hiv检测实验室生物安全及质量控制课件

HIV检测实验室生物安全及质量控制 咸宁市中心血站咸宁市中心血站 佘朝晖佘朝晖 HIV检测实验室生物安全及质量控制1 12实验室生物安全及评估n n国际实验室生物安全发展概况国际实验室生物安全发展概况Laboratory Biosafety Manual1st edition19831993200320042实验室生物安全及评估国际实验室生物安全发展概况Labora2 2实验室生物安全及评估n n国际实验室生物安全发展概况国际实验室生物安全发展概况 在在在在20202020世纪世纪世纪世纪50505050一一一一60606060年代首先出现在美国；年代首先出现在美国；年代首先出现在美国；年代首先出现在美国；1983198319831983年年年年 WHO WHO WHO WHO出版了实验室生物安全手册出版了实验室生物安全手册出版了实验室生物安全手册出版了实验室生物安全手册(第一版第一版第一版第一版)(Laboratory Biosafety Manual)(Laboratory Biosafety Manual)(Laboratory Biosafety Manual)(Laboratory Biosafety Manual)，1993199319931993年出现第年出现第年出现第年出现第二版，直到二版，直到二版，直到二版，直到2004200420042004年出第三版。年出第三版。年出第三版。年出第三版。实验室生物安全及评估国际实验室生物安全发展概况3 3实验室生物安全及评估n n国内实验室生物安全发展概况国内实验室生物安全发展概况 (一一一一)起步起步起步起步 1987 1987 1987 1987年，为了研究流行性出血热的传播途年，为了研究流行性出血热的传播途年，为了研究流行性出血热的传播途年，为了研究流行性出血热的传播途径，军事医学科学院和天津一家生物净化公司合作径，军事医学科学院和天津一家生物净化公司合作径，军事医学科学院和天津一家生物净化公司合作径，军事医学科学院和天津一家生物净化公司合作修建了我国第一个国产三级生物安全防护水平修建了我国第一个国产三级生物安全防护水平修建了我国第一个国产三级生物安全防护水平修建了我国第一个国产三级生物安全防护水平(biosafety level 3(biosafety level 3(biosafety level 3(biosafety level 3，BSL-3)BSL-3)BSL-3)BSL-3)实验室；实验室；实验室；实验室；2002200220022002年年年年12121212月，月，月，月，经卫生部批准并颁布了行业标准微生物和生物医经卫生部批准并颁布了行业标准微生物和生物医经卫生部批准并颁布了行业标准微生物和生物医经卫生部批准并颁布了行业标准微生物和生物医学实验室生物安全通用准则学实验室生物安全通用准则学实验室生物安全通用准则学实验室生物安全通用准则(WS233-2002)(WS233-2002)(WS233-2002)(WS233-2002)；实验室生物安全及评估国内实验室生物安全发展概况4 4实验室生物安全及评估n n国内实验室生物安全发展概况国内实验室生物安全发展概况 (二二二二)SARS)SARS)SARS)SARS期间期间期间期间 2003200320032003年年年年5 5 5 5月月月月6 6 6 6日，科技部、卫生部、国家食日，科技部、卫生部、国家食日，科技部、卫生部、国家食日，科技部、卫生部、国家食品药品监督管理局和国家环境保护总局联合发品药品监督管理局和国家环境保护总局联合发品药品监督管理局和国家环境保护总局联合发品药品监督管理局和国家环境保护总局联合发布了关于印发传染性非典型肺炎病毒研究实布了关于印发传染性非典型肺炎病毒研究实布了关于印发传染性非典型肺炎病毒研究实布了关于印发传染性非典型肺炎病毒研究实验室暂行管理办法的通知。其内容包括传验室暂行管理办法的通知。其内容包括传验室暂行管理办法的通知。其内容包括传验室暂行管理办法的通知。其内容包括传染性非典型肺炎病毒研究实验暂行管理办法染性非典型肺炎病毒研究实验暂行管理办法染性非典型肺炎病毒研究实验暂行管理办法染性非典型肺炎病毒研究实验暂行管理办法和传染性非典型肺炎病毒的毒种保存、使用和传染性非典型肺炎病毒的毒种保存、使用和传染性非典型肺炎病毒的毒种保存、使用和传染性非典型肺炎病毒的毒种保存、使用和感染动物模型的暂行管理办法。和感染动物模型的暂行管理办法。和感染动物模型的暂行管理办法。和感染动物模型的暂行管理办法。实验室生物安全及评估国内实验室生物安全发展概况5 5实验室生物安全及评估n n国内实验室生物安全发展概况国内实验室生物安全发展概况国内实验室生物安全发展概况国内实验室生物安全发展概况 (三三三三)第一个实验室生物安全国家标准第一个实验室生物安全国家标准第一个实验室生物安全国家标准第一个实验室生物安全国家标准 2003 2003 2003 2003年年年年8 8 8 8月开始，在国家科技部、卫生部、农业部等的支持下，月开始，在国家科技部、卫生部、农业部等的支持下，月开始，在国家科技部、卫生部、农业部等的支持下，月开始，在国家科技部、卫生部、农业部等的支持下，由国家实验室认证认可委由国家实验室认证认可委由国家实验室认证认可委由国家实验室认证认可委(ChinaNationalAccreditation Board for(ChinaNationalAccreditation Board for(ChinaNationalAccreditation Board for(ChinaNationalAccreditation Board for LaboratoriesLaboratoriesLaboratoriesLaboratories，CNAL)CNAL)CNAL)CNAL)牵头，组织生物安全专家开始起草国家标准实牵头，组织生物安全专家开始起草国家标准实牵头，组织生物安全专家开始起草国家标准实牵头，组织生物安全专家开始起草国家标准实验室生物安全通用要验室生物安全通用要验室生物安全通用要验室生物安全通用要 求。求。求。求。2004 2004 2004 2004年年年年9 9 9 9月月月月1 1 1 1日建设部与国家质量监督检验检疫总局又联合日建设部与国家质量监督检验检疫总局又联合日建设部与国家质量监督检验检疫总局又联合日建设部与国家质量监督检验检疫总局又联合 发布了生物安全实验室建设技术规范发布了生物安全实验室建设技术规范发布了生物安全实验室建设技术规范发布了生物安全实验室建设技术规范(GB50346-2004)(GB50346-2004)(GB50346-2004)(GB50346-2004)，提，提，提，提 出了生物安全实验室建设的技术标准。出了生物安全实验室建设的技术标准。出了生物安全实验室建设的技术标准。出了生物安全实验室建设的技术标准。实验室生物安全及评估国内实验室生物安全发展概况6 6实验室生物安全及评估n n国内实验室生物安全发展概况国内实验室生物安全发展概况 (四四四四)病原微生物实验室生物安全管理条例病原微生物实验室生物安全管理条例病原微生物实验室生物安全管理条例病原微生物实验室生物安全管理条例 2004 2004 2004 2004年年年年11111111月月月月12121212日，由温家宝总理签发的中华人民共和日，由温家宝总理签发的中华人民共和日，由温家宝总理签发的中华人民共和日，由温家宝总理签发的中华人民共和 国国务院令国国务院令国国务院令国国务院令(第第第第424424424424号号号号)公布施行了病原微生物实验室生公布施行了病原微生物实验室生公布施行了病原微生物实验室生公布施行了病原微生物实验室生 物安全管理条例物安全管理条例物安全管理条例物安全管理条例(简称条例简称条例简称条例简称条例)。2004 2004 2004 2004年年年年5 5 5 5月，国家认证认可监督管理委员会和科技部月，国家认证认可监督管理委员会和科技部月，国家认证认可监督管理委员会和科技部月，国家认证认可监督管理委员会和科技部 联合提出并委托中国实验室国家认可委员会（联合提出并委托中国实验室国家认可委员会（联合提出并委托中国实验室国家认可委员会（联合提出并委托中国实验室国家认可委员会（CNALCNALCNALCNAL）制）制）制）制 订了国家强制性标准订了国家强制性标准订了国家强制性标准订了国家强制性标准 GB19489-2004-GB19489-2004-GB19489-2004-GB19489-2004-实验室生物安全实验室生物安全实验室生物安全实验室生物安全 通用要求，为规范我国的实验室生物安全管理提供了通用要求，为规范我国的实验室生物安全管理提供了通用要求，为规范我国的实验室生物安全管理提供了通用要求，为规范我国的实验室生物安全管理提供了 科学的技术规范；科学的技术规范；科学的技术规范；科学的技术规范；2008200820082008年进行了修订再版。年进行了修订再版。年进行了修订再版。年进行了修订再版。2005 2005 2005 2005年年年年7 7 7 7月月月月26262626日，武汉大学生物安全三级动物实验室日，武汉大学生物安全三级动物实验室日，武汉大学生物安全三级动物实验室日，武汉大学生物安全三级动物实验室 首家获国家认可。首家获国家认可。首家获国家认可。首家获国家认可。实验室生物安全及评估国内实验室生物安全发展概况7 7实验室生物安全及评估n n国内实验室生物安全发展概况国内实验室生物安全发展概况 (五五五五)现状和展望现状和展望现状和展望现状和展望 当前，国际上，特别是当前，国际上，特别是当前，国际上，特别是当前，国际上，特别是WHOWHOWHOWHO对生物医学实对生物医学实对生物医学实对生物医学实验室的生物安全比较重视。我们各种等级实验验室的生物安全比较重视。我们各种等级实验验室的生物安全比较重视。我们各种等级实验验室的生物安全比较重视。我们各种等级实验室的建设应该有一个适当比例，应该普及推广室的建设应该有一个适当比例，应该普及推广室的建设应该有一个适当比例，应该普及推广室的建设应该有一个适当比例，应该普及推广BSL-2BSL-2BSL-2BSL-2实验室，根据需要适当建设实验室，根据需要适当建设实验室，根据需要适当建设实验室，根据需要适当建设BSL-3BSL-3BSL-3BSL-3实验室，实验室，实验室，实验室，特殊需要的建设特殊需要的建设特殊需要的建设特殊需要的建设BSL-4BSL-4BSL-4BSL-4实验室，要有一个合理的实验室，要有一个合理的实验室，要有一个合理的实验室，要有一个合理的宏观布局。宏观布局。宏观布局。宏观布局。实验室生物安全及评估国内实验室生物安全发展概况8 8实验室生物安全及评估n n病原微生物分类病原微生物分类 第一类病原微生物，是指能够引起人类或者动物第一类病原微生物，是指能够引起人类或者动物非常严重非常严重疾疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物。第二类病原微生物，是指能够引起人类或者动物第二类病原微生物，是指能够引起人类或者动物严重严重疾病，比疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物。的微生物。第三类病原微生物，是指能够引起人类或者动物疾病，但一般第三类病原微生物，是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境情况下对人、动物或者环境不构成严重危害不构成严重危害，传播风险有限，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物。施的微生物。第四类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人类或者动物第四类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物。疾病的微生物。第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物实验室生物安全及评估病原微生物分类9 9实验室生物安全及评估n n各国病原微生物危险分级各国病原微生物危险分级组织组织 对象对象 低低病原微生物病原微生物高高WHOWHO病原微生物病原微生物 1 1 2 2 3 3 4 4美国美国 病原微生物病原微生物 1 1 2 2 3 3 4 4 日本日本微生物病毒微生物病毒 1 12a2a2b2b3a3a3b3b4a4a4b4b英国英国 病原微生物病原微生物 C C B B A A中国中国 病原微生物病原微生物 4 4 3 3 2 2 1 1实验室生物安全及评估各国病原微生物危险分级1010实验室生物安全及评估n n生物安全实验室生物安全实验室 生物安全实验室慨念生物安全实验室慨念 1 1、通过规范的实验室设计建造、实验设备的配置、个、通过规范的实验室设计建造、实验设备的配置、个 人防护装备的使用（硬件）。人防护装备的使用（硬件）。2 2、严格遵从标准化的操作程序和管理规程等（软件）、严格遵从标准化的操作程序和管理规程等（软件）3 3、确保操作生物危险因子的工作人员不受实验对象的伤、确保操作生物危险因子的工作人员不受实验对象的伤 害，确保周围环境不受其污染害，确保周围环境不受其污染,确保实验因子保持原有本性所确保实验因子保持原有本性所 采取综合措施的实验室。（目的）采取综合措施的实验室。（目的）实验室生物安全及评估生物安全实验室1111实验室生物安全及评估n n生物安全实验室生物安全实验室 分级分级 根据实验室所处理对象的生物危害程度和采根据实验室所处理对象的生物危害程度和采取的防护措施，把生物安全实验室分为四级，其中取的防护措施，把生物安全实验室分为四级，其中一级对生物安全隔离的要求最低，四级最高。一般一级对生物安全隔离的要求最低，四级最高。一般以以BSLBSL1 1、BSLBSL2 2、BSLBSL3 3、BSLBSL4 4表示实验表示实验室相应的生物安全防护水平。室相应的生物安全防护水平。实验室生物安全及评估生物安全实验室1212实验室生物安全及评估n n生物安全实验室生物安全实验室 目的目的 1 1、确保操作生物危险因子的工作人员不受实、确保操作生物危险因子的工作人员不受实验对象的伤害验对象的伤害-人人 2 2、确保周围环境不受其污染、确保周围环境不受其污染-环境环境 3 3、确保实验因子保持原有本性（不受污、确保实验因子保持原有本性（不受污染）染）-物物实验室生物安全及评估生物安全实验室1313实验室生物安全及评估n n生物安全实验室生物安全实验室 三道屏障：三道屏障：1 1、生物安全设备和个体防护装置；、生物安全设备和个体防护装置；2 2、实验室设施，实验室特殊设计和建设要求；、实验室设施，实验室特殊设计和建设要求；3 3、实验室管理制度（软件部分）。包括标准、实验室管理制度（软件部分）。包括标准 化操作程序和严格实验室管理。化操作程序和严格实验室管理。实验室生物安全及评估生物安全实验室1414实验室生物安全及评估n n生物安全实验室组织管理要求生物安全实验室组织管理要求生物安全实验室组织管理要求生物安全实验室组织管理要求 实实验验室室所所在在机机构构应应设设立立生生物物安安全全委委员员会会，实实验验室室安安全全负负责责人人是是安安全全委委员员会会委委员员，该该实实验验室室管管理理层层有有责责任任确确保保安安全全检检查查的的执执行行。每每年年应应对对工工作场所进行不定期抽查，例行检查每年至少一次。检查内容包括：作场所进行不定期抽查，例行检查每年至少一次。检查内容包括：1 1、应急装备、警报体系和撤离程序功能及状态正常。、应急装备、警报体系和撤离程序功能及状态正常。2 2、用于危险物质漏出控制的程序和物品状态正常。、用于危险物质漏出控制的程序和物品状态正常。3 3、对对可可燃燃易易燃燃性性、可可传传染染性性、放放射射性性和和有有毒毒物物质质的的存存放放进进行行适适当当防防护护和控制；污染和废弃物处理程序的状态。和控制；污染和废弃物处理程序的状态。4 4、实验室设施、设备、人员的状态正常、实验室设施、设备、人员的状态正常 5 5、实验室各项操作规程与管理制度正确实施。、实验室各项操作规程与管理制度正确实施。实验室生物安全及评估生物安全实验室组织管理要求1515实验室生物安全及评估n n生物安全实验室组织管理要求生物安全实验室组织管理要求 实实验验室室负负责责人人为为实实验验室室安安全全第第一一责责任任人人，可可任任命命一一名名有有适适当当资资质质和和经经验验的的实实验验室室安安全全负负责责人人来来协协助助管管理理安安全全事事宜宜。实实验验室室负负责责人人对对所所有有实实验验室室员员工工和和实实验验室室来来访访者者的的安全负责。安全负责。实实验验室室安安全全负负责责人人应应对对实实验验室室以以及及实实验验人人员员进进行行日日常常管管理监督。理监督。信信息息安安全全及及保保密密制制度度：与与HIV/AIDSHIV/AIDS检检测测相相关关的的所所有有资资料料均均应应严严格格保保密密，包包括括送送检检单单、检检测测记记录录、样样品品登登记记、报报告告单单及及工工作作人人员员年年度度检检测测结结果果等等，不不得得对对无无关关人人员员透透露露检测结果。检测结果。实验室生物安全及评估生物安全实验室组织管理要求1616实验室生物安全及评估n n生物安全实验室组织管理要求生物安全实验室组织管理要求生物安全实验室组织管理要求生物安全实验室组织管理要求（五五）制制定定、维维护护和和监监督督有有效效的的实实验验室室安安全全计计划划。该该安安全全计计划划应应包包括括教育及培训、审核及评估、促进实验室安全行为的程序。教育及培训、审核及评估、促进实验室安全行为的程序。（六六）有有权权阻阻止止不不安安全全的的活活动动。实实验验室室负负责责人人应应制制定定规规定定和和程程序序确确保保实实验验室室设设施施、设设备备、个个人人防防护护设设备备、材材料料等等符符合合国国家家有有关关安安全全要要求求，定期检查、维护、更新，确保不降低其设计性能。定期检查、维护、更新，确保不降低其设计性能。（七七）确确保保提提供供实实验验室室人人员员适适当当的的实实验验室室安安全全方方面面（如如潜潜在在危危害害性性，保保护护暴暴露露者者必必要要的的注注意意事事项项以以及及暴暴露露评评估估程程序序）的的培培训训。实实验验室室人人员必须接受年度最新的补充培训以了解操作规程和政策的变化。员必须接受年度最新的补充培训以了解操作规程和政策的变化。（八八）定定期期或或不不定定期期组组织织进进行行实实验验室室安安全全自自查查，对对于于自自查查情情况况应应有有记记录录，对对重重大大生生物物安安全全隐隐患患或或发发现现问问题题应应立立即即向向上上级级生生物物安安全全委委员员会会汇报，对发现问题应有整改与复查措施。汇报，对发现问题应有整改与复查措施。实验室生物安全及评估生物安全实验室组织管理要求1717实验室生物安全及评估n n实验室人员管理要求实验室人员管理要求实验室人员管理要求实验室人员管理要求 实实验验室室所所在在单单位位人人事事部部门门、生生物物安安全全委委员员会会负负责责：实实验验室室人人员员的的组组织织管管理理、上上岗岗资资格格认认定定、培培训训、岗岗位制定和准入标准。位制定和准入标准。负责成立实验室人员考核工作组，制定分类的负责成立实验室人员考核工作组，制定分类的 考核标准，定期对实验室人员基本知识、操作技考核标准，定期对实验室人员基本知识、操作技 能、生物安全进行考核与评价。能、生物安全进行考核与评价。实验室生物安全及评估实验室人员管理要求1818实验室生物安全及评估n n生物安全实验室化学品安全管理要求生物安全实验室化学品安全管理要求化学品安全应符合以下要求：化学品安全应符合以下要求：在在实实验验室室中中，对对化化学学品品的的存存放放、处处理理、使使用用及及处处置置的的规规定定和和程程序序均均应应符符合合良良好好化化学学实实验验室室行行为为标标准准。应应按按照照相相关关标标准准在在每每个个储储存存容容器器上上标标明明每每个个产产品品的的危危害害性性和和风风险性，还应在险性，还应在“使用中使用中”材料的器上清楚标明。材料的器上清楚标明。对对化化学学、物物理理及及火火灾灾危危害害应应有有足足够够可可行行的的控控制制措措施施。应应定定期期对对这这些些措措施施进进行行监监督督以以确确保保其其有有效效可可用用。应应保保存存监督结果记录。监督结果记录。实验室生物安全及评估生物安全实验室化学品安全管理要求1919实验室生物安全及评估n n生物安全实验室紧急事故处理生物安全实验室紧急事故处理 实实验验室室负负责责人人负负责责制制定定应应对对涉涉及及本本科科室室及及工工作作的的意意外外事事故故应应急急处处理理程程序序和和预预案案，报报生生物物安安全全委委员员会会备备案案；并并制制定定专专人人负负责责应应对对意意外外事事故故应应急急处处理理所所需需的的设设备备材材料料的的保保管管和和维维护护。实实验验室室人人员员应应熟熟记记紧紧急急情情况况下下的的正正确确应应对对措施。措施。实实验验中中发发现现异异常常情情况况应应及及时时向向实实验验室室负负责责人人报报告告，并并立立即即采采取取控控制制措措施施；同同时时做做好好详详细细的的记记录录。实实验验室室发发生生安安全全事事故故时时，应应视视事事故故类类型型等等不不同同情情况况，进进行行紧紧急急处处理理，并详细记录事故经过，按规定报告生物安全委员会。并详细记录事故经过，按规定报告生物安全委员会。实验室生物安全及评估生物安全实验室紧急事故处理2020实验室生物安全及评估n n生物安全实验室紧急事故处理生物安全实验室紧急事故处理 应应制制定定紧紧急急撤撤离离的的行行动动方方案案。该该方方案案应应考考虑虑到到生生物物性性、化化学学性性、失失火火和和其其他他紧紧急急情情况况。应应包包括括所所采采取取的的使使留留下下的的建建筑筑物物处处于于尽尽可可能能安安全全状状态态的的措措施施。所所有有实实验验室室人人员员都都应应了了解解紧紧急急撤撤离离的的行行动动方方案案、撤撤离离路路线线和和紧紧急急撤撤离离的的集集合合地地点。每年至少一次演习。点。每年至少一次演习。实实验验室室负负责责人人应应备备有有用用于于急急救救的的物物品品储储备备（如急救药箱，包括普通和特殊的解毒剂等。（如急救药箱，包括普通和特殊的解毒剂等。实验室生物安全及评估生物安全实验室紧急事故处理2121实验室生物安全及评估n n生物安全柜生物安全柜（Biosafety Cabinet,BSC)Biosafety Cabinet,BSC)负压过滤排风柜：在生物因子操作过程中用来负压过滤排风柜：在生物因子操作过程中用来保护操作人员、环境和（或）实验物品，防止其暴保护操作人员、环境和（或）实验物品，防止其暴露于实验中（可能）产生的危险性或潜在危险性生露于实验中（可能）产生的危险性或潜在危险性生物气溶胶或溅出物。是病原微生物实验室的重要设物气溶胶或溅出物。是病原微生物实验室的重要设备，是备，是“病原体操作的一级安全隔离屏障病原体操作的一级安全隔离屏障”，关系，关系生命安全和环境安全，要求非常严格。生命安全和环境安全，要求非常严格。实验室生物安全及评估生物安全柜（Biosafety Cabi2222实验室生物安全及评估n n生物安全柜生物安全柜（Biosafety Cabinet,BSC)Biosafety Cabinet,BSC)实验室生物安全及评估生物安全柜（Biosafety Cabi232324保护类型及生物安全柜的选择24保护类型及生物安全柜的选择2424实验室生物安全及评估n n生物安全柜生物安全柜（Biosafety Cabinet,BSC)Biosafety Cabinet,BSC)生物安全柜摆放位置生物安全柜摆放位置 1 1、与其它操作区域相分离；、与其它操作区域相分离；2 2、远离主要通道；、远离主要通道；3 3、与气道有一定距离；、与气道有一定距离；4 4、与实验室入口保持一定距离。、与实验室入口保持一定距离。实验室生物安全及评估生物安全柜（Biosafety Cabi2525实验室生物安全及评估n n安全柜的检验安全柜的检验 安装检验 1 1、下降气流流速、流入气流流速、气流模、下降气流流速、流入气流流速、气流模式过滤器泄漏警报和联锁功能式过滤器泄漏警报和联锁功能 2 2、排气系统性能（负压排气压力和排气罩、排气系统性能（负压排气压力和排气罩 性能）性能）3 3、照度、噪声、振动、漏电流、接地电阻、照度、噪声、振动、漏电流、接地电阻实验室生物安全及评估安全柜的检验2626实验室生物安全及评估n n安全柜的检验安全柜的检验 维护检验维护检验 1 1、更换过滤器和安全柜内部维修、更换过滤器和安全柜内部维修 2 2、使用的安全柜每年进行验证、使用的安全柜每年进行验证 3 3、检验项目与安装检验相同、检验项目与安装检验相同实验室生物安全及评估安全柜的检验2727实验室生物安全及评估n n安全柜的检验安全柜的检验 检测周期检测周期 1 1、实验室施工时，、实验室施工时，级生物安全柜搬放到指级生物安全柜搬放到指定位置后。定位置后。2 2、级生物安全柜被移动位置后。级生物安全柜被移动位置后。3 3、对对级生物安全柜进行检修后。级生物安全柜进行检修后。4 4、级生物安全柜更换高效过滤器后。级生物安全柜更换高效过滤器后。5 5、级生物安全柜一年一度的常规现场级生物安全柜一年一度的常规现场 检测。检测。实验室生物安全及评估安全柜的检验2828实验室生物安全及评估n n生物安全柜操作注意事项生物安全柜操作注意事项生物安全柜操作注意事项生物安全柜操作注意事项 1 1、工作台内不应存放过多器具，当使用旋转、震荡或加、工作台内不应存放过多器具，当使用旋转、震荡或加热器具时，应尽可能把这些器具置于操作区的后端，这样就热器具时，应尽可能把这些器具置于操作区的后端，这样就可以减少通道口的湍流现象；可以减少通道口的湍流现象；2 2、不可随便改变鼓风机的风速，除非通过检测空气速度、不可随便改变鼓风机的风速，除非通过检测空气速度确实降低了方可进行；确实降低了方可进行；3 3、切勿用操作台来储藏设备或实验室器具；、切勿用操作台来储藏设备或实验室器具；4 4、不要阻塞空气入口格网；、不要阻塞空气入口格网；5 5、不要在操作台内使用有毒、易燃或易爆等高度危物；、不要在操作台内使用有毒、易燃或易爆等高度危物；6 6、操作前后应对台面进行消毒；、操作前后应对台面进行消毒；7 7、应对安全柜定期进行检查、维修。、应对安全柜定期进行检查、维修。实验室生物安全及评估生物安全柜操作注意事项2929实验室生物安全及评估n n生物安全柜内感染性材料溢洒的处理生物安全柜内感染性材料溢洒的处理 1 1、当发生少量溢洒时，应用吸收纸巾立即处理，并立、当发生少量溢洒时，应用吸收纸巾立即处理，并立即用浸满消毒液的毛巾或纱布对生物安全柜及其内部的所即用浸满消毒液的毛巾或纱布对生物安全柜及其内部的所有物品进行擦洗。工作面消毒后应更换手套，不论是摘下有物品进行擦洗。工作面消毒后应更换手套，不论是摘下手套还是更换手套都要洗手。手套还是更换手套都要洗手。2 2、若发生大量溢洒，液体会通过生物安全柜前面或后、若发生大量溢洒，液体会通过生物安全柜前面或后面的格栅流到下面去，生物安全柜内所有的物品都应该进面的格栅流到下面去，生物安全柜内所有的物品都应该进行表面消毒并拿出生物安全柜，在确保生物安全柜的排水行表面消毒并拿出生物安全柜，在确保生物安全柜的排水阀被关闭后，可将消毒液倒在工作台面上，使液体通过格阀被关闭后，可将消毒液倒在工作台面上，使液体通过格栅流到排水盘上。所有接触溢出物品的材料都要进行消毒栅流到排水盘上。所有接触溢出物品的材料都要进行消毒和和/或高压灭菌处理。或高压灭菌处理。实验室生物安全及评估生物安全柜内感染性材料溢洒的处理3030实验室生物安全及评估n n生物安全柜消毒生物安全柜消毒 表面消毒表面消毒 1 1、工作完成时，所有的容器和设备应该、工作完成时，所有的容器和设备应该进行表面消毒并拿出安全柜。在每天工作结束时，进行表面消毒并拿出安全柜。在每天工作结束时，应该对安全柜进行最后的表面消毒，包括工作台应该对安全柜进行最后的表面消毒，包括工作台面、安全柜的边壁、后壁和观察窗玻璃内部的擦面、安全柜的边壁、后壁和观察窗玻璃内部的擦拭。如果必要，安全柜也应该进行放射性检测并拭。如果必要，安全柜也应该进行放射性检测并进行必要的消毒。进行必要的消毒。2 2、作为安全的微生物学操作的最后步骤，、作为安全的微生物学操作的最后步骤，操作者应该摘下手套、脱下工作服并且洗手。操作者应该摘下手套、脱下工作服并且洗手。气体消毒气体消毒 在更换在更换HEPAHEPA过滤器或进行内部维修之前要过滤器或进行内部维修之前要对生物安全柜必须进行消毒。对生物安全柜必须进行消毒。实验室生物安全及评估生物安全柜消毒3131实验室生物安全及评估n n生物安全柜的日常维护生物安全柜的日常维护 1.1.定期清洁操作台面和前窗玻璃定期清洁操作台面和前窗玻璃 2.2.保保持持实实验验室室内内空空气气质质量量,延延长长高高效效过过滤滤器器的的使用寿命使用寿命 3.3.定期检测紫外灯的照射强度定期检测紫外灯的照射强度,及时更换灯管及时更换灯管 4.4.长长期期不不用用应应定定期期进进行行维维护护性性运运行行高高效效过过滤滤器器应定期检测应定期检测,及时更换及时更换.5.5.做好使用和维护记录做好使用和维护记录.实验室生物安全及评估生物安全柜的日常维护3232实验室生物安全及评估n n生物危害评估生物危害评估 1 1、生物安全危害评估是指实验室工作人员处理致病微生物及其毒素时，对可能、生物安全危害评估是指实验室工作人员处理致病微生物及其毒素时，对可能给人或环境带来的危害所进行的评估，包括对微生物危险性和防护屏障的评估。给人或环境带来的危害所进行的评估，包括对微生物危险性和防护屏障的评估。2 2、生物危害评估原则和依据是根据生物因子的种类、来源、传染性、致病性、生物危害评估原则和依据是根据生物因子的种类、来源、传染性、致病性、传播途径、在环境中的稳定性、感染剂量、浓度、动物实验数据有效的预防和治传播途径、在环境中的稳定性、感染剂量、浓度、动物实验数据有效的预防和治疗方法等诸因素进行生物危害评估。疗方法等诸因素进行生物危害评估。3 3、危害评估是为了确定某种微生物实验过程中的危险所在，危险性大小，以及、危害评估是为了确定某种微生物实验过程中的危险所在，危险性大小，以及如何避免和防护危险的发生，达到保护人、物和环境的目的。如何避免和防护危险的发生，达到保护人、物和环境的目的。4 4、根据卫生部病原微生物危害等级分类，艾滋病毒属第二类高致病性病原微生、根据卫生部病原微生物危害等级分类，艾滋病毒属第二类高致病性病原微生物（国际危险程度为物（国际危险程度为级）级）5 5、根据危害评估结果，制定相应的操作规程、实验室管理制度和紧急事故处理、根据危害评估结果，制定相应的操作规程、实验室管理制度和紧急事故处理办法，必须形成书面文件并严格遵守执行。在新增加实验内容时应对该实验进行办法，必须形成书面文件并严格遵守执行。在新增加实验内容时应对该实验进行危险度评估；及时收集与危险程度相关的新资料以及来自科学文献的其他相关的危险度评估；及时收集与危险程度相关的新资料以及来自科学文献的其他相关的新信息，以便必要时对危险度评估结果进行定期检查和修订。新信息，以便必要时对危险度评估结果进行定期检查和修订。实验室生物安全及评估生物危害评估3333实验室生物安全及评估 艾滋病毒在艾滋病毒在 卫生部名录中的分类卫生部名录中的分类 （“卫生部关于印发人间传染的病原微生物名录的通知卫生部关于印发人间传染的病原微生物名录的通知”卫科教发卫科教发200615号）号）实验室生物安全及评估 艾滋病毒在 卫生部名录中的3434实验室生物安全及评估n nHIV相关检测的生物安全级别 (一一)HIV)HIV抗体检测（包括筛查和确证实验）、抗抗体检测（包括筛查和确证实验）、抗原检测和相关的免疫学检测应在符合原检测和相关的免疫学检测应在符合级生物安级生物安全实验室（全实验室（BSL-2BSL-2）要求的艾滋病检测实验室中）要求的艾滋病检测实验室中进行。进行。（二）（二）HIVHIV分离培养、浓缩、中和试验、细胞培分离培养、浓缩、中和试验、细胞培养及研究工作及其它需要应用活病毒的研究工作，养及研究工作及其它需要应用活病毒的研究工作，应在应在级生物安全实验室（级生物安全实验室（BSL-3BSL-3）中进行。）中进行。实验室生物安全及评估HIV相关检测的生物安全级别(一)HI3535实验室生物安全及评估n nHIV相关检测的生物安全级别（三）（三）HIVHIV核酸提取和检测均应在符合核酸提取和检测均应在符合级生物安级生物安全实验室（全实验室（BSL-2BSL-2）要求的艾滋病检测实验室中进）要求的艾滋病检测实验室中进行。行。（四）（四）HIVHIV病毒株应保存在符合病毒株应保存在符合级生物安全实验级生物安全实验室（室（BSL-3BSL-3）要求的艾滋病实验室；）要求的艾滋病实验室；HIVHIV阳性样品，阳性样品，包括全血、血清、血浆和其他组织（液）、核酸包括全血、血清、血浆和其他组织（液）、核酸提取物应保存在符合提取物应保存在符合BSL-2BSL-2要求的艾滋病实验室。要求的艾滋病实验室。实验室生物安全及评估HIV相关检测的生物安全级别（三）HIV3636HIV检测质量控制及报告nHIVHIV检测实验室的类型检测实验室的类型 （一）艾滋病检测确证实验室（一）艾滋病检测确证实验室 1、艾滋病确证中心实验室、艾滋病确证中心实验室 2、艾滋病确证实验室、艾滋病确证实验室 （二）艾滋病检测筛查实验室（二）艾滋病检测筛查实验室 1、艾滋病筛查中心实验室、艾滋病筛查中心实验室 2、艾滋病筛查实验室、艾滋病筛查实验室 3、艾滋病检测点、艾滋病检测点HIV检测质量控制及报告HIV检测实验室的类型3737HIV检测质量控制及报告nHIVHIV筛查实验室检测方法筛查实验室检测方法 1、酶联免疫试验（、酶联免疫试验（ELISA）2、快速检测（、快速检测（RT）及其它检测：包括明）及其它检测：包括明胶颗粒凝集试验（胶颗粒凝集试验（PA）、斑点）、斑点EIA或称斑或称斑点点ELISA、斑点免疫胶体金（或胶体硒）、斑点免疫胶体金（或胶体硒）快速试验、艾滋病唾液检测卡、家庭快速试验、艾滋病唾液检测卡、家庭HIV检检测。测。3、尿液、尿液HIV抗体检测抗体检测HIV检测质量控制及报告HIV筛查实验室检测方法3838HIV检测质量控制及报告nHIVHIV确证实验室检测方法确证实验室检测方法 包括免疫印迹试验（包括免疫印迹试验（WB）、条带免疫试验）、条带免疫试验（LIATEK HIV）、放射免疫沉淀试验）、放射免疫沉淀试验（RIPA）及免疫荧光试验（）及免疫荧光试验（IFA）。）。国内常用的确认试验方法是国内常用的确认试验方法是WB。HIV检测质量控制及报告HIV确证实验室检测方法3939HIV检测质量控制及报告nHIVHIV检测其他辅助方法检测其他辅助方法 1 1、HIVHIV核酸定性检测核酸定性检测 2 2、HIV RNAHIV RNA定量检测定量检测 3 3、CD4CD4+和和CD8 CD8+T T淋巴细胞检测淋巴细胞检测 4 4、HIV P24HIV P24抗原检测抗原检测 5 5、HIV RNAHIV RNA定量测定：包括逆转录定量测定：包括逆转录PCRPCR试试验（验（RT-PCRRT-PCR）、核酸序列扩增试验）、核酸序列扩增试验（NASBANASBA）、分支）、分支DNADNA杂交试验（杂交试验（bDNAbDNA）HIV检测质量控制及报告HIV检测其他辅助方法4040HIV检测质量控制及报告nHIVHIV实验室质量体系概述实验室质量体系概述 ISO9001 ISO9001定义为：在质量方面指挥和控制组定义为：在质量方面指挥和控制组 织的管理体系，它具备了保证产品质量的人织的管理体系，它具备了保证产品质量的人 力、物力，还要明确有关部门和人员的职责和力、物力，还要明确有关部门和人员的职责和 权力，以及规定完成任务所必须的各项程序和权力，以及规定完成任务所必须的各项程序和 活动。活动。HIV检测质量控制及报告HIV实验室质量体系概述 4141HIV检测质量控制及报告 行业标准行业标准:艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准 WS298-2008技术规范技术规范:全国艾滋病检测技术规范全国艾滋病检测技术规范 （2009年修订版）年修订版）HIV检测质量控制及报告 行业标准:4242HIV检测质量控制及报告n影响质量的七大因素：人机料法环信控影响质量的七大因素：人机料法环信控 1 1、人员：是指实验室负责人和血液检测技术人员。、人员：是指实验室负责人和血液检测技术人员。实验室负责人对实验室运行和行政管理全面负责，确保血液检实验室负责人对实验室运行和行政管理全面负责，确保血液检测量测量 血液检测人员需经过职业道德培训保证血液检测结果的真实性、血液检测人员需经过职业道德培训保证血液检测结果的真实性、可靠性和保密性可靠性和保密性 检测人员需接受血液检测岗位职责相关文件的培训和实践技能检测人员需接受血液检测岗位职责相关文件的培训和实践技能的培训，并有相应的培训记录；还必须经过签名和相关法律的培训；的培训，并有相应的培训记录；还必须经过签名和相关法律的培训；检测人员必须登记和保存签名并定期更新和存档；制定实验室全员会检测人员必须登记和保存签名并定期更新和存档；制定实验室全员会议制定议制定 有专人负责职业健康和安全卫生；有专人负责职业健康和安全卫生；实验室负责人和血液检测技术人员都应具有相应的学历要求；实验室负责人和血液检测技术人员都应具有相应的学历要求；新增的技术人员要经过满足岗位需求的培训和考核，合格后方能上岗。新增的技术人员要经过满足岗位需求的培训和考核，合格后方能上岗。HIV检测质量控制及报告影响质量的七大因素：人机料法环信控4343HIV检测质量控制及报告n影响质量的七大因素：人机料法环信控影响质量的七大因素：人机料法环信控 2 2、设备：、设备：设备的配置应能满足血液检测业务工作的需要并与其功能设备的配置应能满足血液检测业务工作的需要并与其功能 相适应相适应 设备在投入使用前或维修后均应确认设备在投入使用前或维修后均应确认 设备在使用时应有使用和维护记录设备在使用时应有使用和维护记录 大型关键设备应具有唯一性标识并明确维护校准周期，大型关键设备应具有唯一性标识并明确维护校准周期，档案应由人管理有使用维护和校准记录，停用或维修的设备也档案应由人管理有使用维护和校准记录，停用或维修的设备也 应有明显的标志应有明显的标志 关键设备在检测过程中有不间断电力供应和应急预案。关键设备在检测过程中有不间断电力供应和应急预案。使用的仪器应符合国家相关标准使用的仪器应符合国家相关标准 建立和实施仪器设备的评估、确认、维护、校准、和持建立和实施仪器设备的评估、确认、维护、校准、和持 续监控等管理制度，以保证仪器设备符合预期使用要求。续监控等管理制度，以保证仪器设备符合预期使用要求。HIV检测质量控制及报告影响质量的七大因素：人机料法环信控4444HIV检测质量控制及报告n影响质量的七大因素影响质量的七大因素：人机料法环信控人机料法环信控 3 3、物料：、物料：建立和实施血液检测试剂与材料管理程建立和实施血液检测试剂与材料管理程 序，包括试剂与材料的生产商和供应商的资质评估序，包括试剂与材料的生产商和供应商的资质评估 建立试剂与材料的评估、选购、确认、保建立试剂与材料的评估、选购、确认、保 存、使用、监控以及库存管理程序存、使用、监控以及库存管理程序 物料物料须是经国家食品药品监督管理局注册须是经国家食品药品监督管理局注册 批准、在有效期内的试剂，其中酶联免疫试剂应批批批准、在有效期内的试剂，其中酶联免疫试剂应批批 检合格。推荐使用临床质量评估敏感性和特异性高的检合格。推荐使用临床质量评估敏感性和特异性高的 试剂试剂 建立和实施试剂的确认和库存管理程序建立和实施试剂的确认和库存管理程序 HIV检测质量控制及报告影响质量的七大因素：人机料法环信控4545HIV检测质量控制及报告n影响质量的七大因素影响质量的七大因素：人机料法环信控人机料法环信控 4 4、方法：是指实验室的检查项目均应有相、方法：是指实验室的检查项目均应有相 适应的检测方法，这些检测方法必须符合相关适应的检测方法，这些检测方法必须符合相关 法律、法规和文件规定并在体系内受控。法律、法规和文件规定并在体系内受控。HIV检测质量控制及报告影响质量的七大因素：人机料法环信控 4646HIV检测质量控制及报告n影响质量的七大因素影响质量的七大因素：人机料法环信控人机料法环信控 5 5、环境：、环境：分区：清洁区、半污染区和污染区分开；实验分区：清洁区、半污染区和污染区分开；实验 区和工作区分开，实验室内禁止进食、饮水、化妆等区和工作区分开，实验室内禁止进食、饮水、化妆等 实验室温湿度要符合要求实验室温湿度要符合要求 具有具有BSL-2BSL-2级实验室应有的相应配备和要求。如级实验室应有的相应配备和要求。如 防蚊蝇、防水、具有密闭性、配备灭火器报警器、有冲防蚊蝇、防水、具有密闭性、配备灭火器报警器、有冲 淋设施和洗眼器和职业暴露相关的药品等。淋设施和洗眼器和职业暴露相关的药品等。具有国际通用的生物危害标识、危险级别标识、具有国际通用的生物危害标识、危险级别标识、授权人员方可进入标识等。授权人员方可进入标识等。HIV HIV实验室应有实验室应有HIVHIV检测相应资质标志。检测相应资质标志。HIV检测质量控制及报告影响质量的七大因素：人机料法环信控4747HIV检测质量控制及报告n影响质量的七大因素：人机料法环信控影响质量的七大因素：人机料法环信控 6 6、信息管理系统：、信息管理系统：建立和使用血液检测计算机信息管建立和使用血液检测计算机信息管 理系统，对从标本接收到检测报告发出整个血液检测过程实理系统，对从标本接收到检测报告发出整个血液检测过程实 行计算机管理程序行计算机管理程序严格控制非授权人员进入计算机系统，严格控制非授权人员进入计算机系统，非法查询、录入和更改数据或检测程序非法查询、录入和更改数据或检测程序血液检测计算机管血液检测计算机管 理软件供应商应具备国家规定资质理软件供应商应具备国家规定资质应建立和实施计算机管应建立和实施计算机管 理系统使用的风险分析、培训、确认和使用及使用后的评估理系统使用的风险分析、培训、确认和使用及使用后的评估 程序程序建立和实施发生意外事件的应急预案和恢复程序，确建立和实施发生意外事件的应急预案和恢复程序，确 保血液检测正常进行。保血液检测正常进行。HIV检测质量控制及报告影响质量的七大因素：人机料法环信控4848HIV检测质量控制及报告n影响质量的七大因素影响质量的七大因素：人机料法环信控人机料法环信控 7 7、受控：指从标本接收开始到报告的发放、受控：指从标本接收开始到报告的发放 整个过程受控，每一份标本都具有可溯源性，整个过程受控，每一份标本都具有可溯源性，确保所有血液检测可以追溯到相应标本采集、运确保所有血液检测可以追溯到相应标本采集、运送、接收、检测方法和过程、检测结果、检测报送、接收、检测方法和过程、检测结果、检测报告与追踪的整个过程。告与追踪的整个过程。HIV检测质量控制及报告影响质量的七大因素：人机料法环信控4949HIV检测质量控制及报告nHIVHIV检测过程管理检测过程管理 （一）标本的采集、保存和运送（一）标本的采集、保存和运送 1 1、采集：可采用血清、血浆、滤纸干血斑、唾液和、采集：可采用血清、血浆、滤纸干血斑、唾液和尿液样品。尿液样品。2 2、保存：、保存：用于抗体检测的血清或血浆样品，应用于抗体检测的血清或血浆样品，应存放于存放于-20-20以下，短期（以下，短期（1 1周）内进行检测的样品可存放周）内进行检测的样品可存放于于2-82-8。用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存于冻存于-20-20以下，进行病毒以下，进行病毒RNARNA检测的样品如需保存检测的样品如需保存3 3个个月以上应置于月以上应置于-80-80用于用于CD4+/CD8+TCD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样淋巴细胞测定的样品不能长期保存，样品采集时间超过品不能长期保存，样品采集时间超过48h48h则不可检测。则不可检测。HIV检测质量控制及报告HIV检测过程管理5050HIV检测质量控制及报告nHIVHIV检测过程管理检测过程管理 3 3、运送、运送：实验室间传递的样品应为血清或血浆，除特殊情况外一般不运送实验室间传递的样品应为血清或血浆，除特殊情况外一般不运送 全血。全血。应采用应采用WHOWHO提出的三级包装系统：第一层容器：装样品，要求防渗提出的三级包装系统：第一层容器：装样品，要求防渗 漏。样品应置于带盖的试管内；试管上应有明显的标记，标明样品的编漏。样品应置于带盖的试管内；试管上应有明显的标记，标明样品的编 号或受检者姓名、种类和采集时间。在试管的周围应垫有缓冲吸水材号或受检者姓名、种类和采集时间。在试管的周围应垫有缓冲吸水材 料，以免碰碎。料，以免碰碎。随样品应附有送检单，送检单应与样品分开放置。第二随样品应附有送检单，送检单应与样品分开放置。第二 层容器：要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层容器，可以装若干层容器：要求耐受性好、防渗漏、容纳并保护第一层容器，可以装若干 个第一层容器。将试管装入专用带盖的容器内，容器的材料要易于消毒个第一层容器。将试管装入专用带盖的容器内，容器的材料要易于消毒 处理。第三层容器：放在一个运输用外层包装内，应易于消毒。在第三处理。第三层容器：放在一个运输用外层包装内，应易于消毒。在第三 层容器外面要贴标签（数量，收、发件人）。层容器外面要贴标签（数量，收、发件人）。血清和血浆样品应在血清和血浆样品应在2-82-8条件下由专人运送。用于条件下由专人运送。用于CD4+/CD8+TCD4+/CD8+T淋淋 巴细胞测定的样品应在室温下运送。每一包装的体积以不超过巴细胞测定的样品应在室温下运送。每一包装的体积以不超过50ml50ml为宜。为宜。运送感染性材料必须有记录。如分离血浆仍有困难，可直接将抗运送感染性材料必须有记录。如分离血浆仍有困难，可直接将抗 凝血凝血-20-20以下冻存，采用冰壶冷藏运输，避免冻融。以下冻存，采用冰壶冷藏运输，避免冻融。HIV检测质量控制及报告HIV检测过程管理5151HIV检测质量控制及报告nHIVHIV检测过程管理检测过程管理 （二）室内质控（二）室内质控 1 1、实施室内质控应遵循的原则：、实施室内质控应遵循的原则：选择选择S/COS/CO值为值为1.5-41.5-4的弱阳性质控品的弱阳性质控品 常规精密性控制在常规精密性控制在CV20%CV2s2s范围的变化时，系统范围的变化时，系统 处于告警状态，应予注意，是否可以继续检测需要处于告警状态，应予注意，是否可以继续检测需要 进一步观察。进一步观察。2 2、出现下列情况时，应暂停检测查、出现下列情况时，应暂停检测查 找原因：出现一次找原因：出现一次3s3s范围的变化、连续两次出现范围的变化、连续两次出现 同一方向同一方向2s2s范围的变化、连续四次出现同一方向的范围的变化、连续四次出现同一方向的 1s 1s范围的变化、连续范围的变化、连续1010次结果都在次结果都在1s1s范围内，但落范围内，但落 在均值线的同一侧。在均值线的同一侧。HIV检测质量控制及报告HIV检测过程管理5555HIV检测质量控制及报告nH