基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达,聪明出于勤奋，天才在于积累,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达基因在大肠杆菌和酵母的高效表达聪明出于勤奋，天才在于积累本章目录,4.1基因的表达系统与表达策略,。,0,4.1.1基因的表达系统,4.1.2根据表达蛋白用途选择基因的表达策略,4.2基因在大肠杆菌中的高效表达,4.2.1基于T7噬菌体RNA聚合酶/启动子的大肠杆菌表达系统,4.2.2蛋白质的融合表达,4.2.3蛋白质的分泌型表达,4.2.4蛋白质的包含体形式表达与蛋白质复性,4.3基因在酵母中的高效表达,4.3.1酵母表达系统概述,4.3.2甲醇酵母表达系统,4.33组织纤溶酶原激活剂在甲醇酵母中的表达,第一节基因的表达系統与表达略,基因的表达系统,基因的高效表达策略,为了加快农村中学体育教育前进的步伐，解决制约农村中学体育教育发展的问题迫在眉睫。从客观的角度来说，农村中学体育教育存在教学基础设施较弱、教育环境较差等问题，直接导致教育的进度缓慢。从主观的角度来说，现阶段很多农村体育教育当中存在一位教师身兼多职的情况。由于经济发展不足，教师的薪资较低，再加上各种福利、环境与城市相差较大，很多教师都不愿意前往农村教学。本文主要讨论了农村中学体育教育存在的问题及对策。,一、农村中学体育教育存在的问题,1.教学设施匮乏。面对国家迅速发展的教育事业，农村中学体育教育是发展中的重点环节。现阶段的农村虽然在经济上有了很大的提升，但体育教育问题却没有得到太大的改善。从客观的角度来分析，教学设施匮乏是一种非常严重的现象。在我国的偏远地区，农村体育教学设施的更新速度非常慢，即便是双杠、单杠这样的基础教学设施，也是在反复使用，部分气垫、球拍损坏，甚至要学生家长去修理。在一般的农村地区，中学体育教育缺乏肺活量测试仪、心率测试仪等相对高端的仪器，学生只能凭借教师的讲解来训练，无法帮助学生有一个实质性的理解。教学设施的改善是今后的重点工作。,2.师资力量令人堪忧。很多年轻教师不愿意投身于农村中学体育教育当中。而一些经验老成、教学研究成果丰硕的教师，面临家庭的牵绊和众多客观条件的限制，也没有办法直接前往农村教学。由此可见，农村中学体育的师资力量令人堪忧。,二、农村中学体育教育的对策,1.加大政府资金投入，改善农村中学办学条件。由于农村中学教学的问题是长期积累所造成的，因此在日后的解决当中，也要考虑到时间的问题和客观条件的问题。为此，本文认为，应加大政府的资金投入，逐步改善农村中学体育办学条件。为了促进农村体育教育事业的持续健康快速发展，各级政府应积极落实各项惠农政策，加大资金投入，切实抓好“两免一补”和贫困生救助工作，真正让每个贫困生都享受到均等的教育机会。同时，政府应积极筹措资金，改造危旧校舍，添置体育艺术器材和实验仪器等硬件设备，改善农村中学体育的办学条件。就目前的情况来看，改善工作可从区域来划分，从偏远地区到临近城市的地区;也可以按年级划分，从高年级到低年级的进步;还可以按照具体情况来划分，从最需要改善的到不需要改善的。,2.建构优化合理的农村中学教师队伍。从主观的角度来说，农村中学体育教师的招聘并不容易，成绩优秀的教师不愿意前往，成绩一般的教师无法胜任。为此，在今后的师资队伍建设当中，需要在以下几个方面努力：第一，加大农村体育教师管理制度的改革。我国优惠政策的落实当中，往往给支持农村教育的教师提供了较多的优惠，却没有办法落实。诸如住房优惠、薪资等等，都得不到具体体现。因此，今后应改革农村体育教师管理力度，为教师提供较多的保障。第二，加强对教师的培训。由于农村条件的问题，不可能直接聘请到经验丰富、教学成果丰硕的体育教师。今后可适当地降低教师聘请条件，吸引大批体育教师前来教学，然后根据教育要求，不断地对教师进行培训，甚至是送体育教师去进修，建设属于农村中学体育教育的师资队伍，实现客观上的教育水平提升。,3.健全农村体育中的教学体系。农村教育中的体育教学体系直接关系到教育水平，对全国的教育工作具有较大的影响。在今后的工作中，可从以下几个方面努力：第一，将农村固有的体育教师送往城市学校学习，互相交流经验，在一定程度上效仿城市教学模式。第二，派遣城市体育教师前往农村指导，尽量是每个科目都派遣一位教师，时间间隔上把握在3个月左右，为农村的中学体育教育提供更多的助力。,本文对农村中学体育教育存在的问题和对策展开了讨论。就目前的教育情况来看，农村中学的教育问题已经有了很大的进步，以往的一些情况没有反复出现。今后的各项措施，诸如基础设施建设、师资力量建设、教学体系建设等等，必须持续地进行，不可以出现中断，否则之前的努力将会付之东流。相信在今后的教育工作中，农村中学体育教育会得到更大的改善，为我国的教育事业做出更大的贡献。,实践过程中任何教育者都把提高受教育者的能力作为其培养的第一要义，那么语文教学自然也要以培养学生的语文能力作为最高目标。因此，让学生习得知识、掌握技能、提高语文综合能力的“三驾马车”也就成为语文教育工作者孜孜以求的目标。,一、细实濡化，积淀语文知识,就教学的终极目标来说，语文教学必须让学生在掌握知识的基础之上掌握技能，从而达到提高能力的目的与效果。所以语文能力提高的基础应当是先具有一定的语文知识。所谓语文知识就是“语文教科书所提供的语文基础知识，它包括四个方面的知识：听说读写知识、语言知识、文章知识和文学知识”。,课堂教学应是学生获得语文知识的最主要途径，更能为学生课外语文知识的获得提供指导。因此在语文教学的实践中，教师应对学生听说读写、语言、文章和文学等方面的知识学习加以强化，确保学生能够有效地积累这些知识。,其实，语文知识的积累是一个循序渐进的过程，作为语文教育工作者，要想让学生积累足够甚至超出一般水平的语文知识，就必须在“细实”和“濡化”上下足工夫。所谓“细实”就是要准确把握语文知识体系的特点，对学生进行细致实在地教育和教学；所谓“濡化”，则是要求语文教育工作者在自己的教育教学实践中追求厚积薄发的效果，对庞大的语文知识体系融会贯通。就语文知识体系的特点来说，这些语文知识的积累首先要解决的难题，就是教会学生记忆和使用常用汉字，这样，中小学教学才能在学生记忆和已经学会使用常用汉字的基础上实施听说读写、语言、文章和文学等方面的知识的学习。,在此基础上，提高学生的听说读写知识、语言知识、文章知识和文学知识也就有了依据和可能，下面所剩下的就是教师如何让学生积累这些知识的问题了。当然，教的问题前人已经有过精辟的论述“先生的责任在教学生学；先生教的法子必须根据学生学的法子；先生须一面教一面学”。,二、恒久厚积，锤炼语文技能,1.要培养学生听、说、读、写的语文能力，就得传授语文技能,（1）传授要在活动中进行。语文活动突出了语言认识的活动性，传授语文技能要置学生于语言认识活动之中。这样，便于指导学生进行语言认识，通过具体实践掌握技能，使之转换为能力。,（2）传授要在迷津之际进行。由于人与人的思维不同，其思维途径和操作方法也相异。为了不阻碍学生的思维，让他们探索自己的思维途径和操作方法，就要在学生进行语言认识出现迷津之际即对传授，才更有针对性、启发性。,（3）传授要在生根上下工夫。要使语文技能在学生身上扎根，那就得在学生进行语言认识中有针对性地传授，反复抓，抓反复，即反复进行语言认识活动，反复传授技能，在反复中强化，在反复中掌握，在反复中运用，并促其养成习惯，进而达到熟能生巧、巧能生“华”（升华）的程度。,2.明确学生需要的语文技能,不用说，学生需要听说读写的技能。对我们这样一个以汉语为母语的民族来说，怎样才能听好、读好？怎样才能说好、写好？我觉得，重要的是他要能知道并懂得在什么场合、什么情景、在什么人物身上，当表达既定意思时，需要用什么样的词、什么样的句式和什么样的声调语气。语文教学要给学生的语文技能，我认为最重的就是这一点。,3.学生获得语文运用技能的方法,技能是在实践的运用及思维活动中取得的，要让学生获得上面所说的技能，语文教学需要做好三方面的工作：设法让学生大量阅读范文，并在老师的指导下模仿写作。通过各种教学手段，让学生知道，一篇文章好，好在何处；一篇文章差，差在哪儿。需要教给学生一些语文知识和技能。,三、整合关系，提高语文能力,“语文知识支撑着技能和能力的提高，语文知识引导着语感的生成，语文知识是提高语文技能和能力的基础”。语文知识与技能的关系是相互衍生又相互作用的关系；知识与技能的区分为是：知识是技能的锤炼前提并可指导技能；技能是知识的运用并创造丰富知识。,那么，如何利用它们之间关系，进一步提高语文能力呢？那就要在明确学习目标的前提之下，抓住语文能力要点，提高效率，重点突破。既然学会学习、提高能力是学习目标，那么在学习中关注的就不应该只是某一篇文章写了什么，怎么写的，不应该拘泥于前人对某个作品的结论。而应该是如何进一步去分析一篇文章、鉴赏一部作品，如何能更精到地写好文章，清晰准确生动地表达自己的思想和情感。因此，需要分析各项能力要点，使之条理化、细化，把大目标化成若干个小目标。这样，就比较容易把握，容易突破，也容易有成就感。对以后的语文学习及综合能力的提高大有裨益。,不难看出，对于语文知识、技能、能力这“三驾马车”，不仅要了解它们各自的重要作用，还需要整合和活用它们之间的关系，让它们之间的作用发挥得更充分、更协调，从而更有效地提高学生的语文综合素养，使受教育者更好、更快地成为全面发展的社会有用人才。,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达聪明出于勤奋，天才在于积累基因,1,本章目录,4.1基因的表达系统与表达策略,。,0,4.1.1基因的表达系统,4.1.2根据表达蛋白用途选择基因的表达策略,4.2基因在大肠杆菌中的高效表达,4.2.1基于T7噬菌体RNA聚合酶/启动子的大肠杆菌表达系统,4.2.2蛋白质的融合表达,4.2.3蛋白质的分泌型表达,4.2.4蛋白质的包含体形式表达与蛋白质复性,4.3基因在酵母中的高效表达,4.3.1酵母表达系统概述,4.3.2甲醇酵母表达系统,4.33组织纤溶酶原激活剂在甲醇酵母中的表达,本章目录,2,第一节基因的表达系統与表达略,基因的表达系统,基因的高效表达策略,3,基因的表达系統,。,表达载体的组成,0,DNA复制及质粒DNA的筛选:有DNA复制起点ori,及Amp,Tet抗,性基因,目的基因转录的调控系统:这一系统包括启动子,抑制物基因和,转录终止子.启动子位于目的基因的上游常用的如P|acz等,蛋白质的翻译系统:包括核糖体识别位点SD,翻译起始密码子和,终止密码子,基因的表达系統,4,表达系統的种类,。,0,原核表达系统,真核表达系统,酵母,植物拟南芥,昆虫,哺乳动物细胞系,5,一)原核表达系统:细菌,。,0,6,。,大杆豪外源基因的美,0,繁殖迅速、培养简单、操作方便、遗传稳定,基因克隆及表达系统成熟完善,全基因组测序,共有4405个开放型阅读框架,被美国FDA批准为安全的基因工程受体生物,7,大局杆盲泰这外源基因的翁,。,0,缺乏对真核生物蛋白质的修饰加工系统,缺乏对真核生物蛋白质的复性功能,内源性蛋白酶降解空间构象不正确的异源蛋白,细胞周质内含有种类繁多的内毒素,8,二)真核表达系统,。,0,9,酵母表达系统,全基因组测序,基因表达调控机理比较清楚,遗传操作简便,。,0,大规模发酵历史悠久、技术成熟、工艺简单、成本低廉,具有原核细菌无法比拟的真核蛋白翻译后加工系统,能将外源基因表达产物分泌至培养基中,不含有特异性的病毒、不产内毒素,美国FDA认定为安全的,酵母表达系统,10,啸乳动物细胞系,。,0,可以悬浮培养,生,长快,连续传代,精确的糖基化,胞外表达,人本身的细胞系,人的表达系统,啸乳动物细胞系,11,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,12,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,13,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,14,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,15,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,16,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,17,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,18,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,19,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,20,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,21,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,22,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,23,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,24,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,25,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,26,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,27,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,28,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,29,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,30,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,31,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,32,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,33,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,34,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,35,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,36,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,37,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,38,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,39,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,40,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,41,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,42,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,43,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,44,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,45,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,46,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,47,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,48,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,49,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,50,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,51,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,52,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,53,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,54,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,55,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,56,基因在大肠杆菌和酵母的高效表达课件,57,31,、只有永远躺在泥坑里的人，才不会再掉进坑里。,黑格尔,32,、希望的灯一旦熄灭，生活刹那间变成了一片黑暗。,普列姆昌德,33,、希望是人生的乳母。,科策布,34,、形成天才的决定因素应该是勤奋。,郭沫若,35,、学到很多东西的诀窍，就是一下子不要学很多。,洛克,31、只有永远躺在泥坑里的人，才不会再掉进坑里,58,