第十二章骨代谢异常的生物化学诊断优质课件

第十二章骨代谢异常的生物化学诊断第十二章骨代谢异常的生物化学诊断1优选第十二章骨代谢异常的生物化学诊断优选第十二章骨代谢异常的生物化学诊断骨骨骨骨纤维骨相关骨相关细胞胞无机成分无机成分 骨骨组织细胞细胞间质间质（骨（骨基质）基质）有机成分有机成分矿物物质：钙、磷、磷、镁骨骨盐：羟磷灰石磷灰石结晶晶蛋白蛋白质型胶原型胶原多糖蛋白多糖蛋白质脂脂类糖蛋白复合体糖蛋白复合体骨骨细胞胞成骨成骨细胞胞破骨细胞破骨细胞基基础概要概要A.A.骨骨组成成骨主要由骨骨主要由骨矿物物质（无机物）、有机基（无机物）、有机基质和骨和骨组织组成。成。骨骨纤维无机成分 骨组织细胞间质（骨基质）有机成分矿物质：钙3l成骨作用包括两个成骨作用包括两个过程，即骨的有机（基）程，即骨的有机（基）质形成和形成和 骨骨盐沉沉积。骨的有机（基）骨的有机（基）质形成是成骨形成是成骨细胞分泌蛋白多糖胞分泌蛋白多糖和胶原、由胶原聚合成胶原和胶原、由胶原聚合成胶原纤维作作为骨骨盐沉沉积的的骨架。骨架。成骨成骨细胞被埋在骨的有机（基）胞被埋在骨的有机（基）质中成中成为骨骨细胞。胞。骨骨盐沉沉积于胶原于胶原纤维表面，先形成无定形骨表面，先形成无定形骨盐（如磷酸（如磷酸氢钙等），等），继而形成而形成羟磷灰石磷灰石结晶。晶。成骨作用包括两个过程，即骨的有机（基）质形成和4n溶骨作用溶骨作用是破骨是破骨细胞胞释放溶放溶酶体中的蛋白水解体中的蛋白水解酶，使骨的有机，使骨的有机质（胶原）水解，同（胶原）水解，同时破骨破骨细胞胞还释放出一些酸性物放出一些酸性物质，如乳，如乳酸、酸、柠檬酸、碳酸等，使局部酸性物檬酸、碳酸等，使局部酸性物质增加，促增加，促进骨骨盐溶解，溶解，这种骨的有机种骨的有机质水解及骨水解及骨盐溶解称溶解称为溶骨作用。溶骨作用。溶骨作用5正常成人体内的成骨和溶骨作用保持着正常成人体内的成骨和溶骨作用保持着动态平衡，不平衡，不仅保保证了骨的正常生了骨的正常生长，还维持了持了钙磷的磷的动态平衡，平衡，这种作用称种作用称为骨的更新作用。骨的更新作用。正常成人体内的成骨和溶骨作用保持着动态平衡，不仅保证了骨的正6B.骨的正常代骨的正常代谢 骨骨矿物物质（钙、磷、磷、钠、镁、铁、氟等）和骨、氟等）和骨盐维持骨密持骨密度。度。骨的有机物骨的有机物质(蛋白蛋白质、I型胶原、脂型胶原、脂类和糖蛋白复合体等和糖蛋白复合体等)参与了骨小梁和骨基参与了骨小梁和骨基质的形成，促的形成，促进骨的生骨的生长、修复，参、修复，参与骨骼的新与骨骼的新陈代代谢。骨的骨的组织细胞（骨胞（骨细胞、成骨胞、成骨细胞和破骨胞和破骨细胞）在相关激胞）在相关激素（甲状旁腺素、降素（甲状旁腺素、降钙素、活性素、活性维生素生素D）的作用下，相）的作用下，相互互协调，共同，共同维护骨的正常代骨的正常代谢，实现骨骼骨骼发育、生育、生长。B.骨的正常代谢 7C.骨代骨代谢性疾病性疾病 骨代骨代谢疾病是指由多种因素引起骨疾病是指由多种因素引起骨组织中中钙、磷等、磷等矿物物质、成骨、成骨细胞和胞和/或破骨或破骨细胞功能胞功能异常，引起的骨基异常，引起的骨基质、骨、骨细胞代胞代谢紊乱。包括紊乱。包括骨骨质疏松症、骨疏松症、骨软化病、佝化病、佝偻病等。病等。C.骨代谢性疾病 8三种激素对钙磷代谢的调节骨钙素是含49个氨基酸，分子量5669的小蛋白，为人骨中主要的和最多的非胶原蛋白，占总蛋白的1%。低清蛋白血症：血清总钙降低(+)肾远曲小管及集合管合成钙结合蛋白，促进钙、磷的重吸收由于Pyr 和D-Pyr是胶原纤维的交联物，为其结构成分，因此只能由成熟的骨基质降解产生；免疫化学发光法(CLIA)在胶原纤维成熟过程中，由两个羟赖氨酸侧链和一个赖氨酸侧链反应生成脱氧吡啶酚，由三个羟赖氨酸侧链反应生成吡啶酚。近来建立了对BALP特异性很强的单克隆抗体的免疫分析法，具有高度的特异性和敏感性，而且操作简便，被认为是目前鉴别和定量分析BALP的最佳方法。骨的组织细胞（骨细胞、成骨细胞和破骨细胞）在相关激素（甲状旁腺素、降钙素、活性维生素D）的作用下，相互协调，共同维护骨的正常代谢，实现骨骼发育、生长。原发性甲状旁腺功能亢进和PTH过度分泌骨中的镁主要以磷酸镁及碳酸镁的形式存在。钙、磷、镁的分布和存在形式手足搐搦，尿钙显著增加，皮肤、毛发、指甲等外胚层组织病变，小儿牙齿发育不全。1，25-二羟维生素D3升高见于孕妇、儿童、甲状旁腺功能亢进、肾衰、慢性炎症、甲状腺髓样癌、白血病、骨髓外骨髓增殖症、肺癌等。过程减慢，可能发生骨营养不良。增加骨吸收的其他病理生理过程。功能受损的病人中易发生。主要内容主要内容 三种激素对钙磷代谢的调节 主要内容 一、钙、磷、镁代谢及9第一第一节骨代骨代谢及其异常及其异常一、一、一、一、钙钙代代代代谢谢及其异常及其异常及其异常及其异常二、磷代二、磷代二、磷代二、磷代谢谢及其异常及其异常及其异常及其异常三、三、三、三、镁镁代代代代谢谢及其异常及其异常及其异常及其异常四、骨代四、骨代四、骨代四、骨代谢谢激素激素激素激素第一节骨代谢及其异常 一、钙代谢及其异常 二、10钙钙、磷、磷、磷、磷、镁镁是人体重要是人体重要是人体重要是人体重要组组成物成物成物成物质质，具有广泛的生理功能。，具有广泛的生理功能。，具有广泛的生理功能。，具有广泛的生理功能。钙、磷、磷、镁在在组织中的分布和在血中的分布和在血浆中的存在形式中的存在形式组织相相对分布分布存在血存在血浆中形式中形式骨和骨和齿（%）软组织（%）细胞外胞外（%）总浓度度(mmol/L)游离游离（%）结合合（%）复合物复合物（%）总浓度度(mmol/L)钙9910.2255040102.252.252.752.75磷磷8515成骨成骨)对肾的作用的作用(+)(+)肾远曲小管及集合管合成曲小管及集合管合成钙结合蛋白，促合蛋白，促进钙、磷的重吸收、磷的重吸收总效效应升高血升高血钙与血磷与血磷 骨代谢调节:靶器官是小肠、骨、肾脏。对小肠的作用(+)小肠32（1 1）维生素生素D D摄入不足入不足佝佝偻病和骨病和骨软化症化症（2 2）肝性佝）肝性佝偻病和病和肾性佝性佝偻病病（3 3）维生素生素D D依依赖性佝性佝偻病病 表表现为1 1，2525二二羟维生素生素D3D3降低，血清磷降低，血降低，血清磷降低，血清清钙含量低或正常，血清骨碱性磷酸含量低或正常，血清骨碱性磷酸酶增高。增高。发生佝生佝偻病和骨病和骨软化病，同化病，同时肌肉松弛、非特异性神肌肉松弛、非特异性神经精神精神症状、生症状、生长迟缓、免疫力低下等表、免疫力低下等表现。活性维生素活性维生素D的调节异常的调节异常（1）维生素D摄入不足 佝偻病和骨软化症 活性维生素D的333.3.降钙素（降钙素（CTCT）(1)(1)受血浆中的钙离子的影响，受血浆中的钙离子的影响，CTCT的分泌随血钙升高而增加，的分泌随血钙升高而增加，两者呈正相关。两者呈正相关。(2)(2)骨代谢调节骨代谢调节:靶器官主要是骨和肾，对小肠间接影响。靶器官主要是骨和肾，对小肠间接影响。对骨的作用骨的作用(-)(-)(-)(-)溶骨溶骨溶骨溶骨(+)(+)(+)(+)骨骨骨骨盐盐沉沉沉沉积积对肾的作用的作用(-)(-)(-)(-)肾肾近曲小管近曲小管近曲小管近曲小管对对磷磷磷磷远远曲小管曲小管曲小管曲小管对钙对钙、磷的重吸收、磷的重吸收、磷的重吸收、磷的重吸收对小小肠的作用的作用(-)(-)通通通通过过抑制抑制抑制抑制1,25(OH)1,25(OH)2 2D D3 3生成，生成，生成，生成，间间接抑制接抑制接抑制接抑制钙钙的吸的吸的吸的吸收。收。收。收。总效效应降低血降低血降低血降低血CaCa2+2+、血磷、血磷、血磷、血磷3.降钙素（CT）(1)受血浆中的钙离子的影响，C34（3 3）降）降钙素分泌异常素分泌异常 升高升高见于孕于孕妇、儿童、甲状旁腺功能亢、儿童、甲状旁腺功能亢进、肾衰、慢性炎症、甲状腺髓衰、慢性炎症、甲状腺髓样癌、白血病、骨癌、白血病、骨髓外骨髓增殖症、肺癌等。髓外骨髓增殖症、肺癌等。降低降低见于甲状腺先天于甲状腺先天发育不全、甲状腺全切育不全、甲状腺全切患者、低血患者、低血钙等。等。（3）降钙素分泌异常 35三种激素三种激素对钙磷代磷代谢的的调节激素激素肠钙吸收吸收溶骨溶骨成骨成骨肾排排钙肾排磷排磷血血钙血磷血磷1,25(OH)2D3PTHCT注：注：表示升高表示升高表示表示显著升高著升高表示降低表示降低三种激素对钙磷代谢的调节 激素肠钙吸收溶骨成骨肾排钙肾排磷36一、骨形成一、骨形成标志物志物第二第二节骨骨转换相关相关标志物志物二、骨吸收二、骨吸收标志物志物一、骨形成标志物 第二节骨转换相关标志物 二、37骨骨骨骨转换标转换标志物志物志物志物n骨形成骨形成标志物志物骨骨钙素素骨性碱性磷酸骨性碱性磷酸酶型型胶原前胶原前肽n骨吸收骨吸收标志物志物吡吡啶酚和脱氧吡酚和脱氧吡啶酚酚型胶原型胶原C端端肽和和N端端肽抗酒石酸酸性磷酸抗酒石酸酸性磷酸酶尿尿羟脯氨酸脯氨酸骨代骨代谢过程中，破骨程中，破骨细胞活胞活动所降解的骨基所降解的骨基质成分和分泌的成分和分泌的产物，以及成骨物，以及成骨细胞形成新骨所胞形成新骨所释放的代放的代谢产物物进入血液和尿液入血液和尿液中，构成了反映破骨中，构成了反映破骨细胞活性的骨吸收指胞活性的骨吸收指标和反映成骨和反映成骨细胞活胞活性的骨形成指性的骨形成指标。骨转换标志物 骨形成标志物骨吸收标志物骨代谢过程中，破骨38n骨骨钙素是含素是含4949个氨基酸，分子量个氨基酸，分子量56695669的小蛋白，的小蛋白，为人骨中主要的和最多的非胶原蛋白，占人骨中主要的和最多的非胶原蛋白，占总蛋白的蛋白的1%1%。n骨骨钙素是素是1,25-(OH)1,25-(OH)2 2-D-D3 3刺激下由成骨刺激下由成骨细胞合成。胞合成。50%50%结合合羟磷灰石中的磷灰石中的Ca2+Ca2+，50%50%游离入血，由游离入血，由肾脏清除。清除。骨钙素骨钙素骨形成标志物骨形成标志物骨钙素是含49个氨基酸，分子量5669的小蛋白，为人骨中主要39骨主要由骨矿物质（无机物）、有机基质和骨组织组成。（如磷酸氢钙等），继而形成羟磷灰石结晶。元素在热解石墨炉中被加热原子化，成为基态原子蒸汽，能吸收相同原子发射的特定波长的光。表现为PTH减少，血钙降低，尿磷减少，血磷浓度增高。在胶原纤维成熟过程中，由两个羟赖氨酸侧链和一个赖氨酸侧链反应生成脱氧吡啶酚，由三个羟赖氨酸侧链反应生成吡啶酚。排镁过少 肾排镁减少是高镁血症最重要的原因。血钙 复合钙15同位素稀释质谱法 IFCC推荐的决定方法包括骨质疏松症、骨软化病、佝偻病等。第三节骨代谢异常的生物化学检测指标正常成人体内的成骨和溶骨作用保持着动态平衡，不仅保证了骨的正常生长，还维持了钙磷的动态平衡，这种作用称为骨的更新作用。目前应用最多，此方法简便、快速、重复性好，正确和敏感性高，已成为钙离子测定的参考方法。注：血浆中发挥生理作用的是离子钙，离子钙与非扩散钙可相互转换，但受PH影响。高钙血症（Hypercalcemia）方式：主动转运过程骨性碱性磷酸酶定义:指血清无机磷浓度高于1.其主要功能是保持骨的正常矿化和抑制异常羟磷灰石结晶形成。n其主要功能是保持骨的正常其主要功能是保持骨的正常矿化和抑制异常化和抑制异常羟磷灰磷灰石石结晶形成。晶形成。n 循循环中的骨中的骨钙素半寿期素半寿期仅5min左右，因此，血清左右，因此，血清骨骨钙素水平基本上能素水平基本上能够反映近期成骨反映近期成骨细胞活性和骨胞活性和骨形成功能形成功能。骨钙素骨钙素骨形成标志物骨形成标志物骨主要由骨矿物质（无机物）、有机基质和骨组织组成。其主要功能40n由成骨由成骨细胞合成和分泌。它在成骨胞合成和分泌。它在成骨过程中能水解多种磷酸程中能水解多种磷酸酯，为羟磷灰石的沉磷灰石的沉积提供所需的磷酸，同提供所需的磷酸，同时水解焦磷酸水解焦磷酸盐，维 持局部碱性持局部碱性环境，促境，促进骨的骨的矿化。化。n 血清骨性碱性磷酸血清骨性碱性磷酸酶：在反映成骨：在反映成骨细胞活性和骨形成上有胞活性和骨形成上有较高特异性，高特异性，优于骨于骨钙素。因素。因为B-ALPB-ALP在血清中比骨在血清中比骨钙素更素更稳定，血清中的半寿期定，血清中的半寿期为1 12d2d，并且不受昼夜，并且不受昼夜变化的影响化的影响 骨性碱性磷酸酶骨性碱性磷酸酶 骨性碱性磷酸酶41N末端肽末端肽C末端肽末端肽前胶原前胶原胶原胶原N端前肽端前肽C端前肽端前肽三螺旋区三螺旋区型胶原是由成骨细胞的前体细胞合成，含型胶原是由成骨细胞的前体细胞合成，含N-和和C-端延伸端延伸段。这些延伸段又称前肽，在形成纤维和释放入血时从段。这些延伸段又称前肽，在形成纤维和释放入血时从型胶原上断裂下来。现多检测型胶原上断裂下来。现多检测C-端前肽。端前肽。型胶原前肽型胶原前肽N末端肽C末端肽前胶原胶原N端前肽C端前肽三螺旋区型胶原是42型胶原也是其他型胶原也是其他组织的主要基的主要基质，故，故型胶型胶原前原前肽评估骨形成的敏感性和特异性不如骨估骨形成的敏感性和特异性不如骨钙素素和和B-ALP。型胶原前肽型胶原前肽 型胶原也是其他组织的主要基质，故型胶原前肽评估骨形43 骨吸收骨吸收过程中，由于破骨程中，由于破骨细胞的胞的酶解作用，解作用，胶原等有机基胶原等有机基质降解，降解，产生生肽类、游离氨基酸、游离氨基酸等等产物，可从血或尿中物，可从血或尿中检出。出。骨吸收标志物骨吸收标志物 骨吸收过程中，由于破骨细胞的酶解作用，胶原等44在胶原在胶原纤维成熟成熟过程中，程中，由两个由两个羟赖氨酸氨酸侧链和一和一个个赖氨酸氨酸侧链反反应生成脱氧吡生成脱氧吡啶酚，由三个酚，由三个羟赖氨酸氨酸侧链反反应生成吡生成吡啶酚。酚。1.1.吡吡啶酚（酚（PyrPyr）和脱氧吡）和脱氧吡啶酚（酚（D-PyrD-Pyr）PyrD-Pyr 在胶原纤维成熟过程中，由两个羟赖氨酸侧链和一个赖氨酸45Pyr和和D-Pyr作作为骨吸收骨吸收标志物的志物的优越性：越性：由于由于Pyr 和和D-Pyr是胶原是胶原纤维的交的交联物，物，为其其结构成构成分，因此只能由成熟的骨基分，因此只能由成熟的骨基质降解降解产生；生；胶原降解胶原降解产生的生的Pyr和和D-Pyr入血后不入血后不经中中间代代谢而而直接由尿排出；直接由尿排出；在骨中含量在骨中含量远远高于其它高于其它组织，更具代表性；，更具代表性；不受不受饮食和体力活食和体力活动影响。影响。Pyr和和D-Pyr 比比较：Pyr 在在软骨中含量最高，而骨中含量最高，而D-Pyr主要来源于骨，所以主要来源于骨，所以评价骨吸收，价骨吸收，D-Pyr的特异性的特异性和灵敏度和灵敏度优于于Pyr。Pyr和D-Pyr作为骨吸收标志物的优越性：462.2.型胶原型胶原C C端肽和端肽和N N端肽端肽 型胶原交联区的型胶原交联区的C端和端和N端肽也是一种骨吸收的指端肽也是一种骨吸收的指标，与脱氧吡啶酚和吡啶酚一样具有较好特异性，不标，与脱氧吡啶酚和吡啶酚一样具有较好特异性，不受饮食等干扰。受饮食等干扰。2.型胶原C端肽和N端肽 型胶原交联区的47v血清中的酸性磷酸血清中的酸性磷酸酶有有6种同工种同工酶，抗酒石酸酸性磷酸，抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)是其中的一种，具有抗酒石酸的特性，其主要来源于骨。是其中的一种，具有抗酒石酸的特性，其主要来源于骨。TRAP是成熟破骨是成熟破骨细胞的主要胞的主要标志。志。v在骨吸收在骨吸收时，破骨，破骨细胞胞产生并分泌生并分泌TRAP。同。同时，破骨，破骨细胞胞产生并分泌的部分生并分泌的部分TRAP进入血清，故血清中的入血清，故血清中的TRAP可反映破可反映破骨骨细胞的活性和骨吸收的状况。胞的活性和骨吸收的状况。3.抗酒石酸酸性磷酸酶抗酒石酸酸性磷酸酶血清中的酸性磷酸酶有6种同工酶，抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP48由脯氨酸由脯氨酸羟化而成。化而成。易受各种疾病或其他因素包括易受各种疾病或其他因素包括饮食的干食的干扰。对骨更新或骨吸收不特异，不是骨更新或骨更新或骨吸收不特异，不是骨更新或骨吸收的常骨吸收的常规标志物。志物。4.尿羟脯氨酸尿羟脯氨酸 由脯氨酸羟化而成。4.尿羟脯氨酸49第三第三节骨代骨代谢异常的生物化学异常的生物化学检测指指标第三节骨代谢异常的生物化学检测指标 50一、一、一、一、钙钙、磷、磷、磷、磷、镁检查镁检查n血清血清总钙（TCa2+）的）的测定定滴定法（氧化滴定法（氧化还原滴定法、原滴定法、络合滴定法）合滴定法）比色法比色法邻甲酚甲酚酞络合合酮法法WHO和我国推荐的常和我国推荐的常规法法甲基麝香草酚甲基麝香草酚蓝法法偶氮偶氮胂法法火焰光度法火焰光度法原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法IFCC推荐的参考方法推荐的参考方法同位素稀同位素稀释质谱法法IFCC推荐的决定方法推荐的决定方法一、钙、磷、镁检查 血清总钙（TCa2+）的测定51原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法元素在元素在热解石墨炉中被加解石墨炉中被加热原子化，成原子化，成为基基态原子蒸汽，能原子蒸汽，能吸收相同原子吸收相同原子发射的特定波射的特定波长的光。在一定的光。在一定浓度范度范围内，其内，其吸收吸收强度与度与试液中被液中被检原子的含量成正比。其定量关系可用原子的含量成正比。其定量关系可用LambertbeerLambertbeer定律定律。主要用于痕量元素杂主要用于痕量元素杂质的分析质的分析原子吸收分光光度法元素在热解石墨炉中被加热原子化，成为基态原52同位素稀同位素稀释质谱法法将已知将已知质量的同位素作量的同位素作为稀稀释剂加入加入样品中，均匀混合，用品中，均匀混合，用质谱仪测定混合前定混合前后同位素丰度的后同位素丰度的变化的比化的比值，由此，由此计算算出出该样品中品中该元素含量的方法元素含量的方法。主要用于痕量元素的测定主要用于痕量元素的测定同位素稀释质谱法将已知质量的同位素作为稀释剂加入样品中，均匀53n血清游离（离子）血清游离（离子）钙测定定生物学法生物学法透析法透析法超超滤法法金属指示金属指示剂法法离子离子选择性性电极法极法(ISE)(ISE)目前目前应用最多，此方法用最多，此方法简便、快速、便、快速、重复性好，正确和敏感性高，已成重复性好，正确和敏感性高，已成为钙离子离子测定的参考方法。定的参考方法。血清游离（离子）钙测定 54电极管电极管内电极（内参比电极）内电极（内参比电极）电极內充溶液（内参比溶液）电极內充溶液（内参比溶液）电极膜（敏感膜）电极膜（敏感膜）ISE基本结构基本结构电极管ISE基本结构55n血清磷血清磷测定定还原原钼蓝法法我国推荐的常我国推荐的常规方法方法非非还原法原法染料染料结合法合法紫外分光光度法紫外分光光度法黄黄嘌呤氧化呤氧化酶比色比色测定法定法WHOWHO推荐的常推荐的常规方法方法同位素稀同位素稀释质谱法法决定性方法决定性方法原子吸收分光光度法等原子吸收分光光度法等参考方法参考方法血清磷测定56n血清血清镁测定定比色法比色法我国推荐甲基麝香草酚我国推荐甲基麝香草酚蓝法（法（MTBMTB法）和法）和钙镁试剂法作法作为常常规方法。方法。荧光法光法离子离子层析法析法离子离子选择性性电极法极法(ISE)(ISE)酶法法原子吸收分光光度法原子吸收分光光度法参考方法参考方法同位素稀同位素稀释质谱法法决定性方法决定性方法血清镁测定57二、骨代二、骨代二、骨代二、骨代谢谢相关激素相关激素相关激素相关激素检测检测n甲状旁腺激素甲状旁腺激素测定定放射免疫法（放射免疫法（RIARIA）酶联免疫法免疫法(ELISA)(ELISA)免疫化学免疫化学发光法光法(CLIA)(CLIA)CLIACLIA法是新近法是新近发展起来的方法，具有快速、灵敏、无展起来的方法，具有快速、灵敏、无同位素同位素污染的染的优点点.二、骨代谢相关激素检测 甲状旁腺激素测定58n25-OH-D3的的测定定放射放射竞争性争性结合法（合法（CPB）放射受体放射受体测定法（定法（RRA）放射免疫法（放射免疫法（RIA）高效液相色高效液相色谱法（法（HPLC）25-OH-D3的测定59n1,25-(OH)1,25-(OH)2 2-D-D3 3的的测定定酶联免疫法免疫法nCTCT的的测定定放射免疫法放射免疫法1,25-(OH)2-D3的测定CT的测定60三、骨代三、骨代三、骨代三、骨代谢标谢标志物志物志物志物测测定定定定n骨骨钙素素测定定放射免疫法放射免疫法双位免疫放射法双位免疫放射法酶联免疫法免疫法亲和素和素-生物素生物素酶免疫免疫测定法定法(BAEIA)化学化学发光免疫分析法光免疫分析法(CLIA)免疫免疫荧光分析法光分析法(FIA)等等n目前目前应用最多的是用最多的是RIA法和法和CLIA法法三、骨代谢标志物测定 骨钙素测定 61n骨性碱性磷酸骨性碱性磷酸酶测定定先先识别或分离出或分离出BALP，再，再测定其碱性磷酸定其碱性磷酸酶的的活性。活性。近来建立了近来建立了对BALP特异性很特异性很强的的单克隆抗体的克隆抗体的免疫分析法，具有高度的特异性和敏感性，而且操免疫分析法，具有高度的特异性和敏感性，而且操作作简便，被便，被认为是目前是目前鉴别和定量分析和定量分析BALP的最的最佳方法。佳方法。骨性碱性磷酸酶测定 62n吡吡啶酚和脱氧吡酚和脱氧吡啶酚酚测定定HPLCHPLC法：用法：用HPLC-HPLC-荧光光检测法法测定。定。免疫法：用等分子交叉反免疫法：用等分子交叉反应法法检测吡吡啶酚。酚。竞争性争性单克隆抗体克隆抗体ELISAELISA法法测定脱氧吡定脱氧吡啶酚。酚。nC-C-端端肽和和N-N-端端肽测定定ELISAELISA法法n耐酒石酸酸性磷酸耐酒石酸酸性磷酸酶测定定免疫法免疫法n羟脯氨酸脯氨酸测定定离子交离子交换色色谱法、反相法、反相HPLCHPLC法。法。吡啶酚和脱氧吡啶酚测定 63第四第四节骨代骨代谢异常生物化学异常生物化学检测指指标的的临床床应用用骨软化症骨质疏松症第四节骨代谢异常生物化学检测指标的临床应用 骨软化症骨64以骨以骨组织显微微结构退化构退化为特征，骨特征，骨矿成分和骨基成分和骨基质等不断减少，等不断减少，骨骨质变薄，骨小梁数量减少，骨脆性增加和骨折危薄，骨小梁数量减少，骨脆性增加和骨折危险度升高的度升高的一种全身骨代一种全身骨代谢障碍的疾病。障碍的疾病。常常见原因：原因：生生长期骨形成缺陷。期骨形成缺陷。成骨成骨细胞骨形成受胞骨形成受损。增加骨吸收的其他病理生理增加骨吸收的其他病理生理过程。程。主要主要临床表床表现：是疼痛、不适和易骨折。：是疼痛、不适和易骨折。一、骨质疏松症一、骨质疏松症以骨组织显微结构退化为特征，骨矿成分和骨基质等不断减少，骨质65【特点特点】静静态，隐匿性疾病匿性疾病非特异性症状易被忽非特异性症状易被忽视病程病程较长：绝经后骨后骨质疏松症（疏松症（I I型）型）老年性骨老年性骨质疏松症（疏松症（IIII型）型）：内分泌性疾病，骨髓增生性疾病，：内分泌性疾病，骨髓增生性疾病，药物物性骨量减少，性骨量减少，营养缺乏性疾病，慢性疾病，先天性疾病而养缺乏性疾病，慢性疾病，先天性疾病而废用性骨用性骨丢失其他能引起失其他能引起继发性骨性骨质疏松的疾病和因素。疏松的疾病和因素。青少年骨青少年骨质疏松，青壮年成人骨疏松，青壮年成人骨质疏松疏松原原发性骨性骨质疏松疏松继发性骨性骨质疏松疏松特特发性骨性骨质疏松症：疏松症：【特点】：绝经后骨质疏松症（I型66