淋巴细胞亚群与临床

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,淋巴细胞亚群免疫表型与临床,主要内容,概念,各类淋巴细胞的基础知识,淋巴细胞亚群检测的临床意义,一、概念,淋巴细胞,属白细胞的一种，由淋巴器官产生，是机体免疫应答功能的重要细胞成分。,淋巴细胞的免疫表型,淋巴细胞的,膜表面分子,（,分化群抗原,CD,）可用于鉴定和区分其亚群和亚类，是研究淋巴细胞的重要工具。,淋巴细胞亚群,按其发生迁移、表面分子和功能的不同，可分为T细胞、B细胞和自然杀伤(NK)细胞。,淋巴细胞的免疫表型,淋巴细胞的,膜表面分子,（,分化群抗原,CD,）可用于鉴定和区分其亚群和亚类，是研究淋巴细胞的重要工具。,淋巴亚群在外周血中的比例,（,%淋巴细胞）,T淋巴细胞,50-84%,NK细胞 7-40%,B淋巴细胞 5-18%,各类淋巴细胞的基础知识,T淋巴细胞,概念,来源于骨髓的淋巴样干细胞，在胸腺中成熟的淋巴,细胞，故称胸腺依赖性淋巴细胞（thymus-dependentlymphocyte），简称T细胞。,功能,负责细胞免疫功能，参与抗肿瘤、抗细胞内感染微生物、移植排斥、迟发型超敏反应；对部分体液免疫发挥辅助功能。,免疫表型,：CD3，与TCR形成复合体，是T细胞识别抗原和转导信号的主要单位。,CD3+/CD4+：辅助性T细胞,CD3+/CD8+：杀伤性T细胞,T,淋巴细胞的分化发育,T细胞在胸腺中的发育,T细胞在外周淋巴器官中的分化发育,T细胞在胸腺中的发育,三个阶段,双阴性阶段 (DN),双阳性阶段 (DP),单阳性阶段 (SP),三个重要事件,TCR基因重排,阳性选择,阴性选择,三个重要结果,获得功能性TCR,获得MHC限制性,获得自身耐受,T细胞在外周淋巴器官中的分化发育,初始T细胞,主要定居于外周淋巴器官的胸腺依赖区,T细胞在外周淋巴器官与抗原接触后，最终分化为具有不同效应功能的T细胞亚群，,效应T细胞,和,记忆T细胞,。,T,淋巴细胞亚群,按,T细胞,所处的活化阶段,初始T细胞（naive T cell）,效应T细胞（effector T cell）,记忆性T细胞（memory T cell）,按TCR的表型分类,TCR,+,T细胞,TCR,+,T细胞,按T细胞的CD4和CD8分子表型,CD4+ T细胞 辅助T细胞,CD8+ T细胞 杀伤T细胞,按T细胞的功能分类,Th（help T cell）,Tc/C TL（cytotoxic T cell）,Tr（regulatory T cell）,初始,T细胞、效应T细胞和记忆T细胞,初始T细胞,表型：CD45RA+、 CD62L+、CD25-（IL-2R）,特点：未接触抗原的成熟T细胞，有分化潜能,效应T细胞,表型： CD4+、CD8+,迁往炎症部位，执行细胞免疫效应,记忆性T细胞,表型：CD45RO+、CD25+（IL-2R）,特点：存活期长，再次接受抗原刺激后可迅速活化,TCRT,细胞和,TCRT,细胞,TCRT细胞,数量少，占5,多为CD4CD8（DN细胞）；少数为CD8+,分布于皮肤、粘膜参与固有免疫，是抗感染的第一线细胞,TCRT细胞,数量多，CD4+或CD8+（SP细胞）,TCR识别谱广，是参与免疫应答的主要细胞群,Th、CTL,、,Ts,和,Treg,细胞,辅助性T细胞（Th）,主要表面标记：,CD4,CD8,-,主要种类：,TH1，TH2,功能：具有辅助其他免疫细胞分化和调节免疫应答（促进和抑制）的作用,细胞毒性T细胞（CTL）,主要表面标记：CD4-CD8+CD28+,功能：特异性直接杀伤靶细胞,杀伤机制：,释放穿孔素，颗粒酶杀伤靶细胞,通过Fasl介导靶细胞的凋亡,抑制性T细胞（Ts）,主要表面标志：CD4-CD8+CD28-,功能：对免疫应答有重要的负调节功能，抑制性T细胞功能的异常，常与T自身免疫性疾病、第I型超敏反应等疾病发生有关。,调节性T细胞（Treg）,主要表面标记：CD4+CD25+,功能：抑制免疫应答,小结,Th,CTL,Ts,Treg,表面标志,CD3+CD4+CD8-,CD3+CD4-CD8+CD28+,CD3+CD4-CD8+CD28-,CD3+CD4+CD25+,主要功能,介导细胞免疫,引起迟发型超敏反应、,辅助体液免疫,抗寄生虫感染,特异性直接杀伤靶细胞,对免疫应答有重要的负调节功能,抑制免疫应答,NK淋巴细胞,NK细胞：,一种大颗粒淋巴细胞。英文全称为“natural killer cell”，也称作“自然杀伤细胞”。,它是一种能直接杀伤靶细胞效应的特殊的淋巴细胞系，具有抗肿瘤抗感染免疫调节的功能，且表现为,速发效应,。在医学上被称作是,“,人体抵抗癌细胞和病毒感染细胞的第一道防线,”。,NK细胞的表型,NK细胞表面标志物：,CD3-/CD16+CD56+,与T细胞、B细胞相比，NK细胞表面标志的特异性是相对的。人NK细胞mIg-，部分NK细胞CD2、CD3和CD8阳性，表达IL-2受体链（P75，CD122），CD11b/CD18阳性。,细胞因子,诱导,杀伤细胞（CIK）,CIK（cytokine-induced Killer）细胞是由r-IFN、CD3-Ab、IL-1、IL-2等细胞因子在体外诱导并大量扩增的具有杀伤肿瘤活性的细胞，是一种新型、高效、广谱的免疫细胞，是目前最新的肿瘤免疫治疗手段。,CIK细胞：CD3+T细胞为主的异质性细胞群体，同时表达CD3、CD56，兼CTL强大的抗瘤活性，和NK细胞非MHC限制性杀瘤特点，目前所知杀伤活性最强的免疫效应细胞。,CIK的表型及起源,：,表型：,CD3,+,CD56,+,和CD3,CD56,两个亚群，主要效应细胞CD3,+,CD56,+,。,分布：,优先分布肝脏，CD3,+,CD56,+,占肝脏CD3细胞的1/3，其次外周血，占-5%。,来源：,主要是CD3,+,CD56,的T细胞，多数是CD4,-,CD8,+,及CD4,-,CD8,-,。,B淋巴细胞,B淋巴细胞是免疫系统中的抗体产生细胞。,产生的抗体可与抗原起特异性的结合，如中和细菌的外毒素使其失去毒性作用；,抗体与抗原结合后形成的复合物易被吞噬细胞清除；,抗体与抗原结合后再结合补体清除病原体。,B细胞特异性标志物：CD19、CD20等,B淋巴细胞检测时，多用CD3-CD19+来作为检测标志。,B细胞的亚群,周围淋巴器官中的B细胞具有异质性,可依据CD5是否表达分为B1和B2两亚群,性质,B1,B2,初次产生时间,胎儿期,出生后,更新方式,自我更新,骨髓产生,特异性,多反应性,单特异性,是否有CD5表达,有,无,淋 巴 细 胞 亚 群 与 临 床,淋巴细胞亚群的检测内容,目前常做以下项目的检测,淋巴细胞亚群分析,T细胞亚群分析,T淋巴细胞（CD3+）,辅助T细胞(CD3+CD4+),杀伤/抑制T细胞（CD3+CD8+),CD4+/CD8+的比值,B细胞(CD3+CD19+),NK细胞(CD3-CD16+56+),活化淋巴细胞的检测,TBNK检测的适用人群,肿瘤病人化疗过程中，抗癌药物对同样处于增殖状态的、对肿瘤敏感的活化淋巴细胞也有杀伤作用，甚至免疫功能严重损毁。,活动期的自身免疫病患者，必然表现为淋巴细胞亚群绝对值和活化淋巴细胞百分比的明显异常。,怀疑有免疫缺陷的病人,器官移植患者术后监测中更具有不可或缺的作用,淋巴细胞亚群的正常参考值（%淋巴细胞群）,项 目,百分率（%）,总T淋巴细胞（CD3+CD19-),50-84,辅助/T淋巴细胞（CD3+CD4+),27-51,抑制/细胞毒T淋巴细胞（CD3+CD8+),15-44,辅助/抑制T淋巴细胞比值,0.71-2.78,NK细胞（CD3-/CD16+56+),7-40,总B淋巴细胞（CD3-CD19+),5-18,T淋巴细胞+NK淋巴细胞+B淋巴细胞,95-105,NK细胞,CIK细胞,B细胞,淋巴细胞亚群的临床意义,淋巴细胞亚群分析是检测细胞免疫和体液免疫功能的重要指标，它总体反映机体当前的免疫功能、状态和平衡水平，并可以辅助诊断某些疾病（如自身免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液病、变态反应性疾病等），分析发病机制，观察疗效及检测预后有重要意义 。,当某种细胞亚群所占百分比过高或过低，都提示存在免疫功能紊乱，但一般情况下对疾病的诊断和鉴别无特异性。,淋巴细胞亚群测定的结果解释,T细胞异常,CD4细胞异常,CD8细胞异常,CD4/CD8比值异常,B细胞异常,NK细胞异常,总T、总B、NK细胞可以用来判断某些免疫缺陷和自身免疫性疾病，也可以用于监测移植后得免疫重建。,T细胞减少,见于先天性免疫缺陷病（例如DiGeorge综合症，胸腺发不发育）,以及肾脏和心脏移植后接受预防排斥的免疫调节药物OKT-3的患者,也常见于恶性肿瘤、自身免疫性疾病（SLE和RA等）、先天性免疫缺陷病、艾滋病、接受放疗、化疗或者使用肾上腺皮质激素等免疫抑制剂资料的患者。,T细胞增多,见于慢性活动性肝炎、重症肌无力等自身免疫病活动期,CD4淋巴细胞减少：,见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、应用免疫抑制剂患者。,CD4淋巴细胞增加：,可能有过强的细胞免疫反应；或某些免疫增强药物的有效结果。,CD8淋巴细胞增多：,见于自身免疫性疾病，如SLE、艾滋病初期、慢性活动性,肝炎,、肿瘤及病毒感染等。,CD8淋巴细胞减少：,见于机体对各种病毒感染的免疫反应；肿瘤患者具有抗肿瘤免疫反应时 。,CD8细胞与CD4细胞同时减少：,见于各种严重的免疫缺陷以及肿瘤患者晚期或免疫系统严重损伤后。,CD4/CD8比值异常,表明细胞免疫功能处于“过度活跃”状态，容易出现自体免疫反应，见于,类风湿,性,关节炎,、I型糖尿病等。,CD4CD810,称为“免疫抑制”状态，常见于,（1）,免疫缺陷病，如艾滋病时的比值常显著小于0.5；,（2）,恶性肿瘤，当发生癌转移时,CD3 、CD4 细胞数明显减少的同时CD8 细胞数明显增多,CD4/ CD8 比值明显降低,提示恶性肿瘤患者晚期细胞免疫功能更低,预后更差 ；,（3）,再生障碍性贫血、白血病；,（4）,某些病毒感染；CD4/CD8降到1.0以下为“倒置”,是较为明显的异常；,（5）,用于器官移植后监测机体的免疫状态、用药剂量的调整、抑制排斥反应的发生。若移植后CD4/CD8较移植前明显增加，则可能发生排斥反应。比值持续减低表明移植后感染，若比值0.2时应停用免疫抑制剂，以免继发严重感染而导致移植失败。,注意分清主要是CD8细胞增多还是CD4减少,B细胞的异常,B细胞明显增加：,见于淋巴组织增生失调（例如慢性淋巴细胞白血病），也见于病毒感染早期。,B细胞缺如：,见于原发性B细胞缺陷病（如性联无丙种球蛋白血症）和重症联合免疫缺陷（T细胞同时缺如）；体液免疫功能不良者则减少；在生命垂危时可呈现极度减少,NK细胞异常,NK细胞增多：见于病毒感染，肿瘤早期患者（尚有抗肿瘤免疫反应时）,NK细胞减少：免疫功能低下，免疫抑制药物使用后，肿瘤晚期,活化淋巴细胞的检测（CD69/HLA-DR/CD71）,活化淋巴细胞的标志有CD25 （IL-2R），CD69，CD71，CD38，CD95，HLA-DR。它们在 T 细胞活化的不同时期表达。,活化标志一般选择,CD69、CD25、HLA-DR等,结合淋巴细胞亚群绝对值，可评估免疫功能失调,临床上将活化的,CD3细胞数目过低，即视作机体免疫功能极度缺失、提示有可能继发全身感染，应当立即调整治疗方案,T,HANKS,！,