有,嗜银性,(,Argyrophilic),。,22,网状纤维具有嗜银性，因此可以用银盐染色来显示。,23,H&E,染色的中等动静脉,d.,不同的染色方法，其结果不同。,24,醛复红染色的中等动静脉,25,在染色后，重新进入酒精和二甲苯，最后用中性树胶,封片,，以便长期保存。,* 切片,:,固定,梯度酒精,二甲苯,石蜡。,* 染色,:,石蜡,二甲苯,梯度酒精,水。,* 保存,:,水,梯度酒精,二甲苯,中性树胶。,26,二、电镜技术,1.,透射电镜技术（,transmission electron microscope TEM,）,a.,标本制作,5080nm,的超薄切片,b.,染色,重金属盐染色,c.,超微结构,d.,电子密度高、低,27,电子密度高,:,当电子束投射到,密度大吸附重金属多,的结构时,电子被散射的多,因此,射落到荧 光屏上的电子少而呈暗像,电镜照片呈,黑,或深灰色,称为,电子密度高。,反之称为,电子密度低。,28,2.,扫描电镜技术,(SEM),a.,标本制作,不需,制作超薄切片,b.,染色,重金属盐染色,c.,超微结构,用于观察组织细胞,表面,结构，具有真实的立体感。,29,30,3.,EM,的组织的制备与,LM,的相似，但有以下不同:,a.,通常使用戊二醛和四氧化锇作,双重固定,。,b.,切片,超薄,(厚度小于90,nm)，,塑胶,包埋。,c.,用,重金属盐,如醋酸铀或醋酸铅等染色。因此，所有,原始的电镜图片都是,黑白,的。,TEM,：,电子密度高、电子密度低,31,32,TEM,显示胰腺腺泡细胞内部结构。,33,其它的显微镜技术,冷冻蚀刻(freeze etchine method),观察细胞断裂表面结构,分析电镜 X射线显微分析术(X-ray microanalysis),研究细胞、组织内元素含量及分布,34,35,电镜:,“两暗夹一明”,C,膜:,36,C.,特殊的染色方法,:,1. 组织化学,(,Histochemistry,细胞化学),法,: 通过生物化学的,方法在原位产生不溶解的有颜色的反应产物，来显示,微细结构的位置，然后用显微镜观察。,PAS,反应,: 用来显示,多糖及糖蛋白,的糖链,的分布。先用过碘酸(,Periodic acid,)将多糖氧化，在多糖表面形成戊二醛结构，然后用无色亚硫酸品红(,Schiff,试剂) 还原戊二醛形成,紫红色沉淀,。,脂类显示法、核酸显示法、酶类显示法,37,肝脏的,PAS,染色,38,2. 免疫细胞化学,(,Immunocytochemistry),染色法,:,a.,待测结构或化学物质被看作抗原(,Antigen),，通过非常敏感和专一的免疫反应使抗原和被标记的抗体(,Antibody),结合，然后显示标记物，在原位产生不溶有色的反应产物，最后用显微镜观察。,39,b.,2,种基本染色法,:,*,直接法: 第一抗体被标记。,*,间接法: 第一抗体也被看作抗原，而第二抗体被标记。因为信号被放大，因此更加敏感。,3. 放射自显影,(,Autoradiography):,给细胞所要代谢的物质分子上标记放射性物质如,I,125,等，间隔照相，从而追踪该物质代谢途径。,40,4、细胞培养术和组织工程 细胞培养术,(cell culture),41,组织工程(tissue engineering),是应用组织学方法和工程学原理在体外模拟构建机体的组织或器官的技术。,基本要素：,种子细胞,细胞外基质（生物学材料） 信息分子,体外构建组织或器官移植于体内,。,42,组织化学技术,(1) 一般组织化学(histochemistry)技术,原理 ：待检物试剂有色沉淀（原位）,常用技术：,a.多糖和糖蛋白的糖链:,过碘酸希夫,（pariodic acid Schiff reactionPAS）,反应,原理：,多糖,过碘酸,多醛,希夫试剂,紫红色沉淀,b. 脂类：苏丹、油红、尼罗蓝等,c. 酶 ：酶对底物作用原理,d. 核酸：盐酸处理，再用Schiff试剂检测,43,PAS,反应，小肠上皮杯状细胞的黏原颗粒,44,2.,免疫组织化学,(immunohistology),技术,免疫细胞化学（,immunocytochemistry),技术,根据抗原、抗体特异性结合原理，检测组织切片中的,肽和蛋白质,.,特异性强、敏感度高。,用标记的抗体与组织中的抗原结合，标记物可于显微镜下观察。标记物有,荧光素（荧光显微镜观察）、辣根过氧化物酶（光镜或电镜观察）、胶体金（多用于电镜观察,）,分为：,直接法,间接法,45,免疫组织化学原理模式图,46,3. 原位杂交技术（in situ hybridization） 即核酸分子杂交组织化学术,检测基因（DNA片段）的有无基因的表达活性（mRNA）。,原理：用带,标记物,的已知碱基顺序的,核酸探针,与细胞内待测核酸按碱基配对原则进行特异性原位结合（杂交），并通过对标记物的显示而获知待测核酸的有无及相对量。,常用标记物：放射性核素、地高辛,47,4、,细胞培养(cell culture)、组织培养技术,5. 干细胞（stem cell）和组织工程 (tissue engineering),6、图像分析术(image analysis)又称形态计量术（morphometry) ,体视学(sterology),流式细胞仪技术等。,其它技术,48,实验中的组织工程耳,49,D.,学习组织学应注意的问题,:,1.,体内结构为立体的，三维的，而课本、讲义和显微镜下的结构均为平面的，二维的。,2.,学习组织学应注意静态与动态、理论与实践相结合、前后联系对比、结构与功能联系。,50,本 章 测 试,：,HE,染色 （,HE staining,）,PAS,反应 （,PAS reaction,）,2.,填空：,在电镜照片上呈黑色或深灰色称,电子密度，呈浅灰色称,电子密度。,关于石蜡切片技术切片厚度一般为,；透射电镜技术切片厚度一般为,_,。,51,52,本章重点,掌握上皮组织的一般特点和分类。,掌握各种被覆上皮的结构特点分布和功能。,掌握微绒毛、纤毛、紧密连接、缝隙,连接、桥粒、基膜、,质膜内褶,的超微,结构与功能。,了解腺细胞、腺上皮和腺的概念，外,分泌腺的主要形态特点。,53,上皮组织 (,Epithelium Tissue),组织,由一群,结构和功能相同或相似,的细胞,(,及细胞间质)构成。,人体内有四大基本组织。,54,概述,:,A.,来源：上皮组织来自胚胎时期的三个胚层,B.,分类,: 根据功能分4类 -,被覆，腺,，感觉，肌上皮。,C.,被覆上皮的特性,:,1.,细胞多、,排列,紧密,间质,很少,。,2.,有基膜、无血管,，,但神经末梢丰富,。,3.,被覆上皮分布于,体表管、腔、囊的内外表面,。,有极性,。,极性,: 细胞的游离面和基底面的结构和功能不同。,4.,功能: 保护、分泌和吸收、排泄等。,55,56,II.,被覆上皮的一般结构,:,A.,分类依据,:细胞排列的层数和表层细胞的形态。,B.,被覆上皮的类型和结构,:,1. 单层,: 由单层细胞构成。,a.,单层扁平上皮,(,Simple squamous epithelium,): 由单层,扁平状细胞构成。,57,*,内皮(,Endothelium,),: 分布于心血管和淋巴管内表面。,*,间皮(,Mesothelium),:,衬于体腔内表面。,*,特点,：表面光滑,减少器官间磨擦，利于液体流 动和物质通透,.,其他类型:分布于肾小体、和肺等处。,58,b.,单层立方上皮,(,Simple cuboidal epithelium,):,特点：由单层立方细胞构成。细胞呈立方形（侧面观）或多角形（表面观），核圆居中。,分布：肾近曲小管和甲状腺等处。,作用：分泌、吸收,59,c.,单层柱状上皮,(,Simple columnar epithelium,):,特点：由单层柱状细胞构成，,细胞呈柱状（侧面观）或多角形（表面观），核长圆形、位于基底部,。,分布：胃、肠、胆囊、子宫等处。,作用：吸收、分泌,60,杯状细胞,(,Goblet cell),:,杯状。胞质,顶部,被大量分泌颗粒占据，颗粒内含,粘液,。胞核位于基部，小，染色深。分泌粘液，润滑表面。,61,d.,假复层纤毛柱状上皮,(,pseudostratified,Ciliated,columnar epithelium,),:,分布于气管内表面。由柱状，梭形和锥体细胞构成，常夹有杯状细胞。,62,细胞核高低不同,；,所有,的细胞均位于基膜上，但,只有,柱状和杯状细胞可以达到游离面。,只有,柱状细胞顶部有纤毛。,作用：分泌、保护,63,2.,复层(由复层细胞构成)：,a.,复层扁平上皮,(,Stratified,squamous epithelium,): 由3种,细胞构成。表层细胞扁平,形；中层细胞多边形，基,底层细胞立方或柱状，排,列,凹凸不平,，且,增殖能力强,。,64,未角化,(,Nonkeratinized,)的复层扁平上皮：分布于食道。所有的细胞均是活细胞。,角化的,(,Keratinized,)复层扁平上皮,:,分布于表皮。角化层内的细胞已死亡。,作用：保护,65,b.,变移上皮,(,Transitional epithelium,):,特点,：细胞为多层，细胞形状和层数因器官功能状态不同而异,排空的膀胱上皮厚，细胞层数增多，细胞呈大的立方形,充盈的膀胱上皮薄，细胞层数减少，细胞呈扁梭形,分布：肾盏、肾盂、输尿管、膀胱,66,变移上皮光镜图（膀胱空虚态）,变移上皮光镜图（膀胱充盈态）,67,被覆上皮的类型和主要分布,上皮类型 主要分布,单层上皮 单层扁平上皮,内皮:,心、心血管和淋巴管,间皮:,胸膜、腹膜和心包膜,单层立方上皮 肾、甲状腺等,单层柱状上皮 胃、肠、子宫等,假复层纤毛柱状上皮 呼吸管道,复层上皮 复层扁平上皮 口腔、食管和阴道,皮肤,复层柱状上皮 男性尿道等,变移上皮 肾盂、输尿管和膀胱,68,Originate and classification of gland,69,III,.,腺体,(,Glands,),:,腺上皮为主的器官。,A.,概述,:,1.,分类,:,两类。,a.,内分泌腺,(,Endocrine glands,)：,无导管,。分泌物由血管和淋巴管运送。甲状腺、肾上腺、胰腺中的胰岛等。,b.,外分泌腺,(,Exocrine gland,)：,有导管,。汗腺、唾液腺、胰腺。,70,由分泌部和导管组成,导管可有分支，分泌部呈管状、泡状或管泡状，据此进行外分泌腺的形态分类,泡状和管泡状的分泌部称腺泡（,acinus,）,71,B.,几种腺上皮细胞,:,1. 浆液性细胞,(,Serous cell,): 即蛋白质分泌细胞。,a.,多边形或锥形，极性明显。,b.,基底部嗜碱，含大量的,RER。,c.,顶部嗜酸，含大量的分泌颗粒，内有蛋白质(酶) 。,d.,通过胞吐释放颗粒内容物。,72,2. 粘液性细胞,(,Mucus-secreting cell,): 即糖蛋白分泌细胞。,a.,细胞顶部有大量分泌颗粒。,b.,颗粒内有强亲水性粘液。,c.,杯状细胞是体内典型的粘液性细胞。,73,浆液性细胞,粘液性细胞,74,3. 类固醇分泌细胞,(,Steroid-secreting cell,): 分泌类固醇类激素,的内分泌细胞。嗜酸性细胞质内有大量脂滴，,发达的,SER,和丰富的管状嵴,MT。,75,IV,.,上皮组织的特殊结构,: 通常存在于上皮组织的细胞之间，也可存在于其他组织的细胞之间。,A.,游离面,(,Free surface):,1.,微绒毛(,Microvillus),:,a.,细胞游离面伸出的微细指状突起,，外覆细胞衣。长约1,m,，直径约80,nm。,76,b.,内含2030根由终末网发出的,纵行微丝,。,c.,扩大,细胞表面积，,有利于吸收,。,*,纹(刷)状缘,(,Striated (brush) border,): 密集排列的微绒毛,在光镜下的,结构。分布于小肠内表面(肾近曲小管) 。,77,2. 纤毛(Cili,um,),:,a.,细长毛发样结构，,可运动,。5 10 m长。直径 0.2 m。协调摆动时象风吹麦浪。,78,b. “9 + 2”,结构,: 内部由周边的纵行,9组,2,联微管,和居中的,2条纵行单独微管,构成，含肌动蛋白丝。,79,B.,侧面,(,Lateral surface):,电镜结构。,1. 紧密连接,(,Tight junction)：,a.,带状。相邻细胞的细胞膜内,蛋白质“嵴”相贴,。细胞膜融合。,b.,封闭10,nm,宽的胞间隙,。,c.,常存在于体内各种屏障内。,80,2. 中间连接,(,Intermediate junction)：,a.,带状。常分布于紧密连接下方。,b.,20nm,宽的胞间隙两侧的胞膜内有,电子致密斑,附着。,c.,由,终末网,内发出的微丝插入致密斑。,d.,粘着,相邻细胞、保持细胞形态、传递细胞收缩力。,81,3. 桥粒,(,Desmosome),:,a.,盘状，,很牢固,。,b.,30 nm,宽的胞间隙内有电子致密的,中间线,。胞膜内侧有,附着板,。两者由,跨膜细丝,相连。,c.,大量,“,U”,形的张力丝,穿入附着板。,桥粒在表皮细胞间大量存在，构成,细胞间桥,。,d.,起固定和支持作用。,82,4. 缝隙连接,(,Gap junction):,a.,有23,nm,胞间隙。常群居。,b.,相邻胞膜上的直径8,nm,的柱状蛋白质颗粒 (,Connexons, nm,的,亲水性通道,。,c.,信息交换,: 分子量小于1500,Da,的信息分子可以通过该通道。,连接复合体,(,Junctional complex,),:,由两种或两种以上的连接排列在一起构成。,83,C.,基底面,(,Basal surface,),:,1.,基膜(,Basement membrane,),:,a.,位于上皮组织和结缔组织,之间,的一层薄膜状细胞外基质。,b.,光镜下可见的,嗜酸性、嗜银性,结构。,PAS (+),。,c.,由基板(,Lamina densa),和网板(,Lamina fibroreticularis),构成。,84,d.,半透性,(,Semi-permeable,),膜,。,最厚的基膜位于假复层纤毛柱状上皮下方。,85,2. 质膜内褶,(,Plasma / basement membrane infolding,): 细胞底部胞膜向内折迭形成，可,扩大,细胞表面积，促进物质交换。该处有大量纵行排列的,线粒体,。,3. 半桥粒,(,Hemidesmosome,): 桥粒的一半。,86,游离面 微绒毛（,microvillus,）,纤毛（,cilium,）,侧 面紧密连接（,tight junction,）,中间连接（,intermediate junction,）,桥粒（,desmosome,）,缝隙连接（,gap junction,）,基底面基膜（,basement membrane,）,质膜内褶（,plasma membrane infolding,）,半桥粒（,semidesmosome,）,被覆上皮,特殊结构,