药物十七章合成抗菌药

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第十七章 合成抗菌药物的分析,喹诺酮和磺胺药物结,构、性质和分析方法,喹诺酮和磺胺类药,物有关物质的检查,喹诺酮和磺胺类,药物的体内分析,掌 握,熟 悉,了 解,第一节 喹喏酮类药物的分析,一、化学结构与性质,R,1,O,COOH,1,2,3,4,5,6,7,8,N,R,2,R,3,R,4,R,5,X,基本结构,:4-,喹诺酮,3,位,COOH,和,4,位,C=O,为活性必需,在,C,6,、,N,1,、,C,7,、,C,8,引入不同的基团,改变抗菌谱、抗菌活性、脂溶性、光敏反应,形成各具特点的喹诺酮类药物。,R,1,O,COOH,1,2,3,4,5,6,7,8,N,R,2,R,3,R,4,R,5,X,【,发展概况与分代,】,分代 代表药,第一代,(1962-1969),萘啶酸,(,nalidixic acid,),第二代,(1969-1979),吡哌酸,(,pipemidic acid,PPA,）,第三代,(1980-1996),诺氟沙星,(norfloxacin),(,氟喹诺酮类,),第四代,(1997-),莫西沙星,(moxifloxacin),(,新型氟喹诺酮类,),萘啶酸,第一代喹诺酮类抗菌药,吡哌酸,第,二,代喹诺酮类抗菌药,第三代喹诺酮类抗菌药,氟喹诺酮类,6,位引入氟原子，,7,位引入哌嗪基,诺氟沙星,常用氟喹诺酮类药物,诺氟沙星,(nor,floxacin,),环丙沙星,(cipro,floxacin,),氧氟沙星,(o,floxacin,),左氧氟沙星,(levo,floxacin,),洛美沙星,(lome,floxacin,),氟罗沙星,(flero,xacin,),司氟沙星,(spar,floxacin,),培氟沙星,(pe,floxacin,),依诺沙星,(enox,acin,),莫西沙星,(moxi,floxacin,),吉米沙星,(gemi,floxacin,),加替沙星（,gatif,loxacin,）,（后三种为第四代）,理化性质,外观性状：,类白色或淡黄色结晶,溶解性：,在水及乙醇中的溶解度小，在,酸性和碱性,水溶液有一定的溶解度。如诺氟沙星,25,o,C,时在水中的溶解度约为,0.027%,，乙醇中的溶解度约,0.076%,。,成盐后在水中溶解,:,如盐酸环丙沙星在水中溶解，在甲醇中微溶，在乙醇中极微溶解，在三氯甲烷中几乎不溶。,酸碱两性,:,含有羧基和碱性氮原子，故显酸碱两性，易溶于酸和碱,R,1,O,COOH,1,2,3,4,5,6,7,8,N,R,2,R,3,R,4,R,5,X,紫外吸收光谱特征：,分子结构中具有共轭系统，在紫外区有特征吸收，利用此性质可进行鉴别或含量测定。,1.0,A,0.0,200,350,l/,nm,诺氟沙星片紫外吸收光谱,旋光性：,左氧氟沙星具有旋光性，氧氟沙星、环丙沙星等无旋光性。,分解反应：,遇光照可分解，使用前后均应注意避光。,离子络合反应,:,极易和金属离子如钙、镁、铁、锌等形成螯合物,:,3,4-,位羧基和羰基,R,1,O,COOH,1,2,3,4,5,6,7,8,N,R,2,R,3,R,4,R,5,X,二、鉴别试验,（,1,）与丙二酸的反应,（反应机制尚未清楚）,喹诺酮类药物为叔胺化合物，与丙二酸在酸酐中共热时，有棕色、红色、紫色或蓝色呈现。,R,1,O,COOH,1,2,3,4,5,6,7,8,N,R,2,R,3,R,4,R,5,X,示例,:,Ch P2010,诺氟沙星乳膏的鉴别,【,鉴别,】,取含量测定相下供试品溶液,5ml,，置水浴上蒸干，残渣中甲丙二酸约,50mg,与酸酐,1ml,在水浴中加热约,10,分钟，溶液显红棕色。,（,2,）紫外,-,可见分光光度法,ChP2010,利用紫外,-,可见分光光度法对多种喹诺酮类药物进行鉴别,1.0,A,0.0,200,350,l/,nm,诺氟沙星片紫外吸收光谱,示例,:,ChP2010,左氧氟沙星的,UV,鉴别,【,鉴别,】,取供试品适量,加盐酸溶液溶解并稀释制成每,1ml,中约含,5 mg,的溶液,在,226nm,与,294nm,的波长处有最大吸收,在,263nm,的波长处有最小吸收。,（,3,）薄层色谱法,ChP2010,对氧氟沙星、诺氟沙星和氟罗沙星用本法鉴别,.,系统适用性实验,:,斑点的检测灵敏度、比移值,(R,f,),和分离效能。,x,x,x,对照品,供试品,混合对照品,(4),高效液相色谱法,含量测定项下供试品主峰应与相应对照品主峰的保留时间一致。,对照品,供试品,对照品,（,5,） 红外光谱法,用本法鉴别药物时，中国药典要求按指定条件绘制供试品的红外光吸收图谱，与,药品红外光谱集,中的相应标准图谱对比，如果峰位、峰形、相对强度都一致时，即为同一种药物。,诺氟沙星红外光谱图,2400,2100,1900,1650,1670,1500,C,三,C,乙炔基,C,O,羰基,C,C,苯环,C,三,N,腈基,1300,1000,1000,650,C-O,醚,CH,苯,(,单取代,),酯,三、特殊杂质检查,有关物质,:,工艺杂质、降解产物,ChP2010,检查喹诺酮类药物有关物质主要采用,HPLC,法,（一般了解）,判断：,供试品溶液色谱图中右氧氟沙星峰面积不得大于对照溶液主峰面积,(1.0%),。,左氧氟沙星中的光学异构体分离图谱,1.,右氧氟沙星；,2.,左氧氟沙星,配合交换手性流动相法,四、含量测定,非水溶液滴定法,紫外分光光度法,高效液相色谱法,（,1,）非水溶液滴定法,ChP2010,吡哌酸的非水溶液滴定测定,【,含量测定,】,取供试品约，精密称定，加冰醋酸,20ml,溶解后，加结晶紫指示液,1,滴，用高氯酸滴定液,(0.1mol/L),滴定至溶液显纯蓝色，并将滴定的结果用空白试验校正。每,1ml,高氯酸滴定液,(0.1mol/L),相当于的,C,14,H,17,N,5,O,3,。,（,2,）紫外分光光度法,ChP2010,诺氟沙星乳膏含量的,UV,测定。,【,含量测定,】,精密称取供试品适量,(,约相当于诺氟沙星,5mg),，置分液漏斗中，加三氯甲烷,15ml,，振摇，用氯化钠饱和的,0.1%NaOH,溶液,25,、,20,、,20,和,10ml,分次提取，合并提取液，置,100ml,量瓶中，加,0.1%NaOH,溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液,10ml,，用,0.4%NaOH,溶液稀释制成每,1ml,中约含,5g,的溶液，在,273nm,波长处测定,A,；另取诺氟沙星对照品适量，精密称定，加,0.4%NaOH,溶液溶解并定量稀释制成每,1ml,约含,5g,的溶液，同法测定，计算，即得。,（,3,）高效液相色谱法,盐酸洛美沙星含量的戊烷磺酸钠离子对,HPLC,测定,左氧氟沙星的高氯酸钠离子对,HPLC,测定,第二节 磺胺类药物分析,治疗细菌感染性疾病的化学合成药物,磺胺类药物的发现，,开创了化学治疗的新纪元,使死亡率很高的细菌性传染疾病得到控制,.,(1),基本结构,苯,对氨基,磺酰胺,芳伯氨基,磺酰胺基,一、化学结构与性质,磺胺嘧啶（,SD,）,嘧啶环,较活泼,磺胺甲,噁,唑（,SMZ,）,5-,甲基异,噁,唑,较活泼,(2),理化性质,性状,本类药物多为白色或类白色结晶性 粉末,在水中几乎不溶,溶于盐酸或氢氧化钠溶液,易溶于乙醇、丙酮，具有一定的熔点。,例：磺胺嘧啶的性状规定：,磺胺嘧啶为白色或类白色结晶或粉末；无臭，无味；遇光色渐变暗。在乙醇或丙酮中微溶，在水中几乎不溶；在氢氧化钠试液或氨试液中易溶，在稀盐酸中溶解。,（,2,）熔融变色,不少磺胺类药物以直火加热熔融后，可呈现不同的颜色，产生不同的分解产物。如磺胺可显紫蓝色，磺胺嘧啶显红棕色等。,3.,具有酸碱两性,碱性,酸性,p,K,a,: 78,4.,芳伯胺基反应,重氮化,-,偶合反应,氧化反应,5.,磺酰氨基的反应,沉淀反应,6,.,苯环上的反应,卤代反应,含氮杂环,具有较强的紫外吸收和红外吸收特征,在酸性条件下，还可与生物碱沉淀剂发生沉淀反应,7.,取代杂环的特性,1,、金属离子的取代反应,与硫酸铜的成盐反应 活泼,H,OH,-,草绿,噁,磺胺嘧啶,黄,绿,紫色,二、鉴别试验,ChP,磺胺甲噁唑与铜盐反应的鉴别,ChP,磺胺异噁唑与铜盐反应的鉴别,2,、重氮化,偶合反应 芳伯氨基,噁,偶氮化合物,猩红色,橙黄色,-,萘酚,ChP2010,规定芳香胺类的反应条件,3.,钠盐反应,4.,高效液相色谱法,5.,红外分光光度法,磺胺类药物具有相近的基本母核，其红外光谱特征吸收峰特别相似,红外吸收谱图中的特征吸收峰,/cm,-1,3300,3500,氨基,1610,1570,1480,1440,苯环,1650,1600,氨基,1350,1150,磺酰基,磺胺甲噁唑的红外吸收图谱,磺胺甲噁唑,红外吸收光谱鉴别,本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（,光谱集,565,图,）一致。,具体操作：波数,400 cm,-1,开始，逐个查看供试品图谱与对照图谱吸收峰位，峰形，强弱，相对大小是否一致。,400 cm,-1,2000 cm,-1,，波数读数误差允许在,10 cm,-1,，,2000 cm,-1,4000 cm,-1,，波数读数误差允许在,20cm,-1,，在,400 cm,-1,2000 cm,-1,由于峰较多，所以误差不能太大。,一般杂质：,氯化物、炽灼残渣、重金属。,酸度,溶液的澄清度与颜色,三、杂质检查,酸 度,查什么？,制备中的酸性中间体及副产物,方法,酸碱滴定，灵敏度法,碱性溶液的澄清度与颜色,查什么？,不溶于碱性溶液的杂质和有色杂质,方法,比色、比浊,方法依据,溶解性质差异,2.,特殊杂质的检查（有关物质）,TLC,法（,一般了解,）,复方磺胺甲噁唑注射液中磺胺、对氨基苯磺酸和甲氧苄啶降解产物的,TLC,检查,四、含量测定,高效液相色谱法,滴定法：,非水溶液滴定法、永停滴定法、沉淀滴定法,高效液相色谱法,ChP,复方磺胺嘧啶片含量的,HPLC,测定,色谱条件与系统适用性试验,ChP2010,规定磺胺嘧啶钠、磺胺嘧啶锌、磺胺甲噁唑、磺胺多辛和磺胺醋酰钠等原料药和制剂、磺胺嘧啶原料药采用永停滴定法。,2.,永停滴定法,【,含量测定,】,精密称定磺胺多辛约，置烧杯中，加水,40ml,与盐酸溶液,(12)15ml,，置电磁搅拌器上，搅拌使溶解，再加溴化钾,2g,，插入铂,-,铂电极后，将滴定管的尖端插入液面下约,2/3,处，用亚硝酸钠滴定液,(0.1mol/L),迅速滴定，随滴随搅拌，至近终点时，将滴定管的尖端提出液面，用少量水淋洗尖端，洗液并入溶液中，继续缓缓滴定，至电流计指针突然偏转，并不再回复，即为滴定终点。每,1ml,亚硝酸钠滴定液,(0.1mol/L),相当于的,C,12,H,14,N,4,O,4,S,。,磺胺多辛,3.,非水溶液滴定法,磺胺异噁唑原料药及片剂的非水溶液滴定法,磺胺异噁唑片,【,含量测定,】,取磺胺异噁唑片,20,片，精密称定，研细，精密称取细粉适量,(,约相当于磺胺异噁唑,0.5g),，加二甲基甲酰胺,40ml,使溶解，加偶氮紫指示液,3,滴，用甲醇钠滴定液,(0.1mol/L),滴定至溶液恰显蓝色，并将滴定的结果用空白试验校正。每,1ml,甲醇钠滴定液,(0.1mol/L),相当于的,C,11,H,13,N,3,O,3,S,。,第三节 体内合成抗菌药物分析,一、水产品中残留喹诺酮和磺胺类,药物的检查,（一般了解）,水产品中残留喹诺酮和磺胺类 药物的检查,提取方法,净化方法,二、左氧氟沙星的血浆浓度测定,一、典型药物的结构,二、鉴别：硫酸铜（黄绿,-,紫）；,芳香第一胺（猩红）,三、化学性质：酸碱两性、取代杂环的特性,四、含量测定：,具有丙二酸呈色反应的药物是：,诺氟沙星,磺胺嘧啶,磺胺甲恶唑,司可巴比妥,盐酸氯丙嗪,ChP 2010,氧氟沙星中“有关物质”的检查方法是：,紫外分光光度法,薄层色谱法,高效液相色谱法,气相色谱法,毛细管电泳法,下列含量测定方法,磺胺类药物未采用的是,:,高效液相色谱法,溴酸钾法,紫外分光光度法,非水溶液滴定法,亚硝酸钠滴定法,亚硝酸钠滴定法测定磺胺甲恶唑含量时, ChP2010,选用的指示剂或指示终点的方法是：,永停法,外指示剂法,内指示剂法,淀粉,碘化钾,-,淀粉,与硫酸铜生成草绿色沉淀的是,A,、磺胺甲,噁,唑,B,、磺胺嘧啶,C,、甲氧苄啶,D,、磺胺异,噁,唑,E,、磺胺醋酰钠,多选题：,磺胺类药物的鉴别方法有,A. Kober,反应,B.,重氮化,-,偶合反应,C.,与硫酸铜的沉淀反应,D. Marquis,反应,E.,茚三酮反应,喹诺酮类药物采用的鉴别方法有：,硫酸铜反应,红外分光光度法,高效液相色谱法,丙二酸反应,紫外分光光度法,多选题：,喹诺酮类药物的含量测定法有：,A.,非水溶液滴定法,B.,紫外分光光度法,C.,高效液相色谱法,D.,荧光分光光度法,E.,配位滴定法,磺胺类药物的鉴别方法,:,红外光谱法,烯丙基的反应,与硫酸铜的反应,三氯化铁反应,芳香第一胺反应,具有酸碱两性的药物有,:,磺胺嘧啶,磺胺异恶唑,吡哌酸,依诺沙星,硫喷妥钠,盐酸左氧氟沙星胶囊含量测定,:,取装量差异项下的内容物,混匀,紧密称定,(,约相当于左氧氟沙星,40mg),置,100 ml,容量瓶中，加,0.1 mol/L,盐酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过。精密量取续滤液,10ml,，置,100ml,容量瓶中，用盐酸溶液稀释至刻度，摇匀，精密量取,20,m,l,注入液相色谱仪，记录色谱图，另取左氧氟沙星对照品适量，同法测定，按外标法计算峰面积，即得。已知盐酸左氧氟沙星胶囊的规格为,g,平均装量为,0.1889g,称取内容物质量为。若对照品溶液的浓度为,40,g/ml,，供试品与对照品的峰面积分别为：,1467,和,1165,，求其标示量的百分含量。,标示量,% =,= 95.3%,X 10,6,1467,1165,1165,100 x100,10,X,0.0998,X,3.7980,20,0.1,40 x,