肺炎支原体感染的实验室诊断(儿科)--课件

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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,ppt课件,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,ppt课件,*,肺炎支原体感染的实验室诊断,1,ppt课件,肺炎支原体感染的实验室诊断1ppt课件,1,概述,支原体是一类能在无生命人丁培养基中生长、繁殖的最小原核型微生物,该类病原体中对人类致病的有肺炎支原体、人型支原体、解脲脲原体等。肺炎支原体是介于细菌和病毒之间的一种病原微生物。 无细胞壁,能通过细菌滤器,需要含胆固醇的特殊培养基,在接种,10,天后才出现菌落,菌落很小,很少超过,0.5mm,。革兰氏染色阴性。,2,ppt课件,概述支原体是一类能在无生命人丁培养基中生长、繁殖的最小原核型,2,精品资料,精品资料,3,你怎么称呼老师?,如果老师最后没有总结一节课的重点的难点,你是否会认为老师的教学方法需要改进?,你所经历的课堂,是讲座式还是讨论式?,教师的教鞭,“不怕太阳晒,也不怕那风雨狂,只怕先生骂我笨,没有学问无颜见爹娘 ”,“太阳当空照,花儿对我笑,小鸟说早早早”,肺炎支原体感染的实验室诊断(儿科)-课件,4,肺炎支原体感染的特点:,肺炎支原体感染广泛发生于世界各地。,平时,散在发病,,3-7,年一次性地区流行。支原体肺炎好发年龄为,5-30,岁。潜伏期可长达,2-3,周,支原体肺炎是,Mp,感染的主要表现。,Mp,感染引起的急性呼吸道感染除肺炎外绝大部分表现为咽炎、扁桃体炎及急性支气管炎和毛细支气管炎等。,Mp,可诱发哮喘、慢性阻塞性肺疾病等急性发作。可累及神经、血液、心血管等系统,以及皮肤、肌肉、关节等器官。,5,ppt课件,肺炎支原体感染的特点: 肺炎支原体感染广泛,5,肺炎支原体的实验室诊断:,由于,Mp,无细胞壁,作用于细胞壁的抗菌药物对其没有杀伤作用,故,Mp,引起感染的治疗与其他细菌和病毒感染的治疗方案不同。因此及时有效地,Mp,感染的实验室诊断是十分必要的,它可及时指导临床治疗,进而预防可能发生的流行和并发症。,6,ppt课件,肺炎支原体的实验室诊断:由于Mp无细胞壁,作用于细胞壁的抗,6,1,、常用的肺炎支原体实验室诊断方法:,目前国内外采用的,Mp,诊断方法主要包括经典的培养法、血清学抗体检测法、抗原检测法、核酸检测等方法。,检测,Mp IgG,抗体应采急性期及发病后,2-3,周的双份血清抗体进行比较。血清,IgG,抗体呈,4,倍以上升高或降低者,同时,Mp,分离阳性者,有绝对诊断意义。血清,IgM,抗体阳性伴,Mp,分离阳性者,也可明确,Mp,感染诊断。,7,ppt课件,1、常用的肺炎支原体实验室诊断方法:7ppt课件,7,如仅有,4,倍以上,IgG,抗体改变或,IgM,阳性,推测有近期感染,应结合临床表现进行诊断。,2,、肺炎支原体实验室诊断方法探讨:,Mp,的分离培养和鉴定可以客观反映,Mp,感染的存在,至今仍是支原体鉴定的金标准,可用于验证各种其他方法的检测结果。其缺点是费时耗力,由于,Mp,对培养条件要求苛刻,生长缓慢,作出判断需,3-4,周。当标本中,Mp,8,ppt课件,如仅有4倍以上IgG抗体改变或IgM阳性,推测有近期感染,应,8,数量极少、培养基营养标准不够或操作手法不当时,均会出现假阴性。因此,多数实验室诊断都采取血清学方法。,(,1,)、血清学检测方法,:,最早是应用补体结合实验,现已被改良。,20,世纪八十年代以来许多方法进入市场:间接免疫荧光、颗粒凝集试验和酶联免疫试验。,9,ppt课件,数量极少、培养基营养标准不够或操作手法不当时,均会出现假阴性,9,间接免疫荧光法的结果判断受人的主观影响,并需要荧光显微镜,还可受到类风湿因子的影响,使其试剂盒的使用受到限制。,颗粒凝集试验,主要是利用乳胶和凝胶作为携带颗粒与实验血清进行孵化。如果血清中含有特异抗体,颗粒附着,产生可见反应。但其检出的阳性标本,多不能区分,IgG,和,IgM,。除了操作简单,与其他实验技术相比没有任何优势。,酶联免疫试验,(EIA),在检测急性感染时比培养法敏,10,ppt课件,间接免疫荧光法的结果判断受人的主观影响,并需要荧光显微镜,还,10,感,在有足够的抗体产生时间,而且患者免疫系统正常情况下,其敏感性相当于,PCR,。,(,2,)抗原检测:包括直接免疫荧光、对流免疫电泳、免疫印迹和抗原捕获,EIA,。这些方法敏感性较低、与其他支原体存在交叉反应,使其应用受到限制。,(,3,)核酸检测:,1980,年以来,人们通过实验室和临床研究,确定了,PCR,方法检测,Mp,感染的可靠性,认为可以用,PCR,方法与血清学方法和或培养法联合进行临床诊断。,PCR,优点:可以检测经过处理用于组织学检测的,11,ppt课件,感,在有足够的抗体产生时间,而且患者免疫系统正常情况下,其敏,11,组织,或者已经污染不能进行分离培养的组织;只需要一份标本;一天内可以完成检测;与血清学方法比较,可以检测更早期的感染;检测标本中的支原体不必须是活体。,12,ppt课件,组织,或者已经污染不能进行分离培养的组织;只需要一份标,12,在,PCR,法与培养法联合使用时,,PCR,检测阳性而培养结果阴性很容易用,PCR,法的敏感性解释。但是,当,PCR,阴性而培养结果或血清学检测阳性时,必须考虑到,PCR,实验中出现了抑制因素或实验技术问题,稀释标本可能减少,PCR,抑制因素,但同时可能降低,PCR,的敏感性。,阳性的,PCR,结果和阴性的血清学结果同时出,13,ppt课件,在PCR法与培养法联合使用时,PCR检测阳性而培养结果阴性很,13,现,可能是由于标本采集过早,抗体尚未产生的原因;而,PCR,结果阴性,伴随,IgG,或,IgM,水平久高不降,也有血清学检测假阳性的可能;经抗生素治疗后,24,小时的标本,,PCR,结果可能是阴性的,但血清学检测结果可以是阳性的。总之要结合临床表现和治疗情况综合判断实验结果。,14,ppt课件,现,可能是由于标本采集过早,抗体尚未产生的原因;而PCR结果,14,总之,对,Mp,进行实验室诊断十分必要,它是指导临床及时治疗、合理用药,防止,Mp,感染流行、肺外严重并发症,以及滥用药物导致耐药菌产生的重要手段。,15,ppt课件,总之,对Mp进行实验室诊断十分必要,它是指导临床及时治疗、合,15,谢谢!,16,ppt课件,16ppt课件,16,
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