血管疾病并发症培训ppt课件

血管疾病并血管疾病并发发症症血管疾病并发症1一、概述一、概述（一）糖尿病与代谢异常综合征（一）糖尿病与代谢异常综合征胰岛素抵抗通常先于胰岛素抵抗通常先于型糖尿病出现，型糖尿病出现，而且常伴有其他危险因素而且常伴有其他危险因素血脂异常，血脂异常，高血压和促凝因子激活，即代谢异常综高血压和促凝因子激活，即代谢异常综合征。合征。2血管疾病并发症一、概述2血管疾病并发症23血管疾病并发症3血管疾病并发症3（三）糖尿病血管病变密切相关的并发症（三）糖尿病血管病变密切相关的并发症冠心病冠心病(患病危险性提高24倍)中风中风(危险性提高410倍)外周血管病外周血管病(危险性提高710倍)肾病肾病视网膜病视网膜病神经疾病和心肌病神经疾病和心肌病4血管疾病并发症（三）糖尿病血管病变密切相关的并发症4血管疾病并发症4（四）糖尿病并发动脉粥样硬化的概况（四）糖尿病并发动脉粥样硬化的概况（糖尿病患者的死因有（糖尿病患者的死因有80%是动脉粥样硬化症）是动脉粥样硬化症）75%由于冠状动脉粥样硬化症由于冠状动脉粥样硬化症25%由于脑血管或外周血管疾病由于脑血管或外周血管疾病糖尿病并发症的住院治疗患者中糖尿病并发症的住院治疗患者中75%以上以上是因为动脉粥样硬化症是因为动脉粥样硬化症目前，诊断患有目前，诊断患有型糖尿病的患者中超过型糖尿病的患者中超过50%患有冠心病患有冠心病5血管疾病并发症（四）糖尿病并发动脉粥样硬化的概况5血管疾病并发症5（五）糖尿病并发肾病的概况（五）糖尿病并发肾病的概况 未治疗的未治疗的2 2型糖尿病型糖尿病病人，有明显蛋白尿病人，有明显蛋白尿者高达者高达2040，其中，其中20的病人将在二十年的病人将在二十年内发展成晚期肾病。内发展成晚期肾病。糖尿病肾病以肾小球基底膜的增厚为特点糖尿病肾病以肾小球基底膜的增厚为特点,最终进展为肾小球硬化及肾功能丧失。最终进展为肾小球硬化及肾功能丧失。6血管疾病并发症（五）糖尿病并发肾病的概况6血管疾病并发症6二、糖尿病血管病变发生的可能机制二、糖尿病血管病变发生的可能机制血浆蛋白和动脉血管壁蛋白的糖基化和进一步血浆蛋白和动脉血管壁蛋白的糖基化和进一步糖基化形成的非酶晚期糖基化终产物糖基化形成的非酶晚期糖基化终产物(Advancedglycationendproducts，AGEs)糖基氧化和氧化作用产生活性氧簇（糖基氧化和氧化作用产生活性氧簇（Reactive oxygen species，ROS）促凝血状态促凝血状态胰岛素抵抗和高胰岛素血症胰岛素抵抗和高胰岛素血症激素、生长因子和细胞因子促进的血管平滑肌激素、生长因子和细胞因子促进的血管平滑肌细胞增生和泡沫细胞形成细胞增生和泡沫细胞形成7血管疾病并发症二、糖尿病血管病变发生的可能机制7血管疾病并发症7（一）晚期糖基化终产物（一）晚期糖基化终产物(AGEs)的作用的作用 动脉粥样硬化的主要临床表现为冠心病。动脉粥样硬化的主要临床表现为冠心病。约约70%70%的的2 2型糖尿病人死于冠心病型糖尿病人死于冠心病，传统的危险传统的危险因素包括高脂血症，高血压，吸烟，肥胖，缺因素包括高脂血症，高血压，吸烟，肥胖，缺乏锻炼和阳性家族史，这些危险因素在糖尿病乏锻炼和阳性家族史，这些危险因素在糖尿病人中有一定的升高。但糖尿病特异性的危险因人中有一定的升高。但糖尿病特异性的危险因素应该是除此以外的一些因素。素应该是除此以外的一些因素。8血管疾病并发症（一）晚期糖基化终产物(AGEs)的作用8血管疾病并发症8 上世纪，几项前瞻性研究显示高血糖本身上世纪，几项前瞻性研究显示高血糖本身就很明显的预示着冠心病就很明显的预示着冠心病。在新诊断的在新诊断的2 2型糖尿型糖尿病病人中，糖化血红蛋白高达三倍者，十年后病病人中，糖化血红蛋白高达三倍者，十年后心血管发病增长了三倍。最近发现，心梗和冠心血管发病增长了三倍。最近发现，心梗和冠状动脉疾病的发生率与餐后高血糖水平相关状动脉疾病的发生率与餐后高血糖水平相关。目前认为，餐后高血糖致病的主要途径是目前认为，餐后高血糖致病的主要途径是诱导产生诱导产生AGEsAGEs。9血管疾病并发症上世纪，几项前瞻性研究显示高血糖本身就很明显的预91.AGEs的形成的形成AGEs形成于梅拉德氏反应形成于梅拉德氏反应(MaillardMaillard reaction)reaction)。Maillardreaction Maillardreaction是为了记念法国化学是为了记念法国化学家家LouisCamilleMaillardLouisCamilleMaillard在在19121912年发现氨年发现氨基酸与糖共加热变褐色的反应而命名。该反应基酸与糖共加热变褐色的反应而命名。该反应为糖分子或乙醛中的酮基与蛋白质中的氨基之为糖分子或乙醛中的酮基与蛋白质中的氨基之间的非酶促反应。间的非酶促反应。10血管疾病并发症AGEs的形成10血管疾病并发症10AGEs形成过程形成过程11血管疾病并发症AGEs形成过程11血管疾病并发症112.AGEs参与糖尿病血管损伤的证据参与糖尿病血管损伤的证据2型糖尿病肾病肾动脉切片，免疫组化显型糖尿病肾病肾动脉切片，免疫组化显示肾动脉壁中有示肾动脉壁中有AGEs沉积（棕色）沉积（棕色）12血管疾病并发症2.AGEs参与糖尿病血管损伤的证据12血管疾病并发症12EricJ.Topol,etal.Receptor for AGE(RAGE)Mediates Neointimal Formation in Response to Arterial Injury.Circulation.2003;107(17):2238-2243A片正常鼠颈动脉切片；内膜及中层无明显片正常鼠颈动脉切片；内膜及中层无明显AGEs沉积（免疫组化）沉积（免疫组化）B片为糖尿病鼠颈动脉切片；内膜及中层有明显片为糖尿病鼠颈动脉切片；内膜及中层有明显AGEs沉积（褐色）沉积（褐色）AB13血管疾病并发症EricJ.Topol,etal.Receptor13A片片:非糖尿病肾切片；肾小球血管中无非糖尿病肾切片；肾小球血管中无AGEs沉积（免疫组化）沉积（免疫组化）B片片:糖尿病患者肾切片；肾小球血管中有明显糖尿病患者肾切片；肾小球血管中有明显AGEs沉积（棕色）沉积（棕色）AB14血管疾病并发症14血管疾病并发症14糖尿病肾组织切片糖尿病肾组织切片,肾小球血管及肾小球内新月肾小球血管及肾小球内新月体有明显体有明显AGEs沉积（免疫组化，深棕色为阳性信号）沉积（免疫组化，深棕色为阳性信号）15血管疾病并发症糖尿病肾组织切片,肾小球血管及肾小球内新153.AGEs致大血管损伤的基本机制致大血管损伤的基本机制 1)1)大分子交联物大分子交联物AGEsAGEs在动脉壁内的沉积在动脉壁内的沉积,降降低脉管的弹性低脉管的弹性 2)2)AGEsAGEs灭活内皮源性灭活内皮源性NO NO 血管扩张缺陷血管扩张缺陷BucalaR,TraceyKJ,CeramiA.Advanced glycosylation products quench nitric oxide and mediate defective endothelium-dependent vasodilatation in experimental diabetes.JClinInvest1991;87:432-8.16血管疾病并发症3.AGEs致大血管损伤的基本机制16血管疾病并发症16 3)3)AGEsAGEs修饰修饰LDL LDLLDL LDL清除清除正常正常ApoB、E可与可与LDL受体和受体和LDL受体受体相关蛋白结合，糖化相关蛋白结合，糖化ApoB、E不能结合不能结合LDL受体受体BucalaR,MitchellR,ArnoldK,et al.Identification of the major site of apolipoprotein B modification by advanced glycosylation end products blocking uptake by the low density lipoprotein receptor.JBiolChem1995;270:10828-32.17血管疾病并发症3)AGEs修饰LDLLDL清除17血管疾病并17 4)4)AGEsAGEs作用于作用于RAGE RAGE NF-k kB激活激活 表达表达 ICAM-1 MCP-1 PAI-1 组织因子组织因子 VEGF VCAM-1Jean-LucWautier,AnnMarieSchmidt.ProteinGlycationAFirmLinktoEndothelialCellDysfunction.Circulation Research.2004;95（3）:233VlassaraH,FuhH,DonnellyT,et al.Advanced glycation end products promote adhesion molecule(VCAM-1,ICAM-1)expression and atheroma formation in normal rabbits.MolMed1995;1:447-56.18血管疾病并发症4)AGEs作用于RAGENF-kB激活1185)AGEs与与RAGE 交互作用交互作用血管紧张素血管紧张素II诱导的平滑肌细胞增殖诱导的平滑肌细胞增殖ShawSS,SchmidtAM,BanesAK,et al.S100B-RAGE-mediated augmentation of angiotensin II-induced activation of JAK2 in vascular smooth muscle cells is dependent on PLD2.Diabetes2003;52:2381-8.19血管疾病并发症5)AGEs与RAGE交互作用血194.AGEs致肾致肾损伤的基本机制损伤的基本机制1)AGEs的直接作用的直接作用 2 2）刺激结缔组织生长因子和转化生长因子）刺激结缔组织生长因子和转化生长因子1表达表达 ，促进结缔组织增生，致肾纤维化，促进结缔组织增生，致肾纤维化CaiLi*andLuCaidaggerddagger AdvancedGlycationEnd-ProductsInduceConnectiveTissueGrowthFactor-MediatedRenalFibrosisPredominantlythroughTransformingGrowthFactor-IndependentPathway.American Journal of Pathology.2004;165（6）:2033-204320血管疾病并发症4.AGEs致肾损伤的基本机制20血管疾病并发症20Wister大鼠大鼠,分为尾静脉注射分为尾静脉注射PBS、RSA（100mg/kg）和和AGE-RSA（100mg/kg）6周，肾小球中纤维结合素（周，肾小球中纤维结合素（FN）和和4型型胶原表达的变化。胶原表达的变化。21血管疾病并发症Wister大鼠,分为尾静脉注射P21肾小球中肾小球中转化生长因转化生长因子子1（TGF-1）和结缔组织和结缔组织生长因子生长因子（CTGF）表达的变化。表达的变化。22血管疾病并发症肾小球中22血管疾病并发症223)刺激血管紧张素刺激血管紧张素-II增加，加速肾间质纤维化增加，加速肾间质纤维化JenniferL.Faulkner*,LisaM.Szcykalski*,FredyneSpringer,etal.OriginofInterstitialFibroblastsinanAcceleratedModelofAngiotensinII-InducedRenalFibrosis.American Journal of Pathology.2005;167:1193-1205.4）诱导细胞凋亡诱导细胞凋亡和和VEGF表达表达5）刺激肾小球系膜细胞中单核细胞化学趋化因刺激肾小球系膜细胞中单核细胞化学趋化因子子-1(MCP-1)表达，表达，促进促进MCP-1在间质细胞中在间质细胞中分泌，导致糖尿病肾病的启动分泌，导致糖尿病肾病的启动 YamagishiS,et al.Advanced glycation end product-induced apoptosis and overexpression of vascular endothelial growth factor and monocyte chemoattractant protein-1 in human-cultured mesangial cells.JBiolChem2002;277:20309-15.23血管疾病并发症3)刺激血管紧张素-II增加，加速肾间质纤维化23血管23（二）活性氧簇（二）活性氧簇（ROS）的作用的作用在促进糖尿病血管病变及糖尿病肾病中，在促进糖尿病血管病变及糖尿病肾病中，AGEs与与ROS互为因果，加速糖尿病并发症的进展。互为因果，加速糖尿病并发症的进展。AGE-RAGE能诱导能诱导ROS生成，生成，ROS又能又能介导介导AGEs的有害影响的有害影响。1.ROS可上调可上调RAGEmRNA的水平的水平，正反馈地加强正反馈地加强AGE的作用。的作用。2.ROS通过有丝分裂原活化蛋白激酶通过有丝分裂原活化蛋白激酶(MAPK)途径的途径的核因子核因子-B(NF-B)的激活的激活,增加微血管内皮细胞中增加微血管内皮细胞中VEGF基因的转录基因的转录,促血管平滑肌和促血管平滑肌和结缔组织增生，促结缔组织增生，促进动脉硬化及肾单位的纤维化。进动脉硬化及肾单位的纤维化。24血管疾病并发症（二）活性氧簇（ROS）的作用24血管疾病并发症24YvesGorin,KarenBlock,JamesHernandez,etal.NAD(P)Hoxidasemediateshypertrophyandfibronectinexpressioninthediabetickidney.J.Biol.Chem.2005;10.1074/jbc.M502412200辅酶辅酶II氧化酶产生活性氧介导氧化酶产生活性氧介导糖尿病肾病的糖尿病肾病的肾单位肥大和肾单位表达纤维结合素肾单位肥大和肾单位表达纤维结合素。AtsushiKonishi,ToruAizawa,AmyMohan,etal.HydrogenPeroxideActivatestheGas6-AxlPathwayinVascularSmoothMuscleCells.J.Biol.Chem.2004;Vol.279,Issue27,28766-28770 过氧化氢激活血管平滑肌细胞中过氧化氢激活血管平滑肌细胞中VEGF基因基因的转录。的转录。3.ROS的其他多作用环节的其他多作用环节25血管疾病并发症YvesGorin,KarenBlock,James25AndreaM.Vincent,JamesW.Russell,PhillipLow，etal.OxidativeStressinthePathogenesisofDiabeticNeuropathy.EndocrineReviews2004；25(4):612-628 高糖血症可致氧化应激，活性氧簇损伤蛋白，高糖血症可致氧化应激，活性氧簇损伤蛋白，降低其生物活性，损害能量代谢、细胞信号转降低其生物活性，损害能量代谢、细胞信号转导、运输功能等，最终导致细胞死亡。导、运输功能等，最终导致细胞死亡。Jean-LucWautier,AnnMarieSchmidt.ProteinGlycationAFirmLinktoEndothelialCellDysfunction Circulation Research.2004;95（3）:233.在内皮细胞，在内皮细胞，AGEs与与RAGE结合诱导细胞结合诱导细胞粘附分子、组织因子、细胞因子如粘附分子、组织因子、细胞因子如IL-6和单核和单核细胞趋化蛋白细胞趋化蛋白-1等的表达。等的表达。AGEs通过通过RAGE充分发挥其效应是产生活性氧。充分发挥其效应是产生活性氧。26血管疾病并发症AndreaM.Vincent,JamesW26Antonio Ceriello;Enrico Motz.Is Oxidative Stress thePathogenicMechanismUnderlyingInsulinResistance,Diabetes,and Cardiovascular Disease?The Common Soil HypothesisRevisited.Arteriosclerosis,Thrombosis,and Vascular Biology.2004;24(5):816氧化应激是导致胰岛素抵抗、糖尿病和心血管疾病氧化应激是导致胰岛素抵抗、糖尿病和心血管疾病的主要发病机制？的主要发病机制？认为胰岛素抵抗、糖尿病伴有氧化应激。而活性氧认为胰岛素抵抗、糖尿病伴有氧化应激。而活性氧是胰岛素抵抗伴有的内皮细胞功能障碍、最终导致明是胰岛素抵抗伴有的内皮细胞功能障碍、最终导致明显的糖尿病和心血管疾病的发病。认为治疗心血管疾显的糖尿病和心血管疾病的发病。认为治疗心血管疾病的药物如钙通道阻滞剂、血管紧张素转换酶病的药物如钙通道阻滞剂、血管紧张素转换酶（ACE）抑制剂、血管紧张素抑制剂、血管紧张素1（AT-1）受体阻断剂受体阻断剂等的原因在于药品均有细胞内抗氧化活性，结果可减等的原因在于药品均有细胞内抗氧化活性，结果可减少糖尿病的发病。少糖尿病的发病。27血管疾病并发症AntonioCeriello;EnricoMotz.27三、糖尿病血管并发症的防治策略三、糖尿病血管并发症的防治策略(一一)抗糖基化抗糖基化1.作用机理作用机理阻断糖与蛋白等生物大分子功能物质的联结。阻断糖与蛋白等生物大分子功能物质的联结。如氨基胍、维生素如氨基胍、维生素B6等可试用于糖尿病并发等可试用于糖尿病并发症的防治。症的防治。28血管疾病并发症三、糖尿病血管并发症的防治策略28血管疾病并发症28氨基胍的分子结构式氨基胍的分子结构式HHNNHHCNNHH29血管疾病并发症氨基胍的分子结构式29血管疾病并发症29蛋白质糖基化过程蛋白质糖基化过程蛋白质、核酸蛋白质、核酸NNNHHHHCHCHOHCOHC=OHCHOCHHOCHHCOHHCOHHCOHHOCHHOCHHOCHHCOHHCOHHCOHHOCHHHHCOHH解链葡萄糖解链葡萄糖30血管疾病并发症蛋白质糖基化过程30血管疾病并发症30氨基胍的抗糖基化、抗交联作用氨基胍的抗糖基化、抗交联作用31血管疾病并发症氨基胍的抗糖基化、抗交联作用31血管疾病并发症312.近年的相关研究近年的相关研究Yi-TsenLin*,Yung-ZuTseng*,andKuo-ChuChang*,1AminoguanidinePreventsFructose-InducedArterialStiffeninginWistarRats:AorticImpedanceAnalysisExperimental Biology andMedicine2004;229（10）:1038-1045氨基胍防止果糖诱导的氨基胍防止果糖诱导的Wistar大鼠的动脉大鼠的动脉硬化硬化:主动脉阻抗分析主动脉阻抗分析发现氨基胍可能通过抑制果糖源性晚期糖发现氨基胍可能通过抑制果糖源性晚期糖基化终产物的形成而防止果糖引起的基化终产物的形成而防止果糖引起的Wistar大大鼠的动脉硬化改变。鼠的动脉硬化改变。32血管疾病并发症2.近年的相关研究32血管疾病并发症32JosephineM.Forbes1,LouisTeoLoonYee1,VickiThallas1,etal.AdvancedGlycationEndProductInterventionsReduceDiabetes-AcceleratedAtherosclerosis.Diabetes2004;53（7）:1813-1823,抑制晚期糖基化终产物形成减少糖尿病促成的动脉抑制晚期糖基化终产物形成减少糖尿病促成的动脉硬化硬化.应用链脲佐菌素诱导的糖尿病应用链脲佐菌素诱导的糖尿病apoE基因缺陷小鼠基因缺陷小鼠20只，给予只，给予AGEs交联阻断剂交联阻断剂ALT-711，或或AGEs形成形成抑制剂氨基胍抑制剂氨基胍(AG)AG)20周，结果发现用周，结果发现用ALT-711组大鼠组大鼠动脉硬化斑块的面积减少动脉硬化斑块的面积减少30%，用氨基胍组减少，用氨基胍组减少40%，且斑块明显变薄。，且斑块明显变薄。糖尿病也伴随主动脉总胶原尤其是胶原糖尿病也伴随主动脉总胶原尤其是胶原I、III和和IV的积聚，并有纤维化细胞因子的积聚，并有纤维化细胞因子-转换生长因子转换生长因子和结和结缔组织生长因子及细胞内缔组织生长因子及细胞内-平滑肌肌动蛋白增加。在平滑肌肌动蛋白增加。在两糖尿病治疗组均可见这些因素减少的变化。两糖尿病治疗组均可见这些因素减少的变化。33血管疾病并发症JosephineM.Forbes1,Lo33MarkusLassila,KweeK.Seah,TerriJ.Allen,etal.AcceleratedNephropathyinDiabeticApolipoproteinE-KnockoutMouse:RoleofAdvancedGlycationEndProducts.JAmSocNephrol2004;15（8）:2125-2138 晚期糖基化终产物的作用晚期糖基化终产物的作用ApoE基因敲除糖尿病基因敲除糖尿病小鼠加速肾病的发病小鼠加速肾病的发病 本研究采用本研究采用ApoE基因敲除基因敲除(apoE-KO)链脲佐菌素链脲佐菌素糖尿病小鼠模型。分为阳性对照组、糖尿病小鼠模型。分为阳性对照组、AGEs抑制剂抑制剂氨氨基胍基胍(1g/kgperd)治疗组或交联阻断剂治疗组或交联阻断剂ALT-711(20mg/kgperd)应用应用20周。用非糖尿病周。用非糖尿病apoE-KO小鼠作小鼠作对照。发现两治疗组胶原及转化生长因子对照。发现两治疗组胶原及转化生长因子1的表达，的表达，-平滑肌肌动蛋白免疫染色、巨噬细胞的渗出和血平滑肌肌动蛋白免疫染色、巨噬细胞的渗出和血浆及肾的浆及肾的AGEs表达均被削弱。糖尿病表达均被削弱。糖尿病apoE-KO小鼠小鼠的肾损害加速，抑制肾内的肾损害加速，抑制肾内AGEs的积聚则可减轻这些的积聚则可减轻这些损害。损害。34血管疾病并发症MarkusLassila,KweeK.S34Kuo-ChuChang1,*,Kwan-LihHsu2,Tsai-FwuChou3,etal.Aminoguanidinepreventsage-relateddeteriorationinleftventriculararterialcouplinginFisher344ratsBritish Journal of Pharmacology2004;142(7):1099-1104氨氨基基胍胍防防止止Fisher344大大鼠鼠左左心心室室与与动动脉脉衔接处随年龄发生的退行性变衔接处随年龄发生的退行性变发发现现氨氨基基胍胍防防止止大大鼠鼠左左室室动动脉脉联联合合与与年年龄龄相关的退化。相关的退化。35血管疾病并发症Kuo-ChuChang1,*,Kwan-Li35SubramaniamPennathur,YasuoIdo,JozsefI.Heller,.etalReactiveCarbonylsandPolyunsaturatedFattyAcidsProduceaHydroxylRadical-likeSpecies.J.Biol.Chem.,Vol.280,Issue24,22706-22714,June17,2005本研究采用高糖所致的氧化应激时羟自由本研究采用高糖所致的氧化应激时羟自由基引起脂肪酸过氧化、蛋白质损伤的灵长类基引起脂肪酸过氧化、蛋白质损伤的灵长类模型，发现氨基胍能明显减少体内的脂质过模型，发现氨基胍能明显减少体内的脂质过氧化产物和糖基化的蛋白产物。氧化产物和糖基化的蛋白产物。36血管疾病并发症SubramaniamPennathur,Y36(二二)抗氧化抗氧化某些抗氧化酶、还原活性的物质或维生素某些抗氧化酶、还原活性的物质或维生素及活血化淤、消炎类中药。及活血化淤、消炎类中药。1999 1999年年,国内研究披露国内研究披露,活血化淤药川芎嗪活血化淤药川芎嗪可增加血管内皮细胞构建型一氧化氮合酶可增加血管内皮细胞构建型一氧化氮合酶（cNOScNOS）的合成，并有减少糖尿病并发症的的合成，并有减少糖尿病并发症的应用报道。应用报道。有关中药方面的研究，目前尚未查到国外有关中药方面的研究，目前尚未查到国外的相应报道。的相应报道。37血管疾病并发症(二)抗氧化37血管疾病并发症37 川川芎芎嗪嗪是是从从伞伞形形科科藁藁本本属属植植物物川川芎芎根根茎茎中中提提取取分分离离的的生生物物碱碱单单体体。其其化化学学结结构构为为四四甲甲基基吡吡嗪嗪(tetramethel tetramethel pyrazine)pyrazine)，现现已已可可人人工工合成。其化学结构式如下：合成。其化学结构式如下：38血管疾病并发症川芎嗪是从伞形科藁本属植物川芎根茎中提取分离的生38 1.国内外的相关研究国内外的相关研究 LucyB.Esberg和JunRen.TheOxygenRadicalGeneratorPyrogallolImpairsCardiomyocyteContractileFunctionViaaSuperoxideandp38MAPKinase-DependentPathway:ProtectionbyAnisodamineandTetramethylpyrazine.CardiovascularToxicology;2004,Volume4,Issue4,pps.375-384发现川芎嗪通过抗氧化具有保护心肌作用。发现川芎嗪通过抗氧化具有保护心肌作用。冉兴无，等.中国循证医学杂志中国循证医学杂志 2004 Vol.4 No.6 P.393-3972004 Vol.4 No.6 P.393-397 研究认为，研究认为，TMPTMP对治疗糖尿病周围病变可能有一定对治疗糖尿病周围病变可能有一定疗效疗效,但由于尚缺乏高质量的证据支持但由于尚缺乏高质量的证据支持,TMPTMP治疗治疗DPNDPN的的疗效还需进行更多高质量的随机对照试验才能得出肯疗效还需进行更多高质量的随机对照试验才能得出肯定性结论定性结论.39血管疾病并发症1.国内外的相关研究39血管疾病并发症39 曾素耘，樊素璇，蒋小青.川芎嗪对妊娠高血压综合征患者川芎嗪对妊娠高血压综合征患者脐静脉内皮细胞粘附分子表达的抑制作用脐静脉内皮细胞粘附分子表达的抑制作用.中华妇产科杂志.2000;Vol.35No.5P.282-284 2）抑制外周血白细胞）抑制外周血白细胞iNOS-mRNAiNOS-mRNA与与ecNOS-ecNOS-mRNAmRNA表达。以抑制表达。以抑制iNOS-mRNAiNOS-mRNA表达作用强大。表达作用强大。40血管疾病并发症曾素耘，樊素璇，蒋小青.川芎嗪对妊娠高血压综合征患40高果糖大鼠外周血白细胞高果糖大鼠外周血白细胞ecNOS-mRNA表达的变化表达的变化A:高糖饮水高糖饮水1个月大鼠外周血白细胞个月大鼠外周血白细胞ecNOS-mRNA表达表达(1000);B:高糖饮水高糖饮水2个月大鼠外周血白细胞个月大鼠外周血白细胞ecNOS-mRNA表达表达(1000);C:高糖饮水高糖饮水6个月用药个月用药3个月大鼠外周血白细胞个月大鼠外周血白细胞ecNOS-mRNA表达表达(1000);41血管疾病并发症高果糖大鼠外周血白细胞ecNOS-mRNA表达的变化A:高41高糖大鼠外周血白细胞高糖大鼠外周血白细胞iNOS-mRNA的表达的表达1B:高糖饮水高糖饮水2月大鼠外周血白细胞月大鼠外周血白细胞iNOS-mRNA的表达的表达(1000)；1C:高糖饮水高糖饮水3月大鼠外周血白细胞月大鼠外周血白细胞iNOS-mRNA的表达的表达(1000)；1D:高糖饮水高糖饮水6月用药月用药3个月大鼠外周血白细胞个月大鼠外周血白细胞iNOS-mRNA的表达的表达(1000)42血管疾病并发症高糖大鼠外周血白细胞iNOS-mRNA的表达1423)糖尿病大鼠外周血白细胞糖尿病大鼠外周血白细胞PI-3KP85亚亚单位单位mRNA表达降低，应用川芎嗪与氨基胍可表达降低，应用川芎嗪与氨基胍可改善胰岛素信号改善胰岛素信号PI-3KmRNA表达。表达。A：正常对照；正常对照；B：糖尿病对照；糖尿病对照；C：用药用药1月；月；D：用药用药3月月AB43血管疾病并发症3)糖尿病大鼠外周血白细胞PI-3KP85亚43CD44血管疾病并发症C444)糖尿病大鼠外周血白细胞糖尿病大鼠外周血白细胞IGF-1mRNA表表达降低，应用川芎嗪与氨基胍可改善达降低，应用川芎嗪与氨基胍可改善IGF-1mRNA表达。表达。A：正常对照；正常对照；B：糖尿病对照；糖尿病对照；C：用药用药1月；月；D：用药用药3月月AB45血管疾病并发症4)糖尿病大鼠外周血白细胞IGF-1mRNA表达45CD46血管疾病并发症C465)糖尿病大鼠外周血白细胞糖尿病大鼠外周血白细胞TGF-mRNA表表达增加达增加，川芎嗪与氨基胍使川芎嗪与氨基胍使TGF-mRNA表达降表达降低。低。A：糖尿病对照；糖尿病对照；B：用药用药3月月AB47血管疾病并发症5)糖尿病大鼠外周血白细胞TGF-mRNA表达476)7月龄糖尿病大鼠月龄糖尿病大鼠，肾间质发生明显纤维肾间质发生明显纤维化，川芎嗪与氨基胍能减轻肾间质纤维化。化，川芎嗪与氨基胍能减轻肾间质纤维化。A：糖尿病对照；糖尿病对照；B：用药用药3月月AB48血管疾病并发症6)7月龄糖尿病大鼠，肾间质发生明显纤维化，川482004年年获获得得发发明明专专利利49血管疾病并发症2004年获得发明专利49血管疾病并发症4950血管疾病并发症50血管疾病并发症50一、概述一、概述型糖尿病与胰岛素抵抗型糖尿病与胰岛素抵抗糖尿病患者以糖尿病患者以型糖尿病居多（型糖尿病居多（90以上）以上），发生于中老年，多存在胰岛素发生于中老年，多存在胰岛素介导的葡萄糖代谢障碍（胰岛素抵抗）介导的葡萄糖代谢障碍（胰岛素抵抗）或合并胰岛或合并胰岛细胞分泌胰岛素功能缺陷细胞分泌胰岛素功能缺陷。51血管疾病并发症一、概述型糖尿病与胰岛素抵抗51二、胰岛素抵抗课题研究背景二、胰岛素抵抗课题研究背景1.胰胰岛素信号途径素信号途径52血管疾病并发症二、胰岛素抵抗课题研究背景52血管疾病并发症522.前期研究发现及其研究背景果糖喂养2月龄Wistar大鼠3个月复制出明显地胰岛素抵抗模型，空腹血糖（7.341.02）mmol/L，空腹血浆胰岛素（46.213.62）mIU/L。喂饲果糖6个月时该大鼠的死亡率高达45.5%(10/22)。同时，外周血白细胞PKCmRNA阳性细胞率（40.159.09%）明显高于正常对照组（6.262.93%）；PI-3KmRNA（22.557.64%）及IGF-1mRNA（25.556.54%）阳性细胞率明显低于正常对照组（35.6211.07%、41.3311.27%）；显示该胰岛素抵抗大鼠的IGF-1及PI-3K信号转录水平下调53血管疾病并发症2.前期研究发现及其研究背景53血管疾病并发症53血管疾病并发症培训ppt课件54胰胰岛素素样生生长因子因子-1信号信号55血管疾病并发症胰岛素样生长因子-1信号55血管疾病并发症55 2003年，年，Holzenberger1发现胰胰岛素素样生生长因子因子-1受体（受体（IGF-1R）杂合子基因敲除鼠合子基因敲除鼠Igf1r(+/-)的抗氧化的抗氧化应激能力明激能力明显增增强，其平均，其平均寿命寿命较同同窝野生鼠延野生鼠延长26%。56血管疾病并发症56血管疾病并发症56 HolzenbergerM,DupontJ,DucosB,etal.IGF-1receptorregulateslifespanandresistancetooxidativestressinmice.Nature 2003;421(6919):182-187Studiesininvertebrateshaveledtotheidentificationofanumberofgenesthatregulatelifespan,someofwhichencodecomponentsoftheinsulinorinsulin-likesignallingpathways1,2,3.ExamplesincludetherelatedtyrosinekinasereceptorsInR(Drosophila melanogaster)andDAF-2(Caenorhabditis elegans)thatarehomologuesofthemammalianinsulin-likegrowthfactortype1receptor(IGF-1R).ToinvestigatewhetherIGF-1Ralsocontrolslongevityinmammals,weinactivatedtheIGF-1Rgeneinmice(Igf1r).Here,usingheterozygousknockoutmicebecausenullmutantsarenotviable,wereportthatIgf1r+/-miceliveonaverage26%longerthantheirwild-typelittermates(P0.02).FemaleIgf1r+/-micelive33%longerthanwild-typefemales(P0.001),whereastheequivalentmalemiceshowanincreaseinlifespanof16%,whichisnotstatisticallysignificant.Long-livedIgf1r+/-micedonotdevelopdwarfism,theirenergymetabolismisnormal,andtheirnutrientuptake,physicalactivity,fertilityandreproductionareunaffected.TheIgf1r+/-micedisplaygreaterresistancetooxidativestress,aknowndeterminantofageing.TheseresultsindicatethattheIGF-1receptormaybeacentralregulatorofmammalianlifespan.57血管疾病并发症HolzenbergerM,Dupont572005年HiroshiKurosu2等在转基因实验研究中发现，Klotho基因过度表达小鼠，其Klotho表达产物（Klotho蛋白）通过与细胞膜受体结合，明显抑制胰岛素/胰岛素样生长因子-1(Ins/IGF-1)信号并延寿。58血管疾病并发症58血管疾病并发症58 Science16September2005:Vol.309.no.5742,pp.1829-1833DOI:10.1126/science.1112766Prev|TableofContents|NextResearchArticlesSUPPRESSIONOFAGINGINMICEBYTHEHORMONEKLOTHOHiroshiKurosu,1MasayaYamamoto,1JeremyD.Clark,1JohanneV.Pastor,1AnimeshNandi,1PremGurnani,1OwenP.McGuINness,3HirotakaChikuda,4MasayukiYamaguchi,4HiroshiKawaguchi,4IichiroShimomura,5YoshiharuTakayama,2JoachimHerz,2C.RonaldKahn,6KevINP.Rosenblatt,1MakotoKuro-o1*AdefectINKLOTHOgeneexpressionINMICEacceleratesTHEdegenerationOFmultipleage-sensitivetraits.Here,weshowthatoverexpressionOFKLOTHOINMICEextendslifespan.KLOTHOproteINfunctionsasacirculatINgHORMONEthatbINdstoacell-surfacereceptorandrepressesINtracellularsignalsOFINsulINandINsulIN-likegrowthfactor1(IGF1),anevolutionarilyconservedmechanismforextendINglifespan.AlleviationOFAGING-likephenotypesINKLOTHO-deficientMICEwasobservedBYperturbINgINsulINandIGF1signalINg,suggestINgthatKLOTHO-mediatedINhibitionOFINsulINandIGF1signalINgcontributestoitsanti-AGINGproperties.KLOTHOproteINmayfunctionasananti-AGINGHORMONEINmammals.59血管疾病并发症Science16September200559MasayaYamamoto等进一步阐明Klotho蛋白可激活FoxOforkhead转录因子，抑制Ins/IGF-1受体的自身磷酸化，依次降低胰岛素受体底物（IRS-1、2）及其相关的磷酯酰肌醇3激酶（PI-3K）p85的磷酸化，使Ins/IGF-1信号作用减弱，进而增加锰过氧化物歧化酶的表达，促进活性氧簇（reactiveoxygenspecies，ROS）清除，从而产生抗衰老作用。60血管疾病并发症MasayaYamamoto等进一步阐明Klot60J.Biol.Chem.,Vol.280,Issue45,38029-38034,November11,2005RegulationofOxidativeStressbytheAnti-agingHormoneKlotho*MasayaYamamoto,JeremyD.Clark,JohanneV.Pastor,PremGurnani,AnimeshNandi,HiroshiKurosu,MasayoshiMiyoshi,YasushiOgawa,DiegoH.Castrillon,KevinP.Rosenblatt,andMakotoKuro-o1klothoisanagingsuppressorgeneandextendslifespanwhenoverexpressedinmice.Klothoproteinwasrecentlydemonstratedtofunctionasahormonethatinhibitsinsulin/insulin-likegrowthfactor-1(IGF-1)signaling.HereweshowthatKlothoproteinincreasesresistancetooxidativestressatthecellularandorganismallevelinmammals.KlothoproteinactivatestheFoxOforkheadtranscriptionfactorsthatarenegativelyregulatedbyinsulin/IGF-1signaling,therebyinducingexpressionofmanganesesuperoxidedismutase.Thisinturnfacilitatesremovalofreactiveoxygenspeciesandconfersoxidativestressresistance.Thus,Klotho-inducedinhibitionofinsulin/IGF-1signalingisassociatedwithincreasedresistancetooxidativestress,whichpotentiallycontributestotheanti-agingpropertiesofklotho.61血管疾病并发症J.Biol.Chem.,Vol.280,Issu613.前期研究相关前期研究相关积累累 在胰在胰岛素抵抗素抵抗发病机制研究中，基于川芎病机制研究中，基于川芎嗪具有抗氧化作用，氨基胍具有抗氧化作用，氨基胍为晚期糖基化晚期糖基化终产物（物（AGEs）形成抑制）形成抑制剂，对糖尿病血管并糖尿病血管并发症有效，本症有效，本课题组将川芎将川芎嗪与氨基胍与氨基胍纳入入实验研究，研究，结果果发现，两，两药合用能上合用能上调IGF-1mRNA表达（表达（图2），提高胰），提高胰岛素敏感指数、素敏感指数、降血糖和降低降血糖和降低该胰胰岛素抵抗大鼠死亡率素抵抗大鼠死亡率（13%，3/23）。）。2004年年获得得川芎川芎嗪与氨与氨基胍复方基胍复方应用治用治疗2型糖尿病及其并型糖尿病及其并发症症发明明专利利62血管疾病并发症3.前期研究相关积累62血管疾病并发症62PI-3KmRNA胰岛素抵抗组胰岛素抵抗组(左左)治疗组治疗组(右右)PKCmRNA胰岛素抵抗组胰岛素抵抗组(左左)治疗组治疗组(右右)IGF-1mRNA胰岛素抵抗组胰岛素抵抗组(左左)治疗组治疗组(右右)63血管疾病并发症PI-3KmRNA63血管疾病并发症63实验技技术积累累探索外周血白探索外周血白细胞原位胞原位杂交交实验技技术该技技术探索始于探索始于1999年年10月，外周血白月，外周血白细胞原位胞原位杂交交实验技技术对医学科研与医学科研与临床均有床均有重要价重要价值。当。当时的背景条件是，原位的背景条件是，原位杂交交实验结果的重复性差。果的重复性差。目前目前,该技技术已已较为成熟。成熟。04年年获发明明专利，利，06年年获山山东省高校省高校优秀科研成果二等秀科研成果二等奖。64血管疾病并发症实验技术积累64血管疾病并发症64三、当前研究三、当前研究进展情况展情况川芎川芎嗪与氨基胍与氨基胍药理的理的进一步一步发现：IGF-1R下下调。65血管疾病并发症三、当前研究进展情况65血管疾病并发症6566血管疾病并发症66血管疾病并发症6667血管疾病并发症67血管疾病并发症67四、下一步的目四、下一步的目标68血管疾病并发症四、下一步的目标68血管疾病并发症68谢谢大家！谢谢大家！69血管疾病并发症谢谢大家！69血管疾病并发症69