畜牧微生物学 畜牧微生物病毒学各论

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,病毒学各论,微生物及免疫学,双股,DNA,病毒,单股,DNA,病毒,具有反转录过程的病毒,单负股病毒目,分节段的负股,RNA,病毒,套式病毒,其他正股病毒,朊病毒,双股,RNA,病毒,病毒颗粒无囊膜，直径,27nm,，,20,面体对称,外表光滑呈球形，由,60,多个亚单位组成，每个亚单位含有,4,种衣壳蛋白。,基因组为单分子线状正股,RNA,。,一、微,RNA,病毒科,（,Picornaviridae,）,口蹄疫是全球性最重要的动物疫病，常在牛群、猪群大范围流行。,多种偶蹄动物都易感,。感染率很高，致死率较低。人类偶能感染，表现发热、食欲差及口、手、脚产生水泡。,口蹄疫病毒,(FMDV),诊断,申报,被列为必须申报的疾病，诊断只能在指定的实验室进行。,检测方法,OIE,推荐使用商品化及标准化的,ELISA,试剂盒,用于诊断，数小时出结果。也用细胞培养分离病毒，分离的病毒通过,ELISA,或者中和试验,加以鉴定。,疫苗,弱毒疫苗可能散毒，不安全。推荐使用,浓缩的灭活疫苗,。,检测猪血清中抗猪口蹄疫病毒非结构蛋白,3ABC,的抗体,肠道病毒,EV71,手足口病,(HFMD),是由,肠道病毒,引起的传染病，多发生于,5,岁以下的婴幼儿，可引起发热和手、足、口腔等部位的皮疹、溃疡，个别患者可引起心肌炎、肺水肿、无菌性脑膜脑炎等并发症。引发手足口病的肠道病毒有,20,多种，其中,柯萨奇病毒,A16,型,(Cox A16),和,肠道病毒,71,型（,EV 71,）,最常见。,二 分节段的负股,RNA,病毒,分节段的,RNA,病毒有,3,个科即,正粘病毒科,、布尼病毒科和砂粒病毒科。,正粘病毒科中,禽流感病毒,在动物病毒中较为重要，核酸分,8,个节段，基因易发生基因重配，使病毒变异率较高，给预防带来困难。流行的禽流感病毒毒株差异很大。,布尼病毒中裂谷热病毒是其中较为重要的病毒。,第一节 正黏病毒科,（,Orthomyxoviridae,）,病毒颗粒多形性，多球形；,有囊膜及纤突，甲、乙型病毒纤突上有两种糖蛋白（棒状的凝血素蛋白,H,、蘑菇状的神经氨酸酶蛋白,N,）；,基因组为,8,节段线状负股单股,RNA,；,细胞核内复制，胞浆膜出芽成熟释放；,对脂溶剂敏感，在外环境中极不稳定。,禽流感病毒,(AIV),1.,与人及哺乳动物流感有关 虽然早在,1901,年即分离禽流感病毒，但直到,1955,年才明确它与人及哺乳动物流感的关系。禽流感病毒某些毒株，可不经过猪体混合重配而直接感染人。,2.,基因库 水禽是流感病毒的“基因库”，并对养禽业构成潜在威胁。,禽流感电镜照片,3.,病毒毒力,禽流感的高致病力毒株,(,HPAlV,),对鸡有较强致病性，旧称真性鸡瘟。高致病性禽流感,(,HPAl,),是,OIE,规定的,A,类疫病。,病毒毒力有很大差异。高致病力毒株主要有,H7N7,、,H5N2,、,H5N1,亚型的某些毒株。,诊断,分离病毒非常必要，对鉴定病原及其毒力均不可少。,病料,一般从泄殖腔内采样，也可采肝、脾、血液、肺等。,分离,接种,8-10,日龄鸡胚尿囊腔。,鉴定,取尿囊液用鸡红细胞作,HA-HI,或,ELISA,等。进一步鉴定亚型需送国家级指定实验室完成。,毒力分析,可将分离株接种鸡，或用分离毒作空斑试验，检测其毒力，有毒株能产生空斑，无毒株则否。,高致病,OIE,规定的标准为：将含病毒的鸡胚尿囊液原液用灭菌生理盐水作,1:10,稀释 静脉内接种,4-8,周龄,SPF,鸡,8,只，每只,0.2ml,，隔离饲养观察,10d,，死亡,6,只者，判为高致病性禽流感病毒。,预防与控制,预防措施应包括在国际、国内及局部养禽场,3,个不同水平。,高致病力禽流感被,OIE,列为,A,类疫病，一旦发生应立即通报。,国内措施主要为防止病毒传人及蔓延。,养禽场还应侧重防止由野禽传给家禽，要有隔离设施阻挡野禽。一旦发生高致病力禽流感，应采取断然措施防止扩散。灭活疫苗可作预防用。,三 弹状病毒科,（,Rhabdoviridae,）,病毒颗粒子弹状，直径,20nm,长,170nm,。圆柱形核衣壳螺旋形对称，有囊膜及膜粒。基因组为单分子负股单股,RNA,。,弹状病毒结构模式图,弹状病毒电镜照片,狂犬病毒,1.,感染动物,病毒感染所有温血动物，引致人与动物狂犬病，感染的动物和人一旦发病，儿乎都难免死亡。,2.,症状,狂犬病表现神经症状，有兴奋型及麻痹型两种。,透射电镜下的狂犬病毒,3.,致病机理,传播,主要传播途径为被带毒动物咬伤，病犬唾液具有高度传染性。,病毒复制,病毒特异结合,神经肌肉结合处的乙酰胆碱受体及神经节苷脂,等受体。在伤口附近的肌细胞内复制，而后侵入外周神经系统，,沿神经轴索上行至中枢神经系统,，在脑的边缘系统大量复制，导致脑组织损伤，行为失控出现症状。病毒从脑沿传出神经扩散至唾液腺等器官，在其内复制，并以很高的滴度分泌到唾液中。,4.,诊断,具有确认资格的人员才能作出狂犬病的实验室诊断。往往要确定咬人的动物是否患狂犬病，需作,脑组织切片，检测包涵体。,取其脑组织如小脑或海马或唾液腺检测，方法为,荧光抗体染色,。,RT-PCR,技术,检测组织中的病毒,RNA,，敏感度高。,5.,预防与控制,应及时扑灭狂犬病患畜。对家养犬、猫进行弱毒疫苗免疫接种。,（,1,）形状：,20,面体,（,2,）核衣壳类型：,20,面体,（,3,）抵抗力：热、光及脂溶剂敏感；耐干燥、不耐酸；,（,4,）基因组：线状双股,DNA,，,125Kb-235Kb,。,（,5,）有囊膜，糖蛋白纤突,四 疱疹病毒科,(,Herpesrividae,),一、主要特征,疱疹病毒构造模拟图,细胞介导的单纯疱疹病毒内吞作用,二、病毒的复制与感染,1,、,伪狂犬病病毒,猪为病毒原始宿主，成年猪多为隐性感染，怀孕母猪,50,可发生流产、死胎或木乃伊胎。基因工程疫苗用于预防。,三、主要的疱疹病毒,2,、,马立克病病毒,(MDV),是鸡的重要的传染病病原，具有致肿瘤特性。可为神经淋巴瘤病，出现麻痹等症状。疫苗预防。,3,、,禽传染性喉气管炎病毒,各年龄段鸡均易感，以,4 18,周龄鸡易感性高，表现为咳嗽、咳血。,三、主要的疱疹病毒,4,、,鸭瘟病毒,鸭等多种水禽均易感，有弱毒疫苗。,三、主要的疱疹病毒,主要特征：有囊膜，,E2,纤突重要，,20,面体对称，基因组线性单股正链,RNA,，黄病毒属以,Vero,细胞培养。瘟病毒属以原动物细胞培养，多无,CPE,，抵抗力差。,五 黄病毒科,重要的动物病毒,（,1,）,日本乙型脑炎病毒,人畜共患，多种动物感染，使幼驹表现神经症状，孕猪繁殖障碍，以三喙库蚊传播，弱毒和灭活苗预防,（,2,）,牛病毒性腹泻病毒,分,CPE,和非,CPE,两型，可致犊牛、羊、鹿腹泻。猪也可感染，牛黏膜病，引起绵羊抑制，经胎盘传播。,（,3,）,猪瘟病毒,主要特征：感染猪有典型和非典型猪瘟，使孕猪繁殖障碍。,预防控制：,垃圾饲料注意消毒,扑杀有效，疫苗接种,六 痘病毒科（,Poxviridae,）,英国医生,Jenner(1798),开创用牛痘病毒预防人天花，是病毒免疫的里程碑。目前痘苗病毒被作为基因工程疫苗载体广泛应用，鸡痘、绵羊痘及羊口疮为害较严重。,一、主要特征,（,1,）形状,：,砖状,（,2,）核衣壳类型：复合对称。,（,3,）抵抗力：热差、冷强、耐干燥、不耐酸；,（,4,）基因组：线状双股,DNA,，,130Kb-375Kb,（,5,）复制与释放：胞浆内复制，胞吐释放。,二、传播方式,传播途径：,皮肤伤口感染、呼吸道、昆虫叮咬感染。痘病毒感染,宿主谱较窄,。,三、培养特点,痘病毒可在,鸡胚绒毛尿囊膜,上生长，多数可在膜上形成痘斑。,痘斑的形态,等因痘病毒的种类而异。可根据痘斑特征，对病毒作出初步鉴定。,四、主要的痘病毒,1.,痘苗病毒,痘苗病毒一直作为痘病毒的模型，同时广泛用作疫苗预防天花。该病毒分布广泛，而且宿主谱宽，在自然条件下能引致牛乳头感染。,2.,绵羊痘病毒,只感染绵羊，可致全身性疱疹，伤口、呼吸道感染。疫苗预防。,3.,鸡痘病毒,禽痘病毒属,的代表种为鸡痘病毒。所有禽痘病毒均以吸血昆虫为机械传播媒介,有皮肤型及黏膜型两种形式，黏膜型鸡痘又称,鸡白喉,，死亡率较高。,七 套式病毒目,1,冠状病毒科,病毒颗粒为球形，直径,80-220nm,，核衣壳螺旋对称,;,有囊膜及长达,20nm,的棒状纤突。,基因组为单分子线状正股单股,RNA,。,猪传染性胃肠炎病毒,(TGEV),已报道,4,种冠状病毒能感染猪：,猪血凝性脑脊髓炎病毒,猪流行性腹泻病毒,猪传染性胃肠炎病毒,猪呼吸道冠状病毒,(PRCV),。,致病,TGEV,在世界各地均有发现，引致仔猪腹泻，伴有呕吐，,3,周龄以下的仔者有较高死亡率。但有时成年猪也有高死亡率，母猪表现为厌食、发热、腹泻及无乳等。,防制,仔猪可通过初乳及奶液获得母源,IgA,抗体，产生被动免疫。,二、动脉炎病毒科,主要特征：,20,面体对称，有囊膜，核酸为单股正链,RNA,复制和释放方式与冠状病毒相似 。,套式病毒目,An,Arenavirus,猪呼吸与繁殖综合征病毒,分为欧洲株和美洲株、我国美洲株。,母猪感染流产，仔猪感染呼吸困难。,病毒可能来源于小鼠乳酸脱氢酶病毒。,病毒感染单核细胞和巨噬细胞产生免疫抑制。,冬季流行。,分离病毒可用肺巨噬细胞或,MA-104/MAC-145,细胞。,基因缺失苗和灭活苗预防。,（,1,）病毒无囊膜，球状，直径,17-22nm,；,（,2,）基因组为单分子单股,DNA,，环状，在细胞核复制；,（,3,）,60 30min,，,pH3-9,。,十,圆环病毒科,(,Circoviridae,),一、主要特征,二、主要成员,包括猪、禽及植物的圆环病毒，是目前已知最小的动植物病毒,鸡贫血病毒,(CAV),1979,年在日本发现，曾称鸡传染性贫血因子,(CAA),，现已是养禽业的世界性问题。,除鸡以外不感染其他禽，只有一个血清型。雏鸡表现为急性免疫抑制性疾病。由于红细胞生成减少造成贫血，,血液可成水样，凝结缓慢。常发生继发性细菌感染,。本病毒通过直接接触传递，亦可经卵垂直传递。大多数鸡群均携带本病毒。,猪圆环病毒（,PCV,）,能引起仔猪断奶后多系统衰竭综合征（,僵猪综合征,）。,双股,RNA,病毒,呼肠孤病毒科和双,RNA,病毒核酸类型为双股,RNA,，核酸是,分节段,的，常常具有较高的变异率。,属于该类的动物较为重要的病毒有,蓝舌病毒,、,轮状病毒,、,传染性囊病病毒,。,鸡的,传染性法氏囊炎,是临床上常见多发病，对我国乃至世界养禽业危害极大。,1,、主要特征：有囊膜，线性双股,RNA,，分节段，三层衣壳，每层均为,20,面体对称 。,（,1,）蓝舌病毒,绵羊蓝舌病，吸血昆虫传播,（,2,）轮状病毒,幼龄动物易感发病，激发大肠杆菌病情加重,一、呼肠孤病毒科,1,主要特征 ：双股,RNA,，无囊膜，,20,面体对称，基因组分,2,节段，对热稳定 。,鸡传染性法氏囊炎病毒,（,1,）主要特征 ：,2,个血清型，,1,型有致病性，,2,型无致病性，两者抗原交叉性差，流行过程中毒力可变强，主要感染,25,65,日龄鸡。,（,2,）微生物学诊断,制备触片琼扩鸡胚接种鸡源细胞培养,ELISA,（,3,）预防与控制 疫苗的效果不尽如人意。,双股,RNA,病毒科,主要特征：无囊膜，,20,面体对称，,32,个杯状壳粒，核酸单股正链,RNA,。,兔出血热病毒,（兔瘟）,家兔野兔出血性败血症，,2,月龄一下幼兔，急性或亚急性败血症，死亡率,100,，病毒有血凝性，尚未分离到病毒，组织苗可用于预防。,兔出血热病毒,嵌杯病毒科,副粘病毒科,（,Paramyxoviridae,）,病毒多形性，有时呈长丝状，有囊膜，表面有血凝性和,/,或神经氨酸酶纤突，使细胞融合，负股,RNA,。,人副粘病毒电镜照片,人副粘病毒电镜照片,动物的副粘病毒电镜照片,新城疫病毒,(NDV),引致鸡、火鸡、鹅、鸽、鹦鹉等新城疫，已成为世界养禽业最重要的疾病之一。,1.,病症,感染鸡 呼吸道、循环系统、胃肠道紊乱及神经症状都很明显，蛋鸡可有突发，生产蛋下降、产薄壳蛋或鸡蛋白蛋白减少。,火鸡等与鸡类似，有呼吸道及神经系统症，最常见气囊炎。鸭鹅多为隐性感染。人类亦可感染。,2.,致病机理,感染,病毒首先在呼吸道及肠道黏膜上皮复制，借助血流扩散到脾及骨髓，产生二次病毒血症，从而感染肺、肠及中枢神经系统。,血清型,NDV,只有一个血清型,，但毒株毒力有较大差异。 可分成,3,个类型：强毒型、中毒型和弱毒型。,强毒型又名嗜内脏型,，致死率可达,100,，引致广泛的出血性损伤。天然弱毒株已作为疫苗使用。,传播,病毒通过气雾、污染的食物及饮水传播。,3.,诊断,必须作病毒分离及血清学试验。可取脾、脑或肺匀浆，接种,10,日龄鸡胚尿囊腔分离病毒。病毒能凝集鸡、人及小鼠等红细胞，再作,HI,试验鉴别。,4.,预防与控制,新城疫是,OIE,规定的,A,类疫病，许多国家都有相应的立法。,控制措施包舌良好卫生及免疫。,通常采用由天然弱毒活毒苗及强毒株的油乳剂灭活苗。,朊病毒,(,prion,),是动物与人,传染性海绵状脑病,(TSE),的病原，实质上不是传统意义上的病毒。它没有核酸，只有传染性的蛋白质颗粒。,早在,15,世纪发现的绵羊的,痒病,就是由朊病毒所致，,1986,年在英国发现的“,疯牛病,”,(,牛海绵状脑病,),，严重打击了养牛业，并危及人类健康，震惊全世界，至今余波未平。,朊病毒（,Prion,）,“疯牛病”,(,牛海绵状脑病,),病原也是朊病毒。美国科学家,Prusiner,获,1997,年诺贝尔医学奖，就是为了表彰其在研究朊病毒的性质及其所致的,TSE,的致病机理所取得的突破性进展。,朊病毒蛋白的一张快照表明该蛋白喜欢彼此配对存在,性质,朊病毒是细胞正常蛋白经变构后而获得致病性。这种正常的细胞蛋白名为,PrPc,。大多数哺乳动物的基因组均编码，并在许多组织尤其是神经元及淋巴内皮细胞中表达。,PrPc,与,PrPsc,PrP,是朊病毒蛋白,(,prion,protein),的缩写。,PrPc,是正常细胞的一种糖蛋白，分子量,27000-30000,，称为,PrP27-30,。,PrP27-30,是,PrP33-35,蛋白酶,K,不完全消化的产物。,朊病毒的特性,具有反转录过程的病毒有反转录病毒科和嗜肝病毒科；,嗜肝病毒科在动物疾病方面重要性较差。,反转录病毒科,在动物疾病方面的主要特点是,多数病毒具有致肿瘤作用,，潜伏期较长。比较重要的动物反转录病毒有,牛白血病病毒,、,梅迪,/,维斯纳病毒,和,马传染性贫血病毒,。,反转录病毒科,反转录病毒科,（,1,）形状：球形，有囊膜；,（,2,）衣壳对称性：二十面体对称；,（,3,）基因组：为二倍体，由两个线状正股单链,RNA,组成；,3,端聚,A,尾；多聚,A5,端有帽子结构；能编码反转录酶基因；,（,4,）具有三层结构，最内层为基因组核蛋白复合物，包含反转录酶，螺旋对称。,一、主要特征,1.,可引致肿瘤的病毒,甲乙丙丁戊型反录病毒属 如,禽白血病肉瘤病毒,、,猫白血病病毒、牛白血病病毒,等。,2.,可引起免疫缺陷的多种病毒,二、主要成员,慢病毒属 如人免疫缺陷病毒,1,型和,2,型、牛、猴、猫免疫缺陷病毒、马传染性贫血病毒等。,腺病毒科,(,Adenoviridae,),二、主要特征,（,1,）形状：五邻体,（,2,）核衣壳类型：,20,面体对称，有纤丝，具血凝性；,（,3,）抵抗力：热差、冷强、耐干燥、不耐酸；,（,4,）基因组：线状双股,DNA,，无囊膜；,（,5,）核内组装，细胞崩解释放。,犬传染性肝炎病毒 、减蛋综合征病毒,等 。,一、成员,腺病毒电镜彩色照片,腺病毒结构模拟图,腺病毒标本模拟图,1,、,犬传染性肝炎病毒,致犬传染性肝炎，犬狐易感染；病毒经鼻咽、口及黏膜途径进入体内，最初感染扁桃体、产生病毒血症，后感染实质组织，导致出血及坏死，感染犬通过尿、粪及唾液排毒。,三、重要的腺病毒,2,、,减蛋综合征病毒,(EDSV),多发于产蛋高峰时的鸡，除鸡以外，鸭及鹅也发病。感染禽产蛋下降,60-80%,，产褪色蛋、软壳蛋或无壳蛋。灭活疫苗效果好。,EDSV,病毒电镜照片,细小病毒科,(,Parvoviridae,),（,1,）形状：球形,（,2,）核衣壳类型：,20,面体对称,（,3,）细胞核内复制,（,4,）基因组：线状单股,DNA,，无囊膜。,一、主要特征,Canine Parvovirus Surface topography of the virus,Molecular surface,radially,depth cued, as solved by X-ray crystallography,1,、猪细小病毒,猪细小病毒病，病猪表现繁殖障碍、呼吸道症状，严重危害养猪业。易感猪群发病率非常高。目前只发现一个血清型。,病毒高度稳定，在环境中能存活多月。,用灭活苗或弱毒苗免疫预防。,2,、犬细小病毒,所有犬科均易感，犬出血性腹泻，有血凝性。,3,、鹅细小病毒,又名小鹅瘟，高免血清与弱毒苗混合用。,