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医学实验室考核要求黑龙江国际旅行卫生保健中心黑龙江国际旅行卫生保健中心1医学实验室考核要求黑龙江国际旅行卫生保健中心11理论考试的总体原则oA应知：理论上应该掌握的基础知识oB应会：实践操作中应了解关键环节oC应用：主要是日常工作中经常应用的项目，而不是提高难度oD理论结合实践oE促进日常工作：大比武的目的在于加强培训，提高人员素质和业务水平21理论考试的总体原则A应知：理论上应该掌握的基础知识22理论考试的总体范围oA医学检验基本知识oB医学检验质控方式和方法oC医学检验结果的临床意义与合理解释oD医学检验正常值32理论考试的总体范围A医学检验基本知识33理论考试的参考资料oA全省医学实验室管理体系文件oB实验室检验标准（全国艾滋病检测规范、全国临检验操作规程）oC生物安全资料（实验室生物安全通用要求、医疗废弃物处理）oD内部培训考核试题43理论考试的参考资料A全省医学实验室管理体系文件4医学实验室管理体系文件o1全省医学实验室质量方针o2医学实验室管理要求（作业指导书第一部分）5医学实验室管理体系文件1全省医学实验室质量方针5全国艾滋病检测规范o2004版本共共10章章o样品的采集和处理样品的采集和处理 oHIV抗体检测抗体检测o艾滋病实验室安全防护和职业暴露艾滋病实验室安全防护和职业暴露预防预防o艾滋病实验室质量管理艾滋病实验室质量管理6全国艾滋病检测规范2004版本共10章6其它参考文献o全国临检验操作规程（第三版）只涉及日常操作中的常规项目oGB实验室生物安全通用要求o医疗废弃物分类目录o内部培训考核熟悉题型和考核模式7其它参考文献全国临检验操作规程（第三版）74理论考试的参考题型oA填空oB判断oC选择oD简答oE论述oF应用84理论考试的参考题型A填空85理论和实践考试的分数分配o1理论考试：100分内容：A17025标准B医学检验基本知识指定的参考资料o2实践操作：100分内容：两个项目各50分95理论和实践考试的分数分配1理论考试：100分9医学实验室生物安全要求o全国艾滋病检测技术规范第七章艾滋病实验室安全防护和职业暴露预防A实验室生物安全级别B实验室安全防护C废弃物处置和消毒D实验室意外和事故处理E艾滋病的职业暴露后预防10医学实验室生物安全要求全国艾滋病检测技术规范101111医学实验室生物安全要求oGB19489-2004实验室生物安全通用要求6.2BSL-2实验室o9管理要求o管理资任员工健康管理安全设计安全计划危险标识事故报告12医学实验室生物安全要求GB19489-2004实验室生1313医疗废物分类医疗废物分类o1感染性废物o2病理性废物o3损伤性废物o4药物性废物o5化学性废物14医疗废物分类1感染性废物14感染性废物携带病原微生物具有引发感染性疾病传播危险的医疗废物。o1、被病人血液、体液、排泄物污染的物品，包括：o(1)棉球、棉签、纱布及其他各种敷料;o(2)一次性用品、一次性医疗器械;o(3)废弃的被服;o(4)其他被病人血液、体液、排泄物污染的物品。o2、传染病病人或者疑似传染病病人产生的生活垃圾。15感染性废物携带病原微生物具有引发感染性疾病传播危险的医疗废感染性废物o3、病原体的培养基、标本和菌种、毒种保存液。o4、各种废弃的医学标本。o5、废弃的血液、血清。o6、使用后的一次性使用医疗用品及一次性医疗器械视为感染性废物。16感染性废物3、病原体的培养基、标本和菌种、毒种保存液。16损伤性废物能够刺伤或者割伤人体的废弃的医用锐器。o1、医用针头、缝合针。o2、各类医用锐器，包括：解剖刀、手术刀、备皮刀、手术锯等。o3、载玻片、玻璃试管、玻璃安瓿等。17损伤性废物能够刺伤或者割伤人体的废弃的医用锐器。17药物性废物过期、淘汰、变质或者被污染的废弃的药品。o1、废弃的一般性药品，如：抗生素、非处方类药品等。o2、废弃的细胞毒性药物和遗传毒性药物，包括：o(1)致癌性药物(2)可疑致癌性药物(3)免疫抑制剂。o3、废弃的疫苗、血液制品等。18药物性废物过期、淘汰、变质或者被污染的废弃的药品。1、废化学性废物具有毒性、腐蚀性、易燃易爆性的废弃的化学物品o1、医学影像室、实验室废弃的化学试剂。o2、废弃的过氧乙酸、戊二醛等化学消毒剂。o3、废弃的汞血压计、汞温度计。19化学性废物具有毒性、腐蚀性、易燃易爆性的废弃的化学物品1病理性废物诊疗过程中产生的人体废弃物和医学实验动物尸体等。o1、手术及其他诊疗过程中产生的废弃的人体组织、器官等。o2、医学实验动物的组织、尸体。o3、病理切片后废弃的人体组织、病理腊块等。20病理性废物诊疗过程中产生的人体废弃物和医学实验动物尸体等。临床实验室质量管理要素o分析前质量保证o临床实验室溯源o质量控制基础o室内质量控制o能力验证要求o分析后质量保证21临床实验室质量管理要素分析前质量保证21医学实验室内部质控基础oLevey-Jennings质控图法o室内质控的实际操作1.设定质控图的中心线(均值)2.标准差的建立3.由质控规则决定质控限：质控限通常是以标准差的倍数表示。4.更换质控品22医学实验室内部质控基础Levey-Jennings质控图医学实验室内部质控基础o5.质控规则的应用o6.质控图的图形分析o1)曲线漂移o2)趋势性变化o3)连续多点分布在中心线一侧o4)其他剧律性变化23医学实验室内部质控基础5.质控规则的应用23医学实验室内部质控基础oWestgard多规则质控方法质控规则以符号AL表示，其中A是超过质控界限的质控测定值的个数或统计量，L为质控界限，如13s指的是质控界限为均数3s，有一个质控结果超出此界限。24医学实验室内部质控基础Westgard多规则质控方法24医学实验室内部质控基础oWestgard多规则使用了下列质控规则o12s:个质控结果超过均值2s，仅用作警告规则，并启动由其他规则来检验质控数据。o13s:一个质控结果超过均值3s，就判断失控，该规则主要对随机误差敏感。25医学实验室内部质控基础Westgard多规则使用了下列质控医学实验室内部质控基础o22s:两个连续的质控结果同时超过均值+2s或均值-2s，就判断失控，该规则对系统误差敏感。oR 4s:一个质控结果超过均值+2s，另一个质控结果超过均值-2s，就判断失控，该规则对随机误差敏感。26医学实验室内部质控基础22s:两个连续的质控结果同时超过医学实验室内部质控基础o41s，:四个连续的质控结果同时超过均值+1s或均值-1s，就判断失控，该规则对系统误差敏感。o10X:10个连续的质控结果落在均值的一侧(高或低于均值，对偏离的大小没有要求)，就判断失控，该规则对系统误差敏感。27医学实验室内部质控基础41s，:四个连续的质控结果同2828292930303131323233333434绘制和分析质控图的要点o要在常规条件下建立质控图参数，用S/CO比值绘制质控图。对同一批质控物连续测定得到20个数据，求均值(x)和标准差(s)o由专人负责建立质控图，每月质控分析，讨论本月的质量控制情况。o长期和稳定地使用一种质量好的试剂盒，更换不同厂家的试剂盒后，必须重新绘制质控图。35绘制和分析质控图的要点要在常规条件下建立质控图参数，用S/绘制和分析质控图的要点o质控结果失控，应填写失控记录，上交质量负责人，分析原因并决定是否发出检测报告。o使用新批次的外部对照质控物时，必须重新绘制质控图。36绘制和分析质控图的要点质控结果失控，应填写失控记录，上交质量医学实验室内部质控基础o建立质控图分析及失控情况处理程序。o当质控已有计划并恰当地执行时，要求可靠的平均值和标准差用于计算质控限，将假失控概率降到最低。当出现失控时进行如重复质控测定或重新分析新的质控物不是最有效的方法，必须找出问题原因，找出解除故障的方法，并消除原因，防止将来出现同样的问题。37医学实验室内部质控基础建立质控图分析及失控情况处理程序。37医学实验室样品管理o样品的管理是质量管理中的核心问题之一。一、样品的采集、传递和准备二、样品的登记三、检测样品的处理38医学实验室样品管理样品的管理是质量管理中的核心问题之一。3医学实验室常规检验各论o一、免疫学常规项目检测o（一）了解各项目意义、原理o（二）艾滋病病毒抗体（HIV-Ab）检测（ELISA法）法）o（三）梅毒血清学检测（RPR+TPPA)o（四）丙型肝炎抗体检测（ELISA法）法）o（五）乙型肝炎病毒标志物检测（ELISA法）法）39医学实验室常规检验各论一、免疫学常规项目检测39重点关注内容o了解乙型肝炎病毒标志物的常见模式：如俗称“大三阳”、“小三阳”等模式的内容、意义o了解梅毒RPR、TPPA项目检测的目的和意义o掌握艾滋病筛查检测流程o掌握ELISA方法的质量管理和操作40重点关注内容了解乙型肝炎病毒标志物的常见模式：如俗称“大三ELISA的质量管理的质量管理oELISA：一种敏感性高、特异性强、重复性好的实验诊断方法，由于其试剂稳定、易保存、操作简便、结果判断较客观等因素，以及既适宜于大规模筛查试验又可以用于少量标本的检测，既可以做定性试验也可以做定量分析等优点，已广泛应用。加强质量管理才能充分发挥其方法学的优点。41ELISA的质量管理ELISA：一种敏感性高、特异性强、重复ELISA的质量管理的质量管理各检验项目的基本原理（ELISA原理）；各检验项目临床意义；熟悉各检验项目检测技巧，了解易出差错的环节及难点；熟悉各检测试剂性能（包括试剂盒组成，包被片段及其组成）；熟悉检测仪器的原理及性能；掌握数据处理的能力和质量控制知识。42ELISA的质量管理各检验项目的基本原理（ELIELISA原理根据检测目的和操作步骤不同有三种基本方法。双抗体（原）夹心法检测抗原（体）的常见方法间接法检测抗体的方法竞争法检测抗原或小分子半抗原、抗体43ELISA原理根据检测目的和操作步骤不同有三种基本方法。4ELISA方法检测影响因素方法检测影响因素1o反应时间反应时间o 温度温度 o 酶结合物的稳定性酶结合物的稳定性o 加标本量加标本量44ELISA方法检测影响因素144ELISA方法检测影响因素方法检测影响因素2o试剂盒的因素：妥善保存试剂，在有效期试剂盒的因素：妥善保存试剂，在有效期内使用内使用o试验操作：成良好的操作习惯：加样时应试验操作：成良好的操作习惯：加样时应将所加物加在将所加物加在ELISA板孔的底部，避免加板孔的底部，避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生气泡。气泡。o严格按试剂说明书操作严格按试剂说明书操作:空白孔不加样品空白孔不加样品和酶标试剂；和酶标试剂；操作过程中集中精力：避操作过程中集中精力：避免加样错误免加样错误45ELISA方法检测影响因素2试剂盒的因素：妥善保存试剂，在有ELISA检测试剂o筛查试剂要求:注册批准；批批检合格；o评估优良；有效期内使用o首选使用酶免试剂;o按要求使用快速试剂46ELISA检测试剂46ELISA检测要点o严格按照试剂说明书操作,不得擅自更改o注意防止交叉污染o严格遵守实验操作规程47ELISA检测要点47ELISA检验标本的采集和保存o可用作的标本十分广泛，如血清，血浆均可，一般使用血清。标本采集时应尽量避免溶血，因红细胞破裂可释放过氧化物酶活性物质干扰，可造成假阳性；o抗凝不完全的标本因纤维蛋白元的干扰而造成假阳性：尽量不用抗凝血尤其是用肝素抗凝剂。ELISA的灵敏度1ng/ml水平上,标本间的污染要尽量避免，尤其不应与生化试验用同一管标本。最起码应先做免疫后做生化。48ELISA检验标本的采集和保存可用作的标本十分广泛，如血o免疫学检验的特点是灵敏度高，其检验的灵敏度高于生化检测106倍。因此，微小的检测数值的变异，会造成很大的S和CV值的变异。国际上尚未有对免疫检验室内质控给出明确规定、标准和方法，均处于借鉴生化的原则、方法，开展免疫检验的室内质控阶段。49免疫学检验的特点是灵敏度高，其检验的灵敏度高于生化检测106ELISA检验的质控要求o（1）试验首先应成立，满足试剂盒要求试验首先应成立，满足试剂盒要求。阴、阳性对照结果符合要求，cut-off值（CO值）判定公式满足试剂盒要求，该试验结果可以发出报告。o（2）在试验成立、基本合格的基础上，免免疫质控的重点，着重整体分析疫质控的重点，着重整体分析。做质控图分析每一阶段的变化趋势，寻找有无问题发生和发生了什么问题，并提出解决问题的办法，不断提高。50ELISA检验的质控要求（1）试验首先应成立，满足试剂盒要求生物化学常规检测项目o（一）了解各项目意义、原理o（二）主要掌握谷丙转氨酶ALT检测的意义、关键控制点o（三）了解肝功能检测各项目的意义51生物化学常规检测项目（一）了解各项目意义、原理515252应掌握内容应掌握内容o标本的正确采集与处理（空腹、抗凝要求）。o室内质量控制、实施及注意事项，室内质控图的绘制和误差分析。o酶类测定：连续监测法的原理，血清丙氨酸氨基转移酶。o糖测定：血糖测定。53应掌握内容53ALT检测基本方法o1速率法IFCC推荐，目前公认的国际参考方法o2赖氏比色法面临淘汰54ALT检测基本方法1速率法54ALT检测临床意义o1.ALT活性增高o(1)肝胆疾病传染性肝炎、肝癌、中毒性肝炎、脂肪肝和胆管炎等。o(2)心血管疾病心肌梗死、心肌炎、心力衰竭时肝淤血和脑出血等。o(3)药物和毒物:氯丙嗪、奎宁、水杨酸制剂及乙醇，铅、示、四氯化碳或有机磷等引起ALT活性增高。55ALT检测临床意义1.ALT活性增高55ALT检测生物参考区间o反应温度37C，健康成年人参考区间为:男性:5-40U/L;女性:5-35U/L。56ALT检测生物参考区间反应温度37C，健康成年人参考区间临检常规项目检测o（一）血液分析o（二）尿液分析57临检常规项目检测（一）血液分析57（一）血液分析o各项目意义、参考值o1白细胞计数o2红细胞计数o3血红蛋白量o4血小板计数58（一）血液分析581.血液有形成分的组成血细胞占全血4050%，称之有形成分1.白细胞中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞2.红细胞(主要成分是血红蛋白)3.血小板591.血液有形成分的组成血细胞占全血4050%，称2.红细胞增加与减少的临床意义红细胞增加o相对性增高：血浆容量减少，使红细胞相对增多：剧烈呕吐、严重腹泻、大面积烧伤、多汗、多尿。o绝对性增高：缺氧而致红细胞代偿性增多，程度与缺氧程度成正比o生理性：胎儿、新生儿、高原地区居民、剧烈体力劳动、情绪激动时，红细胞可一过性增多o病理性：严重慢性心、肺疾患，如阻塞性肺气肿、肺源性心脏病，真性红细胞增多症红细胞减少o生理性：妊娠中、后期；6个月2岁的儿童；老年人造血功能明显减低致红细胞减少；月经期暂时引起下降。o病理性：各种类型贫血，如缺铁性贫血等。602.红细胞增加与减少的临床意义3.白细胞增加与减少的临床意义白细胞增高o生理性增高:见于妊娠期、分娩时、新生儿;剧烈运动、淋浴;严寒、高温;午后高于清晨;饮食后高于饮食前等;o病理性增高:A急性感染如肺炎、扁桃体炎、急性阑尾炎。B严重组织损伤、大量细胞破坏。如术后1276h；急性心肌梗死后12d；急性溶血，急性大出血。急性中毒、代谢性酸中毒。C白血病及恶性肿瘤白细胞减少oA伤寒、副伤寒杆菌感染；B病毒感染。C某些血液病；E慢性理化损伤/电离辐射，如X线、放射性核素等；F服氯霉素。G自身免疫性疾病如系统性红斑狼疮。613.白细胞增加与减少的临床意义4.血小板增加与减少的临床意义o血小板增多见于血小板增多症、慢性粒细胞增多症、真性红细胞增多症、骨髓纤维化、脾切除等。o血小板减少见于血小板减少紫癜、再生障碍性贫血、急性白血病、X射线照射。624.血小板增加与减少的临床意义血小板增多见于血5白细胞自动化分类o二项式分类粒细胞和非粒细胞o三项式分类淋巴、中性粒细胞和中间细胞o五项式分类嗜中、嗜碱、嗜酸、淋巴、单核细胞635白细胞自动化分类二项式分类粒细胞和非粒细胞63（二）尿液分析o1尿液干化学分析（掌握尿液十项分析的意义、影响因素）o2尿液沉渣分析（了解）64（二）尿液分析1尿液干化学分析（掌握尿液十项分析的意义、影尿液干化学分析试剂o使用仪器与试剂带应配套，若使用不使用仪器与试剂带应配套，若使用不同厂商生产的试剂带，必须经严格对同厂商生产的试剂带，必须经严格对照，确定无显著性差异时方可代用照，确定无显著性差异时方可代用65尿液干化学分析试剂使用仪器与试剂带应配套，若使用不同厂商生产尿液分析的标本o尿液留取后尽快送实验室、并应尿液留取后尽快送实验室、并应在在2小时内完成检验。小时内完成检验。o如果尿后如果尿后2小时内无法完成分析，小时内无法完成分析，可置可置28冰箱冷藏，冰箱冷藏，6小时内小时内完成检验完成检验。66尿液分析的标本尿液留取后尽快送实验室、并应在2小时内完成检验干化学分析试剂的使用要求o试剂条贮放于原装容器内，短暂暴露于直射光和室试剂条贮放于原装容器内，短暂暴露于直射光和室内温度都会使试剂条产生错误的结果。内温度都会使试剂条产生错误的结果。o参照厂商规定，要避免防潮，并在参照厂商规定，要避免防潮，并在 一定温度条件下一定温度条件下妥善保存。妥善保存。o使用时一次只取出所需要的试剂带，并立即盖紧，使用时一次只取出所需要的试剂带，并立即盖紧，多余的试剂带不可再放回容器中。多余的试剂带不可再放回容器中。o不要合并各容器内的试剂带。不要合并各容器内的试剂带。o不可触摸试剂带上的化学检测块。不可触摸试剂带上的化学检测块。67干化学分析试剂的使用要求试剂条贮放于原装容器内，短暂暴露于直（三）、ABO血型鉴定1了解方法原理玻片法试管法o2ABO血型鉴定操作必须熟练掌握玻片法68（三）、ABO血型鉴定1了解方法原理68（四）寄生虫检查o1了解操作方法、报告方式o2血液疟原虫检查A.薄血片法B厚血片法o3血液微丝蚴检查A.鲜血片法B厚血片法C试管浓集法69（四）寄生虫检查1了解操作方法、报告方式69p经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量pStudyConstantly,AndYouWillKnowEverything.TheMoreYouKnow,TheMorePowerfulYouWillBe写在最后经常不断地学习,你就什么都知道。你知道得越多,你就越有力量写谢谢你的到来学习并没有结束，希望大家继续努力Learning Is Not Over.I Hope You Will Continue To Work Hard演讲人：XXXXXX 时 间：XX年XX月XX日 谢谢你的到来演讲人：XXXXXX
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