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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,医学微生物学实验五,实验五,其他细菌、真菌、病毒学试验,主要内容:,1,、上次试验结果观察,2,、厌氧芽胞梭菌与厌氧培养法,3,、螺旋体形态观察,4,、真菌的形态与培养,5,、病毒学试验,6,、分枝杆菌与抗酸染色,一、,上次试验结果观察,1,、双糖铁基培养基结果观察,乳糖,H,2,S,葡萄糖 动力,伤寒杆菌, + +,痢疾杆菌, + ,大肠杆菌,+ ,+,2,、血清学试验(示教),选取沙门氏菌或痢疾杆菌属的诊断血清,与双糖铁基斜面上的菌苔作玻片凝集反应。,二、厌氧芽胞梭菌与厌氧培养法,1,、形态观察,破伤风梭菌,产气荚膜梭菌,破伤风梭菌,破伤风梭菌(芽胞),破伤风梭菌(鞭毛),产气荚膜梭菌,2,、厌氧培养法,用于专性厌氧菌的培养,方法:,1)将普通培养基置于无氧环境中培养,如:焦性没食子酸法,2)厌氧培养基:在培养基中加氧化还原剂,如:庖肉培养基,a.,原理:焦性没食子酸在,碱性溶液,中能迅速吸收氧气,生成深棕色,焦性没食子橙,,利用此法可除去试管或平皿等容器中的氧气。,(,1,)焦性没食子酸法,焦性没食子酸培养基,焦性没食子酸培养基示意图,血平板,纱布,石蜡,b.,培养结果观察,产气荚膜梭菌血平板厌氧培养,(2)疱肉培养基, 不饱和脂肪酸,a.,原理,动物组织耗氧法, 还原型氨基酸,谷胱甘肽, 凡士林,破伤风梭菌,产气荚膜梭菌,正常对照,1、形态特点:,三、螺旋体,2、分类:,根据抗原性、螺旋的数目、大,小、规则程度、螺旋间距分类。,原核细胞型微生物,菌体细长柔软,弯曲呈螺旋状,,运动活泼,与疾病有关的:,疏螺旋体属 如 伯氏疏螺旋体,密螺旋体属 如 梅毒螺旋体,钩端螺旋体属 如 钩端螺旋体,回归热疏螺旋体,梅毒螺旋体,钩端螺旋体,钩端螺旋体,钩端螺旋体(镀银染色),3、暗视野显微镜,普通光学显微镜上安装一个特制的集光器暗视野集光器,其中央为不透光的黑板,视野背景是暗的,标本上的光线弥散反射,1、,形态:,单细胞酵母菌,如白色念 珠菌,新型隐球菌,多细胞丝状菌,四、真菌的形态与培养,白色念珠菌,白色念珠菌,新型隐球菌(墨汁染色),2、培养特性:,沙保培养基,成份:,蛋白胨 1,g,琼脂 2,g,葡萄糖 4,g,蒸馏水 100,ml,pH 45,左右,菌落特征:,酵母型菌落,酵母样菌落,丝状菌落,单细胞,多细胞,白色念珠菌,新型隐球菌,酵母型菌落,酵母样菌落,酵母样菌落,酵母型菌落,五、病毒学试验,1、病毒包涵体形态,2、病毒感染的细胞病变(录像),病毒感染细胞后,在胞浆或胞核内出现嗜酸或嗜碱性的圆形、椭圆形、不规则形斑块结构。,什么是包涵体?,狂犬病病毒包涵体(内基小体),巨细胞病毒包涵体,六、分枝杆菌与抗酸染色,1、 形态,2、结构特点,3、抗酸染色,结核杆菌(抗酸染色),结核杆菌(抗酸染色),2、结构特点:,细胞壁含有大量,脂质,,主要是,分枝菌酸,,一般不易着色,如果经加温或延长染色时间而着色后能抵抗强脱色剂,盐酸酒精,的脱色,所以又称,抗酸杆菌,。,3、抗酸染色,(1),温染,:石炭酸复红溶液 5,min,(2),脱色,:,3%,盐酸酒精溶液 0.5-1,min,(3),复染,:碱性美兰 溶液 0.5,min,
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