大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒DNA的转化 ppt课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒DNA的转化,51、山气日夕佳，飞鸟相与还。,52、木欣欣以向荣，泉涓涓而始流。,53、富贵非吾愿，帝乡不可期。,54、雄发指危冠，猛气冲长缨。,55、土地平旷，屋舍俨然，有良田美池桑竹之属，阡陌交通，鸡犬相闻。,大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒DNA的转化大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒DNA的转化51、山气日夕佳，飞鸟相与还。,52、木欣欣以向荣，泉涓涓而始流。,53、富贵非吾愿，帝乡不可期。,54、雄发指危冠，猛气冲长缨。,55、土地平旷，屋舍俨然，有良田美池桑竹之属，阡陌交通，鸡犬相闻。大肠杆菌感受态细胞的制备,与质粒DNA的转化,实验目的,实验原理,实验试剂,实验步骤,注意事项,阅读是中考最重要的内容，同时阅读又是提高英语成绩的最有效方式，但是现实情况是，绝大多数学校，特别农村初级中学并没有重视开展阅读教学。所进行的“阅读”也仅仅只是局限于教科书的几篇阅读材料以及大量的考试模拟题了。在许多学生甚至老师看来，“阅读”就等于“模拟题”。真正的阅读同模拟题有质的差别，关键在于：,（1）阅读是为了进一步学习和英语能力的提高；模拟题则是为了考试，为了分数而进行的机械重复训练。,（2）阅读应该是系统的、循序渐进的、持之以恒的积极活动；而模拟题则是随意的、无明确目标的、暂时的活动。,（3）阅读能让你感到愉快，从快乐中学习、提高；而模拟题则使你片面地学习。,英语首先是一门语言，是一门工具，那么学习英语就应该体会到语言带来的乐趣。学生应该利用这种工具去接受信息，给他们带来知识，带来欢乐。但是，现在的情况是，在大部分学校，除班级内的尖子学生外，大部分学生都对英语愁眉苦脸，无计可施。谈到英语，都有一种想哭的感觉，乐趣更是无从谈起。改变这种状况，提高英语学习效率的最佳出路就是开展阅读。阅读教学在农村初级中学难以开展的原因，分析起来，有以下几种：,一、应试教育惹的祸,只要提到阅读，很多老师的第一反应便是：阅读是好的，但是中考成绩怎么办？似乎开展阅读教学和提高中考成绩是自相矛盾的。但是有些人并没有意识到，开展阅读教学是提高英语成绩的最有效方式。要想解决中考中的阅读问题，最基本的方法就是进行大量的阅读，提高整体实力。,中考考什么，就训练什么，这只是“头痛医头，脚痛医脚”，是治标不治本的，不顾学生今后发展的短视行为，难以达到理想的效果。没有输入，就没有输出。义务教育英语课程标准对中考英语阅读的要求是：初中阶段的五级目标要求除教材外，能读懂供79年级学生阅读的简单读物和报纸、杂志，克服生词障碍，理解大意，能根据阅读目的运用适当的阅读策略。课外阅读量应累计达到15万字以上，这样规定是有道理的。没有大量的阅读，英语学习就没有后劲，成绩就难以有所突破。即便就是侥幸升入高中，英语成绩也会一落千丈，难以继续高一级的英语学习。,这种思想还将造成另外一种普遍现象：在许多学校，老师们也“知道”开展阅读对提高英语成绩有好处，于是强调学生要进行课外阅读，但同时，又给学生布置大量的作业，让学生根本没有时间进行阅读，难以体会到阅读带来的乐趣和效果。这样，开展阅读也就成了一句美丽的谎言。说到底，还是老师对阅读的重要性认识不够，将阅读作为补充，而将“常规”教学作为保底的手段。,二、教育体制不健全,一些教育主管部门和学校管理部门开展所谓的“教学常规”检查，没有分类要求，其中的硬性指标就是老师的备课本和学生的作业本，强调作业的次数。有的领导认为老师没把备课本写满、写完，就是没有备课；学生没有一本本划着“红钩钩”的作业就是老师没出力，不敬业。,当然这也有教师方面的原因。面对上层的“常规”要求，有的老师表现得“底气不足”，不敢肯定地表白阅读在英语学习中的重要性。有的老师认为一些学生没有作业就不学习了，认为只有书面作业才是作业，而阅读就不算作业。所以，给主管部门造成错觉（就是英语科需要大量的练习、作业）的，恰恰是我们英语老师自己。,随着教学手段的改进和观念的更新，教师备课不能仅仅局限于“备课本”，而学生的作业也不能仅局限于“作业本”。教师天天写那么多的“备课常规”，哪有时间去为学生准备阅读材料？布置那么多的语法书面作业，学生哪有时间开展阅读？从中获得阅读的快乐呢？,三、教师自身的认知缺陷,不可否认，对于阅读教学的好处，许多专业的英语教师的认识是积极深刻的。但有些教师看来，开展阅读是浪费时间，难以在短期内提高学生成绩，要想立竿见影、吹糠见米地提高学生成绩，还得靠“语法”“背作文”和“练习”。他们没有认识到阅读能提高学生学习英语的兴趣，进而能提高英语学习成绩，并且还为学生今后的可持续发展和终身学习提供词汇和方法的保障。,坦率地讲，很多老师是在“题海战术”的帮助下培养出来的，走上英语教育教学的工作岗位。这就导致有这样一种狭隘教学意识，只有语法讲解和练习、题海遨游才是学习英语的唯一方法。这种“方法”在应试教育的怪圈中，已经形成了一股强大的“势力”，非常难以突破，并且没有多少人有勇气去面对它、突破它。,笔者自己推行英语阅读教学时，一些老师就表现得非常消极。由于他们没有认真开展阅读，所以，根本体会不到阅读所带来的好处，就更不开展阅读，陷入这样一种穿新鞋走老路的弊病中。反而，那些真正认真开展的老师，自己备课、上课非常轻松，学生非常愿意学习英语，有的甚至在课后还阅读英语报纸、杂志、小说等，成绩提高非常明显。,四、阅读材料遭遇尴尬,英语阅读教学难以开展，还有一个重要的原因就是阅读教程的缺乏。让任课教师在繁重的教学任务下自己整理材料，供学生阅读实在是勉为其难，难以有效实现。,而现在图书市场上，英语教辅图书多数都是同步导考、导学、模拟训练方面的图书，阅读教程非常少，仅有的几种阅读教程往往被淹没在同步辅导类的图书中，不被人关注。,目前，省内已经出版了一种非常好的英语同步阅读教程，但是由于宣传力度不够，造成了有教材不用、不知道如何使用的尴尬局面。建议教育主管部门积极引导，向学校提出要求，让这些优秀教材物有所值，充分利用。,后记：,如果一个人开始学习英语时，,a.有人告诉他进行英语阅读的重要性；,b.能找到适当的材料；,c.最重要的是，能够坚持读下去。,那么他是有福气的。因为他英语学习会很轻松，并且成绩会非常好。,农村初级中学的学生离这“福气”还差多远呢？看来并不令人乐观。还需教育主管部门、教学研究部门、学校，特别是工作在一线教师的共同努力才能得以实现。,语文课程标准“写作部分”对写作内容提出了具体而明确的要求：写作要有真情实感，力求表达自己对自然、社会、人生的感受、体验和思考；能多角度观察生活，发现生活的丰富多彩；能抓住事物的特征，有自己的感受和认识，表达力求创意。下面笔者谈谈对作文教学的一些体会。,一、要注重写作材料的积累,作文课在现在的初中语文教学中并不十分受欢迎，很多初中生因为作文在语文试卷上具有举足轻重的位置，才不得不学习。作文课上，有的学生坐在课桌前搜肠刮肚，抓破头皮，却还觉得无话可说，无事可写，总是三言两语就写完了作文。究其原因，主要还是写作材料不足，因此，要提高写作水平就要注意积累写作材料。,二、添加修饰语,美酒总是要经过长时间的酿造才有独特的芳醇，作文的语言也要经过反复锤炼才会有无穷的魅力。富有表现力的词语使文章内容生动。就像王安石因为“春风又绿江南岸”中的“绿”字用得好而使这首诗成为杰作一样。在写作中，我们应该不断锤炼语言。,如下文描写淑女的吃相：她端起碗，拿起筷子，夹了菜放进嘴里，吃起来。这样写只是简单地用几个动词，至于淑女的具体表现写得不够生动。可以修改为：她小心翼翼地端起碗，挑了几缕菜叶，慢慢地送到嘴边，害羞似地张开樱桃小嘴，又迅速地合上，极小幅度地嚼着食物，还不停地用餐巾纸擦拭唇角的余油。通过添加“小心翼翼”“害羞”“极小幅度”“不停”等一些修饰语之后，淑女的吃相就非常生动具体了。,再如，记得有一次大扫除，好多人看着那破烂不堪的抹布，脸皱成了苦瓜，后来在班主任威严的目光扫视下，迫不得已伸出一根手指，挑起抹布在桌子上有一下没一下地轻抹，另一只手则死死地捂着鼻子。“没事儿，我来擦！”刚从外面提水回来的她，放下水桶，一把抓过皱成麻花的抹布桌子这段描写中有修饰语，有动词，把一个认真负责和其他敷衍了事劳动的学生形象刻画得栩栩如生。,三、要重视学生自己修改作文能力的培养,作文修改是作文教学中一个重要环节，是提高学生写作能力的一项必不可少的工作。培养学生自己修改作文的能力势在必行。教师首先要让学生掌握作文修改的步骤和方法。指导学生先通观全篇，从整体着眼，对主题是否突出，观点是否鲜明，选材是否典型，结构是否合理，层次是否清楚，详略是否得当这几个方面做出总体判断；然后，对字、?、句、标点符号的运用做出推敲，进行修改；最后是对修改过的文章进行润色，以期达到比较理想的效果。另外，教给学生简明、醒目、方便的作文修改符号也是培养学生修改作文能力与习惯的重要一环。,四、以读促写,心理学研究指出，阅读是内化的吸收，是对文本知识理解的过程；写作则是外化的表达，是对语言知识加工输出的过程。学生通过阅读，可以积累丰富的语言素材。同时，阅读还能为写作提供范例，提供写作技能模仿运用的直观示范。从这一意义上讲，阅读是写作的基础，写作则是阅读的发展和提高。当然，反过来讲，写作又可以激发学生产生模仿的心理需要，从而带动阅读、促进阅读。所以说，阅读与写作，两者本是相互促进、相互补充、相辅相成的。,因此，在阅读教学中融入写作教学，借此培养学生的迁移与发散意识，学生才能真正做到“学以致用，举一反三，融会贯通”。阅读课中，教师应有意识地引导学生关注不同话题和体裁文章的写作特点，总结规律，并布置相应的仿写任务。学生在完成相关的阅读任务，在理解文本内容的基础上，也要关注文本结构。在此过程中，教师要特别注意启发学生的自主思维，强调学生的自我归纳、总结提炼，只有这样，才能让学生真正掌握写作技巧。这些方法性知识，学生一旦掌握，可以实现学生阅读与写作能力的同步提高。读书贵于思，这里讲的“思”其实就是在阅读中的一种思维活动过程。,五、巧设生活化命题，激发学生的写作兴趣,在平时的写作教学中，作文教学就是教师布置作文题，在学生写作前加以指导，有的教师还直接让学生自己想，自己写，这样导致学生对作文的题目理解不清楚，没有写作思路，写起来就难于下笔，最后不得不从参考书上东挪西凑，写到作文本上就算完成任务。这样的作文语文当然不会生动，结构也不会太完整。其实，如果教师下些功夫，学生是完全可以写好作文的，关键在于教师如何对学生进行指导和启发。教师要多动脑筋，精心挑选适合学生的写作素材，让学生写自己喜欢的事物，指导学生将自己的生活经历运用到作文中。例如，在我的班级里，我让学生每人准备一个笔记本，用来写发生在自己身边的事物或者对于自己印象深刻的事情，字数不限定，题材也不做要求，可以写一个故事片段，也可以写学生喜欢的任何人和事情，唯一的要求就是写出自己的真情实感，表达出对人生、社会、对自然的真实想法。作文来源于生活，教师不要干涉学生的写作思路，在定作文的题目和指导学生作文时，一定要把学生的日常生活联系起来，这样学生才能有感而发，写出好的作文。,总之，只要教师积极探索，努力实践，学生作文的良好习惯就会迅速形成，学生的作文水平就会迈上一个新台阶。,大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒DNA的转化51、山气日夕佳，,1,大肠杆菌感受态细胞的制备,与质粒DNA的转化,大肠杆菌感受态细胞的制备,2,实验目的,实验原理,实验试剂,实验步骤,注意事项,实验目的,3,、实验目的,了解转化的概念及其在分子生物学研究,中的意义,学习氯化钙法制备大肠杆菌感受态细胞,的方法。,学习将外源质粒DNA转入受体菌细胞并,筛选转化体的方法,、实验目的,4,二、实验原理,感受态细胞 Competent cells,受体细胞经过一些特殊方法(如:电击,法,CaCl2等化学试剂法)的处理后,细胞膜,的通透性发生变化,成为能容许外源DNA的,载体分子通过的感受态细胞( competent cell)。,二、实验原理,5,转化( transformation),是将异源DNA分子引入一细胞株系,使,受体细胞获得新的遗传性状的一种手段,是基,因工程等硏究领域的基本实验技术。,进入细胞的DNA分子通过复制表达,才,能实现遗传信息的转移,使受体细胞出现新的,遗传性状。转化过程所用的受体细胞一般是限,制一修饰系统缺陷的变异株,即不含限制性内,切酶和甲基化酶的突变株,转化( transformation),6,转化的方法:,化学方法(热击法):使用化学试剂(如,CaCl2)制备的感受态细胞,通过热击处,理将载体DNA分子导入受体细胞,电转化法:使用低盐缓冲液或水洗制备,的感受态细胞,通过高压脉冲的作用将,载体DNA分子导入受体细胞,转化的方法:,7,CaCl法是目前常用的感受态细胞制备方,法,简便易行,且其转化效率完全可以,满足一般实验的要求,制备出的感受态,细胞暂时不用时,可加入占总体积15%,的无菌甘油于-70保存(半年),因此,CaC法使用更广泛。,CaCl法是目前常用的感受态细胞制备方,8,克隆的筛选,主要用不同抗生素基因筛选。常用的抗生,素有:氨苄青霉素、卡那霉素、氯霉素、,四环素、链霉素等。,克隆的筛选,9,Recombinant DNA plasmid,ned,NA sequenco,Plasmid or cosmid,Transform E tw.i with recombinant,DNA clone,重组DNA转化,细菌过程示意图,Plate on selective growwth,Recombinant DNA plasmid,10,三、实验试剂,材料,大肠杆菌E. coli Dh5a、pBS质粒、,1.5ml离心管(又称 eppendorf管),试剂,LB培养基、O0.1 mol/L CacI2、无菌水,氨苄青霉素(Amp),三、实验试剂,11,大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒DNA的转化 ppt课件,12,大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒DNA的转化 ppt课件,13,大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒DNA的转化 ppt课件,14,大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒DNA的转化 ppt课件,15,大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒DNA的转化 ppt课件,16,大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒DNA的转化 ppt课件,17,大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒DNA的转化 ppt课件,18,大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒DNA的转化 ppt课件,19,大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒DNA的转化 ppt课件,20,大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒DNA的转化 ppt课件,21,51,、天下之事常成于困约，而败于奢靡。,陆游,52,、生命不等于是呼吸，生命是活动。,卢梭,53,、伟大的事业，需要决心，能力，组织和责任感。,易卜生,54,、唯书籍不朽。,乔特,55,、为中华之崛起而读书。,周恩来,谢谢！,51、天下之事常成于困约，而败于奢靡。陆游52、,22,