生物治疗及在临床肿瘤治疗中应用

单击此处编辑母版标题样式,编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2021/3/2,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2021/3/2,*,大家好,2021/3/2,1,结直肠癌,患者女,70,岁住院号：,127551,介入科,入院诊断：直肠癌，肝转移,第一次入院行直肠癌,Dixon,切除术，手术后三周第二次住院，对肝脏的病灶进行射频消融，射频消融后,2003.8.16-2004.12.16,进行,8,次,CIK,细胞免疫,治疗,出院情况：,80,分；,第三次入院：,2004.1.25-2004.3.26,行,4,次自体,NK,细胞治疗；,目前一般情况好，肝肾功能正常，小便正常, KPS 90,分。到目前为此，共做,30,次细胞免疫治疗。,2011,年,8,月,24,号复查未见复发。患者,每年到我们医院,接受,6,8,次细胞免疫治疗。,2021/3/2,2,乳腺癌（病例一）,病人，女，,69,岁，左乳腺癌术后患者。患者因左乳腺肿物,3,年于,2004-7-29,行左乳癌改良根治术，用环磷酰胺,+,阿霉素,+5-,氟脲嘧啶方案化疗,2,程，,2004-10-22,至,2004-12-17,行,NK,细胞回输,6,次,2005,年,4-9,月行,CIK,细胞回输,6,次每年接受,8,次体细胞免疫治疗。,2007-11-20 PET-CT,示未见复发。,2011-10-18 PET-CT,检查未见复发。目前，患者每年接受,6,8,次细胞免疫治疗。,2021/3/2,3,病人 女,50,岁,2009.3.17 PET-CT,提示左乳肿物,2009.3.20,左乳区段切除,+,左腋窝淋巴结清扫术,术后病理：大小为，浸润性导管癌，,级，,ER(-),，,PR(-),，,Her-2(-),术后分期：,T1N1M0,，,A,期,2009.4.10-09.8.7,行剂量密集型,“,ACT,”,化疗各,4,程,2009.8.31-09.10.14,左乳,+,左锁骨上放疗,2009.6-10.8,细胞免疫治疗共,24,次，其中,NK 8,次，,D-CIK 12,次，,CIK 4,次，疗程间无长时间间隔。,2011.8,至今 病情稳定，一般情况良好。,乳腺癌（病例二）,2021/3/2,4,病人 男,50,岁 盲肠癌 （,Duke,s D,肝转移）,200.12 CEA,升高，肠镜病理：腺癌,级，,PET-CT,：盲肠癌并肝转移瘤采用手术和化疗、生物治疗的综合治疗方案：术前新辅助化疗,3,次，术后辅助化疗,9,次，手术化疗期间均配合,C225,及细胞免疫治疗，之后进行以细胞免疫治疗为主的治疗。 具体过程：,08.1.7-08.2.4 XELOX,化疗,3,次,2008.2.22,右半肝切除术,+,肝内一个转移瘤切除术,+,区域淋巴结清扫术,2008.3.11,肝内另一个转移瘤射频消融治疗,2008.3.18 -08.7.8 CR+5Fu,化疗,1,次，,FOLFIRI,化疗,8,次,2008.1-09.1,细胞免疫治疗,22,次，其中,NK 6,次，,D-CIK 5,次，,CIK 10,次，,D-T 1,次,2009.1-,至今 病情暂稳定,2021/3/2,5,肺癌 （病例一）,患者男,70,岁住院号：,151182,综合科,入院诊断：左上肺腺癌,第一次住院行诱导化疗，后先后行,gamma,刀治疗及射频消融治疗，并于,2005.12.6-2007.6.21,共行,CIK,治疗：,26,次；,DC-CIK,治疗：,15,次。出院时一般情况好，肿瘤标志物无升高，脑无占位，肺部病灶及纵隔淋巴结均无活性,到现在无瘤生存已,36,个月，这个病人是综合治疗的范例。,2021/3/2,6,男，,76,岁，非小细胞肺癌术后,2009,年,7,月右侧胸腔出现胸水,2009,年,8,月开始链式,-CIK,细胞免疫治疗,8,月,3,日第一次抽血（病人,50-60 ml,）,8,月,10,日开始第一程链式,-CIK,回输,到,12,月,2,日，共抽血培养,9,次，回输,27,次,每次回输细胞数量,8.2310,7,4.810,8,2009,年,10,月,16,日,CT,证实胸水明显减少，病人一般情况良好，自觉较前改善。,肺癌 （病例二）,2021/3/2,7,女，,65,岁，非小细胞肺癌,2009,年,8,月开始链式,-CIK,细胞免疫治疗,8,月,3,日第一次抽血（病人,50-60ml,）,8,月,10,日开始第一程链式,-CIK,细胞免疫回输（静脉,/,皮下）,到,12,月,2,日，共抽血培养,8,次，回输,24,次,每次回输细胞数量,510,7,210,8,目前病灶稳定，似较前略有缩小，病人一般情况良好，自觉较前改善。,肺癌 （病例三）,2021/3/2,8,肿瘤细胞,恶性增殖,免疫逃逸,三、肿瘤的免疫基因治疗,Immuno-gene therapy,of cancer,从广义上讲，根据免疫学的理论技术而建立的基因治疗方案，均属免疫基因治疗（,Immune gene therapy,或,Immunogene therapy,） 。,2021/3/2,9,I,：,493,项,I/II: 160,项,II : 118,项,II/III: 7,项,III: 19,项,肿瘤的免疫基因治疗,抗 原,180,项,细胞因子,247,项,500,项,2021/3/2,10,美国,FDA,批准,Provenge (sipuleucel-T),，一种治疗晚期前列腺癌的患者免疫活性细胞，这标志进入新癌症治疗：自身免疫活性细胞治疗。（）,PROVENGE,由自身外周血单核细胞组成，包括在确定的培养期间用一种重组人蛋白，,PAP-GM-CSF,已被活化的抗原提呈细胞,(APCs),；前列腺酸性磷酸酶,(PAP),，在前列腺癌组织中高表达的一种抗原，连接至免疫细胞激活剂粒,-,巨噬细胞集落刺激因子,(GM-CSF,组成,),。刺激自体的,T,淋巴细胞。将这些经体外刺激的细胞回输给前列腺癌患者， 从而达到治疗前列腺癌患者的目的。,Sipuleucel-T,成为,FDA,历史上,第一个批准,上市,的肿瘤疫苗,。,2021/3/2,11,前列腺癌是一个比较理想的生物治疗模型,发病率高,病情进展,缓慢,肿瘤相关,抗原表达,化疗疗效,有限,“,非必需”,组织,前列腺癌细胞免疫治疗获得成功的原因,PSA,、,PAP,等,内分泌治疗无效的患者，此时肿瘤负荷较小，机体具有一定的抗肿瘤能力,Nat Rev Immunol. 2010, 10: 580-593.,2021/3/2,12,肿瘤侵润性,T,细胞受体免疫基因治疗,免疫基因治疗在的肿瘤临床中的应用,2021/3/2,13,Science. 2006 Oct 6;314(5796):126-9. Epub 2006 Aug 31,2021/3/2,14,经基因修饰的自体,DC,细胞激活的,T,淋巴细胞的制备,T,淋巴细胞,成熟,DC,细胞,DC,细胞刺激的自体,T,淋巴细胞（,DC-T,）,肿瘤抗原,PBMNC,（,80-100ml,）,共培养,TNF,IL-4,GM-CSF,IL-2,负载肿瘤抗原的,AAV,感染,2021/3/2,15,负载,CEA,抗原的,DC,刺激的,T,淋巴细胞的表型,2021/3/2,16,一些抗原与肿瘤的发生发展密切相关,Viral antigens:,Primary hepatic carcinoma:,Hepatitis B virus, Hepatitis C virus,Cervical cancer :,Human papillomavirus: E6, E7.,2. Self-antigens:,Lung cancer: k19, Her-2/neu, etc.,Primary hepatic carcinoma:,-FP.,Breast cancer: Her-2/neu, BA46, etc.,Prostate cancer: PSA, PSMA,2021/3/2,17,自体,DC-T,淋巴细胞在恶性肿瘤治疗中的策略,肿瘤患者外周血（,80-100ml,）,体外诱导,DC-T,淋巴细胞,回输,DC-T,淋巴,细胞给术后的,患者（一个月,2,次）,特异性杀伤肿瘤细胞,抑制肿瘤的复发和转移,2021/3/2,18,2021/3/2,19,2021/3/2,20,前列腺癌,患者，男，年龄：,68,岁,2007,年,4,月，常规体检时，发现,PSA,显著升高，,100ng/L,穿刺活检提示：前列腺癌，,Gleason,评分：,10,分。胸部,CT:,未见异常。,行内分泌治疗：诺雷德,Zoladex,（,goserelin,）,+,康士得,/Casodex,（,Bicalutamide,）。,PSA,迅速下降，,9,个月后降至,0.2,以下，继续维持,9,个月后，选择了间断治疗（停用这两种药物），,PSA,迅速上升，,6,个月后升至,16,，继续内分泌治疗，,PSA,迅速降至,0.16,，以后就逐步上升，倍增时间,1416,周。自,2010,年,9,月开始出现全身骨痛，以左髋部明显，胸腹部,CT,：椎体及髂骨广泛转移灶， 全身骨扫描：中轴骨广泛转移。左髋臼及多处肋骨转移。,2011.2-13: PSA: 1376 ng/ml,，,2011.3-28,开始进行生物治疗，回输两次,DC,T,，,2011.4.25 PSA: 737 ng/ml,，回输四次,DC,T,（负载,PSA,抗原的,DC,刺激的自体,T,淋巴细胞）,一星期后检测,PSA 561 ng/ml,。现在患者感觉精神改善，无明显副反应。生活能够完全自理，能够自由下床活动，左髋部不适改善，疼痛不明显，无需止痛药物。饮食可，精神可。,2021/3/2,21,DC,T,细胞免疫治疗,用负载前列腺癌细胞高表达抗原,PSA,和,PSMA,负载自体,DC,刺激的自体,T,淋巴细胞对前列腺癌患者治疗后，外周血中,PSA,水平明显下降,PSA: 1376 ng/ml,PSA 561 ng/ml,2021/3/2,22,根据不同肿瘤的生物学特性,(,肿瘤类型、分期和肿瘤的免疫源性,),、患者的遗传背景（是否具有家族倾向？）、目前的病情状况,(,体质，免疫状况,),、前期治疗方法、年龄等，在传统肿瘤治疗模式的基础上，制定出适合病人的个体化体细胞免疫治疗方案。,三、如何制定出适合病人的个体化体细胞免疫治疗方案。,2021/3/2,23,肿瘤体细胞免疫治疗与常规治疗有机结合的治疗策略,恶性肿瘤,手术治疗,放化疗敏感（常规放化疗）,疾病稳定期,专科治疗,不能手术（,期，,期）复发者,可手术,放化疗不敏感,细胞免疫治疗,化疗敏感 化疗后,细胞免疫治疗,联合专科治疗,（靶向治疗）,细胞免疫治疗联合内分泌或靶向治疗,细胞免疫治疗,（微创介入）,（卵巢癌，乳腺癌，小细胞肺癌等）,放化疗间隙联合细胞免疫治疗,（肾癌，前列腺癌，黑色素瘤等）,（乳腺癌，卵巢癌，神经母细胞瘤，小细胞肺癌等）,化疗不敏感,（原发性肝癌，肾癌，前列腺癌等）,疾病稳定期,2021/3/2,24,（一）针对老年肿瘤晚期患者，体质弱、免疫功能极度低下采取抽少量血多次回输的治疗方案,抽血,30ml,第,1,天,先抽血,30ml,进行下个疗程治疗；同时进行第,3,次,CIK,回输,第,1,次,CIK,回输,第,2,次,CIK,回输,第,4,天,第,8,天,第,12,天,第,14,天,第,16,天,开始下一个疗程的治疗,2021/3/2,25,(,二）细胞免疫治疗与化疗有机结合,化疗前,1,天抽血，免疫细胞分离培养,第一周,第二周,7,天,开始化疗,第,2,次开始化疗,回输,CIK,、,NK,、,D-CIK,等细胞,化疗前,1,天抽血，免疫细胞分离培养,2021/3/2,26,（三）体细胞免疫治疗联合放疗的增效方案,放疗前抽静脉血,50ml,，,上午,放疗,放疗,放疗,上午放疗后，下午回输免疫细胞,第,2,天,周二,第,3,天,周三,第,1,天,周一,第,4,天,周四,第,6,天,周六,第,7,天,周日,第,5,天，,周五下午回输培养的,CIK,、,NK,、,D-CIK,等细胞,休息,休息,2021/3/2,27,（四）抗肿瘤效应细胞交替使用方案,第一周,NK,第二周,D-CIK,第三周,NK,第四周,D-CIK,抽血,30ml,回输第三周,NK,抽血,50ml,抽血,30ml,，回输第一周,NK,抽血,50ml,，回书第二周,D-CIK,第五周,第六周,回输第四周,D-CIK,2021/3/2,28,（五）体细胞免疫治疗联合抗肿瘤的细胞因子，抗肿瘤抗体，生物分子靶向药物增强疗效的方案,Threshold,for tumor,regression,Immune,stimulation/,inflammation,Spontaneous release of,immune modulators,by tumor cells,Spontaneous,regression/,response to,therapy,Tumor,progression,Antigen-specific,Immunization,，生物靶向药物,（抗肿瘤抗体和小分子化合物）,Non-specific,immune stimulation,NK cells,，,CIK cells,，,D-CIK,IL-2.IFN-,2021/3/2,29,采用的治疗方案,Threshold,for tumor,regression,Immune,stimulation/,inflammation,Spontaneous release of,immune modulators,by tumor cells,Spontaneous,regression/,response to,therapy,Tumor,progression,Antigen-specific,Immunization,，生物靶向药物,（,C225, Iressa,）,Non-specific,immune stimulation,NK cells,，,CIK cells,IL-2. IFN-,2021/3/2,30,恶性肿瘤发生转移的示意图,2021/3/2,31,Induction of anti-tumor immunization in human with DC Vaccination,2021/3/2,32,体细胞治疗在临床肿瘤治疗中的作用,1,、恶性肿瘤综合治疗的一部分,常规治疗后的巩固治疗；,2,、一些免疫原性较强的恶性肿瘤（如肾癌，恶性黑色素瘤，,恶性神经胶质瘤）或对化疗和放疗不敏感肿瘤（原发性肝,癌）在手术或介入微创治疗，使肿瘤负荷降低后可直接进,行细胞免疫治疗。,3,、通常在进行体细胞免疫治疗前，要降低肿瘤负荷。,4,、体细胞免疫治疗联合抗肿瘤的细胞因子，抗肿瘤抗体，生,物靶向药物能取得更好的疗效；,因此，肿瘤患者在综合治疗原则下辅以个体化的细胞免疫治疗，能取得更好的预后。,2021/3/2,33,Chester Southam:,在五十年代首次给志愿者注射活的癌细胞,结果,:,注射的癌细胞在,健康人,体内不生长,.,注射的癌细胞在,癌症病人,体内可长成大肿瘤。,结论：,癌症病人体内失去健康人所具有广谱抗癌活性。,研究项目受到伦理学及法律的极大挑战。,研究结果为抗癌界带来极大提示，,1968,年被推选成全美抗癌学会主席。,Science,，,1957,年,一月,125: 158-160,首次证明人体内天然抗癌活性的存在,五、人体免疫与肿瘤的发生,2021/3/2,34,非粒细胞,单核细胞,粒细胞,血浆,红细胞,人体白细胞分离,离心,人体粒细胞抗肿瘤的研究,2021/3/2,35,中性粒细胞,嗜碱性粒细胞,嗜酸性粒细胞,淋巴细胞,单核细胞,/,巨噬细胞,人体内白细胞分类,粒,细,胞,非,粒,细,胞,2021/3/2,36,接触病原,自然免疫,:,自然杀伤细胞,巨噬细胞,中性,粒细胞,补体,(,需要几小时或几天,),获得免疫,：,B,淋巴细胞,(,抗体,),T,淋巴细胞,(,需要几星期,),免疫系统的两大分支,2021/3/2,37,12.5,25.0,37.5,50.0,75.0,62.5,87.5,100.0,0,正常小鼠,五十岁以上,的癌症病人,抗癌小鼠,五十岁以上的正常人,年青人,人体,T,淋巴细胞的体外杀癌活性,(,明标实验法）,对,人,宫,颈,癌,细,胞,(Hela),杀,伤,率,（,%,）,2021/3/2,38,0,20,40,60,80,100,天然抗癌活性在不同人群中不同分布（双盲试验法）,癌,细,胞,杀,伤,活,性,（,%,）,健,康,人,小,于,50,岁,健,康,人,大,于,50,岁,癌,症,病,人,大,于,50,岁,健,康,狗,2021/3/2,39,2021/3/2,40,2021/3/2,41,2021/3/2,42,人体抗癌活性稳定性及相关因素的影响,100,80,60,40,20,0,2,4,6,8,10,12,14,16,周数,急性精神压力,三天恢复,癌,细,胞,杀,伤,率,(%,）,2021/3/2,43,100,80,60,40,20,0,2,4,6,8,10,12,14,16,周数,慢性精神压力,三个月恢复,人体抗癌活性稳定性及相关因素的影响,癌,细,胞,杀,伤,率,(%,）,2021/3/2,44,人类接触致癌物是不可避免的，不过多少而已。,人体内癌细胞产生也是每天都有的,，,不过多少而已。,但为什么大多数人不得癌症呢,?,癌细胞产生,癌细胞清除,2021/3/2,45,人体内癌细胞清除力,:,体液免疫（抗体，蛋白质）,细胞免疫（白血球,）,粒细胞,巨噬细胞,自然杀伤细胞,T,淋巴细胞,人类癌细胞清除力是与生具来的,人与人之间有差别,不同人对不同癌有差别,年龄不同有差别,身体状况不同有差别,不同季节有差别,2021/3/2,46,2021/3/2,47,2021/3/2,48,2021/3/2,49,从抗癌小鼠的,意外发现,到人类癌症的防治,Apheresis/Elutra,2021/3/2,50,生物治疗研究室,生物治疗,研究中心,基础研究细胞制备病房；三位一体平台,临床用细胞制备室（,GMP,）,临床生物治疗病区,生物治疗新项目研发室,中国华南生物治疗基地,2021/3/2,51,努力使临床、教学和科研更上一个新台阶,加强团队建设,2021/3/2,52,夏建川主编,科学出版社,2011,年,8,月出版,ISBN,-,-,-,-,肿瘤生物治疗基础与临床应用,2021/3/2,53,