植物组织培养和动物细胞培养比较

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,*,植物组织培养和动物细胞培养的比较,比较项目,植物组织培养,动物细胞培养,原理,细胞的,细胞,培养基性质,培养基,培养基,培养基特有成分,、植物激素,葡萄糖、,培养结果,植物体,培养目的,快速繁殖、培育无病毒植株,获得,全能性,增殖,固体,液体,蔗糖,动物血清,细胞株、细胞系,细胞或细胞分泌蛋白,温故而知新,植物体细胞杂交,（,马铃薯番茄,）,融合的原生质体,AB,再生出细胞壁,植物细胞的融合,杂种细胞,AB,杂种植株,脱分化,愈伤组织,再分化,植物组织培养,原生质体,B,原生质体,A,去 壁,去 壁,人,工,诱,导,植物细胞,A,植物细胞,B,动物细胞可以融合吗？,如果可以，两者相同吗？,2.2.2动物细胞融合,与单克隆抗体,带着问题走进课堂？,2.2,动物细胞工程,自主阅读，,p52第2自然段，,思考下列问题：,什么叫动物细胞融合,？,（概念要点）,两个细胞正在融合,受精作用,两个或多个动物细胞,一个细胞,（杂交单核细胞）,动物细胞融合,动物细胞融合过程示意图,不同,DNA,的两个细胞,灭活的病毒,有丝分裂,两个完整的杂交细胞,一、动物细胞融合（细胞杂交）,1,、概念：,指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。,2,、结果：,形成单核的杂交细胞,3,、原理：,细胞膜的流动性,4,、诱导方式,物理法：离心、振动、电激,化学法：聚乙二醇（,PEG),生物法：灭活的病毒,思考讨论：,为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活？不灭活行吗？,因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂,质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，不灭,活的话会感染细胞，而不能诱导细胞融合。,5,、过程：,动物细胞,A,动物细胞,B,诱导，融合,2,个完整的杂交细胞,AB,有丝分裂,（膜融合、质融合）,（核融合）,注意：,动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细胞,6,、意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。,7,、应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段,特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体,思考题,1.,植物体细胞杂交时首先应用什么方法去掉细胞壁？,酶解法，如纤维素酶或果胶酶,2.,动物细胞融合时需要进行去壁处理吗？为什么？,无需，因为动物细胞无细胞壁,3.,植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？,离心、电激等物理方法；,PEG,等化学方法,4.,动物细胞融合能利用上述两类方法吗？还有其他方法吗？,能 还可以利用灭活的病毒进行诱导,5.,植物体细胞杂交应先进行原生质体的融合再进行组织培养形 成完整的杂种个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？,不能,植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较,比较项目,植物体细胞杂交,动物细胞融合,细胞融合原理,细胞融合的方法,诱导方法,用途,获得,杂种植株,细胞膜的流动性,细胞膜的流动性,细胞的全能性,去除细胞壁,后诱导原生质体融合,使细胞分散后诱导细胞融合,物理（离心、振荡、电刺激）,化学（聚乙二醇）,物理、化学方法（同左）,灭活的病毒,主要用于制备,单克隆抗体,2.,动物细胞融合的概念,动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞称为,杂交细胞,。,1,、,抗体,1.1,概念：,抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白,。,1.2,来源：,B淋巴细胞。,二、单克隆抗体,B,淋巴细胞与抗体的关系：,B,淋巴细胞受抗原刺激后，可以产生抗体。,动物体内的,B,淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。,每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。,自主阅读,P,52,：,传统的抗体的生产方法及,缺陷是什么？怎样解决这个问题？,2.1,、单克隆,由一个细胞经过无性繁殖,(,多次有丝分裂,),形成的一个细胞群，叫一个克隆，即单克隆。,2、单克隆抗体的概念,2.2,、单克隆抗体,由一个效应,B,淋巴细胞经过无性繁殖形成的一个细胞群产生的化学性质单一，特异性强的抗体，即单克隆抗体。,要想获得大量的单一抗体，必须克隆单一的,B,淋巴细胞，形成细胞群。,3,、原理：杂交瘤细胞具有两个亲本的特性，即能迅速大量增殖，又能足够数量的单一抗体。,4,、过程,B,淋巴细胞,骨髓瘤细胞,诱导融合,B-B,细胞,B-,瘤细胞,瘤,-,瘤细胞,选择培养,杂交瘤细胞,（,B-,瘤细胞）,克隆化培养,抗体检测,杂交瘤细胞,体外培养,小鼠腹腔内增殖,单克隆抗体,6.,单克隆抗体的应用：,特异性强、灵敏度高、产量大,作为诊断试剂：准确识别各种抗原物质，并与特异性结合,优点：,准确、高效、简易、快速,用于,运载药物：制成“生物导弹”,治疗疾病：主要用于癌症治疗,5,、,单克隆抗体的特点：,思考,问题,：,1,、本过程利用了哪些原理？,免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理,这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的遗传物质，不仅具有,B,细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体,2,、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与,B,细胞融合？,知识结构,两个过程,动物细胞培养过程,单克隆抗体制备过程,三个“一”,一个诱导细胞融合的新方法 灭活的病毒,一个新细胞杂交瘤细胞,一个优势单克隆抗体特异性 强、灵敏度高的优势,1,、,动物细胞融合的目的中最重要的是 （ ）,A.克服远源杂交不亲和,B.制备单克隆抗体,2,、,动物细胞融合过程中所用的诱导剂灭活的病毒，抗原性和感染力的有无是 （,）,A.失去抗原性，具有感染力,B.具有抗原性，也具有感染力,C.失去抗原性，也失去感染力,D.具有抗原性，失去感染力,B,课堂练习,D,3、,“生物导弹”是指 （,）,A.单克隆抗体 B.杂交瘤细胞,C.产生特定抗体的B淋巴细胞,D.在单克隆抗体上连接抗癌药物,D,4、,科学家们用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交瘤细胞，经培养可产生大量克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是 （,）,A.经过免疫的T淋巴细胞,B.未经过免疫的T淋巴细胞,D.未经过免疫的B淋巴细胞,C,5,. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞,诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，,在这种培养基上不能存活增殖的细胞是 （ ）,淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 B淋巴细胞自身融合细胞,小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞,A. B.,C. D.,C,6,.动物细胞融合和植物原生质融合决定于 ( ),A.细胞膜的流动性 B细胞膜的选择透过性C.细胞质的流动性D细胞质酶的活性,A,