透射电镜的原理与演示课件

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电子显微镜的原理与演示电子显微镜的原理与演示 演演示示实实验验1电子显微镜的原理与演示 演示实验1分分分分辨辨辨辨力力力力(resolution):指指显显微微镜镜能能将将近近邻邻的的两两个个质质点点分分辨辨清清楚楚的的能能力力,通通常常是是用用相相邻邻两两点点间间的距离的距离(D)来表示。来表示。一、电子显微镜出现的必然性一、电子显微镜出现的必然性一、电子显微镜出现的必然性光源的波长光源的波长镜口率镜口率(N.A.)1.1.分辨力分辨力分辨力分辨力2分辨力(resolution):指显微镜能将近邻的两个质点分可见光波长为可见光波长为400700nm(平均平均550nm)取决于镜口角和物镜与标本间介质的折射率取决于镜口角和物镜与标本间介质的折射率 vv波长:波长:波长:波长:vv镜口率镜口率镜口率镜口率(N.A.)(N.A.)的大小:的大小:的大小:的大小:镜口角镜口角物镜与标本之间介质的折射率物镜与标本之间介质的折射率空气的折射率为空气的折射率为1水为水为1.33香柏油为香柏油为1.515-溴萘为溴萘为1.66 3可见光波长为400700nm(平均550nm)取决于镜紫外光显微镜:紫外光显微镜:紫外光显微镜:紫外光显微镜:0.1 0.1 mm光镜分辨力的最小数值:光镜分辨力的最小数值:0.2 0.2 mm一般光镜设计的最大放大倍数为一般光镜设计的最大放大倍数为1,0001,500 光学分辨率的极限!光学分辨率的极限!光学分辨率的极限!光学分辨率的极限!JJ有效放大:有效放大:有效放大:有效放大:指指本本来来用用肉肉眼眼看看不不清清楚楚的的物物体体经经显显微微镜镜放大成像后可以分辨清楚的放大放大成像后可以分辨清楚的放大指指本本来来用用肉肉眼眼能能看看清清楚楚的的物物体体经经放放大大镜镜、幻幻灯灯机机或或投投影影仪仪等等放放大大成成像像后后可可以以分分辨辨得更清楚的放大。得更清楚的放大。LL无效放大:无效放大:无效放大:无效放大:4紫外光显微镜:0.1 m光镜分辨力的最小数值:0.2 各种光与电子束的波长比较各种光与电子束的波长比较各种光与电子束的波长比较各种光与电子束的波长比较各种光与电子束的波长比较各种光与电子束的波长比较名名 称称波长波长(nm)可见光可见光可见光可见光760390760390紫外光紫外光紫外光紫外光3901339013X-X-射线射线射线射线130.05130.05 -射线射线射线射线10.00510.005电子束电子束电子束电子束 100V 100V0.1230.123 10,000V 10,000V0.01220.0122 100,000V 100,000V0.003870.00387电子束的波长与发射电子电子束的波长与发射电子电子束的波长与发射电子电子束的波长与发射电子束的电压平方根成反比:束的电压平方根成反比:束的电压平方根成反比:束的电压平方根成反比:1 V5各种光与电子束的波长比较名 称波长(nm)电子束的电子显微镜与光学显微镜的异同点电子显微镜与光学显微镜的异同点电子显微镜与光学显微镜的异同点电子显微镜与光学显微镜的异同点电子显微镜与光学显微镜的异同点电子显微镜与光学显微镜的异同点 1,000,0001,000放大倍数放大倍数0.1nm0.20.1 m分分 辨辨 力力电聚焦机械聚焦聚焦方式聚焦方式电磁透镜电磁透镜电磁透镜电磁透镜光学透镜光学透镜光学透镜光学透镜透透透透 镜镜镜镜真真真真 空空空空空空空空 气气气气介介介介 质质质质短:短:0.0030.008长:长:200750波长波长(nm)电子束电子束电子束电子束光光光光 束束束束照照照照 射射射射 光光光光电子显微镜电子显微镜光学显微镜光学显微镜2.2.2.2.电镜与光镜的对比电镜与光镜的对比电镜与光镜的对比电镜与光镜的对比 6电子显微镜与光学显微镜的异同点 1,000,0001,000电子显微镜与光学显微镜结构的对比图解电子显微镜与光学显微镜结构的对比图解电子显微镜与光学显微镜结构的对比图解电子显微镜与光学显微镜结构的对比图解 7电子显微镜与光学显微镜结构的对比图解 7二、电镜的分类二、电镜的分类二、电镜的分类根据电子束和样品之间作用方式的不同,可将根据电子束和样品之间作用方式的不同,可将电镜分为电镜分为4 4大类大类:1)物体透射电子物体透射电子2)物体发射电子物体发射电子3)物体反射电子物体反射电子4)物体吸收电子物体吸收电子透射电镜透射电镜透射电镜透射电镜透射电镜透射电镜扫描电镜扫描电镜扫描电镜扫描电镜扫描电镜扫描电镜观察和分析样品的内部结构观察和分析样品的内部结构观察和分析样品的表面立体形貌观察和分析样品的表面立体形貌8二、电镜的分类根据电子束和样品之间作用方式的不同,可将电镜分三、透射式电子显微镜三、透射式电子显微镜三、透射式电子显微镜 真空系统真空系统供电及保护系统供电及保护系统电子照明系统电子照明系统成象系统成象系统观察记录系统观察记录系统 1 1 1 1、透射电镜的结构、透射电镜的结构、透射电镜的结构、透射电镜的结构 9三、透射式电子显微镜 真空系统1、透射电镜的结构 9电子照明系统电子照明系统成象系统成象系统观察记录系统观察记录系统真空系统真空系统供电及供电及保护系统保护系统透镜系统或透镜系统或电子光学系统电子光学系统 透射电镜的结构透射电镜的结构透射电镜的结构透射电镜的结构10电子照明系统成象系统观察记录系统真空系统供电及透镜系统或透射一般电镜一般电镜超高压电镜超高压电镜真空系统真空系统抽真空的意义:抽真空的意义:抽真空的意义:抽真空的意义:=防止灯丝的氧化损伤;防止灯丝的氧化损伤;=确保电子束在运行过程中的运动轨迹不受空气分子干扰;确保电子束在运行过程中的运动轨迹不受空气分子干扰;=去除空气分子对样品的污染。去除空气分子对样品的污染。1.3 10-12Pa离子泵离子泵离子泵离子泵真空涡流泵真空涡流泵真空涡流泵真空涡流泵机械泵:机械泵:机械泵:机械泵:油扩散泵:油扩散泵:油扩散泵:油扩散泵:冷阱:冷阱:冷阱:冷阱:真空管道、阀门、储气罐等真空管道、阀门、储气罐等真空管道、阀门、储气罐等真空管道、阀门、储气罐等1 Pa 1.3 10-510-6Pa;1.3 10-6Pa 1.3 10-7 10-9Pa1.3 10-9Pa 1.3 10-10Pa真空系统的组成部件:真空系统的组成部件:真空系统的组成部件:真空系统的组成部件:真真空空系系统统11一般电镜超高压电镜真空系统抽真空的意义:防止灯丝的氧化损伤;供电及保护系统的组成部件及其作用:供电及保护系统的组成部件及其作用:供电及保护系统的组成部件及其作用:供电及保护系统的组成部件及其作用:供供电电及及保保护护系系统统高电压低电流的高压电源高电压低电流的高压电源高电压低电流的高压电源高电压低电流的高压电源:产生高速电子产生高速电子低电压高电流的透镜电源低电压高电流的透镜电源低电压高电流的透镜电源低电压高电流的透镜电源:控制高速电子束的运动轨迹控制高速电子束的运动轨迹一般电镜均拥有两个电源:一般电镜均拥有两个电源:一旦电镜的某一部分发生故障一旦电镜的某一部分发生故障,电镜的保护系电镜的保护系统会让其自动紧急关机和断电统会让其自动紧急关机和断电,以免损伤电镜以免损伤电镜!稳压和稳流装置:稳压和稳流装置:保证电压和电流的高度稳定保证电压和电流的高度稳定 保护与控制系统:保护与控制系统:12供电及保护系统的组成部件及其作用:供电及保护系统高电压低电流电子照明系统的组成部件及其作用:电子照明系统的组成部件及其作用:电子照明系统的组成部件及其作用:电子照明系统的组成部件及其作用:电电子子照照明明系系统统 电子枪:电子枪:电子枪:电子枪:产生高压电子束产生高压电子束 两级聚光镜:两级聚光镜:两级聚光镜:两级聚光镜:会聚高压电子束,以得到极细而均匀的电子束流会聚高压电子束,以得到极细而均匀的电子束流第一聚光镜第一聚光镜:将电子束的直径缩小:将电子束的直径缩小2060倍倍第二聚光镜第二聚光镜:将电子束的直径扩大:将电子束的直径扩大12倍倍第二聚光镜第二聚光镜第二聚光镜第二聚光镜放大放大第一聚光镜第一聚光镜第一聚光镜第一聚光镜缩小缩小高压高压(V)高高 压压电子束电子束灯丝灯丝栅板栅板阳极阳极电子枪电子枪电子枪电子枪13电子照明系统的组成部件及其作用:电子照明系统电子枪:产生高压成象系统的组成部件及其作用:成象系统的组成部件及其作用:成象系统的组成部件及其作用:成象系统的组成部件及其作用:成成象象系系统统 样品室样品室样品室样品室样品室样品室 成像与放大装置成像与放大装置成像与放大装置成像与放大装置成像与放大装置成像与放大装置冷阱冷阱样品放置室样品放置室液氮罐液氮罐金属导杆金属导杆放大放大50倍倍放大放大3倍倍放大放大15倍倍放大放大200倍倍500,000倍倍物镜物镜中间镜中间镜I I中间镜中间镜IIII投影镜投影镜吸附样品室中的少量空气分子吸附样品室中的少量空气分子以提高真空度以提高真空度降低温度可防止电子的热漂移降低温度可防止电子的热漂移铜网铜网样品样品14成象系统的组成部件及其作用:成象系统样品室成像与放大装置冷阱观察记录系统的组成部件及其作用:观察记录系统的组成部件及其作用:观察记录系统的组成部件及其作用:观察记录系统的组成部件及其作用:观观察察记记录录系系统统注意注意:电镜照相与普通照相不同,图像的反衬度最低时电镜照相与普通照相不同,图像的反衬度最低时才是正聚焦;且底片还必须要经过预干燥处理才是正聚焦;且底片还必须要经过预干燥处理$观察室观察室观察室观察室观察室观察室LL放大镜放大镜放大镜放大镜放大镜放大镜照相装置照相装置照相装置照相装置照相装置照相装置透过样品的电子打到荧透过样品的电子打到荧光屏上可显示出反映样光屏上可显示出反映样品真实结构的图像品真实结构的图像保护眼睛保护眼睛荧光屏荧光屏荧光屏荧光屏铅玻璃窗铅玻璃窗铅玻璃窗铅玻璃窗用于放大投到荧光屏上的图像用于放大投到荧光屏上的图像电子形成的荧光图像衰减速度很快,一旦电子形成的荧光图像衰减速度很快,一旦观察到理想的结构图像就需要尽快照相观察到理想的结构图像就需要尽快照相15观察记录系统的组成部件及其作用:观察记录系统注意:电镜照相与2 2 2 2、透射电镜的成像原理、透射电镜的成像原理、透射电镜的成像原理、透射电镜的成像原理 获得高分辨率的图像:获得高分辨率的图像:数百万倍数百万倍数百万倍数百万倍v使用电子枪发射出了波长极短的电子波使用电子枪发射出了波长极短的电子波v利用电磁透镜可对电子束进行聚焦、放大和成像利用电磁透镜可对电子束进行聚焦、放大和成像高速电子束高速电子束 透射样品透射样品162、透射电镜的成像原理 获得高分辨率的图像:数百万倍使用电子电能转变成光能电能转变成光能图像各处浓淡的不同真实反映图像各处浓淡的不同真实反映了样品不同部位的物质结构了样品不同部位的物质结构高压电子枪高压电子枪高速电子束高速电子束电磁透镜电磁透镜样品样品电子束发生投射电子束发生投射荧光屏荧光屏浓淡不同的图像浓淡不同的图像成像原理:成像原理:成像原理:成像原理:成像原理:成像原理:17电能转变成光能图像各处浓淡的不同真实反映了样品不同部位的物质透射电镜照片演示透射电镜照片演示微管蛋白的免疫荧光照片微管蛋白的免疫荧光照片微管蛋白的免疫荧光照片微管蛋白的免疫荧光照片18透射电镜照片演示微管蛋白的免疫荧光照片18一个植物细胞的透射电镜照片一个植物细胞的透射电镜照片一个植物细胞的透射电镜照片一个植物细胞的透射电镜照片一个植物细胞的透射电镜照片一个植物细胞的透射电镜照片图像各处浓淡的不同真实反映了样品中不同部位的物质结构图像各处浓淡的不同真实反映了样品中不同部位的物质结构图像各处浓淡的不同真实反映了样品中不同部位的物质结构图像各处浓淡的不同真实反映了样品中不同部位的物质结构 透透射射电电镜镜照照片片演演示示19一个植物细胞的透射电镜照片图像各处浓淡的不同真实反映了样品中糙面内质网的透射电镜照片糙面内质网的透射电镜照片糙面内质网的透射电镜照片糙面内质网的透射电镜照片糙面内质网的透射电镜照片糙面内质网的透射电镜照片透透射射电电镜镜照照片片演演示示20糙面内质网的透射电镜照片透射电镜照片演示20多核糖体的透射电镜照片多核糖体的透射电镜照片多核糖体的透射电镜照片多核糖体的透射电镜照片多核糖体的透射电镜照片多核糖体的透射电镜照片透透射射电电镜镜照照片片演演示示21多核糖体的透射电镜照片透射电镜照片演示21玉米分散高尔基体的透射电镜照片玉米分散高尔基体的透射电镜照片玉米分散高尔基体的透射电镜照片玉米分散高尔基体的透射电镜照片玉米分散高尔基体的透射电镜照片玉米分散高尔基体的透射电镜照片透透射射电电镜镜照照片片演演示示22玉米分散高尔基体的透射电镜照片透射电镜照片演示22线粒体的透射电镜照片线粒体的透射电镜照片线粒体的透射电镜照片线粒体的透射电镜照片线粒体的透射电镜照片线粒体的透射电镜照片叶绿体的叶绿体的叶绿体的叶绿体的叶绿体的叶绿体的透射电镜透射电镜透射电镜透射电镜透射电镜透射电镜照片照片照片照片照片照片透透射射电电镜镜照照片片演演示示23线粒体的透射电镜照片叶绿体的透射电镜照片透射电镜照片演示23细胞核的透射电镜照片细胞核的透射电镜照片细胞核的透射电镜照片细胞核的透射电镜照片细胞核的透射电镜照片细胞核的透射电镜照片有丝分裂器的透射电镜照片有丝分裂器的透射电镜照片有丝分裂器的透射电镜照片有丝分裂器的透射电镜照片有丝分裂器的透射电镜照片有丝分裂器的透射电镜照片凋凋凋凋凋凋亡亡亡亡亡亡细细细细细细胞胞胞胞胞胞正正正正正正在在在在在在杀杀杀杀杀杀肿肿肿肿肿肿瘤瘤瘤瘤瘤瘤细细细细细细胞胞胞胞胞胞的的的的的的T T T细细细细细细胞胞胞胞胞胞透透射射电电镜镜照照片片演演示示24细胞核的透射电镜照片有丝分裂器的透射电镜照片凋亡细胞正在杀肿 -辅肌动蛋白辅肌动蛋白辅肌动蛋白辅肌动蛋白热休克蛋白热休克蛋白热休克蛋白热休克蛋白Hsp60Hsp60Hsp60Hsp60笼形笼形笼形笼形蛋白蛋白蛋白蛋白透透射射电电镜镜照照片片演演示示25-辅肌动蛋白热休克蛋白Hsp60笼形蛋白透射电镜照片演示2金的原子布阵的透射电镜照片金的原子布阵的透射电镜照片金的原子布阵的透射电镜照片金的原子布阵的透射电镜照片金的原子布阵的透射电镜照片金的原子布阵的透射电镜照片透透射射电电镜镜照照片片演演示示26金的原子布阵的透射电镜照片透射电镜照片演示26T4T4T4噬菌体噬菌体噬菌体噬菌体噬菌体噬菌体负染色负染色负染色负染色负染色负染色的透射电镜照片的透射电镜照片的透射电镜照片的透射电镜照片的透射电镜照片的透射电镜照片图像各处浓淡的不同与样品中不同部位的物质结构相反图像各处浓淡的不同与样品中不同部位的物质结构相反图像各处浓淡的不同与样品中不同部位的物质结构相反图像各处浓淡的不同与样品中不同部位的物质结构相反 透透射射电电镜镜照照片片演演示示27T4噬菌体负染色的透射电镜照片图像各处浓淡的不同与样品中不同螺原体螺原体螺原体螺原体28螺原体28驱动蛋白驱动蛋白驱动蛋白驱动蛋白核纤层蛋白核纤层蛋白核纤层蛋白核纤层蛋白纤毛动力蛋白纤毛动力蛋白纤毛动力蛋白纤毛动力蛋白胞质动力蛋白胞质动力蛋白胞质动力蛋白胞质动力蛋白29驱动蛋白核纤层蛋白纤毛动力蛋白胞质动力蛋白29在透射电镜中,被观察粒子的大在透射电镜中,被观察粒子的大小一定要大于电子束的波长才能被小一定要大于电子束的波长才能被分辨出来;否则,电子束就会发生分辨出来;否则,电子束就会发生绕射,无法看到粒子绕射,无法看到粒子!30在透射电镜中,被观察粒子的大小一定要大于电子束的波长才能被分扫描电镜扫描电镜扫描电镜扫描电镜透射电镜透射电镜透射电镜透射电镜 光光光光 镜镜镜镜 肉眼肉眼玻璃透镜玻璃透镜(目镜目镜)投影镜投影镜玻璃透镜玻璃透镜(物镜物镜)样品样品玻璃透镜玻璃透镜(聚光镜聚光镜)光源光源(卤灯或汞灯卤灯或汞灯)高压电子枪高压电子枪样品样品电磁电磁透镜透镜束偏转器束偏转器图像投到图像投到视屏上视屏上荧光屏荧光屏光镜、透射电镜及扫描电镜的成像光路图解光镜、透射电镜及扫描电镜的成像光路图解光镜、透射电镜及扫描电镜的成像光路图解光镜、透射电镜及扫描电镜的成像光路图解 31扫描电镜透射电镜 光 镜 肉眼玻璃透镜投影镜玻璃透镜样品玻璃四、扫描电镜的结构与成像原理四、扫描电镜的结构与成像原理四、扫描电镜的结构与成像原理 1.1.扫描电镜的基本结构扫描电镜的基本结构扫描电镜的基本结构扫描电镜的基本结构电子光学系统电子光学系统电子枪电子枪电磁透镜电磁透镜扫描线圈扫描线圈样品室样品室信号的收集处理及显示系统信号的收集处理及显示系统真空系统真空系统供电保护系统等供电保护系统等扫描电镜扫描电镜扫描电镜扫描电镜32四、扫描电镜的结构与成像原理 1.扫描电镜的基本结构电子光电子枪电子枪电磁透镜电磁透镜扫描线圈扫描线圈样品室样品室信号的收集处理系统信号的收集处理系统真空系统真空系统供电供电保护保护系统系统显示系统显示系统(显象管显象管)(110KV)33电子枪电磁透镜扫描线圈样品室信号的收集处理系统真空系统供电显电子枪灯丝电子枪灯丝电磁电磁透镜透镜探测器探测器电磁电磁透镜透镜扫描线圈的扫描线圈的束偏转器束偏转器样品托样品托样品样品显象管显象管电子光学系统电子光学系统电子光学系统电子光学系统扫描电镜的结构简图扫描电镜的结构简图扫描电镜的结构简图扫描电镜的结构简图34电子枪灯丝电磁探测器电磁扫描线圈的样品托样品显象管电子光学系2.扫描电镜的成像原理扫描电镜的成像原理电子枪电子枪接接 受、受、转变成光子转变成光子放放 大、大、转换成电压信号转换成电压信号电子束电子束电磁透镜电磁透镜样品表面样品表面扫描线圈扫描线圈扫描线圈扫描线圈次级电子信号次级电子信号探测器探测器光电倍增管光电倍增管显象管显象管/荧光屏荧光屏样品表面上相应点样品表面上相应点样品表面上相应点样品表面上相应点所发出的次级电子数所发出的次级电子数所发出的次级电子数所发出的次级电子数荧光点的亮度荧光点的亮度荧光点的亮度荧光点的亮度352.扫描电镜的成像原理电子枪接 受、放 大、电子束电磁电子枪灯丝电子枪灯丝电子枪灯丝电子枪灯丝电磁电磁电磁电磁透镜透镜透镜透镜探测器探测器探测器探测器电磁电磁电磁电磁透镜透镜透镜透镜扫描线圈的扫描线圈的扫描线圈的扫描线圈的束偏转器束偏转器束偏转器束偏转器样品托样品托样品托样品托样品样品样品样品显象管显象管显象管显象管次级电子次级电子次级电子次级电子扫描电镜成像原理的简单图示扫描电镜成像原理的简单图示扫描电镜成像原理的简单图示扫描电镜成像原理的简单图示36电子枪灯丝电磁探测器电磁扫描线圈的样品托样品显象管次级电子扫(1)扫描电镜所用样品的制备方法简便扫描电镜所用样品的制备方法简便(固定、干燥和喷金固定、干燥和喷金),不需经过超薄切片;,不需经过超薄切片;(2)扫描电镜采用的是次级电子成像;扫描电镜采用的是次级电子成像;(3)扫描电镜所观察到图像景深长,图像富有立体感;扫描电镜所观察到图像景深长,图像富有立体感;(4)图像的放大倍率在很大范围内连续可变图像的放大倍率在很大范围内连续可变(101105);(5)样品的辐射损伤及污染程度小等。样品的辐射损伤及污染程度小等。扫描电镜在结构和工作原理上的特点:扫描电镜在结构和工作原理上的特点:扫描电镜在结构和工作原理上的特点:扫描电镜在结构和工作原理上的特点:37(1)扫描电镜所用样品的制备方法简便(固定、干燥和喷金),(1)分辨率还不够高分辨率还不够高(110nm);(2)只能显示样品的只能显示样品的表面形貌表面形貌,无法显示内部详细结构。,无法显示内部详细结构。v可观察到样品的可观察到样品的内部结构内部结构;v可观察到可观察到富有立体感的图像富有立体感的图像;v提高了提高了分辨率分辨率。扫描电镜的局限性:扫描电镜的局限性:扫描电镜的局限性:扫描电镜的局限性:冰冻蚀刻技术冰冻蚀刻技术冰冻蚀刻技术冰冻蚀刻技术冰冻蚀刻技术冰冻蚀刻技术(freeze etching)(freeze etching)(freeze etching):利用利用“复膜复膜(replica)”在透射电镜下观察:在透射电镜下观察:38(1)分辨率还不够高(110nm);可观察到样品的内部结扫描电镜照片演示扫描电镜照片演示39扫描电镜照片演示39人耳听毛细胞的扫描电镜照片人耳听毛细胞的扫描电镜照片人耳听毛细胞的扫描电镜照片人耳听毛细胞的扫描电镜照片扫扫描描电电镜镜照照片片演演示示40人耳听毛细胞的扫描电镜照片扫描电镜照片演示40人人人人RBCRBC的扫描电镜照片的扫描电镜照片的扫描电镜照片的扫描电镜照片有被小泡的扫描电镜照片有被小泡的扫描电镜照片有被小泡的扫描电镜照片有被小泡的扫描电镜照片转转转转化化化化细细细细胞胞胞胞扫扫描描电电镜镜照照片片演演示示41人RBC的扫描电镜照片有被小泡的扫描电镜照片转化细胞扫描电镜细胞褶皱的扫描电镜照片细胞褶皱的扫描电镜照片细胞褶皱的扫描电镜照片细胞褶皱的扫描电镜照片分裂沟的扫描电镜照片分裂沟的扫描电镜照片分裂沟的扫描电镜照片分裂沟的扫描电镜照片扫扫描描电电镜镜照照片片演演示示42细胞褶皱的扫描电镜照片分裂沟的扫描电镜照片扫描电镜照片演示4冰冻蚀刻技术冰冻蚀刻技术冰冰冻冻断断裂裂技技术术也也是是研研究究细细胞胞内内部部各各种种细细胞胞器器结结构构 的有用手段。的有用手段。(freeze-etching techniques)亦亦称称冰冰冻冻断断裂裂(freeze-fracture)(freeze-fracture),是是研研究究生生物物膜膜内内部部结结构构的的一一种种有有用用的的技技术术,关关于于膜膜结结构构的的许许多多资资料料即是利用这种方法取得的。即是利用这种方法取得的。43冰冻蚀刻技术冰冻断裂技术也是研究细胞内部各种细胞器结构 将标本于将标本于-100干冰中或干冰中或-196液氮中,超低温冰冻。液氮中,超低温冰冻。然然后后用用冰冰刀刀骤骤然然将将标标本本冲冲断断开开,升升温温后后冰冰在在真真空空条条件件下迅即升华,暴露出了断裂面结构下迅即升华,暴露出了断裂面结构蚀刻蚀刻(etching)。蚀刻蚀刻蚀刻蚀刻断裂断裂断裂断裂(2)(2)冰冻蚀刻技术的操作步骤冰冻蚀刻技术的操作步骤冰冻蚀刻技术的操作步骤冰冻蚀刻技术的操作步骤:44将标本于-100干冰中或-196液氮中,超低温冰冻。蚀蚀刻刻后后,再再向向断断裂裂上上喷喷涂涂一一层层蒸蒸汽汽碳碳和和铂铂。然然后后将将组组织织溶溶掉掉,把把碳碳和和铂铂的的膜膜剥剥下下,此此膜膜即为复膜即为复膜(replica)。复膜复膜复膜复膜 复复膜膜显显示示出出了了标标本本蚀蚀刻刻面面的的形形态态,可可置置于于透透射射电电镜镜下下观观察察。电电镜镜下下的的影影像像即即代代表表标标本本中中细细胞断裂面处的结构。胞断裂面处的结构。45 蚀刻后,再向断裂上喷涂一层蒸汽碳和铂。然后将组织溶掉细胞质膜的冰冻蚀刻电镜照片细胞质膜的冰冻蚀刻电镜照片细胞质膜的冰冻蚀刻电镜照片细胞质膜的冰冻蚀刻电镜照片冰冰冻冻蚀蚀刻刻电电镜镜照照片片演演示示46细胞质膜的冰冻蚀刻电镜照片冰冻蚀刻电镜照片演示46核膜核膜核膜核膜紧密连结的冰冻蚀刻电镜照片紧密连结的冰冻蚀刻电镜照片紧密连结的冰冻蚀刻电镜照片紧密连结的冰冻蚀刻电镜照片微绒毛的冰冻蚀刻电镜照片微绒毛的冰冻蚀刻电镜照片微绒毛的冰冻蚀刻电镜照片微绒毛的冰冻蚀刻电镜照片连结子连结子连结子连结子基膜基膜基膜基膜冰冰冻冻蚀蚀刻刻电电镜镜照照片片演演示示47核膜紧密连结的冰冻蚀刻电镜照片微绒毛的冰冻蚀刻电镜照片连结子电镜有关的讲解内容到此结束电镜有关的讲解内容到此结束Group 1Group 1:测试中心一楼透射电镜室:测试中心一楼透射电镜室:测试中心一楼透射电镜室:测试中心一楼透射电镜室注意:注意:注意:注意:请务必服从命令听指挥!请务必服从命令听指挥!电电电电镜镜镜镜室室室室参参参参观观观观安安安安排:排:排:排:?本周三?本周三?本周三?本周三 14:00 14:00Group 3Group 3:测试中心一楼透射电镜室:测试中心一楼透射电镜室:测试中心一楼透射电镜室:测试中心一楼透射电镜室?本周五?本周五?本周五?本周五 14:00 14:00Group 2Group 2:测试中心一楼扫描电镜室:测试中心一楼扫描电镜室:测试中心一楼扫描电镜室:测试中心一楼扫描电镜室Group 4Group 4:测试中心一楼扫描电镜室:测试中心一楼扫描电镜室:测试中心一楼扫描电镜室:测试中心一楼扫描电镜室Group 2Group 2:测试中心一楼透射电镜室:测试中心一楼透射电镜室:测试中心一楼透射电镜室:测试中心一楼透射电镜室Group 1Group 1:测试中心一楼扫描电镜室:测试中心一楼扫描电镜室:测试中心一楼扫描电镜室:测试中心一楼扫描电镜室Group 3Group 3:测试中心一楼透射电镜室:测试中心一楼透射电镜室:测试中心一楼透射电镜室:测试中心一楼透射电镜室Group 4Group 4:测试中心一楼扫描电镜室:测试中心一楼扫描电镜室:测试中心一楼扫描电镜室:测试中心一楼扫描电镜室48电镜有关的讲解内容到此结束Group 1:测试中心一楼透射电
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