消化道细菌感染

单击以编辑母版标题样式,单击以编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,肠道感染细菌,以消化道黏膜作为侵入门户,粪-口途径传播,1,弧菌属,螺杆菌属,弯曲菌属,肠杆菌科,埃希菌属,沙门菌属,志贺菌属,耶尔森菌属,2,肠杆菌科,分布：是一大群寄居在人类和动物肠道中，可随人和动物排泄物广泛分布于土壤、水和腐物中。,种类：肠杆菌科、种类众多，,30个菌属,、120多个菌种。,与人类关系：,正常菌群,机会致病菌,致病菌,3,肠杆菌科中与医学有关的常见菌族和菌属,埃希菌族,埃希菌属,大肠杆菌,志贺菌属,痢疾志贺菌,爱德华菌族 爱德华菌属 迟钝爱德华菌,沙门菌族,沙门菌属,伤寒沙门菌,枸橼酸菌属 佛劳第枸橼酸菌,克雷伯菌族 克雷伯菌属 肺炎克氏菌,肠杆菌属 产气肠杆菌,哈夫尼亚菌属 蜂窝哈夫尼亚菌,沙雷菌属 粘质沙雷菌,变形杆菌族 变形杆菌属 普通变形杆菌,摩根菌属 摩氏摩根菌属,普罗威登斯菌属 雷氏普罗威登斯菌,耶尔森菌族,耶尔森菌属,鼠疫耶尔菌,欧文菌族 欧文菌属 草原居民欧文菌,菌族 菌属（菌种数） 代表种,4,共同特性,一、形态与结构:,G,-,杆菌、中等大小、无芽胞，,形态相似,大多有菌毛（粘附于肠道粘膜上皮细胞表面）,多数有鞭毛（志贺菌无鞭毛）,二、培养特性:,兼性厌氧菌或需氧菌;营养要求不高。,三、,生化反应,:,分解多种糖类和蛋白质，产生各不相同的代谢产物。可用各种,生化反应检测其产物，以鉴别,不同的细菌。,5,Gram stain of E.,coli,Gram stain of,Saimonella sp.,6,乳糖分解试验,可初步鉴别肠道致病菌（志贺菌、沙门菌）：-非致病菌（大肠杆菌）：+,其它重要的试验,分离肠杆菌科的,选择鉴别培养基,：EMB-伊红美兰平板、MAC-麦康凯平板、,SS琼脂平板,定科试验：革兰氏染色阴性、触酶阳性、氧化酶阴性、硝酸盐还原试验阳性。,定属和定种试验：KIA、MIU、IMViC等，再结合血清学试验。,生化反应,7,EMB平板,：弱选择性培养基，有利肠杆菌科生长，肠道致病菌无色菌落、非致病菌紫黑色等有色菌落。,MAC平板,：中选择性培养基，有利肠杆菌科生长，肠道致病菌无色菌落、非致病菌红色菌落。,SS琼脂平板,：强选择性培养基，有利志贺菌属、沙门菌属生长，致病菌无色菌落、非致病菌红色菌落。,选择鉴别培养基,8,KIA,：底层黄色，发酵葡萄糖； 斜面黄色，发酵乳糖；黄色-产酸-A；红色-产碱-K；黑色-H,2,S。,MIU：接种线模糊，有鞭毛；加吲哚试剂，变红色，反应阳性。培养基变红色，产生尿素酶；,IMViC：吲哚试验、甲基红试验、VP试验、枸橼酸盐利用试验的合称。,常用生化反应,9,四、,抗原构造,复杂,O抗原,细胞壁结构的脂多糖。,耐热，100 不被破坏。,是肠道杆菌血清学分型和分群的主要抗原、如大肠杆菌O157，霍乱弧菌O139。,IgM型抗体，凝集反应,10,荚膜抗原，多糖抗原,包绕O抗原外，如K抗原、Vi抗原等,不耐热，60 30分钟即被破坏,可阻断O抗原与相应抗体的结合,H抗原：即细菌的鞭毛蛋白,不耐热，60 30分钟即被破坏；,其特异性取决于多肽链氨基酸的组成、排列顺序和空间构型。,IgG型抗体,11,肠道杆菌抗原构造示意图,鞭毛抗原（H）,菌体抗原（O）,荚膜抗原：K或Vi抗原,12,五、抵抗力,不强,六、易变异,溶源性转换,生化反应性变异,耐药性变异,毒力性变异,转导,接合,转化,抗原性变异,13,检验方法,标本采集,肠外标本：依据感染部位而定。,肠道标本多采自新鲜粪便，最好带脓血或粘液。,分离培养,肠外标本：无菌标本用血平板分离培养、有菌标本用MAC、EMB分离培养。,肠道标本用强选择性SS平板分离培养。,细菌鉴定：,革兰氏染色阴性、触酶阳性、氧化酶阴性、硝酸盐还原试验阳性。,KIA、MIU、IMViC等,血清学试验等。,14,第一节 埃希菌属 (Escherichia),大肠埃希菌（E.coli)是典型代表。,分布：婴儿出生后数小时即进入肠道，并终生伴随，是人体肠道正常菌群的重要构成菌。,A：抑制致病菌的生长B：合成 ViB、ViK等，供人体吸收利用。C：天然抗原，驱动免疫应答。,致病：肠道外感染，正常菌群 肠道内感染，致病菌株,其它应用：,环境卫生、食品卫生的检测指标：饮水 3个大肠菌群数/升，瓶装汽水 5个大肠菌群数 /100ml。,分子生物学、基因工程：实验材料和研究对象。,15,G,小杆菌，有鞭毛、菌毛、多数菌株有多糖微荚膜。,发酵多种糖类，产酸并产气，大部分菌株迅速发酵乳糖，,致病性大肠杆菌不发酵或缓慢发酵乳糖,三种抗原，血清型表示式O：K：H，如 O,111,：K,58,：H,2,生物学性状,16,大肠埃希菌(乳糖发酵试验和吲哚试验),17,致病物质,粘附素：,定居因子,菌毛,外毒素：,志贺样毒素,（SLT）：血性腹泻,耐热肠毒素（ST）：肠腔积液,不耐热肠毒素（LT）：霍乱样腹泻,溶血素A,III型分泌系统： 分子注射器，细菌接触宿主细胞后，向宿主细胞输送毒性基因产物,内毒素、荚膜、载铁蛋白,18,二、致病性,肠道外感染，机会性感染以化脓感染最为常见：泌尿系统感染、伤口感染、腹膜炎、阑尾炎、胆囊炎。在婴儿、老年人：败血症、脑膜炎。,肠道内感染，腹泻,肠产毒性大肠杆菌（,enterotoxigenic E. coli，ETEC,),肠侵袭性大肠杆菌（,enteroinvasive E. coli，EIEC,),肠致病性大肠杆菌（,enteropathogenic E. coli，EPEC,),肠出血性大肠杆菌（,enterohemorrhagic E. coli，EHEC,),肠集聚性大肠杆菌（,enteroaggregative E. coli, EAEC/EaggEC,),19,致病性大肠埃希菌,菌株,作用,部位,疾病与症状,致病机制,ETEC,小肠,旅行者腹泻,，婴幼儿腹泻，,水样便，恶心，呕吐，腹,痛，低热,LT,和（或）,ST,肠毒素，大,量分泌液体和电解质,EIEC,大肠,水样便，少量血便,，腹痛，,发热,质粒介导侵袭和破坏结肠粘,膜上皮细胞,EPEC,小肠,婴儿腹泻,，水样便，恶心，,呕吐，发热,粘附和破坏上皮细胞,EHEC,大肠,水样便，大量出血，剧烈,腹痛，低热或无，可并发,HUS,、血小板减少性紫癜,SLT,-,I,或,SLT,-,II,，中断蛋白质,合成,EAEC,小肠,婴儿,持续性,腹泻,，呕吐，,脱水，低热,集聚性粘附上皮细胞，阻止,液体吸收,20,1. 肠产毒性大肠杆菌 （ETEC),ETEC,粘,定居因子（colonization factor）,附 又称粘附素（adhesin）,是细菌的特殊菌毛,CFA/CFA,（ colonization factor antigen，）,小肠粘膜,以免被肠蠕动、肠分泌液所清除,释 放,肠毒素,由细菌的质粒DNA编码,不耐热肠毒素（heat labile enterotoxin，LT）,6530分钟失去活性,耐热肠毒素（heat stable enterotoxin，ST）,100加热20分钟仍不被破坏,21,不耐热肠毒素（LT）,B亚单位,受体,：,肠粘膜上皮细胞膜,表面的GM,1,神经节苷脂,A亚单位（毒性活性部分）,穿越细胞膜 活化,腺苷环化酶,ATP cAMP,水、电解质紊乱,腹泻,22,临床症状：轻度腹泻/严重的霍乱样症状，是婴幼儿和旅游者腹泻的重要病原菌,耐热肠毒素（ST）,鸟苷环化酶,GTP cGMP,水、电解质紊乱,腹泻,23,2.肠侵袭性大肠杆菌（EIEC),无外毒素，但有强的侵袭力（类似痢疾杆菌,）,定位于结肠,侵入肠粘膜上皮细胞，生长繁殖，产生内毒素。,破坏细胞形成炎症和溃疡,引起腹泻，呈脓血便，里急后重,临床症状酷似志贺菌感染，主要侵犯较大儿童及成人。,24,3.肠致病性大肠杆菌（EPEC),是婴儿腹泻的主要病原菌,；,不产生肠毒素；,也无侵袭力；,但能粘附小肠粘膜上皮细胞,在小肠黏膜表面大量繁殖，破坏微绒毛,导致刷状缘破坏，绒毛萎缩，上皮细胞结构、功能受损，干扰细胞的再吸收,造成严重腹泻，严重者可致死,25,肠出血性大肠杆菌（EHEC）,主要血清型：O157：H7,主要毒力因子：,菌毛, 质粒编码,介导细菌与肠粘膜细胞结合。,志贺样毒素（Shiga-like toxin，SLT）：血性腹泻,主要临床症状：,出血性结肠炎、溶血性尿毒综合征（hemolytic uremic syndrome，HUS),伴以剧烈腹痛、血便。轻重不一。10%小于十岁患儿有严重并发症，死亡率3%-5%,26,E. coli,O157:H7 induced hemorrhagic colitis,in a three-year-old girl,27,5.肠集聚性大肠埃希菌EAEC/EaggEC,质粒编码粘附素(Bfp、AAF/,、AAF/,) 使细菌吸附在肠粘膜细胞表面。,细菌在肠粘膜细胞表面自动聚集，形成砖状排列。,刺激粘液大量分泌。,婴儿持续性腹泻,。,28,三、微生物学检查法,1、临床细菌学检查,标本,肠外感染：尿液；脓液；血液,肠道感染：粪便,分离培养 计数培养,纯培养,形态学检查 生化反应 毒素检测 血清,报告结果,29,埃希菌属鉴定,肠杆菌科：革兰氏染色阴性、触酶阳性、氧化酶阴性、硝酸盐还原试验阳性。,定属和定种试验：,KIA（K/AH,2,S-或A/AH,2,S-）,IMViC（+-）,MIU(-+-或+-）,多价血清和单价血清的凝集试验，确定血清型。,致病性大肠杆菌：基因、血清型、毒力试验,30,卫生学指标,大肠菌群指数每1L水中大肠菌群数（大肠菌群：埃希菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属等,我国卫生标准： 3个大肠菌群/L饮水 5个大肠菌群/100,ml瓶装汽水、果汁,2010. 王家岭煤矿3.28透水事故中，4.10检测水样已发生一定变化，相关区域已发现大肠杆菌，意味着存在遗体，并变质腐烂。,31,第二节 志贺菌属 shigella,人类细菌性痢疾最为常见的病原菌，也称痢疾杆菌dysentery bacteria,无鞭毛,，有菌毛,能分解葡萄糖，产酸不产气，不分解乳糖（除,宋内志贺菌,）,抵抗力低于其他肠道杆菌，对酸敏感，,常多重耐药,32,抗原构造及分类,志贺菌O抗原分类、4群44个血清型,菌种 群 型 亚型,痢疾志贺菌 A 1-10 8a，8b，8c,福氏志贺菌 B 1-6， 1a，1b，2a，2b,X，Y变种,3a，3b，4a，4b,鲍氏志贺菌 C 1-18,宋内志贺菌 D 1,K抗原与分类无关。,中国福氏志贺菌、宋内志贺菌多见,。,33,致病性,传染源:患者和带菌者,传播途径：粪口传播,感染灶局限于结肠粘膜层，一般不入血,病后免疫期短，免疫力不巩固,34,志贺菌属,35,致病物质,侵袭力：,粘附至肠粘膜M细胞，炎症反应，破坏肠壁完整性，加速细菌扩散,毒素,内毒素：强烈,局部：破坏肠粘膜炎症、溃疡、,脓血粘液便,肠粘膜通透性升高毒素吸收发热、神志障碍、休克肠壁植物神经肠蠕动失调、痉挛腹痛、,里急后重,内毒素血症,外毒素（A群、型） 志贺毒素 ST(VT)，与内毒素协同作用，加重局部和全身症状,36,致病过程,：志贺菌痢疾,粪口传播,（传染源：病人/ 带菌者）,潜伏期 10,3,个细菌即使人感染,1-3天 突破人体防御能力,胃酸 正常菌群拮抗作用,局部免疫作用（SIgA）,大肠部位,侵入 侵袭力,（菌毛）,粘膜上皮细胞,（生长繁殖，形成感染灶）,37,所致疾病,急性细菌性痢疾,急性典型：发热、腹痛、水样腹泻、1天左右后,脓血粘液便、里急后重,急性非典型：易误诊，导致带菌和慢性,急性中毒性痢疾：小儿，毒素进入血流，脱水、酸中毒、微循环衰竭、中毒性脑炎、DIC,慢性细菌性痢疾：病程迁移两个月以上,38,微生物学检查,采集标本：,服药前采集,粪便脓血、粘液部分,及时送检/暂用30%甘油缓冲盐水保存,培养后生化、血清学鉴定,快速诊断,免疫学,分子生物学,毒力试验,豚鼠角膜结膜炎,产毒基因,39,志贺菌属鉴定,肠杆菌科：革兰氏染色阴性、触酶阳性、,氧化酶阴性、硝酸盐还原试验阳性。,定属和定种试验：,KIA（K/AH,2,S-）,IMViC（-+-或+-）,MIU(-+-或-）,多价血清和单价血清的凝集试验，确定血清型。,40,预防：,控制传染源，切断传播途径,链霉素依赖株活疫苗（Sd）,治疗：,易引起耐药性，联合用药,41,其中许多为人畜共患病,第三节 沙门菌属（Salmonella）,一大群人与动物肠道中的寄生菌,菌群菌型甚多，仅少数对人致病,42,生物学性状,生化反应：不发酵乳糖,发酵葡萄糖产酸产气,（伤寒沙门菌外）,43,沙门菌属,44,伤寒杆菌的抗原构造,O-Ag：,LPS成分、耐热；共同抗原；,0.1%石碳酸不破坏；TI-Ag、产生IgM。,H-Ag：,蛋白质、不耐热；特异抗原；,0.1%石碳酸破坏；TD-Ag、产生IgG。,Vi-Ag,：,多糖成分，性质不稳定；位于菌体表面；,抵抗吞噬，毒力抗原（Virulence）；,阻止O-Ag与相应Ab的体内外结合；,检测抗Vi-Ag的抗体，筛选带菌者。,45,伤寒、希氏沙门菌的表面抗原,与毒力有关,Vi抗原,抗原性弱，刺激机体产生短暂低效价抗体,伴随活菌一起存在,测定Vi抗体有助于检出带菌者,因为,所以,本质,46,致病物质,：,致病性与免疫性,侵袭力,：侵袭素、 Vi抗原、III型分泌系统,毒 素,：,内毒素,外毒素，肠毒素（鼠伤寒沙门菌）,所致疾病：,伤寒副伤寒-肠热症：20万人/年死亡,败血症,胃肠炎（食物中毒）,无症状带菌者,47,疾病进程,：肠热症:,enteric fever,typhoid fever,潜伏期,伤寒杆菌（随食物）,未被胃酸杀灭,小肠上部,（以菌毛吸附在粘膜表面）,经M细胞,肠壁固有层淋巴组织，由M吞噬,抵抗杀伤，继续生长繁殖,淋巴液、肠系膜淋巴组织,血液,（,第一次菌血症,）,48,初期,（病程第1W）,第一期菌血症,血液,骨髓、肝、脾、胆、肾等脏器,被吞噬细胞吞噬，在其中大量繁殖, 血液、骨髓培养阳性率高,乏力、头痛、全身酸痛等前期症状,血液,再次,释放,第二次菌血症,极期,（病程第2、3W）,肝,肾,各脏器,胆囊胆汁,肠道,尿液,49,肠道,尿液,血液,第二期菌血症,刺激已致敏的肠壁淋巴,组织，发生导致变态反应，坏死、溃疡，肠穿孔,释放大量内毒素加重全身中毒症状, 血液、粪便、尿液，细菌培养可呈阳性, 血清中： IgG IgM,粪便排出细菌,尿液排出细菌,血液有细菌,持续高热、肝脾肿大、全身中毒症状显著,50,恢复期（第3W以后）,特异性抗体升高，作用于细胞外细菌,特异性细胞免疫加强，T,D,细胞释放淋巴因子，激活M，使活性增强，有效杀灭M内的伤寒杆菌。,抗伤寒杆菌O-Ag的抗体（IgM）：,抗伤寒杆菌H-Ag的抗体（IgG）：,带菌者 恢复期带菌者：恢复后3周至3月,长期带菌者：3月,伤寒的痊愈指标：胆囊、胆汁细菌培养阴性。,未经治疗死亡率为20%,51,胆囊-肠道-粪排菌,皮肤-血栓出血-玫瑰疹,肾-尿,肝脾-肿大,骨髓,伤寒和副伤寒的致病过程,伤寒沙门和甲型副伤寒杆菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌,小肠上部粘膜,肠系膜淋巴结,固有层淋巴结,进入血液,再次进入血液,第一次菌血症,第二次菌血症,52,3、免疫性,细胞免疫,免疫力牢固,53,微生物学检查,病原菌：金标准，耗时长、难度相对较大,抗体：血清学,54,微生物学检查法：伤寒杆菌,因病程不同采取不同标本,标本,静脉血（第1周）,骨髓（1-3周）,粪便（第2周起）尿液（第3周起）,增菌,离心沉淀,（分离培养）,SS平板,挑取可疑菌落,鉴定 ： KIA；MIU；血清学试验,55,微生物学检查,发病后周数,1,2,3,4,5,6,7,8,56,因病程不同采取不同标本,血液细菌培养阳性率,血液Ab,粪便细菌培养阳性率,尿液细菌培养阳性,发 病 时 间,57,血清学诊断,辅助诊断伤寒，副伤寒,原理：,定量凝集反应,已知伤寒杆菌O-Ag,伤 寒 杆 菌H-Ag,+ 病人血清,甲型副伤寒杆菌H-Ag,乙型副伤寒杆菌H-Ag,相应Ab的有无、含量。,58,结果判定,：,诊断价值:O凝集价=180；H凝集价=1160,诊断意义,H、O凝集价均高，伤寒可能性大,H、O凝集价均低，伤寒可能性小,若H高，O不高，可能为预防接种或非特异性回忆反应,若O高，H不高，感染早期，或交叉反应,若2次检测凝集效价递增 4倍或以上，有诊断意义,少数病例，肥达试验始终阴性：早期使用抗生素或免疫功能低下,59,带菌者检查：,筛选：Vi-Ab的效价 110,确定：反复粪便培养。,60,Typhoid Marry -维基百科,伤寒玛丽本名玛丽马伦（Mary Mallon，18691938），爱尔兰人，1883年独自移民至美国，是美国第一位被发现的伤寒健康带原者，她身为厨师的时间内总计（直接）造成47人感染、3人死亡，但她坚决否认这项事实，并且一再拒绝停止担任厨师一职，因此在当时二度由公共卫生主管机关进行隔离，并且最后于隔离期间去世。,61,伤寒玛丽-维基百科,1909年伤寒玛丽在报纸上的插图,疫情发展,调查过程,隔离,逝世,后世评论,参考文献,延伸阅读,62,伤寒玛丽-维基百科,疫情发展,调查过程,隔离,逝世,后世评论,参考文献,延伸阅读,疫情发展,调查过程,临床症状及处理,实验室研究（致病机制、实验室诊断）,借鉴,参考文献,63,防治原则,水源、食品的卫生管理,带菌者,新一代疫苗：伤寒Vi荚膜多糖疫苗,64,其他沙门菌的致病性,伤寒：由伤寒杆菌引起。,副伤寒：由副伤寒杆菌引起，临床症状与伤寒相似，但较轻。,败血症,肠炎型（食物中毒）：,最常见的沙门菌感染：鼠伤寒沙门、猪霍乱沙门、肠炎沙门菌,潜伏期6-24小时；,主要症状：发热、恶心、呕吐、腹痛、腹泻,常为集体性食物中毒。,65,一、生物学性状,志 贺 菌,有菌毛,不分解乳糖,无鞭毛（动力-）,分解葡萄糖,产酸不产气,不产生H,2,S,沙 门 菌,有菌毛,不分解乳糖,周身鞭毛（动力+）,分解葡萄糖,产酸产气（伤寒杆菌不产气）,大多产生H,2,S,66,二、致病性,志 贺 菌 沙 门 菌,致病部位：,大肠 不侵入血流,致病物质：,侵袭力：,菌毛 粘附上皮细胞,侵袭 侵入结肠粘膜上皮细胞，繁殖、扩散，形成感染病灶,内毒素,外毒素：ST,致病部位：,小肠 侵入血流，引起 菌血症,致病物质：,侵袭力,菌毛,鞭毛 穿越小肠粘膜达皮下组织,Vi抗原,抵抗吞噬细胞的杀伤,内毒素,肠毒素,67,细菌性痢疾,肠道症状：有,不侵入血流,全身中毒症状：,中毒性痢疾,脓血粘液便，粪便是唯一的标本,以局部体液免疫， - SIgA为主,所致疾病临床症状的差异,伤寒,肠道症状：有,侵入血流引起菌血症,全身中毒症状：有,影响肝、肾、脾、胆等器官。,除粪便外，血液、骨髓、尿液、胆汁均可分离到细菌。,以细胞免疫为主，病后获牢固免疫力,68,第四节 弧菌属,69,1.概念：是一群菌体短小，弯曲成弧形的 革兰氏阴性菌。,2.形态：菌体弯曲，属于螺形菌，但人工培养后呈现杆状，类似肠道杆菌。,3.与肠杆菌科细菌的,区别,：,氧化酶试验 +,一端单一鞭毛，运动活泼、呈穿梭状,嗜碱生长,70,电镜图,71,弧菌属(Vibrio),4.分布：广泛存在于自然界中，其中以水体环境最为多见。,5.致病：重要的致病性弧菌为霍乱弧菌和副溶血性弧菌。,72,第一节 霍乱弧菌,霍乱弧菌(V.cholerae)是引起霍乱的病原体，霍乱是一种起源于东南亚的烈性传染病，自从1817年以来，发生过数次世界性的霍乱大流行。,73,霍乱流行,1817年首次从东南亚开始，随后蔓延到世界其它地区。,1829年1851年，在1832年年蔓延至欧洲、伦敦，同年又蔓延至安大略、加拿大和纽约，在1834年又发展到北美的太平洋海岸。,1852年1860年，主要影响了俄罗斯，造成了超过百万人的死亡。并且造成柴可夫斯基和他母亲的死亡。,1863年1875年 传播到了大部分欧洲及非洲区域。,1866年在北美爆发。,1892年，霍乱污染德国汉堡自来水，以致8606人死亡。,第七次爆发被称作,El Tor,，发生于 1961年发生在印尼，1963年传染到孟加拉，1964年传染到印度，并于1966年传播到苏联。,香港曾经在七十年代爆发霍乱。,1994年卢旺达危机后，霍乱暴发在一个月内至少在刚果戈马的难民营造成48 000病例和23 800人死亡,津巴布韦于2008年8月份起爆发霍乱，并在全国蔓延。,74,在1883年霍乱流行中，德国细菌学家,Robert Koch,从霍乱病人排泄物及病死者肠道组织中首先发现了霍乱弧菌，霍乱传染性强，病死率高，属于国际检疫的传染病(海关检查)，在我国霍乱排行甲类传染病第二位，俗称二号病。,75,一、生物学性状,形态和染色,1.大小：0.50.81.53,m。,2.形态：弯曲成弧形或逗点状。,3.结构：有菌毛，特别是菌体一端有单鞭毛，使细菌运动活泼(病人粪便作悬滴标本,可见,鱼群样穿梭,)，部分菌株(例如O139群)有荚膜。,4.染色：革兰氏阴性菌。,76,霍乱弧菌革兰氏染色,77,一、生物学性状,培养特性与生化反应,1.需氧菌,营养要求不高,适应性强,对温度、营养物质、气体环境没有很严格的要求。,2.,耐碱不耐酸,碱性蛋白胨水,运送标本/增菌,碱性琼脂平板,透明/半透明、无色扁平菌落,3.,生化反应,：,氧化酶试验阳性，分解多种糖类，发酵的糖产酸可杀死该菌。,78,抗原结构与分型,1.抗原组成：,O抗原为特异性抗原,H抗原是弧菌的共同抗原。,2.分型：根据O抗原不同，把霍乱弧菌分为155个血清群，O1群霍乱弧菌又分为3个血清型和2个生物型。,79,O1群霍乱弧菌,血清型 O1多克隆抗体 O1单克隆抗体 流行,(抗原成分) A B C,小川型（AB） - 是,稻叶型（AC） - 是,彦岛型（ABC） 未知,“”凝集，“-”不凝集,每个血清型可分为古典生物型和EI-Tor生物型,80,血清群及其流行,O-1群古典生物型,，前六次大流行的流行菌株,O-1群ElTor生物型,，第七次大流行的流行菌株（,1905年在埃及西奈半岛的ElTor 检疫站首次分离）,O139群,，1992年10月开始在印度半岛引起霍乱样病流行，流行菌株不能被O-1群抗血清凝集，命名霍乱弧菌O139群,81,抵抗力,1.对理化因素抵抗力弱：以1份漂白粉和4份水比例处理患者排泄物或呕吐物1小时，可杀死霍乱弧菌。,2.水环境：存活2周左右，与疾病传播有关。自来水加0.5ppm氯, 15分钟能杀死霍乱弧菌。,3.抗生素敏感性：对氯霉素、强力霉素等敏感，注意耐药性。,82,二、致病性,致病物质,霍乱肠毒素、鞭毛、菌毛。,83,霍乱肠毒素,1.性质：外毒素，蛋白质，是,最为强烈的致泻毒素。,2.组成：1个A亚单位和5个B亚单位。B亚单位是结合成分，与小肠粘膜上皮细胞结合； A亚单位是毒性成分。,3.机制： A亚单位的A1成分激活腺苷酸环化酶，细胞内cAMP升高，小肠粘膜上皮细胞分泌亢进(电解质和水)，导致腹泻和呕吐。,84,霍乱肠毒素致病机制,85,霍乱肠毒素,B 亚单位,结合部分,受体,：小肠上皮细胞GM1神经节苷脂,A2亚单位,与B亚单位结合,A1亚单位,毒性部分,活化的A1,胞内,腺苷环化酶活化,ATP cAMP,分泌：Na,+,、K,+,、H,2,O,导致：严重腹泻、呕吐、脱水。,86,菌毛：粘附肠上皮细胞刷状缘的微绒毛；,鞭毛：活泼的鞭毛运动，使细菌穿过粘膜表面,并在此生长繁殖。,87,霍乱弧菌依靠活泼的鞭毛运动, 穿过肠粘膜表面的粘液层, 通过菌毛粘附于肠上皮细胞上, 迅速繁殖并分泌霍乱肠毒素。,88,二、致病性,1.传染源,：霍乱病人、无症状感染者、带菌者。,2.传播途径,：肠道传染病，污染的水或食物经口摄入。,3.致病过程,：稀释胃酸，霍乱弧菌鞭毛、菌毛、霍乱肠毒素。,4.症状,：剧烈吐泻，吐泻物呈“,米泔水,”样。导致水和电解质丢失，循环衰竭及肾功能衰竭。,89,所致疾病,人类是霍乱弧菌的唯一易感者,污染水源、食品,正常胃酸：10,8,10,10,胃,引起感染,胃酸低下：10,3,10,5,小肠,粘附 迅速繁殖,定居,1、霍乱弧菌不侵入上皮细,胞及血液。,肠毒素,2、肠毒素进入肠上皮细胞,发挥作用，但不进入血液。,3、局部一般无炎症细胞,上吐下泻、严重脱水、血容量减少,90,微循环衰竭、酸中毒,肾功能衰竭、休克,死 亡,未经治疗,： 死亡率可达50%75%,及时治疗,：补充液体、电解质，死亡率仅为1%,91,三、免疫性,患病后具有较牢固的免疫力，很少再次感染。,IgG型抗肠毒素抗体：,中和抗体，阻断B亚单位与受体的结合,IgM型抗菌体抗体：,激活补体,SIgA抗体：,与菌毛等粘附因子结合，阻碍细菌粘附于肠粘膜上皮细胞凝聚细菌，使其失去动力，阻止其侵袭力和产生毒素,92,四、微生物学检查法,快速、准确、及时报告疫情！,流行病学调查,直接镜检：,悬滴法,分离培养：,标本,碱性蛋白胨水,运送、保存、增菌,TCBS琼脂平板分离培养,黄色菌落,生化反应 血清学试验,鉴定与分型,快速诊断 荧光球试验；PCR法,93,五、防治原则,1.一般预防：控制传染源(很难消灭传染源)，切断传染途径。,2.免疫预防：应用菌苗类毒素,减毒重组活菌苗,减毒株（CVD103）,菌苗加类毒素混合苗,纯化B亚单位 +灭活细菌,3.治疗措施,：,及时补充水份、电解质(对症处理)是抢救霍乱病人的关键！,敏感抗生素治疗(注意耐药性),及时隔离病人,。,94,第二节 副溶血性弧菌,副溶血性弧菌(V.parahemolyticus)的生物学性状类似霍乱弧菌，但与霍乱弧菌比较，它的一个显著特点是,嗜盐性,，在NaCl浓度较高(3%-4%左右)的环境中才能生长繁殖 ，食入烹饪不当的海产品或腌制品(污染副溶血性弧菌)，可导致,食物中毒,(急性胃肠炎)。,95,致病性:,是我国沿海地区最常见的一种食物中毒,海产品等食物中毒,潜伏期：126小时,症状：腹痛、腹泻、呕吐、发热, 粪便呈水样，伴有血水、粘血。,生物学性状与霍乱弧菌相似,嗜盐性,3.5%NaCl最为适合嗜盐菌,不耐酸,96,要点,霍乱弧菌,形态、培养特性,流行血清群,致病物质及疾病特点、治疗原则,微生物学检查方法,副溶血性弧菌特点及所致疾病,97,螺杆菌属（,Helicobacter,),幽门螺杆菌,（,H.pylori,）,98,99,幽门螺杆菌的发现,年月，澳大利亚珀斯皇家医院岁的研究人员沃伦在一份胃黏膜活体标本中，意外地发现一条奇怪的蓝线，他用高倍显微镜观察，发现是无数细菌紧粘着胃上皮。,100,幽门螺杆菌的发现,这种细菌总是出现在慢性胃炎标本中，沃伦意识到，这种细菌和慢性胃炎等疾病可能有密切关系。,然而，这项发现并不符合当时“正统”的医学理念。当时的医学界认为，健康的胃是无菌的，因为胃酸会将人吞入的细菌迅速杀灭。,101,1981年珀斯皇家医院的消化科医生巴里马歇尔投入到沃伦的研究中。,为了获得这种细菌致病的证据，马歇尔和一位名叫莫里斯的医生，甚至自愿进行人体试验。他们在服食培养的细菌后，都发生了胃炎。,102,英国权威医学期刊lancet报道其成果后，全世界掀起了一股研究热潮。沃伦和马歇尔发现的这种细菌被定名为幽门螺杆菌。世界各大药厂陆续投巨资开发相关药物，专业刊物螺杆菌杂志应运而生，世界性螺杆菌大会定期召开，有关螺杆菌的研究论文不计其数。,103,诺贝尔奖评审委员会评价说，马歇尔和沃伦先驱性的发现，使胃溃疡从原先人们眼中的慢性病，变成了一种“采用短疗程的抗生素就可治愈的疾病” 。,104,105,106,生物学性状,为“S”形、“U”形或弧形杆菌，稍粗，两端钝圆,抗生素治疗时可由螺杆状变为圆球形,革兰染色阴性,在胃粘膜黏液中常呈鱼贯状排列,在病理组织切片中可见，Hp多数存在胃粘膜上皮细胞表面，特别是在胃小凹,107,培养,微需氧,营养要求高,生长缓慢,主要生化依据：,尿素酶,、过氧化氢酶、氧化酶阳性,108,如何突破屏障,定居于胃黏膜?,尿素酶,：分解尿素释放氨，中和胃酸,运动活泼，鞭毛运动穿入胃粘液层，胃小凹、及腺腔内,空泡毒素A (vacuolating cytotoxin A,VacA),：使胃粘膜上皮细胞产生空泡，引起溃疡,细胞毒素相关蛋白A,多种胞外酶或蛋白,109,幽门螺杆菌与疾病,胃炎,消化性溃疡,胃癌,胃粘膜相关淋巴样组织（MALT）淋巴瘤,110,诊断与防治,诊断：直接涂片镜检,检测尿素酶活性,血清学诊断,分子生物学技术,治疗：三联疗法,111,弯曲菌属,(,Campylobacter,),空肠弯曲菌(,C.jejuni,）,112,生物学特性,革兰阴性,形态细长，呈弧形、螺旋形、S形或海鸥状,双鞭毛，运动活泼,微需氧，营养要求高,抵抗力较弱,113,致病性,产生细胞毒素和一种不耐热肠毒素,散发性细菌性肠炎，,病程58d，自愈,孕妇感染可导致流产,114,诊断与防治,粪便标本悬滴法镜检,注意饮水和食品卫生,115,思考题,1.简述痢疾志贺菌的致病特点。,2.简述伤寒菌血症的产生过程及病情变化。,3.简述霍乱弧菌的致病过程。,116,