灭菌和无菌制剂培训课件

灭菌和无菌制菌和无菌制剂第二节第二节 注射剂注射剂一、概述一、概述 注注射射剂剂(Injection)(Injection)俗俗称称针针剂剂，系系指指药药物物制制成成的的供供注注入入机机体体内内的的一一种种制制剂剂.包包括括灭灭菌菌或或无无菌菌溶溶液液、乳乳状状液液和和混混悬悬液液以以及及供供临临用用前前配配成成溶溶液液或或混混悬悬液液的的无菌粉末无菌粉末.2灭菌和无菌制剂（一）注射剂的分类与给药途径（一）注射剂的分类与给药途径(1)(1)溶液型注射剂溶液型注射剂 对对于于易易溶溶于于水水（或或油油）而而且且在在水水（或或油油）溶溶液液中中稳稳定定的的药药物物，则则制制成成溶溶液液型型注注射射剂剂，氯氯化化钠钠注射液，葡萄糖注射液等注射液，葡萄糖注射液等.(2)(2)混悬型注射剂混悬型注射剂 水难溶性药物或注射后要求水难溶性药物或注射后要求延长药效作用的药物，可制成延长药效作用的药物，可制成水或油的混悬液，如醋酸可的水或油的混悬液，如醋酸可的松注射液、喜树碱静脉注射液松注射液、喜树碱静脉注射液.这类注射剂一般仅供肌内注射这类注射剂一般仅供肌内注射.1.1.注射剂的分类注射剂的分类3灭菌和无菌制剂(3)(3)乳剂型注射剂乳剂型注射剂 水水不不溶溶性性液液体体药药物物，根根据据医医疗疗需需要要可可以以制制成成乳乳剂剂型型注注射射剂剂，例例如如胶胶丁丁钙钙注注射射液液和和静静脉脉营营养养脂脂肪肪乳注射剂等乳注射剂等.(4)(4)注射用无菌粉末注射用无菌粉末 注注射射用用无无菌菌粉粉剂剂亦亦称称粉粉针针，是是指指采采用用无无菌菌操操作作法法或或冻冻干干技技术术制制成成的的注注射射用用无无菌菌粉粉末末或或块块状状制制剂剂，制制剂剂需需用用用用适适当当的的溶溶剂剂溶溶解解或或使使其其混混悬悬而而应应用用.例例如如遇遇水水不不稳稳定定的的药药物物青青霉霉素素，-糜糜蛋蛋白白酶酶等等的的粉针剂粉针剂.BenzylpenicillinG4灭菌和无菌制剂2.2.注射剂的给药途径注射剂的给药途径(1)(1)皮内注射皮内注射 intradermal(ID)routeintradermal(ID)route 皮内注射系皮内注射系注于表皮和真皮之间注于表皮和真皮之间，一次，一次注射量在注射量在0.2ml0.2ml以下，常用于以下，常用于过敏性试验过敏性试验或或疾病诊断疾病诊断，如青霉素皮试液和旧结核菌素，如青霉素皮试液和旧结核菌素稀释液稀释液.(2)(2)皮下注射皮下注射 subcutaneous(SC)routesubcutaneous(SC)route 注射于注射于真皮和肌内之间的松软组织内真皮和肌内之间的松软组织内，注射，注射剂量通常为剂量通常为1 12ml2ml，皮下注射剂主要是水溶，皮下注射剂主要是水溶液，药物吸收速度稍慢液，药物吸收速度稍慢.由于人体皮下感觉由于人体皮下感觉比肌肉敏感；故具有刺激性的药物混悬液一比肌肉敏感；故具有刺激性的药物混悬液一般不作皮下注射般不作皮下注射.5灭菌和无菌制剂(3)(3)肌内注射肌内注射 intramuscular(IM)routeintramuscular(IM)route 注射注射肌肉组织中肌肉组织中，一次剂量一般在，一次剂量一般在5ml5ml以下以下，除，除水溶液外，油溶液、混悬液、乳浊液均可作肌水溶液外，油溶液、混悬液、乳浊液均可作肌内注射内注射.(4)(4)静脉注射静脉注射 intravenous(IV)routeintravenous(IV)route 静脉注射分静脉注射分静脉推注静脉推注和和静脉滴注静脉滴注，前者用量小，前者用量小，一般一般5 550ml50ml，后者用量大，多至数千，后者用量大，多至数千ml.ml.静脉注静脉注射射药效最快药效最快，常作，常作急救、补充体液和供营养之用急救、补充体液和供营养之用，多为水溶液多为水溶液.平均直径平均直径1 1mm的乳浊液，可作静脉的乳浊液，可作静脉注射注射.油溶液和一般混悬型注射液不能作静脉注射油溶液和一般混悬型注射液不能作静脉注射.凡能导致红血球溶解或使蛋白质沉淀的药物，均凡能导致红血球溶解或使蛋白质沉淀的药物，均不宜静脉给药不宜静脉给药.6灭菌和无菌制剂(5)(5)脊椎腔注射脊椎腔注射 vertebro caval routevertebro caval route 注入注入脊椎四周蜘蛛膜下腔内脊椎四周蜘蛛膜下腔内.由于神经组织比较由于神经组织比较敏感，脊髓液循环较慢，渗透压的紊乱，能很快敏感，脊髓液循环较慢，渗透压的紊乱，能很快引起头痛和呕吐，所以脊椎腔注射产品质量应严引起头痛和呕吐，所以脊椎腔注射产品质量应严格控制，其渗透压必须与脊椎液相等，注射体积格控制，其渗透压必须与脊椎液相等，注射体积在在10ml10ml以下，以下，pHpH值在值在5.05.08.08.0之间，注入的速度之间，注入的速度应缓慢应缓慢.（6 6）动脉内注射动脉内注射（intra-arterial routeintra-arterial route)注入靶区动脉末端，如诊断用动脉造影剂、肝动注入靶区动脉末端，如诊断用动脉造影剂、肝动脉栓塞剂等脉栓塞剂等.（7 7）其他其他 包括包括心内注射、关节内注射、滑膜腔注射、穴位心内注射、关节内注射、滑膜腔注射、穴位注射以及鞘内注射注射以及鞘内注射等等.7灭菌和无菌制剂皮内注射皮内注射皮下注射皮下注射动脉注射动脉注射静脉注射静脉注射8灭菌和无菌制剂（二）注射剂的特点和一般质量要求（二）注射剂的特点和一般质量要求 (1)(1)药效迅速，作用可靠药效迅速，作用可靠 药药剂剂直直接接注注入入人人体体组组织织或或血血管管，所所以以吸吸收收快快，作作用用迅迅速速.特特别别是是静静脉脉注注射射，不不需需经经过过吸吸收收阶阶段段，适适用用于于抢抢救救危危重重病病人人之之用用.注注射射剂剂由由于于不不经经过过胃胃肠肠道道，故故不不受受消消化化液液及及食食物物的的影影响响，作用可靠，易于控制作用可靠，易于控制.1.1.注射剂的特点注射剂的特点9灭菌和无菌制剂 (2)(2)适用于不能口服给药的患者适用于不能口服给药的患者 如如不不能能吞吞咽咽或或昏昏迷迷的的患患者者，可可以以注注射给药射给药.(3)(3)适用于不宜口服的药物适用于不宜口服的药物 某某些些药药物物由由于于本本身身的的性性质质不不易易被被胃胃肠肠道道吸吸收收，或或具具有有刺刺激激性性，或或易易被被消消化化酶酶破破坏坏等等，可可制制成成注注射射剂剂应应用用.如如青青霉霉素素或或胰胰岛岛素素可可被被消消化化液液破破坏坏，链链霉霉素素口口服服不不易易吸吸收收.所所以以这这些些药药物物只只能能作作成成注注射射剂剂，才才能能发发挥挥它它应应有的疗效有的疗效.10灭菌和无菌制剂(4)(4)发挥局部定位作用发挥局部定位作用 局部麻醉药可以产生局部定位作用，局部麻醉药可以产生局部定位作用，如牙科和麻醉科用的局麻药等如牙科和麻醉科用的局麻药等.(5)(5)注射给药不方便且注射时疼痛注射给药不方便且注射时疼痛.(6)(6)制造过程复杂，生产费用较大，价制造过程复杂，生产费用较大，价格较高格较高.11灭菌和无菌制剂2.2.注射剂的质量要求注射剂的质量要求 (1)(1)无菌无菌 注注射射剂剂成成品品中中不不应应含含有有任任何何活活的的微微生生物物和和芽芽孢孢.不不管管用用什什么么方方法法制制备备，都都必必须须达达到药典无菌检查的要求到药典无菌检查的要求.(2)(2)无热原无热原 无无热热原原是是注注射射剂剂的的重重要要质质量量指指标标，特特别别是是用用大大量量的的，供供静静脉脉注注射射及及脊脊椎椎腔腔注注射射的的药药物物制制剂剂，均均需需进进行行热热原原检检查查，合合格格后后方能使用方能使用.12灭菌和无菌制剂(3)(3)澄明度澄明度 注注射射溶溶液液要要在在规规定定条条件件下下检检查查，不不得得有有肉肉眼眼可可见见的的混混浊浊或或异异物物.鉴鉴于于微微粒粒引引入入人人体体所所造成的危害，目前对澄明度的要求更严造成的危害，目前对澄明度的要求更严.(4)(4)安全性安全性 注注射射剂剂不不能能引引起起对对组组织织刺刺激激或或发发生生毒毒性性反反应应，特特别别是是非非水水溶溶剂剂及及一一些些附附加加剂剂，必必须须经过必要的动物实验，确保使用安全经过必要的动物实验，确保使用安全.13灭菌和无菌制剂(5)(5)渗透压渗透压 注注射射剂剂要要有有一一定定的的渗渗透透压压，其其渗渗透透压压要要求求与与血血浆浆的的渗渗透透压压相相等等或或接接近近.供供静静脉脉注注射的大剂量注射剂还应具有等张性射的大剂量注射剂还应具有等张性.(6)pH(6)pH 注射剂的注射剂的pHpH要求与血液相等或接近，血要求与血液相等或接近，血液液pH7.4pH7.4，注射剂一般控制在，注射剂一般控制在4 49 9的范围内的范围内.14灭菌和无菌制剂(7)(7)稳定性稳定性 注注射射剂剂多多系系水水溶溶液液，而而且且从从制制造造到到使使用用需需要要经经过过一一段段时时间间，所所以以稳稳定定性性问问题题比比其其它它剂剂型型突突出出，故故要要求求注注射射剂剂具具有有必必要要的的物物理理稳稳定定性性和和化化学学稳稳定定性性，确确保保产产品品在在贮贮存期内安全有效存期内安全有效.(8)(8)降压物质降压物质 有些注射液，如复方氨基酸注射液，其有些注射液，如复方氨基酸注射液，其降压物质必须符合规定，以保证用药安全降压物质必须符合规定，以保证用药安全.15灭菌和无菌制剂二、注射剂的处方组成二、注射剂的处方组成注射液用药物原料注射液用药物原料注射用溶剂注射用溶剂注射用附加剂注射用附加剂注射剂的等渗与等张调节注射剂的等渗与等张调节16灭菌和无菌制剂（一）注射用原料（一）注射用原料必须符合必须符合药典或国家质量药品质量药典或国家质量药品质量标准标准.为防止不同批号间的质量差异，正式生为防止不同批号间的质量差异，正式生产之前需做小样试制，各项检验合格后产之前需做小样试制，各项检验合格后可大批生产可大批生产.17灭菌和无菌制剂（二）注射用溶剂（二）注射用溶剂 注射用水注射用水 注射用油注射用油 其他注射用非水溶剂其他注射用非水溶剂注射用溶剂注射用溶剂18灭菌和无菌制剂制药用水制药用水包括包括纯化水、注射用水与灭菌注纯化水、注射用水与灭菌注射用水射用水.纯化水纯化水用用原水经蒸馏法、离子交换法、反原水经蒸馏法、离子交换法、反渗透法或其它适宜方法制得的供药用的水渗透法或其它适宜方法制得的供药用的水，可作为配制普通药物制剂的溶剂或试验用水，可作为配制普通药物制剂的溶剂或试验用水，不得用于注射剂的配制不得用于注射剂的配制.注射用水注射用水为为纯化水经蒸馏所得的蒸馏水纯化水经蒸馏所得的蒸馏水，作为配制注射剂用的溶剂作为配制注射剂用的溶剂.灭菌注射用水灭菌注射用水为为灭菌后的注射用水灭菌后的注射用水，主要，主要用于注射用灭菌粉末的溶剂或注射液稀释剂用于注射用灭菌粉末的溶剂或注射液稀释剂.1.1.注射用水注射用水19灭菌和无菌制剂注射用水的质量要求注射用水的质量要求 注注射射用用水水的的质质量量要要求求在在中中国国药药典典20052005年年版中有严格规定版中有严格规定.l一一般般蒸蒸馏馏水水的的检检查查项项目目如如酸酸碱碱度度、氯氯化化物物、硫硫酸酸盐盐、钙钙盐盐、铵铵盐盐、二二氧氧化化碳碳、易易氧氧化化物物、不挥发物及重金属不挥发物及重金属等均应符合规定等均应符合规定.lpHpH为为5.05.07.0,7.0,氨含量不超过氨含量不超过2 2 ppmppm.l还必须通过热原检查还必须通过热原检查.l制备后制备后12h12h内使用内使用.20灭菌和无菌制剂2.2.注射用油注射用油注注射射用用油油的的质质量量要要求求，中中国国药药典典20002000年版二部附录有明确规定年版二部附录有明确规定:注射用油应无异臭，无酸败味；注射用油应无异臭，无酸败味；色泽不得深于黄色色泽不得深于黄色6 6号标准比色液；号标准比色液；在在1010时应保持澄明时应保持澄明.碘值为碘值为79-12879-128；皂化值为皂化值为185-200185-200；酸值不大于酸值不大于0.56.0.56.21灭菌和无菌制剂碘碘值值：油油中中不不饱饱和和键键的的多多少少，碘碘值值高高，则则不不饱饱和和键键多多，油油易易氧氧化化酸酸败败，不不适适合合注射用注射用.皂皂化化值值：油油中中游游离离脂脂肪肪酸酸和和结结合合成成酯酯的的脂脂肪肪酸酸总总量量多多少少，可可看看出出油油的的种种类类和和纯度纯度.酸酸值值：油油中中游游离离脂脂肪肪酸酸的的多多少少，酸酸值值高高质量差，也可以看出酸败的程度质量差，也可以看出酸败的程度.过过氧氧化化物物：油油脂脂氧氧化化过过程程中中，有有生生成成过过氧氧化化物物的的可可能能性性，故故最最好好对对注注射射用用油油中中的的.22灭菌和无菌制剂（1 1）植物油）植物油植物油植物油由各种脂肪酸的甘油酯所组成由各种脂肪酸的甘油酯所组成.注射用油应贮于避光密闭洁净容器中，避注射用油应贮于避光密闭洁净容器中，避免日光、空气接触，还可考虑加入没食子免日光、空气接触，还可考虑加入没食子酸丙酯、生育酚等抗氧剂酸丙酯、生育酚等抗氧剂.酸酸败败在在贮贮存存时时植植物物油油与与空空气气、光光线线接接触触，发发生生复复杂杂的的化化学学变变化化，产产生生低低分分子子分分解解产产物物：醛醛类类、酮酮类类和和脂脂肪肪酸酸,具具有有特特异异的的刺刺激激性臭味性臭味.矿物油和碳氢化合物不能被机体吸收，故矿物油和碳氢化合物不能被机体吸收，故不能被注射用不能被注射用.油性注射剂只能供肌肉注射油性注射剂只能供肌肉注射.23灭菌和无菌制剂（2 2）油酸乙酯）油酸乙酯 Aethylis oleasAethylis oleas需加抗氧剂需加抗氧剂（3 3）苯甲酸苄酯）苯甲酸苄酯AscabinAscabin不溶于水不溶于水溶于乙醇、脂肪油溶于乙醇、脂肪油助溶剂助溶剂24灭菌和无菌制剂3 3、其他注射用溶剂、其他注射用溶剂(1)(1)乙醇乙醇 本本品品与与水水、甘甘油油、挥挥发发油油等等可可任任意意混混合合.毒毒 性性：对对 小小 白白 鼠鼠 的的 LDLD5050静静 脉脉 注注 射射 为为1.973g/kg1.973g/kg，皮下注射为，皮下注射为8.285g/kg.8.285g/kg.采采用用乙乙醇醇为为注注射射用用溶溶剂剂时时浓浓度度可可高高达达50%50%，如氢化可的松注射液，如氢化可的松注射液.可可供供肌肌肉肉或或静静脉脉注注射射，但但浓浓度度超超过过10%10%肌肌内注射就有疼痛感内注射就有疼痛感.25灭菌和无菌制剂(2)(2)甘油甘油 本本品品与与水水或或醇醇可可任任意意混混合合.由由于于粘粘度度，刺刺激激性性等等原原因因不不能能单单独独作作为为注注射射用用溶溶剂剂，利利用用它它对对许许多多药药物物具具有有较较大大溶溶解解性性的的特特点点，常与乙醇、丙二醇、水等混合应用常与乙醇、丙二醇、水等混合应用.毒毒性性小小：对对小小白白鼠鼠的的LDLD5050皮皮下下注注射射为为10ml/kg10ml/kg，肌肌内内注注射射6ml/kg6ml/kg，大大白白鼠鼠静静脉脉注射注射LDLD5050为为5-6g/kg.5-6g/kg.常用浓度一般为常用浓度一般为1-50%.1-50%.26灭菌和无菌制剂(3)(3)丙二醇丙二醇1,1,2-2-丙丙二二醇醇，本本品品与与水水、乙乙醇醇、甘甘油油相相混混溶，能溶解多种挥发油溶，能溶解多种挥发油.在在注注射射剂剂中中，本本品品在在一一般般情情况况下下稳稳定定，其其特特点是溶解范围较广点是溶解范围较广.可可供供肌肌内内、静静脉脉等等给给药药.采采用用丙丙二二醇醇为为溶溶剂剂的有安定注射液的有安定注射液.毒毒性性：小小鼠鼠腹腹腔腔注注射射的的LDLD5050为为9.7g/kg9.7g/kg，皮皮下下注注射射LDLD5050为为18.5g/kg18.5g/kg，静静脉脉注注射射LDLD5050为为5 58g/kg.8g/kg.常用浓度为常用浓度为1%-50%.1%-50%.27灭菌和无菌制剂(4)(4)二二甲甲基基乙乙酰酰胺胺(Dimethylacetamide,(Dimethylacetamide,DMA)DMA)本本品品为为澄澄明明的的中中性性液液体体，能能与与水水、乙乙醇醇任任意意混混合合，如如足足叶叶噻噻吩吩甙甙注注射射液液含含有有二二甲基乙酰胺甲基乙酰胺.毒毒 性性：对对 小小 白白 鼠鼠 腹腹 腔腔 注注 射射 LDLD5050为为3.266g/kg3.266g/kg，但但连连续续使使用用时时，应应注注意意其其慢性毒性慢性毒性.常用浓度常用浓度0.01%.0.01%.28灭菌和无菌制剂（三）注射剂的附加剂（三）注射剂的附加剂 为为了了提提高高注注射射剂剂的的有有效效性性、安安全全性性与与稳稳定定性性，注注射射剂剂中中除除主主药药外外还还可可添添加加其其它它物物质质，这些物质统称为这些物质统称为“附加剂附加剂”.”.附加剂在注射液中的主要作用：附加剂在注射液中的主要作用：（1 1）增加药物的理化稳定性）增加药物的理化稳定性（2 2）增加主药的溶解度）增加主药的溶解度（3 3）抑抑制制微微生生物物生生长长，尤尤其其对对多多剂剂量量注注射射剂剂更要注意更要注意（4 4）减轻疼痛或对组织的刺激性）减轻疼痛或对组织的刺激性.29灭菌和无菌制剂增溶剂、湿润剂或乳化剂增溶剂、湿润剂或乳化剂 附加剂浓度附加剂浓度(%)(%)聚氧乙烯蓖麻油聚氧乙烯蓖麻油 1-651-65聚山梨酯聚山梨酯20 20 0.010.01聚山梨酯聚山梨酯40 40 0.05 0.05聚山梨酯聚山梨酯80(80(吐温吐温80)80)0.04-4.00.04-4.0聚维酮聚维酮 0.2-1.00.2-1.0聚乙二醇聚乙二醇-40-40蓖麻油蓖麻油 7.0-11.57.0-11.5卵磷脂卵磷脂 0.5-2.00.5-2.0脱氧胆酸钠脱氧胆酸钠 0.210.21普郎尼克普郎尼克F-68 F-68 0.20.230灭菌和无菌制剂 缓缓 冲冲 剂剂 用量（）用量（）醋酸，醋酸钠醋酸，醋酸钠 0.22,0.80.22,0.8枸橼酸，枸橼酸钠枸橼酸，枸橼酸钠 0.5,4.00.5,4.0乳酸乳酸 0.10.1酒石酸，酒石酸钠酒石酸，酒石酸钠 0.65,1.20.65,1.2磷酸氢二钠，磷酸二氢钠磷酸氢二钠，磷酸二氢钠 1.7,0.711.7,0.71碳酸氢钠，碳酸钠碳酸氢钠，碳酸钠 0.005,0.060.005,0.0631灭菌和无菌制剂助悬剂助悬剂 用量（）用量（）明胶明胶 2.02.0甲基纤维素甲基纤维素 0.03-1.050.03-1.05羧甲基纤维素钠羧甲基纤维素钠 0.05-0.750.05-0.75果胶果胶 0.20.232灭菌和无菌制剂 螯合剂螯合剂 用用 量量(%)(%)EDTA2Na 0.01-0.05EDTA2Na 0.01-0.05 抗氧剂抗氧剂 用用 量量(%)(%)亚硫酸钠亚硫酸钠 0.1-0.20.1-0.2亚硫酸氢钠亚硫酸氢钠 0.1-0.20.1-0.2焦亚硫酸钠焦亚硫酸钠 0.1-0.20.1-0.2硫代硫酸钠硫代硫酸钠 0.10.133灭菌和无菌制剂抑菌剂抑菌剂 用用 量（）量（）苯甲醇苯甲醇 1-21-2对羟基苯甲酸酯对羟基苯甲酸酯 0.01-0.0150.01-0.015苯酚苯酚 0.25-0.50.25-0.5三氯叔丁醇三氯叔丁醇 0.25-0.50.25-0.5硫柳汞硫柳汞 0.001-0.010.001-0.0134灭菌和无菌制剂 稳定剂稳定剂 用用 量量(%)(%)肌酐肌酐 0.5-0.80.5-0.8甘氨酸甘氨酸 1.5-2.251.5-2.25菸酰胺菸酰胺 1.25-2.51.25-2.5辛酸钠辛酸钠 0.40.435灭菌和无菌制剂（四）注射剂的等渗与等张调节（四）注射剂的等渗与等张调节渗透压单位：渗透压单位：用用1 1升升中所含的非电解质或电解质中所含的非电解质或电解质(质点）质点）的毫摩尔表示，称为的毫摩尔表示，称为毫渗透摩尔毫渗透摩尔(mosm/L)(mosm/L)，简称，简称毫毫渗渗.Osmotic pressureOsmotic pressureis the pressure that must be is the pressure that must be applied to a solution to prevent the inward applied to a solution to prevent the inward flow of water across a semipermeable membrane.flow of water across a semipermeable membrane.36灭菌和无菌制剂等渗溶液（等渗溶液（isoosmotic solutionisoosmotic solution）与血浆渗与血浆渗透压相等的溶液透压相等的溶液.人血浆渗透压平均值：人血浆渗透压平均值：300 mosm/L300 mosm/L（280-310280-310）.等张溶液（等张溶液（isotonic solutionisotonic solution）渗透压与红渗透压与红细胞膜张力相等的溶液细胞膜张力相等的溶液.This is because the semipermeable cell membrane cannot exclude isoosmotic solutios as it can other solutes,causing a concentration gradient.37灭菌和无菌制剂调节渗透压的方法调节渗透压的方法氯化钠等渗当量法氯化钠等渗当量法指与指与1g1g药物呈等渗的药物呈等渗的氯化钠质量氯化钠质量.血浆冰点值血浆冰点值-0.52-0.52降低冰点降低数据法降低冰点降低数据法WW配制等渗溶液需加入的等渗调节剂配制等渗溶液需加入的等渗调节剂百分含量百分含量，aa药物溶液冰点下降度数，药物溶液冰点下降度数，bb等渗调节剂等渗调节剂1 1溶溶液冰点下降度数液冰点下降度数38灭菌和无菌制剂第三节 注射剂的制备 原辅料、容器前处理 原辅料称量 配制 过滤 灌封 灭菌 质量检查 包装一、制备工艺流程 39灭菌和无菌制剂注射剂生产制备工艺流程与环境区域划分注射剂生产制备工艺流程与环境区域划分 40灭菌和无菌制剂二、注射用水的质量要求及其制备原水：原水：自来水或深井水，用于制备纯化水自来水或深井水，用于制备纯化水.纯纯化化水水：原原水水经经适适宜宜方方法法制制得得的的供供药药用用的的水水，作为普通制剂的溶剂或试验用水作为普通制剂的溶剂或试验用水.注注射射用用水水：纯纯化化水水经经蒸蒸馏馏所所得得的的水水，作作为为注注射剂的溶剂射剂的溶剂.灭灭菌菌注注射射用用水水：注注射射用用水水经经灭灭菌菌所所得得的的水水作作为粉针的溶剂、注射液的稀释剂等为粉针的溶剂、注射液的稀释剂等.（一）注射用水的质量要求41灭菌和无菌制剂中国药典中国药典20052005年版规定的各项要求：年版规定的各项要求：注射用水限量检查：注射用水限量检查：氯化物、硫酸盐、钙盐、硝酸盐、亚硝酸盐、氯化物、硫酸盐、钙盐、硝酸盐、亚硝酸盐、二氧化碳、易氧化物、不挥发物、重金属二氧化碳、易氧化物、不挥发物、重金属 氨氨 2 ppm 2 ppm pH 5.0-7.0 pH 5.0-7.0 热原检查热原检查 12 h 12 h 内使用内使用42灭菌和无菌制剂 自来水自来水 砂滤过器砂滤过器 活性碳过滤器活性碳过滤器 细滤过器细滤过器 电渗析装置（或反渗透装置）电渗析装置（或反渗透装置）阳离子阳离子树脂床树脂床 脱气塔脱气塔 阴离子阴离子树脂床树脂床 混合树脂床混合树脂床 蒸馏水机蒸馏水机 热贮水器热贮水器80注射用水注射用水 原水处理蒸馏法制备（二）注射用水的制备43灭菌和无菌制剂方法方法1 1、原水的处理、原水的处理目的目的 最大限度的去除水中的不溶性杂质、最大限度的去除水中的不溶性杂质、可溶性盐类、微生物及热原可溶性盐类、微生物及热原.离子交换法离子交换法电渗析法电渗析法反渗透法反渗透法44灭菌和无菌制剂利用离子交换树脂去除水中阴、阳离子利用离子交换树脂去除水中阴、阳离子对细菌和热源也有一定去除作用对细菌和热源也有一定去除作用2R-SO2R-SO3 3H HCaCa2 2 （R-SOR-SO3 3）2 2CaCa2H2H+R-NR-N（CHCH3 3）3 3OHOHClCl-R-NR-N（CHCH3 3)3 3ClClOHOH-用途：用途：用途：用途：可作普通制剂的溶剂可作普通制剂的溶剂可作普通制剂的溶剂可作普通制剂的溶剂蒸馏法制备注射用水水源蒸馏法制备注射用水水源蒸馏法制备注射用水水源蒸馏法制备注射用水水源.（1 1）离子交换法）离子交换法45灭菌和无菌制剂 阳床阳床 脱气塔（脱气塔（COCO2 2、NHNH3 3）阴床阴床混合床混合床优点：优点：优点：优点：水质化学纯度高，设备简单，耗能小，成本低水质化学纯度高，设备简单，耗能小，成本低水质化学纯度高，设备简单，耗能小，成本低水质化学纯度高，设备简单，耗能小，成本低阳离子交换树脂阳离子交换树脂氢型：氢型：RSORSO3 3-H H+钠型（稳定）钠型（稳定）NaNa+阴离子交换树脂阴离子交换树脂氢氧型：氢氧型：RNRN+(CH(CH3 3)3 3OHOH-氯型（稳定）：氯型（稳定）：RN+(CHRN+(CH3 3)3 3 ClCl-46灭菌和无菌制剂（2）电渗析法浓水淡水较离子交换法经济，节约较离子交换法经济，节约酸碱，但比电阻低（酸碱，但比电阻低（100100万万cm cm），常用于离子），常用于离子交换前的水处理交换前的水处理.47灭菌和无菌制剂 （3 3）反渗透法）反渗透法 20 20世纪世纪6060年代发展起来的，经过二级反渗透年代发展起来的，经过二级反渗透能够去处能够去处9999以上离子以上离子美国药典将其用于制备注射用水美国药典将其用于制备注射用水.48灭菌和无菌制剂 反渗透法（图示）反渗透法（图示）半透膜：半透膜：醋酸纤维素膜、聚酰胺膜醋酸纤维素膜、聚酰胺膜 浓度差：两侧分别为盐溶液和纯水浓度差：两侧分别为盐溶液和纯水 外压力：大于渗透压，达到盐、水分离外压力：大于渗透压，达到盐、水分离1.1.醋酸纤维素膜醋酸纤维素膜2.2.聚酰胺膜聚酰胺膜纯水纯水盐溶液盐溶液施加的外施加的外压力压力49灭菌和无菌制剂反渗透法原理Gibbs adsorption Gibbs adsorption equationequation50灭菌和无菌制剂2、蒸馏法制备注射用水制备注射用水最经典的方法制备注射用水最经典的方法（1 1）蒸馏水器）蒸馏水器塔式蒸馏水器塔式蒸馏水器缺点：耗能高缺点：耗能高效率低效率低51灭菌和无菌制剂塔式蒸馏水器结构示意图1.1.蒸汽进口蒸汽进口2.2.蒸汽选择器蒸汽选择器3.3.加热蛇管加热蛇管4.4.废气排出器废气排出器5.5.溢流管溢流管6.6.水位玻管水位玻管7.7.隔沫装置隔沫装置8.8.挡水罩挡水罩9.9.第一冷凝器第一冷凝器10.10.第二冷凝器第二冷凝器11.11.排气孔排气孔52灭菌和无菌制剂 多效蒸馏水机多效蒸馏水机特点：特点：耗能低、耗能低、产量高、产量高、质量优质量优.53灭菌和无菌制剂多效蒸馏水机多效蒸馏水机蒸馏塔设备固定架控制面板 冷凝器 54灭菌和无菌制剂u定义定义u组成组成 热原热原(pyrogen)(pyrogen)是微生物是微生物产生的内毒素，微量即产生的内毒素，微量即可引起恒温动物体温异可引起恒温动物体温异常升高常升高.磷脂磷脂脂多糖脂多糖蛋白质组成蛋白质组成脂多糖具有很强的热原脂多糖具有很强的热原活性活性.三、热 原1.1.热原定义热原定义55灭菌和无菌制剂发发热热反反应应：先先经经过过一一个个短短的的潜潜伏伏期期后后，温温度度略略微微上上升升，然然后后又又略略微微下下降降，接接着着很很快快上上升升，并出现一个高峰并出现一个高峰.细细菌菌性性热热原原本本身身不不引引起起发发热热反反应应,热热原原使使多多型型核核白白细细胞胞及及其其他他细细胞胞释释放放一一种种内内源源性性热热原原(endogenous(endogenous pyrogenpyrogen).).内内 源源 性性 热热 原原 可可 能能 是是 蛋蛋 白白 质质 或或 脂脂 蛋蛋 白白(lipoprotein)(lipoprotein)组组成成，确确切切组组成成尚尚未未肯肯完完.它它作作用用于于视视丘丘下下部部体体温温调调节节中中枢枢，可可能能引引起起5-5-羟色胺的升高而导致发热羟色胺的升高而导致发热.56灭菌和无菌制剂热原的组成热原的组成热热原原是是微微生生物物的的一一种种内内毒毒素素，它它存存在在于于细细菌菌的的细细胞膜和固体膜之间胞膜和固体膜之间.内内毒毒素素是是由由磷磷脂脂、脂脂多多糖糖和和蛋蛋白白质质所所组组成成的的复复合合物物，其其中中脂脂多多糖糖(lipopolysaccharidelipopolysaccharide)是是内内毒毒素素的的主主要要成成分分，具具有有特特别别强强的的热热原原活活性性，因因而而大大致致可以认为内毒素可以认为内毒素=热原热原=脂多糖脂多糖.脂脂多多糖糖的的化化学学组组成成因因菌菌种种不不同同而而异异，从从大大肠肠杆杆菌菌分分出出来来的的脂脂多多糖糖中中有有68%-69%68%-69%的的糖糖(葡葡萄萄糖糖、半半乳乳糖糖、庚庚糖糖、氨氨基基葡葡萄萄糖糖、鼠鼠李李糖糖等等)，121213%13%的的类脂化合物，类脂化合物，7%7%的有机磷和其它一些成分的有机磷和其它一些成分.热原的分子量一般为热原的分子量一般为1010 10105 5左右左右.57灭菌和无菌制剂2.热原的性质(1)(1)耐热性耐热性 一般热原在一般热原在6060加热加热1 1小小时不受影响，时不受影响，100100也不会发生热解，也不会发生热解，在在1803-41803-4小时，小时，25030-4525030-45分钟分钟或或65016501分钟可使热原彻底破坏分钟可使热原彻底破坏.通常注射剂灭菌的条件下，往往不通常注射剂灭菌的条件下，往往不足以使热原破坏足以使热原破坏.58灭菌和无菌制剂(2)(2)滤过性滤过性 热原体积小，约在热原体积小，约在1-5nm1-5nm之间，之间，故一般滤器均可通过故一般滤器均可通过.即使微孔滤膜，也不即使微孔滤膜，也不能截留，但活性炭可以吸附热原；能截留，但活性炭可以吸附热原；(3)(3)水溶性水溶性 热原能溶于水；热原能溶于水；(4)(4)不挥发性不挥发性 热原本身不挥发，但在蒸馏热原本身不挥发，但在蒸馏时，往往可随水蒸汽雾滴带入蒸馏水，故时，往往可随水蒸汽雾滴带入蒸馏水，故应设法防止；应设法防止；(5)(5)其它其它 热原能被强酸、强碱破坏，也能热原能被强酸、强碱破坏，也能被强氧化剂如高锰酸钾或过氧化氢所钝化，被强氧化剂如高锰酸钾或过氧化氢所钝化，超声波也能破坏热原超声波也能破坏热原.59灭菌和无菌制剂3.3.污染热原的途径污染热原的途径(1)(1)从溶剂中带入从溶剂中带入 这是注射剂出现热原的主要原这是注射剂出现热原的主要原因因.蒸馏器结构不合理，操作不当，注射用水贮藏时蒸馏器结构不合理，操作不当，注射用水贮藏时间过长都会污染热原间过长都会污染热原.故应使用新鲜注射用水，最好故应使用新鲜注射用水，最好随蒸随用；随蒸随用；(2)(2)从原料中带入从原料中带入 容易滋长微生物的药物，如葡萄容易滋长微生物的药物，如葡萄糖因贮存年久包装损坏常致污染热原糖因贮存年久包装损坏常致污染热原.用生物方法制用生物方法制造的药品如右旋糖酐、水解蛋白或抗生素等常因致造的药品如右旋糖酐、水解蛋白或抗生素等常因致热物质未除尽而引起发热反应；热物质未除尽而引起发热反应；(3)(3)从容器、用具、管道和装置等带入从容器、用具、管道和装置等带入 因此在生产因此在生产中对这些容器用具等物要认真处理，合格后方能使中对这些容器用具等物要认真处理，合格后方能使用用;60灭菌和无菌制剂(4)(4)制备过程中的污染制备过程中的污染 制备过程中，由制备过程中，由于室内卫生条件差，操作时间长，装置于室内卫生条件差，操作时间长，装置不密闭，均增加污染细菌的机会，而可不密闭，均增加污染细菌的机会，而可能产生热原；能产生热原；(5)(5)从输液器带入从输液器带入 有时输液本身不含热有时输液本身不含热原，但仍发现热原反应原，但仍发现热原反应.这往往是由于输这往往是由于输液器具液器具(如输液吊瓶、胶皮管等如输液吊瓶、胶皮管等)污染所污染所致致.61灭菌和无菌制剂4.4.热原的除去方法热原的除去方法(1)(1)高高温温法法 对对于于注注射射用用的的针针筒筒或或其其他他玻玻璃璃器器皿皿，在在洗洗涤涤干干燥燥后后，于于250250加加热热3030分分钟钟以以上上，可以破坏热原；可以破坏热原；(2)(2)酸酸碱碱法法 玻玻璃璃容容器器、用用具具还还可可用用重重铬铬酸酸钾钾硫硫酸酸清清洁洁液液或或稀稀氢氢氧氧化化钠钠处处理理，可可将将热热原原破破坏；坏；(3)(3)吸吸附附法法 活活性性炭炭对对热热原原有有较较强强的的吸吸附附作作用用，同同时时有有助助滤滤脱脱色色作作用用，所所以以在在注注射射剂剂中中使使用用较广较广.常用量为常用量为0.1%-0.5%.0.1%-0.5%.此外，还可用活性炭与白陶土合用除去热原；此外，还可用活性炭与白陶土合用除去热原；62灭菌和无菌制剂(4)(4)离离子子交交换换法法 用用#301301弱弱碱碱性性阴阴离离子子交交换换树树脂脂10%10%与与#122122弱弱酸酸性性阳阳离离子子交交换换树树脂脂8%8%成成功地除去丙种胎盘球蛋白注射液中的热原；功地除去丙种胎盘球蛋白注射液中的热原；(5)(5)凝凝胶胶滤滤过过去去 国国内内有有用用二二乙乙氨氨基基乙乙基基葡葡聚糖凝胶聚糖凝胶(分子筛分子筛)制备无热原去离子水；制备无热原去离子水；(6)(6)用用反反渗渗透透法法除除去去热热原原 这这是是近近几几年年发发展展起来有实用价值的新方法起来有实用价值的新方法.(7(7）超滤法）超滤法也能除去热原也能除去热原.63灭菌和无菌制剂5、热原检查方法 1 1热原检查法热原检查法家兔法检查家兔法检查灵敏度为灵敏度为0.001ug/ml0.001ug/ml试验结果接近人体真实试验结果接近人体真实情况情况操作繁琐费时操作繁琐费时.2 2细菌内毒素检查法细菌内毒素检查法鲎试剂检测或量化由革兰阴鲎试剂检测或量化由革兰阴性菌产生的细菌内毒素性菌产生的细菌内毒素比家兔法灵敏比家兔法灵敏1010倍，操作倍，操作简单易行简单易行其对革兰阴性菌以外的微其对革兰阴性菌以外的微生物产生的内毒素不灵敏生物产生的内毒素不灵敏尚不能完全代替家兔法尚不能完全代替家兔法.64灭菌和无菌制剂四、注射剂的制备（一）原辅料的准备（一）原辅料的准备 1原辅料的选用 原料药 必须达到注射用规格辅料 符合药典规定的药用标准，若有注射用规格，应选用注射用规格.65灭菌和无菌制剂2.投料计算 66灭菌和无菌制剂(二)注射容器的处理1、注射剂容器种类和式样 注射剂的容器是由硬质中性玻璃制成的安瓿或其它式样的容器(如青霉素小瓶、输液瓶等).其容积通常为1、2、5、10、20ml等几种规格安瓿西林安瓿西林小瓶小瓶输液瓶输液瓶软包装软包装67灭菌和无菌制剂 粉末安瓿分装注射用粉末或结晶性药物之用.色环易折安瓿易折安瓿 点刻痕易折安瓿 有颈安瓿 安瓿 粉末安瓿68灭菌和无菌制剂2、安瓿的质量要求与注射剂稳定性的关系 若玻璃容器含有过多的游离碱将增高注射的pH值.玻璃容器若不耐水腐蚀，则在盛装注射用水有时产生“脱片”现象.不耐碱或不耐侵蚀的容器，在装入磺胺嘧啶钠等碱性较大的或枸椽酸钠、碳酸氢钠、乳酸钠、氯化钙等钙钠盐类的注射液时往往灭菌后或长期贮存时发生“小白点”、“脱片”甚至产生混浊现象.69灭菌和无菌制剂如耐热性能差则在熔封或加热灭菌后往往发生爆裂、漏气等现象.玻璃安瓿的清洁度不良，特别是粘着于瓶壁的麻点或玻屑等不易洗净，而在灌封及热压灭菌后往往脱落而成废品.外形规格差别大的安瓿，不利于机械自动化生产，如颈丝粗细相差过大，在灌封机上灌封时就会产生玻屑或封口不严产生毛细孔或出现爆头现象.70灭菌和无菌制剂玻璃容器的质量要求（1）安瓿玻璃应无色透明，以便于检查澄明度、杂质以及变质情况；(2)应具有低的膨胀系数这种优良的耐热性，以耐受洗涤和灭菌过程中所产生的热冲击，使在生产过程中不易冷爆破裂；(3)要有足够的物理强度以耐受当热压灭菌时所产生较高的压力差，并避免在生产、装运和保存过程中所造成的破损；(4)应具有高度的化学稳定性，不改变溶液的pH，不易被注射液所侵蚀；(5)熔点较低，易于熔封；(6)不得有气泡、麻点及砂粒.71灭菌和无菌制剂安瓿：中性玻璃、含钡玻璃、含锆玻璃三种.中性玻璃中性玻璃 低硼硅酸盐 稳定性较好，作近中性或弱酸性注射剂的容器.含钡玻璃含钡玻璃 耐碱性能好含锆玻璃含锆玻璃 较高的化学稳定性，耐酸、耐碱性均好，不易受药液侵蚀72灭菌和无菌制剂3 3、安瓿的检查、安瓿的检查 物物理理检检查查：主主要要检检查查安安瓿瓿外外观观、尺尺寸寸、应应力力、清清洁洁度度、热热稳稳定定性性等等，具具体体要要求求及及检检查查方方法法，可可参参照照中华人民共和国国家标准中华人民共和国国家标准(安瓿安瓿).).化化学学检检查查：玻玻璃璃容容器器的的耐耐酸酸性性、耐耐碱碱性性检检查查和和中中性性检查，可按有关规定的方法进行检查，可按有关规定的方法进行.装装药药试试验验：必必要要时时特特别别当当安安瓿瓿材材料料变变更更时时，理理化化性性能能检检查查虽虽合合格格，尚尚需需作作装装药药试试验验，证证明明无无影影响响方方能应用能应用.73灭菌和无菌制剂4 4、安瓿的切割与圆口、安瓿的切割与圆口 手手工工切切割割适适于于小小量量生生产产，采采用用安安瓿瓿切切割割板板，按按规规定定长长度度调调好好砂砂石石和和档档板板之之间间的的距距离离，采采用用半半拉拉半半揿动作折断瓶颈揿动作折断瓶颈.圆口系利用强烈火焰喷烘颈口截面，使熔融光滑圆口系利用强烈火焰喷烘颈口截面，使熔融光滑.圆口完毕后拍出安瓿内的玻屑，贮存时不得重压圆口完毕后拍出安瓿内的玻屑，贮存时不得重压.74灭菌和无菌制剂5 5、安瓿的洗涤、安瓿的洗涤安瓿可先灌瓶蒸煮，进行热处理安瓿可先灌瓶蒸煮，进行热处理.一一般般使使用用离离子子交交换换水水，质质量量较较差差的的安安瓿瓿须须用用0.5%0.5%的醋酸水溶液，灌满后以的醋酸水溶液，灌满后以1003010030分钟热处理分钟热处理.蒸蒸瓶瓶的的目目的的是是使使瓶瓶内内灰灰尘尘和和附附着着的的砂砂粒粒等等杂杂质质经经加加热热浸浸泡泡后后落落入入水水中中，容容易易洗洗涤涤干干净净，同同时时也也是是一一种种化化学学处处理理，让让玻玻璃璃表表面面的的硅硅酸酸盐盐水水解解，微微量量的的游游离离碱碱和和金金属属离离子子溶溶解解，使使安安瓿瓿的的化化学学稳定性提高稳定性提高.安安瓿瓿的的洗洗涤涤：甩甩水水洗洗涤涤法法、加加压压喷喷射射气气水水洗洗涤涤法法超声洗涤超声洗涤75灭菌和无菌制剂6 6、安瓿的干燥或灭菌、安瓿的干燥或灭菌 安瓿洗涤后，一般要在烘箱内用120140温度干燥.盛装无菌操作或低温灭菌的安瓿则须用180干热灭菌一个半小时.隧道式烘箱：温度可达250350，一般350经5分钟.灭菌好的空安瓿存放柜应有净化空气保护，安瓿存放时间不应超过24小时.76灭菌和无菌制剂1 1）配制用具的选择与处理）配制用具的选择与处理 用具和容器用具和容器 玻璃、不锈钢、搪瓷、耐酸耐碱玻璃、不锈钢、搪瓷、耐酸耐碱陶瓷、无毒聚氯乙烯、聚乙烯塑料等陶瓷、无毒聚氯乙烯、聚乙烯塑料等(三)注射液的配制与滤过1、注射液的配制与滤过77灭菌和无菌制剂2 2）配制方法）配制方法 稀配法配液 浓配法配制所用注射用水其贮存时间不得超过12小时.78灭菌和无菌制剂对于不易滤清的药液可加0.1%0.3%的活性炭或通过铺有炭层的布氏漏斗.配制油性注射液一般先将注射用油在150-160 1-2小时灭菌，冷却后进行配制.79灭菌和无菌制剂 1）滤过的概念借助多孔性材料把固体微粒阻留而使液体通过，将固体微粒与液体分离的过程2、注射液的滤过 80灭菌和无菌制剂3 3）滤过的方法：采用粗滤与精滤相结合的方法）滤过的方法：采用粗滤与精滤相结合的方法.a.a.高位静压高位静压 b.b.加压滤过加压滤过 c.c.减压滤过减压滤过a.a.垂熔玻璃器垂熔玻璃器b.b.砂滤棒砂滤棒c.c.微孔滤膜滤器微孔滤膜滤器d.d.板框压滤机板框压滤机e.e.钛滤器钛滤器2 2）滤器的种类）滤器的种类81灭菌和无菌制剂 垂熔玻璃滤器砂滤棒82灭菌和无菌制剂83灭菌和无菌制剂微孔滤膜滤器内装微孔滤膜 进液口出液口85灭菌和无菌制剂滤过装置(1)高位静压滤过装置(3)加压滤过装置：(2)减压滤过装置 86灭菌和无菌制剂减压滤过装置 87灭菌和无菌制剂加压滤过装置 88灭菌和无菌制剂（四）注射液的灌封1 1、手工灌封、手工灌封 89灭菌和无菌制剂2 2、机械灌封移动齿档送安瓿；灌注针头下降；灌注药液入安瓿；灌注针头上升后安瓿离开同时灌注器吸入药液.四个动作顺序进行，协调一致，这主要通过主轴上的侧凸轮和灌注凸轮来实现的.90灭菌和无菌制剂91灭菌和无菌制剂3、充 气常用的有氮气和二氧化碳，高纯度的氮可不经处理，纯度差的氮气可先通过缓冲瓶，然后经硫酸、碱性焦性没食子酸、1%的高锰酸钾溶液处理.二氧化碳可用装有浓硫酸、硫酸铜溶液、1%的高锰酸钾溶液与50%甘油溶液的洗气瓶处理.通气时安瓿先通气，再灌注药液，92灭菌和无菌制剂（五）注射剂的灭菌和检漏1、注射剂的灭菌 对热不稳定的产品，在避菌条件较好的情况下生产的注射剂，一般1-5ml安瓿可用流通蒸气灭菌10030分钟，10-20ml安瓿使用10045分钟.灭菌时间还可根据情况延长或缩短.要求按灭菌效果F0值大于8进行验证.注射剂从配制到灭菌，必须在规定时间内完成(一般12小时).凡能耐热的产品，宜采用11530分钟灭菌.93灭菌和无菌制剂2 2、检漏检漏一般应用一种灭菌、检漏两用灭菌器.灭菌完毕后，稍开锅门，从进水管，放进冷水淋洗安瓿使温度降低，然后关紧锅门并抽气，灭菌器内压力逐渐降低.如有漏气安瓿，则安瓿内空气也被抽出.当真空度达到85.3-90.6kPa(640-680mmHg)后，停止抽气.将颜料溶液吸入灭菌锅中至盖过安瓿后，然后关闭色水阀，放开气阀，再将色水抽回贮器中，开启锅门，将注射剂车架推出，淋洗后检查，剔去带色的漏气安瓿.也可在灭菌后，趁热立即于灭菌锅内放入颜色水，安瓿遇冷内部压力收缩，颜色水即从漏气的毛细孔进入而被检出94灭菌和无菌制剂五、注射剂的质量检查1、可见异物与不溶性微粒 白点多为原料或安瓿产生；纤维多半因环境污染所致；玻屑往往是由于割口灌封不当所造成.我国对澄明度检查的要求：取供试品，在黑色背景、20W照明荧光灯光源下，用目检视，应符合卫生部关于澄明度检查判断标准的规定.国内生产的BY-1型澄明度检测仪可以用于澄明度检查，并可调节照度，使用方便.95灭菌和无菌制剂2 2、热原检查、热原检查热原检查目前各国药典法定的方法仍为家兔法.选用家兔作试验动物，是因为家兔对热原的反应和人是相同的.鲎试验法：鉴于家兔法费时较长，操作繁琐，近年来发展了体外热原试验法即鲎试验法，其原理是利用鲎(Limus polyphemus)的变形细胞溶解物(amebecyte lysate)与内毒素之间的凝集反应.96灭菌和无菌制剂 鲎试验法 鲎试剂鲎试剂(一般一般0.10.2ml)供试品供试品(一般一般0.10.2ml)37 C水浴中培育水浴中培育60分钟分钟37 C水浴中培育水浴中培育60分钟分钟观察结果观察结果97灭菌和无菌制剂3.3.无菌检查无菌检查 任何注射剂在灭菌操作完成后，必须抽出一定数量的样品进行无菌试验，以确保制品的灭菌质量.通过无菌操作制备的成品更应注意无菌检查的结果.具体检查方法参看中国药典.4.4.其他检查其他检查降压物质、异常毒性、降压物质、异常毒性、pHpH、刺激性、过敏性、刺激性、过敏性98灭菌和无菌制剂维生素C注射液(抗坏血酸)(Vitamin C injection 处方维生素C 104g依地酸二钠 0.05g碳酸氢钠 49g亚硫酸氢钠 2g注射用水加到 1000ml六、注射剂的举例99灭菌和无菌制剂制法 配制容器中加配制量80%的注射用水，通二氧化碳饱和加维生素C溶解后，分次缓缓加入碳酸氢钠，搅拌使完全溶解，加入预先配制好的依地酸二钠溶液和亚硫酸氢钠溶液，搅拌均匀调节药液pH 6.0-6.2，添加二氧化碳饱和的注射用水至足量，用垂熔玻璃漏斗与膜滤器滤过，溶液中通二氧化碳，并在二氧化碳或氮气流下灌封；最后用100流通蒸气15分钟灭菌.100灭菌和无菌制剂注解(1)维生素C分子中有烯二醇式结构，故显强酸性.加入碳酸氢钠(或碳酸钠)，使维生素C部分地中和成钠盐，以避免疼痛.同时碳酸氢钠起调节pH的作用，以增强本品的稳定性.(2)维生素C的水溶液与空气接触，自动氧化成脱氢抗坏血酸.(3)本品稳定性与温度有关.，故以10015分钟灭菌为好.但操作过程应尽量在避菌条件下进行，以防污染.101灭菌和无菌制剂