DNA粗提取与鉴定【优秀ppt课件】

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,2020/8/20,#,2020,高考生物一轮复习,DNA,的粗提取与鉴定,DNA粗提取与鉴定【优秀ppt课件】,1,基本思路,提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法,分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。对于,DNA,的,粗提取而言，就是要利用,DNA,与,RNA,、蛋白质和脂质等在物,理和化学性质方面的差异，提取,DNA,，去除其它成分。,基本思路提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法,2, DNA,的溶解性,当,NaCl,浓度为,0.14,mol/L,时，,DNA,的溶解度,最小,，,浓,度为,2,mol/L,时，,DNA,的,溶解度,最大,。,利用这一原理，可以,使,DNA,与其他物质分开。,2mol/L,DNA,的特性, DNA的溶解性当NaCl浓度为0.14mol/L2mol,DNA,不溶于酒精,细胞中某些蛋白质溶于酒精, DNA,不溶于酒精溶液,将,DNA,与蛋白质进一步分离,DNA,的特性,DNA不溶于酒精 DNA不溶于酒精溶,（,3,）,DNA,的鉴定,沸水浴,蓝色反应,DNA,+,二苯胺,DNA,的特性,（3） DNA的鉴定沸水浴蓝色反应DNA + 二苯胺DNA,1,DNA_,酒精溶液，但某些蛋白质溶于酒精，,利用这一原理，可以初步分离,DNA,与蛋白质。,2,DNA,在不同浓度的,NaCl,溶液中溶解度不同，它能溶,于,mol/L,的,NaCl,溶液，在,mol/L,的,NaCl,溶,液中溶解度最低。,3,DNA,遇,_,试剂,(,沸水浴,),会呈现,_,色，,因此,_,试剂可以作为鉴定,DNA,的试剂。,不溶于,2,0.14,二苯胺,蓝,二苯胺,实验原理,1DNA_酒精溶液，但某些蛋白质溶于酒精,洋葱,鸡血,香蕉,DNA,含量相对较高、材料易得,实验原理,选取实验材料,洋葱鸡血香蕉DNA含量相对较高、材料易得实验原理选取实验材料,洋葱,取材,称取,30,克洋葱，切碎,破碎细胞，释放,DNA,加入研磨液或者洗涤剂、食盐,破坏细胞,膜，溶解,DNA,过滤,4C,冰箱中放置几分钟或,1500r/min,下离心,5,分钟，然后取,上,清液,除去细胞质,中部,分杂质。,DNA,析出,上清液,与,预冷,95,冷酒精混合，同方向,缓慢,搅拌,，,析出白,色丝状,物或者,10000r/min,下离心,5min,除去核蛋白等。,DNA,鉴定,先,加,入,2mol/L NaCl,溶,液溶解,DNA,。,再加入二苯,胺混匀，置于沸,水,浴中,5,分钟。二苯胺,现配现用,。空白对照。,实验原理,实验步骤,洋葱,预冷酒精的优点：,1.,抑制核酸水解酶活性，防止,DNA,降解,2.,降低分子运动，易于形成沉淀析出,3.,低温有利于增加,DNA,分子柔韧性，减少断裂,DNA,粗提取与鉴定,【,优秀课件,】,DNA,粗提取与鉴定,【,优秀课件,】,洋葱取材称取30克洋葱，切碎破碎细胞，释放DNA加,8,实验原理,实验结果分析,原因：提取的,DNA,不是白色丝状物，,说明,DNA,中的杂质较多。,二苯胺鉴定不是蓝色可能所,提取的,DNA,含量低,析出的丝状物不是白色，或二苯胺鉴定不是蓝色？,DNA,粗提取与鉴定,【,优秀课件,】,DNA,粗提取与鉴定,【,优秀课件,】,实验原理实验结果分析原因：提取的DNA不是白色丝状物，析出的,实验原理,实验结果分析,如何获得较高纯度的,DNA,呢？,DNA,粗提取与鉴定,【,优秀课件,】,DNA,粗提取与鉴定,【,优秀课件,】,实验原理实验结果分析如何获得较高纯度的DNA呢？DNA粗提取,去除杂质的方法,直接在滤液中加入嫩肉粉,嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能分解蛋白质,将滤液放在,60-75C,的恒温水浴箱,中保温,10-15min,蛋白质在此温度下变性，但,DNA,不受影响,反复溶解与析出,DNA,用,高,盐浓度的溶液,溶解DNA,，,能除去在高盐中,不能溶解的杂质；,用,低,盐浓度,使DNA析出,，,能,除去溶解在低盐溶液中的杂质,去除杂质的方法,DNA,粗提取与鉴定,【,优秀课件,】,DNA,粗提取与鉴定,【,优秀课件,】,去除杂质的方法直接在滤液中加入嫩肉粉去除杂质的方法DNA粗提,鸡血,实验原理,实验步骤,鸡血,DNA,粗提取与鉴定,【,优秀课件,】,DNA,粗提取与鉴定,【,优秀课件,】,鸡血实验原理实验步骤鸡血DNA粗提取与鉴定【优秀课件】D,12,制备鸡血细胞液,加柠檬酸钠,，防止血液凝固,破碎细胞，释放,DNA,加,蒸馏水,，使细胞吸水涨破,破坏细胞膜、核膜等。,去除杂质,加入,2mol/L NaCl,，溶解,DNA,，,过,滤,加,蒸馏,水稀释,NaCl,浓度为,0.14mol/L,，析出,DNA,。,将粘稠物溶解到,2mol/L NaCl,溶液中，同方向缓慢,搅拌，过滤,除去细胞质中的大部分杂质。,DNA,析出,与预冷的,95,酒,精混合，同方向缓慢,搅拌，,析出,白色丝状物,除去核蛋白等。,DNA,鉴定,加入,2mol/L NaCl,溶液，,搅拌,。再加入二苯胺，沸水浴,实验原理,实验步骤,鸡血,鸡血,DNA,粗提取与鉴定,【,优秀课件,】,DNA,粗提取与鉴定,【,优秀课件,】,制备鸡血细胞液加柠檬酸钠，防止血液凝固破碎细胞，释放,13,实验原理,课堂练习,1.,（,2018,北京理综，,4B,）鉴定,DNA,时，将粗提产物与二苯胺,混合后进行沸水浴,2.,（,2018,江苏单科，,17C,）提取,DNA,时，在切碎的洋葱中加入,适量洗涤剂和食盐，充分研磨，过滤并弃去滤液,3.,（,2018,江苏单科，,17D,）将,DNA,粗提物溶解在,2mol/Nacl,溶,液中，加入二苯胺试剂，沸水浴后液体由无色变成蓝色,判断对错,DNA,粗提取与鉴定,【,优秀课件,】,DNA,粗提取与鉴定,【,优秀课件,】,实验原理课堂练习1.（2018北京理综，4B）鉴定DNA时，,14,（,2015,江苏卷,.25,）,图,1,、,2,分别为“,DNA,的粗提取与鉴定”的实验中部分操作步骤示意图,下列叙述正确的是（ ）（,多选,）,A.,图,1,、,2,中加入蒸馏水稀释的目的相同,B.,图,1,中完成过滤之后保留滤液,C.,图,2,中完成过滤之后弃去滤液,D.,在图,1,鸡血细胞液中加入少许嫩肉粉有助于去除杂质,BCD,实验原理,课堂练习,DNA,粗提取与鉴定,【,优秀课件,】,DNA,粗提取与鉴定,【,优秀课件,】,（2015江苏卷.25） 图1、2 分别为“DNA 的粗提取,实验原理,课堂小结,DNA,的粗提取与鉴定,实验原理,DNA,粗提取,鉴定,DNA,DNA,在不同浓度的,Nacl,溶液中的溶解度不同,DNA,不溶于酒精,DNA,与二苯胺呈现蓝色反应,选择适宜材料,破碎细胞,去除杂质,DNA,的析出,与二苯胺混合，沸水浴，呈现蓝色反应,DNA,粗提取与鉴定,【,优秀课件,】,DNA,粗提取与鉴定,【,优秀课件,】,实验原理课堂小结DNA的粗提取与鉴定实验原理DNA粗提取鉴定,1.,加强职工主人翁责任感，组织落实各项技术组织措施，认清贯彻劳动定额的重要意义和目的，增强完成定额和超额完成定额的信心。,2.,帮助本单位职能部门做好劳动定额制订和修订工作，并组织班组职工讨论，使劳动定额保持先进合理的水平。,3.,按照定额组织生产，对班组和个人均严格按定额下达生产任务，并进行考核。,4.,定期检查本班组成员定额完成情况，及时了解完成和没有完成或超额完成定额的原因，掌握第一手资料，反馈给车间或上级部门。,5.,组织职工正确填写定额原始记录，做到全面、完整、准确、及时。,6.,根据劳动定额，组织班组开展劳动竞赛，实行按劳分配。,7.,要培养积极的心态，勇于正视自己，正确地看待自己和别人。一般说来，人们容易看到自己的优点，归功于己；看别人却往往会看到缺点，责误于人。这是一种心理学现象，我们应该在自己的不断成长和进步中克服它,8,、当你被引荐到客户的办公室时，如果是第一次见面应做自我介绍，如果已经认识了，只需互相问候并握手。,9,、自觉心是进步之母，自贱心是堕落之源，故自觉心不可无，自贱心不可有。,10,、在劳力上劳心，是一切发明之母。事事在劳力上劳心，变可得事物之真理,DNA,粗提取与鉴定,【,优秀课件,】,DNA,粗提取与鉴定,【,优秀课件,】,DNA粗提取与鉴定【优秀课件】DNA粗提取与鉴定【优秀课件】,