第五章食品毒物的一般毒性作用课件

第五章食品毒物的一般毒性作用第五章食品毒物的一般毒性作用第五章 食品毒物的一般毒性作用生物工程教研室生物工程教研室 2009.82009.82024/7/142&1概述&2食品毒物的急性毒性&3蓄积毒性作用及其评价&4亚慢性和慢性毒性2024/7/1431概述一、一般毒性研究的特点和一、一般毒性研究的特点和发展展趋势食品毒理学是一食品毒理学是一门实验性、性、实践性科学践性科学 最最终目目标：证明食品中某种化学、生物或物理因素的毒性和危明食品中某种化学、生物或物理因素的毒性和危险性性 体内体内试验（in vivo testin vivo test）在）在实验动物模型（物模型（modelmodel）上）上进行行 体外体外试验（in vitro testin vitro test）在微生物、人工培养的）在微生物、人工培养的细胞或胞或组织或器官上或器官上进行行人体人体试验和流行病学和流行病学调查 2024/7/1441概述发展展趋势：动物用量少、物用量少、动物痛苦小、开物痛苦小、开发体外替代体外替代试验ECVAM(European Centre for the Validation of Alternative Methods)ICCVAM(the Interagency coordinating committee on the Validation of Alternative Methods)在在传统长期毒性期毒性试验中附加中附加额外或特殊毒性外或特殊毒性观测内容内容 2024/7/1451概述二、一般毒性的概念和分二、一般毒性的概念和分类一般毒性通常也称基一般毒性通常也称基础毒性毒性 包括：急性毒性包括：急性毒性 蓄蓄积毒性毒性 亚急性或急性或亚慢性毒性慢性毒性 慢性毒性慢性毒性 特殊毒性主要是指致癌作用、致突特殊毒性主要是指致癌作用、致突变作用、致畸和作用、致畸和遗传毒性等毒性等 2024/7/1461概述三、一般毒性三、一般毒性试验在食品安全性在食品安全性评价程序中的地位价程序中的地位 预备/准准备阶段：段：了解食品毒物的理化性了解食品毒物的理化性质、收集毒性研究、收集毒性研究资料料 第一第一阶段：急性毒性段：急性毒性试验(致死和非致死致死和非致死)第二第二阶段：段：亚急性或急性或亚慢性毒性慢性毒性试验（1 1个月喂养个月喂养试验）、代）、代谢试验、蓄、蓄积毒性、毒性、遗传毒性毒性试验、致畸、致畸试验 第三第三阶段：段：亚慢性毒性慢性毒性试验（3 36 6个月喂养个月喂养试验）、繁殖）、繁殖试验、代、代谢试验、蓄、蓄积毒性毒性第四第四阶段：慢性毒性段：慢性毒性试验（6 6个月至个月至终生生试验）、）、致癌致癌试验 2024/7/1472食品毒物的急性毒性一、急性毒性和急性毒性一、急性毒性和急性毒性试验的目的的目的二、急性毒性二、急性毒性试验三、急性毒性三、急性毒性评价价2024/7/148一、急性毒性和急性毒性试验的目的急性毒性急性毒性(acute toxicity)(acute toxicity)是指机体是指机体(人或人或试验动物物)一次接触或一次接触或2424小小时内多次接触内多次接触化学物化学物后在后在短期短期(最最长到到1414天天)内所内所发生的生的毒性效毒性效应。2024/7/149一、急性毒性和急性毒性试验的目的目的目的确定急性毒性确定急性毒性评价参数；价参数；探求化学毒物急性毒性的探求化学毒物急性毒性的剂量量反反应关系与中毒特征；关系与中毒特征；为亚慢性、慢性毒性作用慢性、慢性毒性作用试验的染毒的染毒剂量量设计提供参考依据；提供参考依据；为毒理学机制研究提供毒理学机制研究提供线索。索。2024/7/1410一、急性毒性和急性毒性一、急性毒性和急性毒性试验的目的的目的急性毒性急性毒性试验常用的毒性参数：常用的毒性参数：LD50/LC50 ATE或或ED50LD100/LC100 MLD(LD01)或或MLC(LC01)MTD(LD0)或或MTC(LC0)急性毒性急性毒性LOAEL急性毒性急性毒性NOAEL2024/7/1411二、急性毒性试验(一一)实验动物物 原原则：急急性性毒毒性性试验要要求求选择对化化学学毒毒物物的的代代谢和和毒毒效效应表表现与与人人的的反反应尽尽可可能能一一致的致的试验动物。物。动物易于物易于获得得品系品系纯化化价格价格较低和易于低和易于饲养等条件。养等条件。2024/7/1412二、急性毒性试验1 1试验动物的种属和品系物的种属和品系最好用两种种属的最好用两种种属的动物物啮齿类:小鼠、大鼠、豚鼠或家兔小鼠、大鼠、豚鼠或家兔非非啮齿类：狗或猴。：狗或猴。急急性性皮皮肤肤毒毒性性试验可可选用用成成年年大大鼠鼠、豚豚鼠鼠或或家家兔兔，优先先考考虑白白色色家家兔兔。而而急急性性吸吸入入毒性毒性试验和和经口急性毒性口急性毒性试验则优先考先考虑大鼠。大鼠。2024/7/1413二、急性毒性试验试验动物的年物的年龄和体重：和体重：通常要求通常要求选择刚成年成年动物物进行行试验，而且，而且须是未曾交配和受孕的是未曾交配和受孕的动物。例如：大鼠物。例如：大鼠180180240g240g、小鼠、小鼠181825g25g、家兔、家兔2 22.5kg2.5kg、豚鼠、豚鼠200200250g250g、狗、狗101015kg15kg。同一批同一批试验动物体重物体重变异范异范围不不应超超过该批批动物平均体重的物平均体重的2020。2024/7/1414二、急性毒性试验3.3.试验动物的性物的性别：一般要求一般要求为雌雄各半雌雄各半。如果着重如果着重观察受察受试物物对雄性雄性动物生殖功能的影响物生殖功能的影响应选用雄性用雄性动物物如果如果试验是是为致畸致畸试验则选雌性雌性动物物2024/7/1415二、急性毒性试验4.4.动物数量与随机分物数量与随机分组：小鼠小鼠 每每组不少于不少于1010只只大鼠大鼠 每每组6 68 8只只家兔、狗等大家兔、狗等大动物物 每每组4 46 6只只分分组原原则随机化原随机化原则5.禁食：禁食：经消化道染毒消化道染毒时，要求，要求试验前前对动物禁食物禁食大鼠、大型大鼠、大型动物物隔夜禁食；隔夜禁食；小鼠禁食小鼠禁食4h2024/7/1416二、急性毒性试验染毒后染毒后继续禁食禁食24h，但在禁食，但在禁食时要保障要保障饮水。水。6.实验动物的物的预检：选择健康健康动物物12周的周的检疫期疫期动物物购来后适来后适应饲料和料和环境境3 d5 d2024/7/1417二、急性毒性试验 （二）（二）试验动物的物的饲养养环境境恒定的温度：恒定的温度：223湿度：湿度：3070%照度：昼夜各半照度：昼夜各半饲料合格、料合格、饮水合格、水合格、垫料合格料合格2024/7/1418二、急性毒性试验（三）染毒途径的（三）染毒途径的选择:模模拟人在生活和生人在生活和生产环境中境中实际接触受接触受试物的途径和方式物的途径和方式；有利于不同化学物之有利于不同化学物之间急性毒性大急性毒性大小的比小的比较；受受试物的性物的性质和用途；各种受和用途；各种受试物毒性物毒性评价程序的要求等。价程序的要求等。最常用的染毒途径最常用的染毒途径为经口、口、经呼吸道、呼吸道、经皮及注射途径。皮及注射途径。2024/7/1419二、急性毒性试验经口口(胃胃肠道道)接触接触:灌胃灌胃:小鼠小鼠0.2 0.7ml/20g 大鼠大鼠14ml/200g，不超，不超过5ml/只只 家兔不超家兔不超过10ml/2kg 狗不超狗不超过50ml/10kg 吞咽胶囊吞咽胶囊:经呼吸道接触呼吸道接触:静式吸入静式吸入 动式吸入式吸入 经皮肤接触皮肤接触:注射途径接触注射途径接触:2024/7/1420 对各个毒理学各个毒理学试验应该用同一种、同一批号受用同一种、同一批号受试物物 受受试物成分和配方必物成分和配方必须固定固定 如是异构体混合物，异构体比例必如是异构体混合物，异构体比例必须固定固定 活性成分的百分含量和可活性成分的百分含量和可检测的的杂质的的浓度也度也应固定固定 受受试物在物在贮存期内存期内稳定性和在定性和在饲料中的料中的稳定性必定性必须进行研究并行研究并报告告 受受试物物应一次一次备齐全部全部实验的用量的用量（四）受（四）受试样品品二、急性毒性试验2024/7/1421二、急性毒性试验（五）染毒（五）染毒剂量与分量与分组:1查阅文献文献了了解解化化学学毒毒物物的的结构构式式、分分子子量量、常常温温常常压下下的的状状态、熔熔点点、沸沸点点、密密度度、挥发度度、蒸气蒸气压、水溶性和脂溶性等理化特性，生、水溶性和脂溶性等理化特性，生产批号及批号及纯度，度，杂质成分与含量等。成分与含量等。确确定定使使用用哪哪一一种种计算算方方法法求求LD50，然然后后再再设计剂量量分分组。LD50的的计算算方方法法常常用用寇寇氏氏法、概率法、概率单位法、霍思法等。位法、霍思法等。找出与受找出与受试物物结构与理化性构与理化性质近似的化学物的毒性近似的化学物的毒性资料，并以文献料，并以文献资料中相同的料中相同的动物种系和相同接触途径所物种系和相同接触途径所测得的得的LD50(LC50)值作作为受受试物的物的预期毒性中期毒性中值。2024/7/1422二、急性毒性试验（五）染毒（五）染毒剂量与分量与分组:2预试验 设定定以以此此预期期值作作为待待测化化学学物物的的中中间剂量量组，并并在在该剂量量的的上上下下各各设计l一一2个个剂量量组作作为预试验剂量。量。根据确定的根据确定的剂量量组进行染毒。行染毒。根据根据预试验的死亡的死亡资料确定料确定组距。距。可根据以下公式可根据以下公式计算出算出剂量分量分组：i=(lgLD90-lgLD10)(n-1)或：或：i=(lgLD100-lgLD0)(n-1)式中式中i为组距距(相相邻的两个的两个剂量量组对数数剂量之差量之差)；n为设计的的剂量量组数。数。2024/7/1423二、急性毒性试验（五）染毒五）染毒剂量与分量与分组:3正式正式试验;一般来一般来说、根据、根据试验设计所所选用的用的LD50计算方法来确定算方法来确定组数。例如概率数。例如概率单位法、寇氏法一位法、寇氏法一般般设510个个剂量量组；霍恩法固定；霍恩法固定设4个个剂量量组。求得。求得i值后以最低后以最低剂量量组(LD0或或LD10)的的对数数剂量加上一个量加上一个i值，即是第二个，即是第二个剂量量组的的对数数剂量，依此量，依此类推直至最高推直至最高剂量量组，查各各自的反自的反对数即得出各数即得出各组剂量的真量的真实值。1 2 3 4 5 6 LgLD0 LgLD0+i LgLD0+2i LgLD0+3i LgLD0+4i 2024/7/1424二、急性毒性试验（六）（六）试验周期与毒效周期与毒效应观察察1.1.中毒症状中毒症状2024/7/1425二、急性毒性试验（六）（六）试验周期与毒效周期与毒效应观察察:2.2.体重体重变化化体重可以反映体重可以反映动物中毒后的整体物中毒后的整体变化。化。体重改体重改变的原因很多，因此的原因很多，因此对存活存活动物尤其是物尤其是对低于低于LDLD5050剂量量组的存活的存活动物物应在在观察期察期1414天内称量其体重的天内称量其体重的变化化以便了解受以便了解受试物引起毒效物引起毒效应的持的持续时间。2024/7/1426二、急性毒性试验（六）（六）试验周期与毒效周期与毒效应观察察:3.3.病理病理检查及其他指及其他指标:对死亡的死亡的动物均物均应及及时进行大体解剖和病理行大体解剖和病理组织学学检查；对存活存活动物在物在观察期察期结束束时进行大体病理行大体病理检查，必要，必要时做做组织病理学病理学检查；其他指其他指标：体温、心：体温、心电图、脑电图或或进行某些生化指行某些生化指标测定等。定等。2024/7/1427二、急性毒性试验（六）（六）试验周期与毒效周期与毒效应观察察4.4.死亡和死亡死亡和死亡时间重点重点观察和察和记录每只每只动物死亡的物死亡的时间，特，特别是最早出是最早出现死亡的死亡的时间以及各个以及各个剂量量组动物的死亡数。物的死亡数。分析中毒死亡分析中毒死亡时间的的规律具有一定意律具有一定意义，可，可为深入研究化学物的毒作用机制深入研究化学物的毒作用机制提供参考。提供参考。2024/7/1428毒理学毒理学试验设计的的统计学要求学要求 随机、重复、随机、重复、对照原照原则 对常常规毒理学毒理学试验资料的料的统计学方法学方法 计量量资料：一般用料：一般用t t检验 记数数资料：卡方料：卡方检验（七）毒理学（七）毒理学试验的的统计学学二、急性毒性试验2024/7/14291 1 处理理组与与对照照组比比较差差别有无有无显著性著性 2 2 有无有无剂量量-反反应关系关系3 3 是否伴有其他相关参数的改是否伴有其他相关参数的改变4 4 是否在是否在“正常正常”值范范围 （八）（八）实验结果的判断果的判断二、急性毒性试验2024/7/1430二、急性毒性试验(九九)经典急性毒性典急性毒性试验的局限性的局限性1.1.消耗的消耗的动物量大物量大2.2.获得的信息有限得的信息有限3.3.测得的得的LDLD5050仅仅是一个近似是一个近似值4.4.在安全性在安全性评价中价中仅评价价动物死亡和物死亡和简单的症状的症状观察是不察是不够的，更需要的是的，更需要的是生理学、血液学及其它化生理学、血液学及其它化验检查所提供的深入所提供的深入细致的毒性信息。致的毒性信息。2024/7/1431三、急性毒性评价外源化学物急性毒性分级（外源化学物急性毒性分级（WHO）毒性分毒性分级级大鼠一次经口大鼠一次经口LD50 (mg/kg)6只大鼠吸入只大鼠吸入4小小时，死亡时，死亡24只的只的浓度浓度(ppm)兔经皮兔经皮LD50(mg/kg)对人可能致死的估计量对人可能致死的估计量g/kg总量总量(g/60kg)剧毒剧毒11051510002024/7/1432三、急性毒性评价我国食品毒理急性毒性分级法我国食品毒理急性毒性分级法(1994)急性毒性分级急性毒性分级大鼠经口大鼠经口LD50(mg/kg)大致相当于大致相当于70kg人的致死量人的致死量6级级(极毒极毒)1稍尝稍尝,150001050克克2024/7/1433一、一、基本概念基本概念二、二、蓄蓄积毒性毒性试验方法及其方法及其评价价 3 蓄蓄积积毒性毒性2024/7/1434 当化学毒物反复多次当化学毒物反复多次进入机体，而且吸收速度超入机体，而且吸收速度超过代代谢转化与排泄的速度化与排泄的速度时，化学毒物化学毒物就有可能在机体内逐就有可能在机体内逐渐增加并增加并贮留，留，这种种现象称象称为化学毒物的化学毒物的蓄蓄积作用作用(accumulation)(accumulation)。大多数蓄大多数蓄积作用会作用会产生蓄生蓄积毒性。毒性。一、基本概念一、基本概念2024/7/1435 蓄蓄积作用作用实际上有二个含上有二个含义：物物质蓄蓄积(material accumulation)(material accumulation)功能蓄功能蓄积(functional accumulation)(functional accumulation)一、基本概念一、基本概念2024/7/1436二、蓄二、蓄积毒性毒性试验方法及其方法及其评价价化学毒物的化学毒物的蓄蓄积作用是作用是发生慢性中毒的物生慢性中毒的物质基基础蓄蓄积毒性毒性试验目的：求出蓄目的：求出蓄积系数系数K K，了解化学毒物蓄，了解化学毒物蓄积毒性的毒性的强弱弱2024/7/1437(一一)蓄蓄积系数法系数法 (accumulation coefficient)(accumulation coefficient)多多次次染染毒毒使使半半数数动物物出出现效效应(或或死死亡亡)的的累累积剂量量EDED5050(n)(n)与与一一次次染染毒毒使使半半数数动物出物出现相同效相同效应(或死亡或死亡)的的剂量量EDED5050(1)(1)的比的比值，即：，即：K KEDED5050(n)/ED(n)/ED5050(1)(1)K KLDLD5050(n)/LD(n)/LD5050(1)(1)二、蓄二、蓄积毒性毒性试验方法及其方法及其评价价2024/7/1438 1 1固定固定剂量法：量法：先求出先求出LD50均分均分实验动物两物两组（染毒（染毒组和和对照照组）雌雄各半。每日以固定）雌雄各半。每日以固定剂量（量（120l5LD50）、）、定定时和相同途径染毒和相同途径染毒观察察记录每每组动物死亡数。物死亡数。当当试验组累累积发生一半生一半动物死亡即可物死亡即可终止止试验。此。此时，计算算LD50(n)，依公式，依公式计算算K值，进行行评价。价。但若接触但若接触剂量已累量已累积达到达到5个个LD50剂量，也可量，也可终止止试验。二、蓄二、蓄积毒性毒性试验方法及其方法及其评价价2024/7/1439 2 2定期定期递增增剂量法：量法：在在在在试验试验期期期期间间，当，当，当，当动动物累物累物累物累积积死亡一半死亡一半死亡一半死亡一半时时即可即可即可即可终终止止止止试验试验，计计算算算算K K K K值进值进行行行行评评价。一般来价。一般来价。一般来价。一般来说说，在，在，在，在试试验验第第第第2l2l2l2l天也可天也可天也可天也可结结束束束束试验试验，其累，其累，其累，其累积剂积剂量已达量已达量已达量已达5.26LD5.26LD5.26LD5.26LD50505050，即，即，即，即K K K K5 5 5 5。二、蓄二、蓄积毒性毒性试验方法及其方法及其评价价2024/7/14403 320d20d试验法：法：将将动物物随随机机分分为阴阴性性对照照组和和1/20 1/20 LDLD5050、l/10 l/10 LDLD5050、1/5 1/5 LDLD5050和和1/2 1/2 LDLD5050四四个个剂量量组，每每组1010只，雌雄各半。每日染毒一次，只，雌雄各半。每日染毒一次，连续染毒染毒2020天。天。结果果评价价：各各剂量量组均均无无死死亡亡，即即为蓄蓄积性性不不明明显；如如仅1/2LD1/2LD5050剂量量组有有死死亡亡，则为弱弱蓄蓄积性性；如如1/20LD1/20LD5050剂量量组无无死死亡亡，其其他他各各组间死死亡亡数数有有剂量量反反应关关系系时，则为中中等等蓄蓄积性；性；如如1/20LD1/20LD5050剂量量组有死亡，且有有死亡，且有剂量反量反应关系，关系，则为强蓄蓄积性。性。二、蓄二、蓄积毒性毒性试验方法及其方法及其评价价2024/7/1441(二二)生物半衰期法：生物半衰期法：(biological half-time，t1/2)t t1/21/2是指是指进入机体的外来化学物入机体的外来化学物质被消除一半所需要的被消除一半所需要的时间。t t1/21/2 短，从机体消除快短，从机体消除快 一般，在等一般，在等间距、等距、等剂量染毒的条件下，化学物在体内量染毒的条件下，化学物在体内经5 56 6个个t t1/21/2即可达到蓄即可达到蓄积极限，此极限，此时理理论蓄蓄积量量为极限极限值的的96.996.998.498.4。此后。此后继续染毒蓄染毒蓄积量也基本上不再增加。量也基本上不再增加。蓄蓄积极限量每日吸收量极限量每日吸收量tt1/21/21.441.44二、蓄二、蓄积毒性毒性试验方法及其方法及其评价价2024/7/1442二、蓄积毒性试验方法及其评价（三）蓄（三）蓄积率率测定法定法 分蓄分蓄积组和和对照照组，每，每组6070只。蓄只。蓄积组动物每次按一定物每次按一定剂量量(低于最小致死量低于最小致死量)按按同一同一给毒途径毒途径预先先给受受试物，物，经过一定一定时间之后，按常之后，按常规方法方法测LD50，计算算:蓄蓄积率率=（对照照组LD50-蓄蓄积组LD50）/蓄蓄积组预给受受试物的物的总剂量量 100%在相同在相同时间及及剂量条件下，蓄量条件下，蓄积率越大率越大则表示表示该物物质在体内的蓄在体内的蓄积作用越作用越强，反之，反之则越弱。越弱。2024/7/1443一一 亚慢性毒性作用：慢性毒性作用：亚慢性毒性的概念慢性毒性的概念 亚慢性毒性慢性毒性试验的目的的目的 亚慢性毒性慢性毒性试验的的设计 二二 慢性毒性作用：慢性毒性作用：慢性毒性的概念慢性毒性的概念 慢性毒性慢性毒性试验的目的的目的 慢性毒性慢性毒性试验的的设计 4 亚慢性和慢性毒性试验2024/7/1444(一一)概念：概念：亚慢性毒性慢性毒性(subchronic toxicity)(subchronic toxicity)是指人或是指人或实验动物物连续多日多日(通常通常1 13 3个月个月)重复接触外源重复接触外源化学物所引起的毒性效化学物所引起的毒性效应。慢性毒性慢性毒性(chronic toxicity)(chronic toxicity)是指人或是指人或实验动物物长期期(甚至甚至终生生)反复接触低反复接触低剂量的化学毒物所量的化学毒物所产生的毒性效生的毒性效应。一、一、亚慢性和慢性毒性慢性和慢性毒性试验的概念、目的的概念、目的2024/7/1445（二）（二）试验目的：目的：1.1.确定受确定受试物物亚慢性和慢性毒性的效慢性和慢性毒性的效应谱；2.2.研究受研究受试物物亚慢性和慢性毒作用的靶器官；慢性和慢性毒作用的靶器官；3.3.研究受研究受试物物亚慢性和慢性毒性慢性和慢性毒性剂量量反反应(效效应)关系，确定关系，确定 LOAELLOAEL和和NOAEL,NOAEL,提出此受提出此受试物的安全限量参考物的安全限量参考值;一、一、亚慢性和慢性毒性慢性和慢性毒性试验的概念、目的的概念、目的2024/7/1446一、一、亚慢性和慢性毒性慢性和慢性毒性试验的概念、目的的概念、目的（二）（二）试验目的：目的：4.4.研究受研究受试物物亚慢性和慢性毒性慢性和慢性毒性损害的可逆性害的可逆性;5.5.亚慢性毒性慢性毒性试验为慢性毒性慢性毒性试验的的剂量量设计及及观察指察指标选择提供依据提供依据;6.6.确定不同确定不同动物物种物物种对受受试物物亚慢性和慢性毒效慢性和慢性毒效应的差异，的差异，为将毒性研究将毒性研究结果外推到人提果外推到人提供依据。供依据。2024/7/1447二、二、亚慢性和慢性毒性慢性和慢性毒性试验设计 （一）（一）实验动物物选择 亚慢性毒性慢性毒性试验 年年龄：大鼠：大鼠80100g 狗狗 812月月 小鼠小鼠1015g数量：小数量：小动物物20 大大动物物6性性别：雌雄各半：雌雄各半 慢性毒性慢性毒性试验年年龄：大鼠：大鼠 5070g 狗狗 8月月 小鼠小鼠 初断乳初断乳数量：小数量：小动物物40 大大动物物8性性别：雌雄各半：雌雄各半2024/7/1448（二）（二）实验动物染毒期限：物染毒期限：亚慢性毒性慢性毒性试验：30d30d、90d90d喂养喂养试验慢性毒性慢性毒性试验：工工业毒理学毒理学 6 6个月个月食品毒理学食品毒理学11年年环境毒理学境毒理学11年年致癌致癌试验 接近或等于接近或等于动物的物的预期寿命期寿命二、二、亚慢性和慢性毒性慢性和慢性毒性试验设计2024/7/1449二、二、亚慢性和慢性毒性慢性和慢性毒性试验设计（二）（二）实验动物染毒期限物染毒期限2024/7/1450 经消化道消化道经呼吸道呼吸道经皮肤皮肤二、二、亚慢性和慢性毒性慢性和慢性毒性试验设计（三）（三）实验动物染毒方式物染毒方式2024/7/1451亚慢性毒性的慢性毒性的剂量量选择阴性阴性对照照组低低剂量量组中中剂量量组高高剂量量组 急性毒性的急性毒性的阈剂量量 1/201/5 LD50组距：距：310倍，最低不小于倍，最低不小于2倍倍慢性毒性的慢性毒性的剂量量选择阴性阴性对照照组低低剂量量组中中剂量量组高高剂量量组 亚慢性慢性阈剂量或其量或其1/51/2 1/10 LD50组距：距：25倍，最低不小于倍，最低不小于2倍倍二、二、亚慢性和慢性毒性慢性和慢性毒性试验设计（四）（四）试验分分组和和剂量量设计2024/7/1452（五）（五）观察指察指标二、二、亚慢性和慢性毒性慢性和慢性毒性试验设计2024/7/1453 1.1.一般一般综合性合性观察指察指标：外外观体征、行体征、行为活活动、体重、食物利用率、中毒症状、体重、食物利用率、中毒症状2.2.生理生化指生理生化指标：肝、肝、肾、血、代、血、代谢产物物3.3.病理学病理学检查：（1 1）病理解剖病理解剖二、二、亚慢性和慢性毒性慢性和慢性毒性试验设计（五）（五）观察指察指标2024/7/1454二、二、亚慢性和慢性毒性慢性和慢性毒性试验设计（2 2）脏器湿重、器湿重、脏器系数（器系数（脏/体比体比值 ）（如肝（如肝/体比，即体比，即(全肝湿重全肝湿重/体重体重)100 100）（3 3）病理学病理学检查4.4.特异性指特异性指标：5.5.检测指指标的的时间6.6.恢复期恢复期观察察（五）（五）观察指察指标2024/7/1455二、二、亚慢性和慢性毒性慢性和慢性毒性试验设计2024/7/1456谢谢观赏谢谢观赏