血管紧张素转化酶37778

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,血管紧张素转化酶的测定及其临床意义,检验科,概述,血管紧张素转化酶（,ACE,）又称,激肽,酶或肽基,-,羧基,肽酶，,系统,命名为肽基,-,二肽水解酶。属,血管,内皮,细胞膜,结合酶，由肽的,C,端将,氨基酸,切为两段变换而来，可使肽链,C,端二肽残基水解。,ACE,可催化,血管紧张素,（十肽）水解成八肽的,血管紧张素,，使血管进一步收缩，,血压,升高。也可,作用,于,肾上腺皮质,，促进,醛固酮,的分泌。因此，,ACE,是,肾素,-,血管紧张素,-,醛固酮的重要成分。,概述,ACE,还催化具有降压作用的,缓激肽,水解而失去活性。,ACE,广泛,分布,于,人体,各,组织,，以,附睾,、,睾丸,及肺的含量较丰富，其中肺,毛细血管,内皮,细胞,ACE,活性最高。肾、,脑垂体,等组织,酶活性,较低。,ACE,测定方法,主要有,比色法,、酶偶联法等。,血管紧张素转换酶的别名,：血管紧张素转化酶,转换酶的测定原理血管紧张素,.,（,1,）三,硝基苯,磺酸钠（,INBS,）显色法：底物马尿酰,-,甘氨酰,-,甘氨酸,（,Hip-,Gly,-Gly,）,在,ACE,作用下，释放出甘氨酰,-,甘氨酸（,Gly-Gly,），后者与三硝基苯磺酸（,TNBS,）作用，生成黄色的三硝基苯,-,甘氨酰,-,甘氨酸（,TNP-Gly-Gly,），其含量与,ACE,活性呈正,相关,。,（,2,）酶偶联法：,ACE,使底物马,尿酸,双甘肽,（,Hip-Gly-Gly,）水解成马尿酸（,Hip,）和双,甘肽（,Gly-Gly,），后者与,L-,谷氨酰,-3-,羧,基,-,4-硝基苯胺,（,GGCN,）和,-谷氨酰基转移,酶,（,GGT,）偶联，形成,3-,羧基,-4-,硝基苯胺，,在,340nm,处测其吸光度，以反映,ACE,活性。,试剂,（,1,）三硝基苯磺酸钠（,INBS,）显色法：,底物液：用,5mmol/L,的,Tris,溶液,配制,30mmol/L HGG,溶液，此液中含,0.4mol/L,Na,2,SO,4,、,NaCl,，调。,L,硼酸,盐,缓冲液,（）。,100g/L,钨酸钠（含,2,个水）溶液。,4,。,60mmol/L TNBS,溶液,（,2,）酶偶联法：,50mmol/L HEPES,缓冲液：称羟、乙基,哌嗪,乙磺酸（,HEPES,），加双,蒸馏水,100ml,溶解,，用于配制,GGT,、,CGCN,和,基质,缓冲液。,20kU/L GGT,贮存液：取,HEPES,缓冲液,5ml,，加入,GGT 100U,，混匀后分装小瓶，,20,。,保存,。,应用液：将上述贮存液用二倍量的,HEPES,稀释配制。,溶液：称,GGCN 20mg,，加入,50mmol/L HEPES 60ml,，溶解后,4,保存。,基质缓冲液：称，,NaCl,，,Na,2,SO,4,，用双蒸馏水溶解后，用,NaOH,调,pH,至，再补充双蒸馏水至,100ml,，,4,保存。,基质液：由,Hip-Gly-Gly,加基质缓冲液,10ml,溶解混合而成。此液各试剂终浓度为：,HEPES 50mmol/L,，,NaCl 30mmol/L,，,Na,2,SO,4,400mmol/L,，,Hip-Gly-Gly 30mmol/L,。,10mmol/L,双甘肽标准液：称,Gly-Gly,加双蒸馏水溶解，并稀释至,100ml,，此为贮存液（,40mmol/L,）。,1,份贮存液和,3,份双蒸馏水混合即为应用液。,正常值,（,1,）三硝基苯磺酸钠（,INBS,）显色法：。,（,2,）酶偶联法：,12-68U/L,。,化验结果临床意义,血清,ACE,测定主要同于肺部疾病的诊断，对其他系统疾病的诊疗也有一定,价值。,(1),肺部疾病：绝大多数,结节病,患者,血清,ACE,活力升高，其阳性率及幅度与病,活动,与否和病变累及的范围有关。,肺结核,也可升高，而,哮喘,发作、急性心,原性,肺水肿,、慢性阻塞性肺疾患、,自发性气胸,、肺,纤维,化、,成人呼吸窘迫综,合征,等血清,ACE,均有不同程度下降。,（,2,）,肝脏,疾病：多数肝脏病患者,ACE,活性升高，升高幅度依次为,肝硬化,、急,性肝炎、慢性肝炎。,脂肪肝,则正常。,（,3,）,甲状腺,疾病：,甲亢,患者,ACE,活性明显高于其他甲状腺疾病，且,酶活力,高,低与,T,3,、,T,4,含量呈正相关。,（,4,）其他：,糖尿病,、虹膜炎、,免疫,母细胞,肉瘤,等，血清,ACE,升高；,高血压,、,结肠,炎等则降低。,附注,（,1,）三硝基苯磺酸钠（,INBS,）显色法：,标本,在室温或冰箱存放,1,周，酶活力无明显变化，,15,保存,3,周酶活性,稳定,。,胆红素,对,ACE,有明显,抑制,作用，故重度,黄疸,可使测定结果偏低。,EDTA,是,ACE,的强抑制剂，,NaCl,和,Na,2,SO,4,对,ACE,有明显的活化作用，,溶血,、脂血对结果无影响。,本法与,紫外分光光度法,酶活力单位一致，但其,测得值,为紫外法的,9,倍。,（,2,）酶偶联法：,当底物，时，,ACE,活性与吸光度值有良好,线性,。线性范围大，即使,ACE,在,1500U/L,，,不用,稀释也可获得,理想,结果。,GGCN,浓度选择：本,反应,体系中,GGCN,既是测定酶,ACE,的,受体,，又是指示酶,GGT,的供体。以的,GGCN,最理想，在此浓度下,GGCN,与吸光度,保持,良好的线性。,GGT,对测定的影响：本反应利用,GGT,将双甘肽与,GGCN,偶联，生成黄色的,3-,羧基,-4-,硝基苯胺，其加入量可直接影响测定结果。,GGT,高浓度可使底物过度消耗，使吸光度偏离曲线；低浓度,GGT,又使吸光度偏低，,灵敏度,不高。每次加入,0.335 U GGT,，可获得理想吸光度与线性。在此浓度下，酶基质液的空白管吸光度。,相关疾病,结节病、肺结核、肺水肿、自发性气胸、,气胸,、肝硬化、脂肪肝、糖尿病、肉瘤、黄疸,THANKS,