微量分光光度计

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,NanoDrop 2000超微量分光光度计,1,2,内容简介,一. NanoDrop 2000超微量分光光度计,(1)仪器描述及规格,(2)检测原理及优点,二.软件,(1)使用前准备工作及软件操作界面介绍,三.应用,3,NanoDrop 2000分光光度计可以检测0.5-2ul 的样本，而且检测是非常高的准确性和重复性。样本保留系统应用了表面张力来把样本保留在两根检测光纤中间，这使得仪器可以检测较高浓度的样本而不用稀释。应用这个技术，NanoDrop 2000分光光度计检测样本的最高浓度是标准比色皿的200 倍。,样品臂,检测基座,一. NanoDrop 2000超微量分光光度计,(1)仪器描述,4,仪器类型： 分光光度计,最小样品量： 0.5ul,波长： 1mm（可以自动调整到0.05mm）,光源： 氙闪烁灯,检测器类型： 2048象素线型硅CCD阵列,波长范围： 190840nm,波长准确性： 1 nm,光谱分辨率： 1.8nm,吸收光精确性： 0.002吸光值（1mm光程）,吸收光准确性： 2（257nm波长下，0.76个吸光值）,吸光值范围： 0.02300（等同于10mm光程时）,检测极限： 2ng/ul dsDNA,最大检测浓度： 15,000ng/ul（dsDNA）,检测时间： 5秒,仪器占地面积; 14cm20cm,重量： 2kg,样本基座材料： 303不锈钢以及石英光纤,工作电压; 12V,工作功率; 1218W（最大30W）,软件兼容性; Windows XP 和Vista（32bit,仪器规格,5,(2)检测原理,利用表面张力保持样本形态的专利技术进行检测。只需使用加样器将1ul的样品直接加在检测表面上，而无需其他容器或检测装置。使用两根光纤将样本拉开，形成固定光程的检测通路，自动进行检测。,6,优点,1.检测所需样微量，0.5-2ul，可以节省辛苦得到的样品,2.检测范围宽，比传统的分光光度计的上限高200倍，吸光度0.02-300，对于多数样品而言，无需稀释,3.无需检测容器，日常消耗低，直接将样品加在检测面上，检测完以后把检测表面擦干净即可，保证样品间无交叉污染，也不干扰后续检测,4.全波长190-840nm，分辨率1nm，对于任何一个样品的测量，仪器都自动给出全波长的扫描结果190-840nm,5.使用方便快速，1个样品只需5秒,6.无需预热，直接测量,7,二.软件,(1)在使用仪器进行样品检测前，需要使用USB连接线把仪器和电脑相连，把12V的电源线接到仪器背面的插口上，并连接电源。,任务栏,工具栏,功能选择,8,使用NanoDrop 2000/2000c分光光度计可以方便的使用微量样品进行紫外可见分光检测。NanoDrop 2000可以应用于如下检测：,1,2,3,4,5,6,7,8,9,10,11,1.核酸的浓度和质量,2.筛选有效的荧光标记杂交探针,3.功能同普通的紫外-可见分光光度计,4.检测细胞悬液的光散射,5.蛋白定量,6.蛋白定量(主要检测还有还原剂或去污剂的总蛋白含量),7.检测非纯蛋白的浓度,8.蛋白的浓度和荧光染料的浓度,9.蛋白A280检测,10.编辑新程序,11.蛋白定量(区别于5，测试浓度较低),9,例：核酸,Sample ID-输出样品名称,Type-DNA-50做dsDNA检测，RNA-40做RNA检测，ssDNA-33做单链DNA,Conc-结果,A260,显示10mm光程下的260nm处的吸光值,A280,显示10mm光程下的280nm处的吸光值。,260/280,260nm和280nm处的吸光值的比值（DNA1.8RNA2.0）,10,核酸浓度检测,1 在主菜单中选择核酸模式，如果显示波长校准窗口，放,下基座臂点击OK。,2 选择检测的样品类型，默认的设定为DNA-50。,3 选择浓度单位，默认的为ng/ul。,4 默认的校准波长为340nm，重新选择一个校准波长或者,去选择Baseline来不选择校准波长。,5 选择Add to Report自动把检测结果添加到当前报告中,去，默认设置是把每个样品都添加到报告中。要把样,品数据保存到工作薄中，在检测前必须选上Add to report。,6选择Overlay spectra可以在同一时间显示多个光谱。,7使用合适的液体建立空白对照，空白对照液体是溶解目标分子的液体。空白对照液体的pH值和离子浓度应和检测样品一样。,11,注意：,1.每次检测的样品都必须是新加的。,2.使用干净的无尘纸擦干净上下基座，这样仪器就可以进行下一个样品检测了。,12,Oligo Calc,用来计算特定核酸序列的分子量，消光系数，浓度因子,要使用Oligo Calc：,1.使用如下方法来输入一个碱基序列：,􀂾 使用碱基序列显示框下的按键。键盘（仅仅能使用A，C，G，T，和U来输入碱基）复制和粘贴一个序列到显示框（仅仅能使用A，C，G，T，和U来输入碱基）清除碱基序列框中的序列，点击序列框右侧的Clear键，单个可以手动来删除。,2.选择磷酸化程度，可以选择：DNA单磷酸化，RNA单磷酸化和三磷酸化。,3.如果需要可以选择双链，互补的双链序列能够包括在计算中。,4.在下拉框中，选择检测的核酸类型，默认的为DNA。,5.如果要添加序列选择Modification并输入相关的分子量。,13,thanks,14,