海洋活性物质分离纯化-液相色谱--课件

一般流程及分离原理检测器反相色谱离子交换色谱凝胶色谱高效液相色谱的实验技术高效液相色谱的应用高效液相色谱法11ppt课件高效液相色谱法 以以液液体体为流流动相相的的色色谱法法称称为液液相相色色谱法法。采采用用普普通通规格格的的固固定定相相及及流流动相相常常压输送送的的液液相相色色谱法法则为经典典液液相相柱柱色色谱，其其柱柱效效低低、而而且且一一般般不不具具备在在线检测器器，通通常常作作为分分离离手手段段使使用用。HPLC是是以以经典典的的液液相相柱柱色色谱为基基础，引引入入了了气气相相色色谱的的理理论与与实验方方法法，流流动相相改改为高高压输送送，采采用用高高效效固固定定相相及及在在线检测等等手手段段，发展展而而成成的的分分离离分分析析方方法法。该法法具具有有分分离离效效能能高、分析速度快及高、分析速度快及仪器化等特点，因而称器化等特点，因而称为高效液相色高效液相色谱法。法。22ppt课件一般流程一般流程及分离原理及分离原理一、一、简介介1.与经典的液相柱色谱法相比与经典的液相柱色谱法相比 (1)柱柱内内径径，填填充充剂粒粒度度、均均匀匀性性，新新型型固固定定相相的的问世世分离效率分离效率。(2)柱柱长，填填充充剂机机械械强度度，供供液液压力力和和进样压力力，流流动相相流流速速（15ml/min）分分离离速速度度（78个个峰峰/10min）。）。(3)采用光学原理的采用光学原理的检测器器灵敏度灵敏度。33ppt课件 2.与与GC相比相比 (1)样品品受受限限制制少少，对易易分分解解、不不容容易易气气化化、分分子子量量大大、高极性的有机物（高极性的有机物（7080%的有机物）可用的有机物）可用HPLC分析。分析。(2)不用制不用制备衍生物，减少了衍生物，减少了误差。差。(3)进样量大（量大（500800L），易制），易制备。(4)分离效率降低。分离效率降低。44ppt课件二、一般分离流程高效液相色高效液相色谱仪及一般分离流程。及一般分离流程。55ppt课件三、色谱原理1、概概念念 HPLC：以以溶溶剂或或某某种种溶溶液液为流流动相相，以以装装在在柱柱子子里里的的固固体体为固固定定相相，用用高高压输液液泵将将流流动相相压入入柱柱子子，使使样品品组分在柱子里分在柱子里进行分离的柱色行分离的柱色谱法。法。2、分分类 根根据据色色谱柱柱所所用用填填充充剂的的不不同同，HPLC分分离离原原理理有有：吸吸附附色色谱，分分配配色色谱,键合合相相色色谱，离离子子交交换色色谱，凝凝胶胶色色谱等。等。66ppt课件用液液分配色谱的机理来讨论高效液相色谱的普遍性问题。l色色谱的的分分离离过程程(见图7-2)。（a）在在装装好好填填料料的的柱柱子子中中加加上上样品品，然然后后用用溶溶剂洗洗脱脱，样品品中中各各组分分（若若有有A、B、C三三个个组分分）的的分分子子沿沿流流动相相流流动方方向向移移动。（b）和和（c）表表示示组分分的的移移动。（d）表表示示经过一一段段时间的的洗洗脱脱以以后后，A、B、C三三个个组分分已已经被被分分离离开开，不不同同组分分在在柱柱子子中中移移动速速度度不不同同而而得得到到了了分分离离，也也就就是是说不不同同的的组分分在在柱柱子子上上存存在在差差速迁移速迁移现象。象。另外，对照（另外，对照（a）和（）和（d）可以）可以发现刚上样后，溶质分子形成的发现刚上样后，溶质分子形成的色带（又叫谱带）较窄，而到了色带（又叫谱带）较窄，而到了（d）中，各组分的谱带明显变）中，各组分的谱带明显变宽，这说明同一组分沿柱子移动宽，这说明同一组分沿柱子移动时，存在着扩散问题，即时，存在着扩散问题，即谱带的谱带的扩散。扩散。三组分样品分离过三组分样品分离过程示意图程示意图77ppt课件四、色谱分离两大特点：差速迁移、谱带扩展l差差速速迁迁移移：不不同同组分分在在柱柱子子中中移移动速速度度不不同同而而使使其其混混合合物物得得到到分分离离，即即不不同同的的组分分在在柱柱子子上上存存在在差差速速迁迁移移现象象。引引起起原原因因：在在分分配配色色谱中中，由由于于不不同同组分分在在固固液液两两相相的的分分配配系系数数不不同同引引起起；在在离离子子交交换色色谱中中，主主要要是是由由于于各各组分分对固固定定相相的的静静电引力不同造成的。引力不同造成的。l谱带扩展展：同同一一组分分沿沿色色谱柱柱移移动时，色色带由由窄窄变宽，即即同同一一组分分在在柱柱子子上上存存在在谱带扩展展现象象。产生生原原因因：由由于于同同一一个个化化合合物物的的不不同同分分子子，在在通通过柱柱子子时平平均均迁迁移移速速度度不不同同造造成成的的。其其原原因因是是由由于于涡流流扩散散和和各各种种传质情情况况的的差差异异造造成成了了同同一一物物质不同分子的差速迁移。不同分子的差速迁移。88ppt课件高效液相色谱检测器高效液相色谱检测器 目目前前应用用较多多的的有有紫紫外外吸吸收收检测器器、荧光光检测器器、电化化学学检测器器、化化学学发光光检测器器、蒸蒸发光光散散射射检测器、安培器、安培检测器及示差折光器及示差折光检测器等。器等。1.紫外吸收检测器（紫外吸收检测器（ultraviolet detector,UVD）紫紫外外检测器器是是HPLC应用用最最普普遍遍的的检测器器，利利用用紫紫外外分分光光光光度度计的的原原理理对各各组分分进行行检测，属属浓度度型型检测器器。灵灵敏敏度度、精精密密度度及及线性性范范围均均较好好。既既用用于于等等浓度度，也也用用于于梯梯度度洗洗脱脱。但但只只能能用用于于对紫紫外外线有有吸吸收收的的组分分的的检测，且且流流动相相的的选择有有一一定定的局限性，其截止波的局限性，其截止波长必必须小于小于检测波波长。99ppt课件 2.荧光检测器（荧光检测器（fluorophtometric detector,FD）荧光光检测器器利利用用荧光光分分光光光光度度计的的原原理理对各各组分分进行行检测，其其灵灵敏敏度度高高于于紫紫外外吸吸收收检测器器，但但只只适适用用于于能能产生生荧光光或或其其衍衍生生物物能能发荧光光的的物物质。主主要要用用于于氨氨基基酸酸、多多环芳芳烃、维生生素素、甾甾体体化化合合物物及及酶等等的的检测。在在用用于于氨氨基基酸酸检测时，需需用用衍衍生生法法制制备衍衍生生物物，其其衍衍生生法法分分为柱柱前前与与柱柱后后衍衍生生两两种种，常常用用邻苯苯二二甲甲醛或或异异氰硫硫基基苯苯为衍衍生生化化试剂，是是分分析析氨氨基基酸酸应用用最最广的方法。广的方法。1010ppt课件3.示差折光检测器（RI）属属于于通通用用型型检测器器。其其检测原原理理是是液液体体都都有有折折光光指指数数，很很少少有有两两种种液液体体具具有有相相同同的的折折光光指指数数，所所以以 化化合合物物都都可可用用这种种检测器器检出出。当当流流动相相恒恒定定地地流流过检测池池时，其其折折光光指指数数不不变，仪器器得得到到一一条条基基本本平平直直的的基基线。当当有有组分分峰峰流流过检测池池时，折折光光指指数数发生生变化化，记录仪记下下这信信号号，即即为色色谱图。其其缺缺点点：灵灵敏敏度度较少少低低，检出出下下限限为10-7g/mL；易受温度和流速的影响；不能易受温度和流速的影响；不能进行梯度洗脱行梯度洗脱。1111ppt课件 4.蒸蒸发发光光散散射射检检测测器器（evaporative light scattering detector,ELSD）蒸蒸发光光散散射射检测器器是是20世世纪90年年代代出出现的的最最新新型型通通用用检测器器，可可用用于于挥发性性低低于于流流动相相的的任任何何样品品组分分的的检测，但但对于于有有紫紫外外吸吸收收的的样品品组分分检测灵灵敏敏度度较低低，因因而而主主要要用用于于糖糖类、高高分分子子化化合合物物、高高级脂脂肪肪酸酸、磷磷脂脂、维生生素素、氨基酸、甘油三氨基酸、甘油三酯及甾体及甾体类等几十等几十类化合物。化合物。1212ppt课件 这种种检测器器是是示示差差折折光光检测器器的的理理想想替替代代品品。其其检测原原理理是是：将将流流出出色色谱柱柱的的流流动相相及及组分分先先引引入入已已通通气气体体的的蒸蒸发室室，加加热，使使流流动相相蒸蒸发而而除除去去；样品品组分分在在蒸蒸发室室内内形形成成气气溶溶胶胶，而而后后进入入检测室室；用用强光光或或激激光光照照射射气气溶溶胶胶产生生光光散散射射，测定定散射光散射光强而而获得得组分的分的浓度信号。度信号。1313ppt课件 5.化学发光检测器化学发光检测器 化化学学发光光检测器器是是近近年年来来发展展起起来来的的高高选择性性及及高高灵灵敏敏度度的的新新型型检测器器，其其设备简单，自自身身发光光，不不需需光光源源，价价格格便便宜宜，是是一一种种有有发展展前前途途的的检测器器，可可用用于于药物物代代谢分分析析及及免免疫疫研研究究。其其检测原原理理是是：将将流流出出色色谱柱柱的的组分分与与发光光试剂混混合合，产生生化化学学发光光反反应，光光辐射射可可用用光光导纤维传输，由由光光电倍增管倍增管检测，从而，从而获得信号。得信号。1414ppt课件几种主要检测器的基本特性 1515ppt课件反相色谱（RPC）lHPLCHPLC发发展展早早期期，其其填填料料常常用用固固体体吸吸附附剂剂作作固固定定相相，这这种种色色谱谱叫叫液液固固吸吸附附色色谱谱；另另一一类类填填料料常常采采用用在在固固相相载载体体上上涂涂上上一一层层固固定定液液作作为为固固定定相相（其其代代替替物物是是键键合合填填料料），这这种种色色谱谱是是液液液液分分配配色色谱谱。键键合合填填料料即即将将配配基基直直接接键键合合在在固固体体基基质质上上作作为为固固定相。反相色谱填料是其中之一。定相。反相色谱填料是其中之一。l所所谓谓反反相相色色谱谱或或正正相相色色谱谱，其其叫叫法法是是根根据据填填料料和和流流动动相相的的相相对对极极性性来来区区别别。流流动动相相极极性性弱弱于于固固定定相相的的液液相相色色谱谱法法叫叫正正相相色色谱谱。如如以以硅硅胶胶为为吸吸附附剂剂，以以有有机机溶溶剂剂为为流流动动相相的的吸吸附附色色谱谱中中，由由于于硅硅胶胶（SiOSiO2 2XHXH2 2O O）表表面面大大量量硅硅羟羟基基的的存存在在，其其极极性性强强于于流流动动相相，故故是是正正相相色色谱谱。流流动动相相极极性性强强于于固固定定相相的的液液相相色色谱谱叫叫反反相相色色谱谱。如如以以有有机机溶溶剂剂加加水水作作流流动动相相，以以烷烷基基、苯苯基基键键合合相相填填料料作作固固定定相相的的色色谱谱就就是是反反相相色色谱谱。反反相相高高效效液液相相色色谱谱是是应应用用最最广广的一类高效液相色谱法。的一类高效液相色谱法。1616ppt课件一、固定相l由固体刚性基质和键合在基质上的配基组成。由固体刚性基质和键合在基质上的配基组成。（1 1）基基质质（担担体体）：硅硅胶胶。其其表表面面有有大大量量深深浅浅和和孔孔径径不不同同的的孔孔隙隙，这这样样就就使使硅硅胶胶的的表表面面积积大大大大扩扩大大了了。一一般般常常用用孔孔径在径在6-12nm6-12nm。（2 2）配配基基：配配基基都都是是不不同同类类型型的的有有机机基基团团。采采用用直直接接键键合合的的方方法法固固定定到到基基质质上上。其其方方法法：通通过过有有机机氯氯硅硅烷烷与与硅硅胶胶表表面面硅羟基反应键合上去的。即：硅羟基反应键合上去的。即：1717ppt课件非非极极性性键合合相相 此此类键合合相相表表面面基基团为非非极极性性烃基基，如如 十十 八八 烷 基基 键 合合 相相（十十 八八 烷 基基 键 合合 硅硅 胶胶，octadecylsilane,ODS,C18）以以及及辛辛烷基基（C8）、乙乙基基、甲甲基基和和苯苯基基键合合相相。其其中中苯苯基基可可诱导极极化化，所所以也可以也可视为弱极性弱极性键合相。合相。国国内内产品品有有YWG-C18和和YWG-C8 和和YWG-C6H5，国国外外代代表表性性产品品有有：Nucleosil C18，Spherisorb ODS-2，Zorbox-C8等等。HPLC中中80%的的分分离离工工作作所所用用的的固固定定相相都都是是ODS，流流动相相为不不同同比比例例的的水水和和甲甲醇醇，所所以以是是反反相相技技术。为提提高高固固定定相相极极性性，可可缩短短烷基基的的链长度度，选用用YWG-C8为固固定定相。相。YWG-C6H5为反相，用于分离芳香族化合物。反相，用于分离芳香族化合物。1818ppt课件 中中等等极极性性键合合相相 常常见的的中中等等极极性性键合合相相有有醚基基键合合相相。这种种键合合相相既既可可作作正正相相又又可可作作反反相相色色谱的的固固定定相相，视流流动相相的的极极性性而而定定。国国内内产品品有有YWG-ROR，进口口产品品有有Permaphase-ETH。此。此类键合相合相应用用较少。少。极极性性键合合相相 常常用用的的极极性性键合合相相有有氨氨基基、氰基基键合合相相用用。这种种键合合相相既既可可作作正正相相又又可可作作反反相相色色谱的的固固定定相相。国国内内产品品有有YWG-NH2、YWG-CN 和和YQG-NH2、YQG-CN；进口口产品品有有Nucleosil NH2或或CN，Lichrosorb NH2或或Zorbox-CN。1919ppt课件二、流动相l极性溶极性溶剂。常用：。常用：有机溶有机溶剂(如甲醇、异丙醇、乙如甲醇、异丙醇、乙腈、二氧六、二氧六环)水水l在在这些些溶溶剂中中，水水的的洗洗脱脱能能力力最最弱弱。所所以以在在反反相相色色谱的的梯梯度度洗洗脱脱中中，A液液以以水水为主主，B液液以以有有机机溶溶剂为主主。洗洗脱脱过程程中中逐逐渐向向流流动相相中中添添加加有有机机溶溶剂，就就达达到到了了逐逐渐增增加加洗洗脱脱强度度的的目目的的。相相反反，如如果果向向水水中中添添加加无无机机盐，则是是减减弱弱了了洗洗脱脱剂的的强度，增度，增强了了样品品组分在柱子上的保留。分在柱子上的保留。lRPC中中应用用最最广广的的流流动相相是是:水水甲甲醇醇、水水乙乙腈注注：甲甲醇醇和和乙乙腈一一般般用用色色谱纯，而而水水应当当是是二二次次蒸蒸馏水或蒸水或蒸馏水水经脱离子脱离子处理理2020ppt课件三、保留机理 （两种模型）（1）疏溶）疏溶剂理理论l一一个个分分子子有有亲水水部部分分和和疏疏水水部部分分两两类基基团。亲水水基基团如如OH、-NH2、-COOH和和-SH等等极极性性官官能能团，疏水基，疏水基团如苯如苯环-CH3、-CH2-等基等基团。l当当一一个个非非极极性性溶溶质或或分分子子中中的的非非极极性性部部分分放放入入一一个个极极性性溶溶剂中中时，这个个非非极极性性部部分分（即即疏疏水水性性基基团）与与极极性性溶溶剂之之间相相互互产生生了了一一个个斥斥力力，分分子子中中的的非非极极性性部部分分总是是趋向向于于与与其其他他非非极极性性部部分分聚聚集集，以以减减少少与与极极性性溶溶剂的的接接触触面面积，减减小小表表面面张力力，使使体体系系能能量量最最低低。这种种溶溶质分分子子的的非非极极性性表表面面区区域域在在水水中中倾向向于于减减小小与与极极性性溶溶剂的的接接触触面面积的效的效应叫做疏水作用或疏溶叫做疏水作用或疏溶剂效效应。2121ppt课件l在在RPC中中，有有机机水水溶溶液液作作流流动相相，溶溶质在在非非极极性性的的配配基基（烷基基、苯苯基基等等）上上的的保保留留，就就是是由由于于溶溶质中中的的疏疏水水基基团倾向于与配基向于与配基结合而造成的。合而造成的。l溶溶质中中的的疏疏水水性性越越强，与与配配基基的的结合合地地越越牢牢。所所以以有有机机同同系物中随着系物中随着烷基基链长的增加，其保留的增加，其保留值也增大。也增大。2222ppt课件l样样品品分分子子和和固固定定相相上上的的配配基基在在流流动动相相中中都都是是溶溶剂剂化化的的。当当样样品品分分子子保保留留在在柱柱子子上上时时，样样品品分分子子与与配配基基接接触触，两两者者之之间间结结合合面面上上的的溶溶剂剂化化分分子子被被“挤挤”走走，进进入入流流动动相相。被被“挤挤”走走的的溶溶剂剂分分子子有有Z Z个个。当当样样品品分分子子被被洗洗脱脱下下来来时时，样样品品分分子子进进入入了了流流动动相相，样样品品分分子子与与配配基基的的接接触触面面重重新新被被溶溶剂剂化化，重重新新溶溶剂剂化化所所需需的的溶溶剂剂分分子子是是Z Z个个，与与保保留留时时被被“挤挤”走的溶剂分子相等。走的溶剂分子相等。（2）计量置换模型 2323ppt课件计量置换模型的数学表达式为：lgK=lgI-ZlgD0l式式中中K为容容量量因因子子；lgI为常常数数；Z为配配基基础与与样品品分分子子接接触触面面在在样品品分分子子被被保保留留时释放放出出来来的的溶溶剂分子数；分子数；D0为洗脱洗脱剂中中强溶溶剂的的浓度。度。l在在反反相相色色谱中中，样品品与与配配基基靠靠疏疏水水作作用用结合合。而而洗洗脱脱液液如如水水甲甲醇醇体体系系中中，醇醇比比水水更更容容易易使使疏疏水水性性配配基基和和样品品溶溶剂化化，在在保保留留与与置置换中中，醇醇在在起起作作用用，所所以以上上式式中中D0为甲甲醇醇浓度度。当当柱柱子子、溶溶剂、样品品分分子子、温温度度固固定定后后，Z为常常数数。以以lgK对lgD0作作图可可得得一一条条直直线。通通过此此表表达达式式，使使洗洗脱脱剂浓度与保留度与保留值建立了直建立了直线的关系式。的关系式。2424ppt课件四、反相色谱色谱体系的选择 l当当样品品组分分不不是是离离子子型型化化合合物物，优先先选用用反反相相色色谱来来进行行分分离离。RPC体体系系选择顺序序：首首先先选柱柱子子再再选流流动相相，然然后后再考再考虑检测器、温度、洗脱方式、器、温度、洗脱方式、进样量等条件。量等条件。（1）柱子：）柱子：l常常选 ODS柱柱（其其配配基基为十十八八烷基基）。该柱柱子子优点点：疏疏水水性性强，分离性能好，分离性能好，样品分子在柱内保留品分子在柱内保留值大，大，应用面广。用面广。l另另外外：对于于生生物物蛋蛋白白质（大大分分子子量量），一一般般用用C4-C8的的填填料料柱柱；含含-CN或或-NO2的的化化合合物物，一一般般用用苯苯基基型型填填料料柱柱；多多糖糖、类固固醇醇这样的的强极极性性物物质可可以以使使用用氨氨基基柱柱、氰基基柱柱。氨氨基基柱柱的的配配基基为-RNH2，它它可可以以在在一一定定的的条条件件下下，分分别当正相柱、反相柱和离子交当正相柱、反相柱和离子交换柱使用，是一种特殊的填料。柱使用，是一种特殊的填料。2525ppt课件（2）流动相l首首选：甲醇水：甲醇水体系体系l若若纯甲甲醇醇的的洗洗脱脱能能力力还不不够强，则要要添添加加或或换用用其其他他洗洗脱脱能能更更强的的溶溶剂。常常用用的的溶溶剂洗洗脱脱能能力力强弱的弱的顺序序为：水水 乙乙腈 甲醇甲醇 二氧六二氧六环 四四氢呋喃喃 异丙醇异丙醇（3 3）检测条件）检测条件若物质有发色团有紫外吸收，用紫外检测器。检测若物质有发色团有紫外吸收，用紫外检测器。检测波长最常用波长最常用254nm254nm，因为此波长下灯源光度最强。，因为此波长下灯源光度最强。若样品组分无紫外吸收，则可选示差折光检测器。若样品组分无紫外吸收，则可选示差折光检测器。（4 4）柱温）柱温 rtrt总之，选择色谱条件是根据总之，选择色谱条件是根据“样品组分样品组分”确定的。确定的。2626ppt课件离子交换色谱法（离子交换色谱法（IEC）一、离子交一、离子交换1.离子交换色谱概念离子交换色谱概念 利利用用离离子子交交换剂作作为固固定定相相，以以适适宜宜的的溶溶剂作作为流流动相相，使使被被分分离离混混合合物物中中的的各各组分分按按其其离离子子交交换亲和和力力的的不不同同而而得得到分离。到分离。2.离子交换剂（离子交换树脂）离子交换剂（离子交换树脂）离离子子交交换剂是是不不溶溶性性高高分分子子化化合合物物，其其分分子子中中含含有有解解离离性性离离子子交交换基基团，当当一一定定量量的的水水溶溶液液通通过交交换柱柱时，能能与与存在于溶液中的阳离子或阴离子物存在于溶液中的阳离子或阴离子物质起可逆的交起可逆的交换作用。作用。2727ppt课件 3.离子交换剂的分类离子交换剂的分类 阳离子阳离子交换树脂交换树脂强酸型强酸型 弱酸型弱酸型 PO3HCOOH,OCH2COOHC6H4OHSO3H阴离子阴离子交换树脂交换树脂强碱型强碱型 弱碱型弱碱型 N(CH3)3X NR2NHRNH22828ppt课件 4.4.离子交换树脂的交换原理离子交换树脂的交换原理(1)强酸型阳离子交酸型阳离子交换树脂脂（SCX）电离离程程度度不不受受溶溶液液pH变化化的的影影响响，在在pH 114范范围内内均均能能进行离子交行离子交换反反应。2929ppt课件 聚苯乙烯强酸型树脂：聚苯乙烯强酸型树脂：一一般般为为黑黑褐褐色色，是是最最常常用用的的强强酸酸型型阳阳离离子子交交换换树树脂脂，以以苯苯乙乙烯烯为为单单位位，向向上上下下左左右右延延伸伸的的网网状状结结构构是是它的母体。母体上连结许多它的母体。母体上连结许多SOSO3 3H H。3030ppt课件常常见见型型号号：国国产产树树脂脂中中强强酸酸1 17 7（上上海海树树脂脂厂厂#732#732）、强强酸酸型型#1#1（南南开开大大学学树树脂脂厂厂）和和国国外外产产 品品 Dowex50Dowex50、Amberlite Amberlite IR-120IR-120、Zeo Zeo Karb225Karb225、Zerolit225Zerolit225、wofatit wofatit K K、Permutit Permutit Q Q、Iiwatit S100Iiwatit S100都属于这种。都属于这种。特特性性：这这种种树树脂脂很很稳稳定定，使使用用得得当当，经经过过几几百百次次交交换换，交交换换当当量量也也改改变变不不大大。对对各各种种试试剂剂也也较较稳稳定定，如如较较长长时时间间浸浸在在5%5%氢氢氧氧化化钠钠、0.1%0.1%高高锰锰酸酸钾钾、过过氧氧化化氢氢水水溶溶液液、0.1M0.1M硝硝酸酸中中也也不不会会改改变变性性能能。不不溶溶于于水水和和一一般般有有机机溶溶剂剂，耐耐热热性性也也比比其其他他树树脂脂好好，必必要要时时可可以以在在沸沸水水浴浴上上l00l00左右处理。左右处理。3131ppt课件酚磺酸型树脂酚磺酸型树脂 是是在在聚聚乙乙烯烯树树脂脂出出现现以以前前就就被被广广泛泛应应用用的的强强酸酸性性树树脂脂，可以用对羟基苯磺酸和甲醛缩合而成。可以用对羟基苯磺酸和甲醛缩合而成。国国产产树树脂脂中中华华东东强强酸酸阳阳4242和和国国外外产产品品Amberlite IR-100、IR-105、Dowex30、Zerolit215、Zeo Karb215、wofatit K、wofatit KS都都属属于于这这种种。这这种种树树脂脂一一般般为为黑黑色色，交交换换量量比比苯苯乙乙烯烯树树脂脂小小，遇遇碱碱或或氧氧化化剂剂时时，性性能能易易变变化化。在在不不同同pHpH的的碱碱性性溶溶液液中中离离子子交交换换的的作作用用不不同同，因因为为有有以以上上缺缺点点，故故应用范围较小。应用范围较小。3232ppt课件 (2)强碱型阴离子交碱型阴离子交换树脂脂(SAX)电离离程程度度不不受受溶溶液液pH变化化的的影影响响，在在pH 114范范围内内均均能能进行离子交行离子交换反反应。3333ppt课件 树树脂脂的的母母体体和和苯苯乙乙烯烯强强酸酸性性树树脂脂相相同同，区区别别在在于于母母体体上上连连结结有有季季铵铵。国国产产树树脂脂中中强强碱碱性性201（南南开开大大学学树树脂脂厂厂）、强强碱碱性性201 7（上上海海树树脂脂厂厂717）和和国国外外产产品品Nalcite SAR、Dowex1、Dowex2、Amberlite IRA-400、Ambertite lRA-410、Ambertite XE-98、PermutitS、PermutitS、Lewatit M、Zerolit FF等等都都届届于于这这种种。这这种种强强碱碱性性树树脂脂对对酸酸、碱碱和和有有机机溶溶剂剂亦亦较较稳稳定定，但但在在浓浓硝硝酸酸中中不不稳稳定定。游游离离型型（OH型型）比比盐盐型型（Cl型型）的的耐耐热热性性差差，超超过过40-45就就不不稳稳定定，因因此此一一般般商商品品都都是是Cl型。型。3434ppt课件 (3)弱酸型阳离子交弱酸型阳离子交换树脂脂(WCX)COOH电离离程程度度受受溶溶液液pH变化化的的影影响响很很大大，其其交交换能能力力随随溶溶液液pH的的下下降降而而减减少少，在在酸酸性性溶溶液液中中几几乎乎不不发生生交交换反反应。所所以以羧酸酸阳阳离离子子树脂脂的的交交换反反应必必须在在pH7的的溶溶液液中中才才能能正正常常进行行，对酸酸性性更更弱弱的的酚酚羟基基树脂脂，则应在在pH9的的溶溶液液中才能中才能进行反行反应。3535ppt课件 含有含有 -COOH 的树脂，母体有芳香族和脂肪的树脂，母体有芳香族和脂肪族两种。脂肪族类型中用甲基丙烯酸和二乙烯基苯族两种。脂肪族类型中用甲基丙烯酸和二乙烯基苯聚合的较多。芳香族类型的用二羟基苯酸和甲醛聚聚合的较多。芳香族类型的用二羟基苯酸和甲醛聚合的较多。国产树脂中弱酸合的较多。国产树脂中弱酸l0l l28（上海树脂厂（上海树脂厂#724）、弱酸性）、弱酸性#10l（南开大学树脂厂）和国外产（南开大学树脂厂）和国外产品品Ambertite IRC-50、Wofatit C、Zerolit 226都属都属于弱酸性阳离子交换树脂。于弱酸性阳离子交换树脂。3636ppt课件 (4)弱碱型阴离子交弱碱型阴离子交换树脂脂(WAX)基基团的的电离离能能力力弱弱，和和弱弱酸酸型型阳阳离离子子树脂脂一一样，电离离程程度度受受溶溶液液pH变化化的的影影响响很很大大，其其交交换能能力力随随溶溶液液pH的的降降低低而而增增大大，在在碱碱性性溶溶液液中中几几乎乎不不发生生交交换反反应。所所以以交交换反反应必必须在在pH7的溶液中才能正常的溶液中才能正常进行。行。3737ppt课件 含含有有-NH2，NH，等等基基团团的的阴阴离离子子交交换换树树脂脂。国国产产树树脂脂中中弱弱碱碱330（上上海海树树脂脂厂厂#701）、弱弱碱碱3112（上上海海树树脂脂厂厂#704）、华华东东弱弱碱碱阴阴32l、弱弱碱碱性性#301（南南开开大大学学树树脂脂厂厂）、弱弱碱碱性性330（同同1）和和国国外外产产品品Ambertite IR4B、Wofatit M、wofatit N、LewatitM、Dowex3、Fermutit W等等都都属属于于此此种种。其其基基本本结结构构如如下下。含含有有-NH-基基团团的的碱碱性性较较强强，含含有有NH2或或NH的碱性较弱。这种树脂有黄、橙、黑等颜色。的碱性较弱。这种树脂有黄、橙、黑等颜色。3838ppt课件强性和弱性离子交换树脂的区别：交换速度不一样：强酸和强碱性树脂交换快转型时体积变化不一样：强酸和强碱性树脂由游离型转为盐型时，体积变化小，水洗容易达到中性；弱酸和弱碱性树脂由游离型转为盐型时，体积显著变化，水洗不容易达到中性；但是强酸性树脂的由盐型转为游离型时需要大量的酸处理。3939ppt课件二、填料1、配基和交、配基和交换基基团l离离子子交交换色色谱法法，在在早早期期都都采采用用高高分分子子聚聚合合物物，如如苯苯乙乙烯二二乙乙烯苯苯为基基体体的的离离子子交交换树脂脂作作固固定定相相。因因这种种固固定定相相具具有有膨膨胀性性、不不耐耐压、表表面面的的微微孔孔型型结构构影影响响传质速速率率，所所以以在在高高效效液液相相离离子交子交换色色谱法中已被离子型法中已被离子型键合相所代替。合相所代替。4040ppt课件 最最常常见的的离离子子型型键合合相相是是以以薄薄壳壳型型或或全全多多孔孔微微粒粒硅硅胶胶为载体体，表表面面再再经化化学学键合合成成各各种种离离子子交交换基基团。阴阴离离子子键合合相相常常用用强酸酸性性磺磺酸酸型型（SO3H），而而阳阳离离子子键合合相相常常用用强碱碱性性季季铵盐型（型（N+R3Cl-）。）。国国产的的离离子子化化学学键合合相相有有YWG-SO3H、YWG-N+R3Cl-和和YSG-SO3H、YSG-N+R3Cl-。4141ppt课件2、填料的交换容量和吸附容量填料的柱容量：可用交填料的柱容量：可用交换容量或吸附容量表示。容量或吸附容量表示。（1）离子交）离子交换容量容量l用用单位位量量的的填填料料含含有有可可交交换基基团的的数数量量表表示示。其其单位位：微微摩摩尔/克克（mol/g）或或 微微摩摩尔/毫毫升升（mol/mL）。）。（2）柱子吸附容量）柱子吸附容量l在在特特定定色色谱条条件件（动态或或静静态）下下，填填料料吸吸附附某某样品品组分分的的最最大大量量。用用mg/g、g/L或或mol/g、mol/mL表表示示。吸吸附附量量是是可可变的的：其其值随随测定定方方法、流法、流动相的成分和相的成分和样品的品的变化而化而变化。化。4242ppt课件（3）交换容量与pH值的关系l交交换容容量量受受溶溶液液pH值的的影影响响很很大大，特特别是是弱弱离离子子交交换色色谱填填料料。因因为它它们的的交交换基基团需需要要在在一一定定的的 pH值条条件件下下才才能能完完全全电离离，故故受受 pH值的的影影响更大。响更大。见图7-3。图图7-3 PH值对交换容量的影响值对交换容量的影响4343ppt课件由由图可知：可知：强阳阳离离子子交交换色色谱填填料料 pH 1时才才有有明明显交交换容容量量，pH大大时，交交换容容量量几几乎乎不不再再变化化；而而弱弱阳阳离离子子交交换色色谱填填料料pH 6时才才有有明明显交交换容容量量，且且PH越大，交越大，交换容量越大。容量越大。强阴阴离离子子交交换色色谱填填料料，pH 10时才才能能使使用用；而而弱弱阴阴离离子子交交换色色谱填填料料，pH8时才才有有明明显交交换容量，且容量，且PH越小，交越小，交换容量越大。容量越大。l由由上上可可知知，强阳阳和和强阴阴离离子子交交换色色谱填填料料，具具有有比比弱弱阳阳（阴阴）离离子子交交换色色谱填填料料更更大大的的pH值使使用用范范围，能能适适应较多多的的化化合合物物在在不不同同的的 pH条条件件下下进行行分分离离或或使使用用 pH梯梯度度进行行洗洗脱脱，所所以以应用用较广广。但但是是对于于一一些些保保留留太太强的的样品品，选用用弱弱离离子子交交换色色谱填料更方便些。填料更方便些。4444ppt课件三、IEC的保留机理（起主要决定作用的：静电力）l将将交交换基基团和和样品品分分子子近近似似地地看看作作为两两个个点点电荷荷，它它们之之间的作用力的作用力 F 为：F=q1q2/r2l式式中中q1、q2分分别为两两个个点点电荷荷电量量；为介介质的的介介电常数；常数；r为两点两点电荷之荷之间的距离。的距离。l在在IEC中中，交交换基基团的的大大小小及及电荷荷在在固固定定pH值条条件件下下是是不不发生生变化化的的，所所以以样品品组分分与与交交换基基团的的作作用用力力 F 随随样品品组分分的的带电情情况况及及作作用用距距离离的的不不同同而而变化化。正正是是这种种各各组分分与与交交换基基团之之间有有不同的作用力而使它不同的作用力而使它们得以分离。得以分离。4545ppt课件分析保留值大小l在在离离子子交交换色色谱中中，如如果果流流动相相的的pH pH 值改改变，就就会会改改变样品品分分子子的的电离离平平衡衡，从从而而改改变样品品组分分的的带电情情况况，使使保留保留值发生生变化。化。l在在阳阳IECIEC中中，样品品组分分应该带有有正正电荷荷，多多是是由由于于样品品分分子子中中含含有有各各种种氨氨基基形形成成的的正正电荷荷。离离解解平平衡衡：R-NHR+H+RN+H2Rl而而在在阴阴IECIEC中中，样品品分分子子应该带负电荷荷，多多是是由由于于羧酸酸根根或或 其其 他他 酸酸 根根 离离 解解 形形 成成 的的 负 离离 子子。离离 解解 平平 衡衡：RCOOH R COO-+H+l可可见，在在阳阳IECIEC中中，当当pHpH值减减小小时(即即H H+浓度度增增大大)，促促使使样品品组分分形形成成更更多多的的正正电荷荷。这会会使使样品品组分分对阳阳离离子子交交换剂表面表面带负电的交的交换基基团亲合力增加，合力增加，使保留使保留值增加增加。l在在阴阴IECIEC中中，当当pHpH值增增大大时(H H+浓度度减减小小)，促促使使样品品组分分上上酸酸根根的的离离解解，形形成成更更多多的的负电荷荷，因因而而使使样品品组分分对阴阴离离子子交交换剂表表面面带正正电的的交交换基基团亲合合力力增增加加，使使保保留留值增加增加。4646ppt课件问题：当样品为蛋白质时，分析蛋白质在阴、阳离子交换色谱中，PH值改变对保留值影响。注注意意：在在选选择择弱弱阴阴、阳阳离离子子交交换换填填料料时时，既既要要考考虑虑填填料料在在一一定定PHPH值值下下的的离离解解度度（PHPH越越小小：WAXWAX离离解解度度越越大大，WCXWCX离离解解度度越越小小），又又要要考考虑虑在在一一定定PHPH值值下下流流动动相相的的保保留留值值（PHPH越越小小：阳阳IECIEC中中保保留留越越小小，阴阴IECIEC中中，保保留留越越大大）。这这两两个个是是矛矛盾盾的的。在选择条件时要注意，特别是流动相在选择条件时要注意，特别是流动相PHPH的确定。的确定。对于两性蛋白质无上面的注意事项，阳离子不行就选阴离子交换填料。对于两性蛋白质无上面的注意事项，阳离子不行就选阴离子交换填料。4747ppt课件蛋白蛋白质的保留的保留值()与其表面与其表面纯电荷荷()及流及流动相相PH的关系示意的关系示意图4848ppt课件四、离子交换色谱条件的选择样品在溶液中能形成离子，品在溶液中能形成离子，则首首选离子交离子交换色色谱。1、柱子的、柱子的选择离离子子交交换色色谱的的柱柱子子的的选择比比其其他他色色谱法法更更复复杂。因因为交交换基基团有有四四种种类型型。样品品的的离离解解也也有有不不同同方方式式，所所以以要要根根据据样品品和和实验室室条条件件选择适适用用的的柱柱子子。选择柱柱子子时可可遵遵循循下下列原列原则：（1）根据）根据实验室条件和室条件和实验要求要求定性、定量定性、定量还是分离。是分离。分分析析型型柱柱子子：内内径径48mm,长度度525cm,流流速速0.5-3ml/min。(定性、定量用硬基定性、定量用硬基质填料填料)分离可以用高分子球基分离可以用高分子球基质。4949ppt课件(2)按照样品的性质 l含含有有各各种种氨氨基基（-RNH2，-NHR，-NR2）的的组分分，可可在在溶溶液液中中接接受受质子子，形形成成正正离离子子，所所以以要要用用阳阳离子交离子交换色色谱柱子分离。柱子分离。l含含有有各各种种羧基基的的化化合合物物，可可以以在在溶溶液液中中放放出出质子子，形成形成负离子，所以要用阴离子交离子，所以要用阴离子交换色色谱填料。填料。l等等电点点PI值大大的的蛋蛋白白质，易易形形成成阳阳离离子子，可可优先先选用用阳阳离离子子交交换色色谱；等等电点点PI值小小的的蛋蛋白白质，易形成易形成负离子，可离子，可优先先选用阴离子交用阴离子交换色色谱。5050ppt课件l一一般般小小分分子子，选一一般般填填料料。而而蛋蛋白白质等等分分子子量量很很大大的的化化合合物物，选用用大大孔孔径径填填料料(常常用用内内孔孔径径在在25-50nm)。(3)填料孔径的选择2、流动相选择、流动相选择盐水盐水 组成的溶液。组成的溶液。（盐溶于水以后形成的离子（盐溶于水以后形成的离子作为样品组分的顶替离子）作为样品组分的顶替离子）洗脱强度：由顶替离子的浓度定。浓度越大，洗洗脱强度：由顶替离子的浓度定。浓度越大，洗脱能力越强。脱能力越强。对样品及仪器无损害。例：对样品及仪器无损害。例：NaCl作为流动相时，作为流动相时，Cl对不锈钢有腐蚀性，要控制使用。对不锈钢有腐蚀性，要控制使用。5151ppt课件l对样品品溶溶解解度度无无影影响响。所所以以常常用用具具有有缓冲冲作作用用的的盐l梯梯度度洗洗脱脱：盐浓度度由由弱弱强。改改变洗洗脱脱强度度可可以以浓度梯度或度梯度或PH梯度。梯度。3、检测条件的条件的选择参参见反相色反相色谱部分。部分。4、其他条件的、其他条件的选择操作温度一般操作温度一般选用室温，用室温，5252ppt课件五、影响离子交换的有关因素五、影响离子交换的有关因素1 1、溶液的酸碱度、溶液的酸碱度交交换换溶溶液液中中氢氢离离子子的的浓浓度度显显著著增增高高时时，会会抑抑制制阳阳离离子子交交换换基基团团的的电电离离和和目目标标离离子子的的交交换换反反应应。通通常常强强酸酸性性交交换换剂剂交交换换液液的的pHpH应应大大于于2 2。弱弱酸酸性性交交换换剂剂的的交交换换液液pHpH应在应在6 6以上。以上。同同样样在在阴阴离离子子交交换换剂剂中中，强强碱碱性性交交换换剂剂的的交交换换液液的的pHpH应应在在1212以以下下，弱弱碱碱性性应应在在7 7以下。以下。5353ppt课件2 2、目标离子的交换性能：、目标离子的交换性能：主要取决于母体化合物的解离、目标离主要取决于母体化合物的解离、目标离子的电荷、半径及酸碱性的强弱。解离常数子的电荷、半径及酸碱性的强弱。解离常数大，酸碱性强者置换容易，但洗脱相对来说大，酸碱性强者置换容易，但洗脱相对来说较难。离解离子价数愈高，电荷愈大，则它较难。离解离子价数愈高，电荷愈大，则它的引力愈强，愈易交换在交换树脂上。碱金的引力愈强，愈易交换在交换树脂上。碱金属、碱土金属及稀土元素还与它们的原子序属、碱土金属及稀土元素还与它们的原子序数有关，碱金属原子序数大，则交换吸附就数有关，碱金属原子序数大，则交换吸附就强，稀土元素的原子序数小，其交换吸附强。强，稀土元素的原子序数小，其交换吸附强。5454ppt课件3 3、被交换物质在溶液中的浓度、被交换物质在溶液中的浓度 离子交换操作通常是在水溶液或含有离子交换操作通常是在水溶液或含有水的极性溶剂中进行，这样有利于离解与水的极性溶剂中进行，这样有利于离解与交换。交换。浓度越低，离子交换剂的选择性大。浓度越低，离子交换剂的选择性大。浓度过高，将降低物质的解离，有时会影浓度过高，将降低物质的解离，有时会影响吸附次序及选择性。另外，还会引起树响吸附次序及选择性。另外，还会引起树脂表面及内部交联网孔收缩，影响离子进脂表面及内部交联网孔收缩，影响离子进入网孔。所以一般实验操作时所用溶液的入网孔。所以一般实验操作时所用溶液的浓度应该略稀，有利于提取分离。浓度应该略稀，有利于提取分离。5555ppt课件 4 4、温度的影响、温度的影响 温度的改变对稀溶液的离子交换性能影响不大，温度的改变对稀溶液的离子交换性能影响不大，但在但在0.1mol/L0.1mol/L以上浓度时，温度升高对水合倾向大以上浓度时，温度升高对水合倾向大的离子容易交换吸附。同时离子的活性系数增大，的离子容易交换吸附。同时离子的活性系数增大，对弱酸、弱碱交换剂来说其交换率有较大的影响。对弱酸、弱碱交换剂来说其交换率有较大的影响。一般温度增高，离子交换速度加快，在洗脱时亦可一般温度增高，离子交换速度加快，在洗脱时亦可提高洗脱能力。提高洗脱能力。但对不耐热的交换剂应注意提高温但对不耐热的交换剂应注意提高温度的条件，避免引起交换剂的破坏。度的条件，避免引起交换剂的破坏。5 5、溶剂的影响、溶剂的影响通常在水中进行交换，通常在水中进行交换，亦可采用含水溶剂，但在极亦可采用含水溶剂，但在极性小的溶剂中难以进行或不进行交换，同时还导致性小的溶剂中难以进行或不进行交换，同时还导致离子交换的选择性的降低或消失。离子交换的选择性的降低或消失。5656ppt课件阳离子交换树脂临界温度阴离子交换树脂临界温度华东强酸阳42华东强酸阳42Na型95H型40华东弱碱阴32150Amberlite IR-120Na型120H型100Amberlite IRA-400Amberlite IRA-400Cl型90OH型49Amberlite IR-120Na型120Amberlite IRA-410 andAmberlite IRA-411Cl型82OH型40Amberlite IRC-50Na型120Dowex50Na型120H型150Dowex1 and Dowex2Cl型100OH型50Dowex50Na型95离子交换树脂干燥的临界温度 5757ppt课件六、树脂的预处理及再生六、树脂的预处理及再生（1 1）树脂的选择与准备：）树脂的选择与准备：选择树脂类型时，首先必须了解其性能如交选择树脂类型时，首先必须了解其性能如交换量的大小、颗粒大小、耐热性、酸碱度，换量的大小、颗粒大小、耐热性、酸碱度，然后进行预处理。普通的树脂，粒子都较大，然后进行预处理。普通的树脂，粒子都较大，大部分是大部分是35352020目（目（0.490.490.830.83毫米），亦毫米），亦有有5050目，可作为植物成分的粗提及初步划分，目，可作为植物成分的粗提及初步划分，但不适用子离子交换层析。但不适用子离子交换层析。离子交换层析一般需要较细的树脂，因此需要把它干燥，粉碎后，过筛或利用浮选法进行选择。5858ppt课件（2 2）预处理）预处理 除去可溶性小分子有机物和铁、钙等杂质。首先除去可溶性小分子有机物和铁、钙等杂质。首先把新树脂浸在蒸馏水中把新树脂浸在蒸馏水中1 12d2d，使它膨润后，装在层析，使它膨润后，装在层析管中，按下法处理：管中，按下法处理：强酸性阳离子交换树脂的预处理：强酸性阳离子交换树脂的预处理：新树脂一般是新树脂一般是NaNa型。先用树脂体积的型。先用树脂体积的2020倍的倍的2 2mol/Lmol/L盐酸以盐酸以1ml/(cm1ml/(cm2 2min)min)左右的速度进行交换，使它变为左右的速度进行交换，使它变为H H型后用水洗到流出液呈中性，然后用树脂体积的型后用水洗到流出液呈中性，然后用树脂体积的l0l0倍倍量的量的1 1mol/Lmol/L氢氧化钠（或食盐）进行交换，使它变为氢氧化钠（或食盐）进行交换，使它变为NaNa型。再用水洗到流出液不含型。再用水洗到流出液不含NaNa为止（焰色反应无黄为止（焰色反应无黄色）。再重复一次盐酸色）。再重复一次盐酸氢氧化钠（或食盐）处理。氢氧化钠（或食盐）处理。最后用树脂体积的最后用树脂体积的1010倍量的倍量的l lmol/Lmol/L盐酸进行交换，使盐酸进行交换，使它变为它变为H H型，然后用蒸馏水洗到流出液呈中性为止。型，然后用蒸馏水洗到流出液呈中性为止。5959ppt课件 强碱性阴离子交换树脂的预处理：强碱性阴离子交换树脂的预处理：新树脂一般呈新树脂一般呈ClCl型，依次用树脂体积的型，依次用树脂体积的2020倍的倍的1 1mol/Lmol/L氢氧化钠溶液（使它变为氢氧化钠溶液（使它变为OHOH型）洗涤型）洗涤树脂体积的树脂体积的1010倍量的水洗涤倍量的水洗涤用树脂体积的用树脂体积的lOlO倍量的倍量的l lmol/Lmol/L盐酸溶液洗涤（使它变为盐酸溶液洗涤（使它变为ClCl型）型）用蒸馏水洗至流出液近中性为止。再重复一用蒸馏水洗至流出液近中性为止。再重复一次氢氧化钠次氢氧化钠盐酸处理。最后用树脂体积的盐酸处理。最后用树脂体积的1010倍量的倍量的1 1mol/Lmol/L氢氧化钠溶液进行交换，使它变为氢氧化钠溶液进行交换，使它变为OHOH型。型。OHOH型树脂容易吸收空气中二氧化碳，因型树脂容易吸收空气中二氧化碳，因此保存时要注意，临用时把此保存时要注意，临用时把C1C1型的树脂变为型的树脂变为OHOH型较好。型较好。6060ppt课件 弱酸性阳离子交换树脂的预处理：弱酸性阳离子交换树脂的预处理：新树脂一般是新树脂一般是NaNa型。依次用树脂体积的型。依次用树脂体积的l0l0倍量的倍量的l lmol/Lmol/L盐酸溶液（使它变为盐酸溶液（使它变为H H型）型）用水用水洗到流出液呈中性为止洗到流出液呈中性为止用树脂体积的用树脂体积的1010倍量倍量的的l lmol/Lmol/L氢氧化钠溶液（使它变为氢氧化钠溶液（使它变为NaNa型，此时型，此时体积膨胀）体积膨胀）用树脂体积的用树脂体积的1010倍量的水洗涤至倍量的水洗涤至中性。如果流出液仍然呈弱碱性。再重复一次中性。如果流出液仍然呈弱碱性。再重复一次盐酸盐酸氢氧化钠处理。最后用树脂体积的氢氧化钠处理。最后用树脂体积的1010倍倍量的量的1 1mol/Lmol/L盐酸溶液使它变为盐酸溶液使它变为H H型。用水洗到中型。用水洗到中性。性。6161ppt课件 弱碱性阴离子交换树脂的预处理：弱碱性阴离子交换树脂的预处理：新树脂一般是新树脂一般是ClCl型。预处理与强碱性阴离型。预处理与强碱性阴离子交换树脂基本相同。变为子交换树脂基本相同。变为ClCl型后，用水洗涤型后，用水洗涤时因为水解的关系不容易洗到中性。一般用树时因为水解的关系不容易洗到中性。一般用树脂体积的脂体积的l0l0倍量水洗涤就可以。除盐酸外有时倍量水洗涤就可以。除盐酸外有时也用硫酸，也可用氯化铵代替氯化钠。交换终也用硫酸，也可用氯化铵代替氯化钠。交换终点可以用以下方法来判定。请参考下表。点可以用以下方法来判定。请参考下表。6262ppt课件交换前试剂交换后交换终点的判断方法NaRHRNH4RHRRClROHR2SO4HClNH4ClNaClNaOHNaOHH2SO4NaClHRNH4RNaRNaRROHR2SO4RClNa的火焰反应甲基红等酸性指示剂奈氏试剂检测铵离子酚酞硝酸酸化，硝酸银检测氯离子甲基红等酸性指示剂氯化钡检测硫酸根离子树脂预处理终点交换点的判断树脂预处理终点交换点的判断 6363ppt课件（3 3）再生）再生：用过的树脂，如还要交换同一种样品，用过的树脂，如还要交换同一种样品，把盐型变为游离型即可。如要交换其他样品，把盐型变为游离型即可。如要交换其他样品，要用预处理的方法再生。不用时加水，保存要用预处理的方法再生。不用时加水，保存在广口瓶中。若遇耐热性离子交换树脂，则在广口瓶中。若遇耐热性离子交换树脂，则可在加温条件下处理，市售商品往往是湿的，可在加温条件下处理，市售商品往往是湿的，若遇到干燥状态的树脂时，不要马上加水，若遇到干燥状态的树脂时，不要马上加水，这样易引起龟裂，影响物理性能。可先加饱这样易引起龟裂，影响物理性能。可先加饱和氯化钠湿润后再按前述方法处理或再生。和氯化钠湿润后再按前述方法处理或再生。6464ppt课件七、实验技术七、实验技术 关于树脂量、层析管的粗细、展开溶剂量和流速的关系，可以参考下表。柱子直径cm柱子高度cm树脂量干燥品/g粒子的目数洗脱剂量/ml0.15M NH3流速ml/min7.65.13.82.51.71.20.86141302013.69.66.4110033513541124.21.3608060808010080100801008010080120300009500390012003401207040201041.50.5酚磺酸型阳离子交换柱的操作条件 6565ppt课件苯乙烯强酸型阳离子交换柱的操作条件 柱子直径cm柱子高度cm树脂量干燥品/g粒子的目数洗脱剂量/ml0.15M NH3流速ml/min7.65.13.82.51.71.20.846312315107.24.88302551063093.21.0608060806080608060808010010012058000175007300210062022070502512620.66666ppt课件强碱性阴离子交换柱的操作条件 柱子直径cm柱子高度cm树脂量干燥品/g粒子的目数洗脱剂量/ml0.15M NH3流速ml/min3.82.51.71.20.82315107.24.8100288.33.00.9100