托幼机构消毒卫生标准

,单击此处编辑母版标题样式,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,*,*,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,托幼机构消毒卫生标准,前 言,由于我国目前尚未出台有关托幼机构消毒卫生标准，直接影响对托幼机构消毒质量的监视指导和效果评价。为此，我们依据?中华人民共和国传染病防治法?和?消毒管理方法?有关规定，针对托幼机构的特殊性和卫生要求，结合我省常年监测结果，特制定本标准。,本标准附录A为标准性附录。,本标准由江苏省卫生厅提出并归口。,本标准负责起草单位：江苏省疾病预防控制中心、南通市疾病预防控制中心、徐州市疾病预防控制中心。,本标准主要起草人：孙俊、徐燕、谈智、陈越英、吴小成、周品众、周明浩、章士军、蒋明伦,1范围,本标准规定了托幼机构室内空气、物体外表、工作人员手、餐饮具、游泳嬉水池等消毒卫生要求、指标和检验方法等。,本标准适用于各类托儿所、幼儿园。,2 标准性引用文件,以下文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。但凡注日期的引用文件，其随后所有的修改单不包括订正的内容或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。但凡不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。,GB14934-1994 食饮具消毒卫生标准,GB15982-1995 医院消毒卫生标准,GB9664-1996 文化娱乐场所卫生标准,GB9667-1996 游泳场所卫生标准,GB/T17220-1998 公共场所卫生监测技术标准,GB/T18204.910-2000 游泳池水微生物检验方法,2001年 卫生部?生活饮用水卫生标准?,2002年 卫生部?消毒技术标准?,GB15979-2002 一次性使用卫生用品卫生标准,GB/T4789-2003 食品卫生微生物学检验,3 术语和定义,以下术语和定义适用于本标准,消毒,杀灭或去除传播媒介上病原微生物，使其到达无害化的处理。,预防性消毒,对可能受到病原微生物污染的场所和物品进展的消毒。,物体外表,玩具、毛巾、桌面、卫生洁具、席子、褥具、便器架子等外表。,消毒药械,用于杀灭传播媒介上的微生物使其到达消毒或灭菌要求的制剂或器械。,消毒卫生标准,指不同对象经消毒或灭菌处理后，允许残留微生物的最高数量。,4 卫生要求和指标,4.1 卫生要求,活动室、教室和寝室应有纱窗和纱门，防止苍蝇、蚊子等有害生物侵入和隐匿。幼儿被褥单独叠放，不得混杂堆叠在一起。室内经常保持空气流通，定期进展消毒，传染病流行期间，每日消毒一次。,消毒卫生指标应符合下表规定。,表 消毒卫生指标,5 检验方法,采样及检验方法按附录A执行,6 有关规定,6.1 各类托儿所、幼儿园必须指定专人负责组织实施。,6.2各级卫生监视部门按有关法律、法规开展监视管理工作；各级疾病预防控制机构按本标准开展监测工作，每年至少一次 。,附录A标准性附录采样及检验方法,A1 采样及检验原那么,微生物指标的检验应在采样后6h内尽快进展。,A2 室内空气微生物采样及检验方法,A2.1 样品采集,采样时间分动态或静态，静态选择消毒处理后与进展保教活动之前期间采样，动态即正常保教活动中。室内面积不超过30m2，在一条对角线上设里、中、外3点，里外点位置距墙1m；室内面积超过30m2，设东、西、南、北、中5点，周围四点距墙1m。平板沉降法采样：将营养琼脂平板直径为9cm置于采样点60cm100cm高度，翻开平板盖，使平板在空气中暴露5min，盖上平板盖。溶血性链球菌监测时采用血平板采样。,细菌培养,将采样平板置于37培养48h观察结果，计算平板上细菌菌落数。,A2.3 菌落计算,50000N,空气中细菌菌落总数cfu/m3=,AT,式中：N平板上平均细菌菌落数cfu/平板；,A平板面积cm2,T暴露时间(min),A3物体外表、手外表微生物采样及检验方法,样品采集,物体外表：将经灭菌的内径为5cm5cm的无菌规格板放在被检物体外表，用一浸湿有无菌生理盐水的棉拭子在其内涂擦5次，并随之转动棉拭子，连续采样4个规格板面积，共采集100cm2，然后剪去手接触局部，将棉拭子放入20ml生理盐水采样管内送检。,手：被检人在从事幼教工作前，双手五指并拢，用一浸湿生理盐水棉拭子在双手指曲面，从指根到指端来回涂擦2次一只手涂擦面积约30 cm2，然后剪去手接触局部，将棉拭子放入含20ml无菌生理盐水的采样管内送检。,检验方法,将每支采样管振打80次，取1ml样液接种无菌平皿内，如污染严重，可做适当稀释后接种，每个样本平行接种两个平皿，倾注营养琼脂，摇匀并冷却后置37培养48h，计算平板上细菌菌落总数。,菌落总数计数,手外表：,平板上平均细菌菌落数采样液稀释倍数,每只手外表细菌菌落总数(cfu/ cm2)=,230,物体外表：,平板上平均细菌菌落数采样液稀释倍数,物体外表细菌菌落总数cfu/cm2=,采样面积cm2,大肠菌群,样品采集,使用测定细菌总数时采集的样品无需重采。,检验方法,取样液5ml接种到50ml乳糖胆盐发酵管，置352培养24h，如不产酸也不产气，那么报告为大肠菌群阴性；如有产酸、产气那么划线接种伊红美蓝琼脂平板，置352培养18h24h，观察平板上菌落形态，挑取可疑大肠菌落1个2个进展革兰氏染色镜检，同时接种乳糖发酵管于352培养24h，观察产气情况。凡乳糖管最终产酸产气、革兰氏染色为阴性的无芽胞杆菌，即可报告为大肠菌群阳性 。,致病菌,样品采集,使用测定细菌总数时采集的样品无需重采。,检验方法,绿脓杆菌,取样液5ml，参加到50mlSCDLP培养液中，充分混匀，置352培养18h24h。如有绿脓杆菌生长，培养液外表呈现一层薄菌膜，培养液常呈黄绿色或蓝绿色。从培养液的薄菌膜处挑取培养物，划线接种十六烷三甲基溴化铵琼脂平板，置352培养18h24h，观察菌落特征。绿脓杆菌在此培养基上生长良好，菌落扁平，边缘不整，菌落周围培养基略带粉红色，其他菌不长。,取可疑菌落涂片作革兰氏染色，镜检为革兰氏阴性菌者应进展以下试验：氧化酶试验：取一小块干净的白色滤纸片放在灭菌平皿内，用无菌玻棒挑取可疑菌落涂在滤纸片上，然后在其上滴加一滴新配制的1%二甲基对苯二胺试液，30s内出现粉红色或紫红色，为氧化酶试验阳性，不变色者为阴性。,绿脓菌素试验：取23个可疑菌落，分别接种在绿脓菌素测定用培养基斜面，352培养24h，参加三氯甲烷3ml5ml，充分振荡使培养物中可能存在的绿脓菌素溶解，待三氯甲烷呈蓝色时，用吸管移到另一试管中并参加1mol/L的盐酸1ml，振荡后静置片刻。如上层出现粉红色或紫红色即为阳性，表示有绿脓菌素存在。,硝酸盐复原产气试验：挑取被检菌落纯培养物接种在硝酸盐胨水培养基中，置352培养24h，培养基小倒管中有气者即为阳性。,明胶液化试验：取可疑菌落纯培养物，穿刺接种在明胶培养基内，置352培养24h，取出放于410，如仍呈液态为阳性，凝固者为阴性。,42生长试验：取可疑培养物，接种在普通琼脂斜面培养基上，置42培养24h48h，有绿脓杆菌生长为阳性。,结果报告：被检样品经增菌别离培养后，证实为革兰氏阴性杆菌，氧化酶及绿脓菌素试验均为阳性者，即可报告被检样品中检出绿脓杆菌。如绿脓菌素试验阴性而液化明胶、硝酸盐复原产气和42生长试验三者皆为阳性时，仍可报告被检样品中检出绿脓杆菌。,取样液5ml，参加到50mlSCDLP培养液中，充分混匀，置352培养24h。自上述增菌液中取12接种环，划线接种在血琼脂培养基上，置352培养24h48h。在血琼脂平板上该菌菌落呈金黄色，大而突起，圆形，不透明，外表光滑，周围有溶血圈。,挑取典型菌落，涂片作革兰氏染色镜检，金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性球菌，排列成葡萄状，无芽胞与荚膜。镜检符合上述情况，应进展以下试验：,甘露醇发酵试验：取上述菌落接种甘露醇 培养液，置352培养24h，发酵甘露产酸者为阳性。,血浆凝固酶试验：玻片法：取清洁枯燥载玻片，一端滴加一滴生理盐水，另一端滴加一滴兔血浆，挑取菌落分别与生理盐水和血浆混合，5min如血浆内出现团块或颗粒状凝块，而盐水滴仍呈均匀混浊无凝固那么为阳性，如两者均无凝固那么为阴性。凡盐水滴与血浆滴均有凝固现象，再进展试管凝固酶试验；试管法：吸取1:4新鲜血浆0.5ml，放灭菌小试管中，参加等量待检菌24h肉汤培养物0.5ml。混匀，放352温箱或水浴中，每半小时观察一次，24h之内呈现凝块即为阳性。同时以血浆凝固酶阳性和阴性菌株肉汤培养各0.5ml作为阳性与阴性对照。,结果报告：凡在琼脂平板上有可疑菌落生长，镜检为革兰氏阳性葡萄球菌，并能发酵甘露醇产酸，血浆凝固酶试验阳性者，可报告被检样品检出金黄色葡萄球菌。,溶血性链球菌,取样液5ml，参加到50ml葡萄糖肉汤，352培养24h。,将培养物划线接种血琼脂平板，352培养24h观察菌落特征。溶血性链球菌在血平板上为灰白色，半透明或不透明，针尖状突起，外表光滑，边缘整齐，周围有无色透明溶血圈。,挑取典型菌落作涂片革兰氏染色镜检，应为革兰氏阳性，呈链状排列的球菌。镜检符合上述情况，应进展以下试验： 链激酶试验：吸取草酸钾血浆草酸钾加5ml兔血浆混匀，经离心沉淀，吸取上清液，参加灭菌生理盐水，混匀后再参加待检菌24h肉汤培养物和0.25%氯化钙，混匀，放352水浴中，2min观察一次一般10min内可凝固，待血浆凝固后继续观察并记录溶化时间。如2h内不溶化，继续放置24h观察，如凝块全部溶化为阳性，24h仍不溶化为阴性。,杆菌肽敏感试验：将被检菌菌液涂于血平板上，用灭菌镊子取每片含0.04单位杆菌肽的纸片放在平板外表上，同时以阳性菌株作对照，在352下放置18h24h，有抑菌带者为阳性。,结果报告：镜检革兰氏阳性链状排列球菌，血平板上呈现溶血圈，链激酶和杆菌肽试验阳性，可报告被检样品检出溶血性链球菌。,沙门氏菌,按GB/T4789.4-2003。,A4餐饮具采样与检验方法,发酵法采样与检验,采样方法,餐饮具抽检碗、盘、口杯，将2.0cm2.5cm(5cm2)灭菌滤纸片紧贴内面各10张总面积50cm2、碟、匙、酒杯等小件物品以每5件为1份，每件内面紧贴灭菌滤纸片各2张总面积50cm2/份，如餐饮具较枯燥可将滤纸片用无菌生理盐水湿润后再采样，经1min，按序取下置入50ml灭菌生理盐水试管中，充分振荡后，制成原液。,筷：取每双的下段12cm处约50cm212cm2cm2cm，置入50ml灭菌生理盐水试管中，充分振荡20次，制成原液。,检验方法,大肠菌群,金黄色葡萄球菌,沙门氏菌,按执行。,志贺氏菌,按GB/T4789.5执行。,纸片法采样与检验,餐饮具消毒采用专用的大肠菌群快速检验纸片。,采样方法,随机抽取消毒后准备使用的各类餐具碗、盘、杯等，每次采样610件，每件贴纸片两张，每张纸片面积25cm25cm5cm用无菌生理盐水湿润大肠菌群检验用纸片后，立即贴于食具内侧外表，30s后取下，置于无菌塑料袋内。,筷子以5只为一件样品，用毛细吸管吸取无菌生理盐水湿润纸片后，立即将筷子进口端约5cm抹拭纸片，每件样品抹拭两张，放入无菌塑料袋内。,检验方法,将已采样的纸片置37培养16h18h，假设纸片保持紫蓝色不变为大肠菌群阴性，纸片变黄并在黄色背景上呈现红色斑点或片状红晕为阳性。,A5 嬉水池、游泳池水质检验,游离性余氯,按2001年卫生部?生活饮用水卫生标准?执行。,细菌总数、大肠菌群,按?公共场所卫生标准监测检验方法?执行。,A6结果判定,检查结果符合相应的标准值者，判定为该项检验合格；反之，不符合相应标准值者，那么判定为检验不合格。,谢谢！,谢谢观赏！,2020/11/5,41,