钩端螺旋体病说课文档课件

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钩端螺旋体病钩端螺旋体病1钩端螺旋体病说课文档课件2钩端螺旋体病说课文档课件3钩体体呈呈细长丝状状,圆柱柱形形,螺螺旋旋盘绕细致致,有有1218个个螺螺旋旋,规则而而紧密密。一一端端或或两两端端弯弯曲曲成成钩状状,使使菌菌体体呈呈C或或S字字形形。钩体体运运动活活泼,沿沿长轴旋旋转运运动。中中央央部部分分僵僵直直,两两端端柔柔软,有有较强的的穿穿透透力力。对人人、家家畜畜、野野生生动物物都都有有致病性。致病性。钩体体长度度一一般般为420m,平平均均610m,直直径平均径平均为。病原学病原学问题:采用何种方法:采用何种方法对菌体菌体进行行观察和察和检查?钩体呈细长丝状,圆柱形,螺旋盘绕细致,有1218个螺旋,规4在暗示野在暗示野显微微镜下下较易易见到到发亮的活亮的活动螺旋体。螺旋体。钩体体的的结构:菌体、构:菌体、轴丝、外膜。、外膜。在暗示野显微镜下较易见到发亮的活动螺旋体。钩体的结构:菌体、5菌体由胞壁、胞菌体由胞壁、胞浆膜、胞膜、胞浆组成。成。轴丝为钩体的运体的运动器官,也是其支持器官,也是其支持结构。构。外膜薄而透明,具有抗原活性,外膜薄而透明,具有抗原活性,产生保生保护性抗体。性抗体。菌体由胞壁、胞浆膜、胞浆组成。6革革兰氏染色阴性。但氏染色阴性。但钩体不易着色。可用体不易着色。可用镀银染色或染色或甲苯胺甲苯胺蓝染色等方法染色等方法检测。也可用。也可用荧光抗体染色光抗体染色检测。取血、尿及取血、尿及脑脊液脊液检测病原,但阳性率不高。病原,但阳性率不高。可超速离心集菌后直接可超速离心集菌后直接镜检,以达到快速,以达到快速诊断目的。断目的。革兰氏染色阴性。但钩体不易着色。可用镀银染色或甲苯胺蓝染色等7在变性的内皮细胞内有时可见变性的钩体。酶联免疫吸附试验(ELISA)5g/kg)连喂7天,可以预防和控制病情的蔓延。其他从羊水、胎盘、脐血、乳汁及流产儿的肝肾组织中都能分离出钩体,说明可通过哺乳及先天性感染而传播。中、大猪一般病情较轻。多为青壮年农民(从事牧、渔业劳动者发病率亦高),农村儿童并非少见,年龄死后检查要在1-3h内进行,否则菌体大部分会发生溶解。数小时内可发展至面色极度苍白、唇发绀、肺满布湿啰音。2及时发现、淘汰和处理带菌猪。心血管的损伤主要表现为全身毛细血管的损伤。病程1月左右其效价达高峰。疗程7天,或体温正常后24日。2对新进入场的羊只,应隔离检疫30天,必要时进行血清学检查。管理好饮食,防止带菌鼠的排泄物污染食品。表浅淋巴结肿大,以腹股沟淋巴结肿大为多见。病期长久时,则肾脏变为坚硬。浆膜腔内常可见有过量的黄色液体与纤维蛋白;钩体运动活泼,沿长轴旋转运动。凝集滴度按原血清稀释倍数2计算。在变性的内皮细胞内有时可见变性的钩体。8据据1986年年国国际微微生生物物学学会会统计,全全世世界界已已发现的的钩体体共共有有23个个血血清清群群(serogroup),200个个血血清清型型(serovar)。我我国国已已知知有有19群群161型型,是是世世界界上上发现血血清清型型最最多多的的国国家家。其其中中较常常见的有的有13个血清群、个血清群、15个血清型。个血清型。钩端端螺螺旋旋体体的的型型别不不同同,对机机体体的的毒毒力力、致致病力也不同。病力也不同。据1986年国际微生物学会统计,全世界已发现的钩体共有23个9钩端端螺螺旋旋体体在在宿宿主主体体内内主主要要存存在在于于肾脏、尿尿液液和和脊脊髓髓液液里里,在在急急性性发热期期,广广泛泛存存在在于于血液和各内血液和各内脏器官。器官。某某些些致致病病菌菌型型在在体体内内产生生的的钩体体代代谢产物物如如内内毒毒素素样物物质,细胞胞毒毒性性因因子子、细胞胞致致病病作作用物用物质及溶血素等可引及溶血素等可引发机体机体剧烈反烈反应。钩端螺旋体在宿主体内主要存在于肾脏、尿液和脊髓液里,在急性发10钩体体是是需需氧氧菌菌,常常用用柯柯氏氏(korthof)培培养养基基和和希希夫夫纳培培养养基基()2530培培养养。培培养养基基中中需需加加入入新新鲜灭活活的的兔兔血血清清。钩端端螺螺旋旋体体严格格需需氧氧,其其生生化化特特性性不不活活泼,不不能能发酵酵糖糖类。如何如何进行采行采样和培养?和培养?早早期期钩体体血血症症时取取病病人人血血液液,床床旁旁接接种种于于含含兔兔血血清清的的柯柯氏氏培培养养基基中中,置置28孵孵育育,约1周左右生周左右生长,阳性可达,阳性可达3050。钩体是需氧菌,常用柯氏(korthof)培养基和希夫纳培养基11钩端端螺螺旋旋体体对外外界界环境境有有较强的的抵抵抗抗力力,可可以以在在水水田田、池池塘塘、沼沼泽和和淤淤泥泥里里至至少少生生存存数数月。在低温下能存活月。在低温下能存活较长时间。钩体体对干干燥燥非非常常敏敏感感,干干燥燥环境境下下数数分分钟即即可可死死亡亡,极极易易被被稀稀盐酸酸、70%酒酒精精、漂漂白白粉粉、来来苏儿儿、石石炭炭酸酸、肥肥皂皂水水和和0.5%升升汞汞灭活活。钩体体对理理化化因因素素的的抵抵抗抗力力较弱弱,如如紫紫外外线、温温热5055,30min均可被均可被杀灭。如何如何进行消毒?行消毒?钩端螺旋体对外界环境有较强的抵抗力,可以在水田、池塘、沼泽和12猪猪钩端端螺螺旋旋体体病病呈呈世世界界性性分分布布我我国国长江江流流域域和和南南方方各各地地常常有有该病病的的发生生和和流流行行。近近年年来来黑黑龙江江、新新疆疆等等地地也也有有流流行行的的报道道。在在夏夏、秋秋多多雨雨季季节为流行高峰期。流行高峰期。猪猪的的带菌菌率率和和发病病率率较高高。一一般般呈呈隐性性感感染染,也也时有暴有暴发。其。其临诊症状表症状表现形式多形式多样。急急性性病病例例以以发热、贫血血、水水肿、黄黄疸疸、血血红蛋蛋白尿、流白尿、流产、皮肤和粘膜坏死、皮肤和粘膜坏死为特征。特征。猪猪的的排排菌菌量量大大,排排菌菌期期长,而而且且与与人人接接触触的的机机会最多,会最多,对人造成的威人造成的威胁较大。大。猪猪钩端螺旋体病端螺旋体病猪钩端螺旋体病呈世界性分布我国长江流域和南方各地常有该病的发13传染染源源 主主要要是是发病病猪猪和和带菌菌猪猪。钩端端螺螺旋旋体体可可随随带菌菌猪猪和和发病病猪猪的的尿尿、乳乳和和唾唾液液等等排排于于体体外外污染染环境境;鼠鼠类和和蛙蛙类也也是是重重要要的的传染染源源。它它们都都是是该菌菌的的自自然然贮存存宿宿主主。鼠鼠类能能终生生带菌,通菌,通过尿液排菌,造成尿液排菌,造成环境的境的长期期污染。染。传播播途途径径 主主要要途途径径为皮皮肤肤,其其次次是是消消化化道道、呼吸道以及生殖道粘膜。呼吸道以及生殖道粘膜。易易感感性性 各各年年龄的的猪猪均均可可感感染染,但但仔仔猪猪发病病较多多,特特别是是哺哺乳乳仔仔猪猪和和断断奶奶仔仔猪猪发病病最最严重重。中、大猪一般病情中、大猪一般病情较轻。母猪不。母猪不发病。病。流行病学流行病学 传染源主要是发病猪和带菌猪。钩端螺旋体可随带菌猪和发病猪14多多见于于仔仔猪猪,特特别是是哺哺乳乳仔仔猪猪和和保保育育猪猪,呈呈暴暴发或或散散发流流行行。潜潜伏伏期期12周周。临诊症症状状表表现为突突然然发病病,体体温温升升高高至至4041,稽稽留留35天天。病病猪猪精精神神沉沉郁郁,厌食食,腹腹泻泻,皮皮肤肤干干燥燥,全全身身皮皮肤肤和和粘粘膜膜黄黄疸疸,后后肢肢出出现神神经性性无无力力,震震颤。有有的的病病例例出出现血血红蛋蛋白白尿尿,尿尿液液色色如如浓茶茶;粪便便呈呈绿色色,有有恶臭臭味味,可可见血血粪。死死亡亡率达率达50以上。以上。临诊症状(急性型)症状(急性型)多见于仔猪,特别是哺乳仔猪和保育猪,呈暴发或散发流行。潜伏期15主主要要以以损害害生生殖殖系系统为特特征征。病病初初体体温温有有不不同同程程度度升升高高,眼眼结膜膜潮潮红、浮浮肿,有有的的泛泛黄黄,有有的的下下颌、头部部、颈部部和和全全身身水水肿。母母猪猪一一般般无无明明显的的临诊症症状状,有有时可可表表现出出发热、无无乳乳。妊妊娠娠不不足足45周周的的母母猪猪,感感染染后后47天天可可发生生流流产和和死死产,流流产率率可可达达2070。怀孕孕后后期期的的母母猪猪感感染染后后可可产弱弱仔仔,仔仔猪猪不不能能站站立立,不不会吸乳,会吸乳,12天死亡。天死亡。临诊症状(症状(亚急性和慢性型)急性和慢性型)主要以损害生殖系统为特征。病初体温有不同程度升高,眼结膜潮红16此此型型以以败血血症症、全全身身性性黄黄疸疸和和各各组织器器官官广广泛泛性出血以及坏死性出血以及坏死为主要特征。主要特征。皮皮肤肤、皮皮下下组织、浆膜膜和和粘粘膜膜、肝肝脏、肾脏以以及及膀膀胱胱等等组织黄黄染染和和不不同同程程度度的的出出血血;胸胸腔腔及及心心包包内内有有浑浊的的黄黄色色积液液;肺肺淤淤血血、水水肿,表表面面有有出出血血点点;脾脾脏肿大大、淤淤血血,或或有有出出血血性性梗梗死死;肝肝脏肿大大,呈呈土土黄黄色色或或棕棕色色,质脆脆,胆胆囊囊充充盈盈、淤淤血血,被被膜膜下下可可见出出血血灶灶;肾脏肿大大、淤淤血血、出出血血;肠及及肠系系膜膜充充血血;肠系系膜膜、腹腹股股沟及沟及颌下淋巴下淋巴结肿大,呈灰白色。大,呈灰白色。病理病理变化化(急性型)(急性型)此型以败血症、全身性黄疸和各组织器官广泛性出血以及坏死为主要17各各部部位位组织水水肿,以以头颈部部、腹腹部部、胸胸壁壁、四四肢肢最最明明显;肾脏、肺肺脏、肝肝脏、心心外外膜膜出出血血明明显;浆膜膜腔腔内内常常可可见有有过量量的的黄黄色色液液体体与与纤维蛋白;肝蛋白;肝脏、脾、脾脏、肾脏肿大。大。成年猪的慢性病例以成年猪的慢性病例以肾脏病病变最明最明显。病理病理变化化(亚急性和慢性型)急性和慢性型)各部位组织水肿,以头颈部、腹部、胸壁、四肢最明显;肾脏、肺脏181微微生生物物学学诊断断 采采集集病病猪猪血血液液、尿尿液液,或或病病死死猪猪的的肝肝、肾、脾脾和和脑等等组织。死死后后检查要要在在1-3h内内进行行,否否则菌菌体体大大部部分分会会发生生溶溶解解。用用暗暗视野野显微微镜直直接接镜检或或用用免免疫疫荧光光抗抗体体法法检查。组织中中的的菌菌体体可可染染色色后后检查。病病料料可可用用作病原体的分离培养。作病原体的分离培养。2血血清清学学诊断断 主主要要有有凝凝集集溶溶解解试验、微微量量补体体结合合试验、酶联免免疫疫吸吸附附试验(ELISA)、炭炭凝凝集集试验、间接接血血凝凝试验、间接接荧光光抗抗体体法法以及乳胶凝集以及乳胶凝集试验。诊断断1微生物学诊断采集病猪血液、尿液,或病死猪的肝、肾、脾191使使用用10氟氟甲甲砜霉霉素素(肌肌注注,qd5)、磺磺胺胺类药物物(磺磺胺胺-5-甲甲氧氧嘧啶,肌肌注注,bid5)。链霉霉素素、土土霉霉素素等等四四环素素类抗抗生生素素也也有有一一定定的的疗效效。病病情情严重的可用重的可用维生素、葡萄糖生素、葡萄糖进行行输液治液治疗。2感感染染猪猪群群可可用用土土霉霉素素拌拌料料1.5g/kg)连喂喂7天天,可可以以预防防和和控控制制病病情情的的蔓蔓延延。妊妊娠娠母母猪猪产前前1个个月月连续用土霉素拌料用土霉素拌料饲喂,可以防止喂,可以防止发生流生流产。治治疗1使用10氟甲砜霉素(肌注,qd5)、磺胺类药物(磺胺201做好猪舍做好猪舍环境、水源、境、水源、饲料的消毒工作。料的消毒工作。2及及时发现、淘汰和、淘汰和处理理带菌猪。菌猪。3搞好搞好灭鼠工作。鼠工作。4用用灭活菌苗活菌苗对有病猪的猪群有病猪的猪群进行免疫接种。行免疫接种。预防防1做好猪舍环境、水源、饲料的消毒工作。预防21钩端螺旋体病说课文档课件22钩端螺旋体病说课文档课件23钩端螺旋体病说课文档课件24钩端螺旋体病说课文档课件25起病至1周左右,血液中存在钩体。病程1月左右其效价达高峰。出血患者可有贫血、血小板减少。免疫接种皮下注射多价菌苗。黄疸出血型、秋季型、澳洲型、犬型等毒力较强的钩体菌型的感染,常引起黄疸、出血和肾功能衰竭;患者面色苍白,心慌烦躁,呼吸、心率加快,肺湿啰音进行性增多,此为肺大出血先兆。胸、腹腔内有黄色液体。对污染的水源、积水可用漂白粉及其他有效药物进行喷洒消毒;+:50%以上钩端螺旋体凝集呈蜘蛛状,约有半数未凝集。将我国15群15型钩端螺旋体代表株于Korthof培养基中,28培养57d,暗视野显微镜检查,每400倍视野下不少于50条,运动活泼并无自凝者可作显凝抗原。双侧腓肠肌压痛,重者拒按;首次剂量为40万u,以后每日120160万u,分34次肌肉注射,避免发生赫氏反应。可用镀银染色或甲苯胺蓝染色等方法检测。疗程7天,或体温正常后24日。病后可得较强的同型免疫力。是是绵羊羊和和山山羊羊共共患患的的一一种种传染染病病,其其特特征征为显著著的的黄黄疸疸、血血尿尿、皮皮肤肤和和粘粘膜膜出出血血与与坏坏死死。全全年均可年均可发病,以夏、秋放牧期病,以夏、秋放牧期间更更为多多见。传染染的的主主要要来来源源是是病病畜畜和和鼠鼠类。病病畜畜和和鼠鼠类从从尿尿中中排排菌菌,污染染饲料料和和水水源源,可可以以通通过消消化化道道和和皮皮肤肤传给健健羊羊,有有时也也可可通通过鼠鼠咬咬伤、结膜膜或或上上呼呼吸吸道道粘粘膜膜传染染,间或或可可能能通通过交交配配传染染或胎内感染。或胎内感染。羊羊钩端螺旋体病端螺旋体病(传染性黄疸染性黄疸)起病至1周左右,血液中存在钩体。是绵羊和山羊共患的一种传染病26最最急急性性、急急性性 体体温温升升高高到到4041.5,呼呼吸吸加加快快,脉脉速速。粘粘膜膜发黄黄。尿尿呈呈红色色,有有下下痢痢。眼眼发生生结膜膜炎炎,流流泪泪。鼻鼻腔腔流流出出黏黏液液脓性性或或脓性性分分泌泌物物,鼻鼻孔孔周周围的的皮皮肤肤破破裂裂。病病期期持持续510d,死亡率达,死亡率达50以上。以上。亚急急性性 症症状状与与急急性性者者大大体体相相同同。体体温温升升高高后后可可迅迅速速降降到到常常温温。黄黄疸疸及及血血色色素素尿尿很很显著著。耳耳部部、躯躯干干及及乳乳头部部的的皮皮肤肤发生生坏坏死死。胃胃肠道道显著著弛弛缓,发生生严重重的的便便秘秘。虽然然可可能能痊痊愈愈,但但极极为缓慢。死亡率慢。死亡率为2425。临诊症状症状最急性、急性体温升高到4041.5,呼吸加快,脉速。27尸尸体体消消瘦瘦,可可见粘粘膜膜呈呈深深浅浅不不同同的的黄黄色色。皮皮下下组织水水肿而而黄黄染染。胸胸、腹腹腔腔内内有有黄黄色色液液体体。肝肝脏增大,呈黄褐色,增大,呈黄褐色,质脆弱或柔脆弱或柔软。肾脏的的病病变具具有有诊断断意意义。肾剧烈烈增增大大,被被膜膜很很容容易易剥剥离离,髓髓质与与皮皮质的的界界限限消消失失,组织柔柔软而脆。病期而脆。病期长久久时,则肾脏变为坚硬。硬。肺肺脏黄黄染染,有有时水水肿,心心脏淡淡红,大大多多数数情情况况下下带有淡黄色。膀胱黏膜出血。有淡黄色。膀胱黏膜出血。脑室室中中聚聚积有有大大量量液液体体。血血液液稀稀薄薄如如水水,红细胞溶解,在空气中胞溶解,在空气中长时间不能凝固。不能凝固。剖剖检尸体消瘦,可见粘膜呈深浅不同的黄色。皮下组织水肿而黄染。胸、281直直接接镜检钩端端螺螺施施体体 采采血血液液、尿尿液液、脑脊脊液液、肝肝、肾、脾脾、脑等等病病料料。血血液液、尿尿、脊脊髓髓液液以以3000rpm离离心心30min,取取沉沉淀淀物物制制成成压滴滴标本本,在在暗暗视野野显微微镜下下检查;肝肝、肾、脾脾组织先先制制成成1:51:10悬液液,经1500rpm离离心心510min,其其上上清清液液再再以以3000rpm离离心心30min,沉淀物制片,沉淀物制片镜检。2血血清清学学检查 凝凝集集溶溶解解试验、补体体结合合试验、间接接血血凝凝试验及及酶联免免疫疫吸吸附附试验,均均可可用于用于诊断。断。诊断断1直接镜检钩端螺施体采血液、尿液、脑脊液、肝、肾、脾、291注意注意环境境卫生,作好生,作好灭鼠、排水工作。鼠、排水工作。2对新新进入入场的的羊羊只只,应隔隔离离检疫疫30天天,必必要要时进行血清学行血清学检查。3隔隔离离病病羊羊以以后后,将将其其他他假假定定健健康康的的羊羊转移移到具有新到具有新饮水水处的安全放牧地区。的安全放牧地区。4彻底底清清除除病病羊羊舍舍的的粪便便及及污物物,用用1020生生石石灰灰水水或或2NaOH严格格消消毒毒。对饲槽槽、水水桶桶及及其其他他日日常常用用具具,应用用开开水水或或热草草木木灰灰水水处理,将理,将粪便堆集起来,便堆集起来,进行生物行生物热消毒。消毒。预防防1注意环境卫生,作好灭鼠、排水工作。预防305当当羊羊群群或或牧牧场发生生本本病病时,应当当宣宣布布为疫疫群群或或疫疫场,采采取取一一定定的的限限制制措措施施。在在最最后后一一只只病病羊羊痊痊愈愈后后30d,并并进行行预防防消消毒毒的的情情况况下下,才可解除限制措施。才可解除限制措施。6在在常常发病病地地区区,应该有有计划划地地进行行死死菌菌苗苗或或鸡胚胚化化菌菌苗苗或或多多价价浓缩菌菌苗苗注注射射。免免疫疫期期可可达一年。达一年。5当羊群或牧场发生本病时,应当宣布为疫群或疫场,采取一定的31急急性性型型 突突然然高高热,粘粘膜膜发黄黄,尿尿色色深深,有有大大量量白白蛋蛋白白、血血红蛋蛋白白和和胆胆色色素素。常常见皮皮肤肤干干裂裂、坏坏死和死和溃疡。于。于发病后病后3 3-7日死亡。病死率日死亡。病死率较高。高。亚急急性性型型 常常见于于乳乳牛牛。体体温温有有不不同同程程度度升升高高,食食欲欲减减少少,粘粘膜膜黄黄疸疸,奶奶量量显著著下下降降或或停停止止。乳乳色色变黄黄如如初初乳乳状状并并常常有有血血凝凝块,病病牛牛很很少少死死亡亡。经两月后逐两月后逐渐好好转,乳量恢复正常。,乳量恢复正常。流流产是牛是牛钩端螺旋体病的重要症状之一。一些端螺旋体病的重要症状之一。一些牛群暴牛群暴发本病的唯一症状就是流本病的唯一症状就是流产。牛牛钩端螺旋体病端螺旋体病急性型突然高热,粘膜发黄,尿色深,有大量白蛋白、血红蛋白和32由由致致病病性性钩端端螺螺旋旋体体所所引引起起的的急急性性传染染病病。按按流流行行形形式式一一般般分分为稻稻田田型型、洪洪水水型型和和雨雨水水型型。南南方方以以稻稻田田型型和和雨雨水水型型为主主,北北方方以以洪洪水水型型和和雨雨水水型型为主主。钩体体病病主主要要以以农村村青青壮壮年年发病病为主,集中在主,集中在农忙季忙季节。传染源染源鼠鼠类、猪及其它家畜。、猪及其它家畜。传播播途途径径 钩体体随随带菌菌动物物尿尿排排出出并并污染染水水源源。人人接接触触疫疫水水时,通通过皮皮肤肤、粘粘膜膜感感染染。多多发生在夏秋割稻季生在夏秋割稻季节或大雨洪水之后。或大雨洪水之后。人人钩端螺旋体病端螺旋体病由致病性钩端螺旋体所引起的急性传染病。按流行形式一般分为稻田33起病急起病急骤。早早期期 有有高高热、倦倦怠怠无无力力、全全身身酸酸痛痛、结膜膜充充血、腓血、腓肠肌肌压痛、表浅淋巴痛、表浅淋巴结肿大;大;中中期期 可可伴伴有有肺肺弥弥漫漫性性出出血血,明明显的的肝肝、肾、中枢神中枢神经系系统损害;害;晚晚期期 多多数数病病人人痊痊愈愈。少少数数病病人人出出现后后发热、眼眼结膜炎以及膜炎以及脑动脉脉闭塞性炎症等。塞性炎症等。致死原因致死原因肺弥漫性出血。肝、肺弥漫性出血。肝、肾功能衰竭。功能衰竭。临床特征床特征起病急骤。临床特征341.流行病学史流行病学史在在钩体体病病流流行行季季节,发病病前前一一个个月月内内有有疫疫区区旅旅居居史史,并并接接触触过可可疑疑疫疫水水或或动物物及及其其排泄物。排泄物。诊断断标准准1.流行病学史诊断标准352.早期主要症状和体征早期主要症状和体征发热。短短期期内内体体温温可可达达39左左右右,常常为弛弛张热,可可伴伴有有畏畏寒寒等等症症状状;肌肌痛痛。全全身身肌肌痛痛,特特别是是腓腓肠肌肌痛痛;乏乏力力。全全身身乏乏力力,特特别是是腿腿软明明显;眼眼结膜膜充充血血。轻者者主主要要在在眼眼球球结膜膜、外外眦眦及及上上下下穹穹窿窿部部,重重者者除除角角膜膜周周围外外的的全全球球结膜膜血血管管扩张呈呈网网状状,无无分分泌泌物物,不不痛痛,不不畏畏光光;腓腓肠肌肌压痛痛。双双侧腓腓肠肌肌压痛痛,重重者者拒拒按按;淋淋巴巴结肿大大。主主要要为表表浅浅淋淋巴巴结及及股股淋淋巴巴结,一一般般为12cm,质偏偏软,有有压痛痛,无化无化脓。2.早期主要症状和体征363.实验室室诊断断从血液或从血液或脑脊液或尿液分离到脊液或尿液分离到钩端螺旋体。端螺旋体。从从血血液液或或尿尿液液或或脑脊脊液液检测到到钩端端螺螺旋旋体体核核酸。酸。病病人人血血清清中中抗抗钩端端螺螺旋旋体体抗抗体体恢恢复复期期效效价价比比早期升高早期升高4倍或倍或4倍以上。倍以上。3.实验室诊断371.败血症期血症期起起病病至至1周周左左右右,血血液液中中存存在在钩体体。本本期期可可有有4种种临床床类型型:普普通通型型;肺肺出出血血型型;黄黄疸出血型;疸出血型;脑膜膜脑炎型。炎型。2.免疫反免疫反应期期约在在发病病1周周左左右右,出出现免免疫疫反反应,再再度度出出现短短期期发热,部部分分病病例例出出现眼眼结膜膜炎炎、视神神经炎炎,少少数数于于发病病数数月月后后出出现脑动脉脉炎炎,引引起起头痛、痛、瘫痪、失、失语等神等神经症状。症状。临床表床表现过程程1.败血症期临床表现过程38黄黄疸疸出出血血型型、秋秋季季型型、澳澳洲洲型型、犬犬型型等等毒毒力力较强的的钩体体菌菌型型的的感感染染,常常引引起起黄黄疸疸、出出血血和和肾功能衰竭;功能衰竭;伤寒寒流流感感型型、7日日热型型,特特别是是波波摩摩那那型型等等毒毒力力较弱的感染,弱的感染,则常引起常引起钩体病的体病的轻型。型。病情的病情的轻重重还与人体免疫状与人体免疫状态的高低有关。的高低有关。黄疸出血型、秋季型、澳洲型、犬型等毒力较强的钩体菌型的感染,39普通型普通型突突然然畏畏寒寒、寒寒战、发热,呈呈稽稽留留或或弛弛张热。全全身身酸酸痛痛,腓腓肠肌肌疼疼痛痛尤尤为显著著。患患者者衰衰弱弱无无力力。眼眼结膜膜充充血血,不不痒痒亦亦无无分分泌泌物物。表表浅浅淋巴淋巴结肿大,以腹股沟淋巴大,以腹股沟淋巴结肿大大为多多见。少少数数重重症症患患者者毒毒血血症症显著著,于于发病病25日日出出现面面色色苍白白,四四肢肢冰冰冷冷,脉脉搏搏细弱弱,血血压下下降降,少少尿尿或或无无尿尿,进入入休休克克。常常伴伴有有吐吐泻泻,而而发热、充血等症状不明、充血等症状不明显。普通型40肺出血型肺出血型败血血症症出出现35日日,开开始始出出现咳咳嗽嗽,痰痰带血血丝。患患者者面面色色苍白白,心心慌慌烦躁躁,呼呼吸吸、心心率率加加快快,肺肺湿湿啰音音进行行性性增增多多,此此为肺肺大大出出血血先先兆兆。数数小小时内内可可发展展至至面面色色极极度度苍白白、唇唇发绀、肺肺满布布湿湿啰音音。咯咯血血频作作,若若未未能能控控制制,可可发生生口口鼻鼻大大量量涌涌血血,呼呼吸吸困困难或或因因呼呼吸道吸道为血血块梗阻而窒息。梗阻而窒息。肺出血型41黄疸出血型黄疸出血型发病病36病病日日,开开始始出出现黄黄疸疸,肝肝肿大大伴伴压痛痛。黄黄疸疸于于10病病日日左左右右达达高高峰峰,重重者者可可发生生肝肝坏坏死死。重重症症常常有有鼻鼻衄衄、皮皮肤肤粘粘膜膜出出血血、呕呕血血、便便血血、尿尿血血、阴阴道道出出血血等等。尿尿中中常常见细胞胞、蛋蛋白白、管管型型。重重者者尿尿少少、尿尿闭,发生生尿尿毒症、酸中毒。毒症、酸中毒。黄疸出血型42脑膜膜脑炎型炎型发病病47日日,剧烈烈头痛痛、呕呕吐吐、颈项强直直、克克氏氏征征阳阳性性。脑脊脊液液细胞胞数数稍稍增增多多,蛋蛋白白轻度度增增加加,可可分分离离出出钩体体。少少数数重重症症患患者者呈呈现脑炎炎症症状状,发生生昏昏迷迷、惊惊厥厥,甚甚至至循循环、呼呼吸衰竭。吸衰竭。脑膜脑炎型43钩端螺旋体病说课文档课件44血象:血白血象:血白细胞胞总数及中性粒数及中性粒细胞增高。胞增高。病病原原分分离离:取取早早期期病病人人血血液液接接种种柯柯索索夫夫培培养基,分离养基,分离钩体。体。血血清清学学检查:凝凝集集溶溶解解试验,效效价价1 400以以上上为阳阳性性;双双份份血血清清效效价价呈呈4倍倍以以上上增增长者者可可确确诊。乳乳凝凝试验、反反向向乳乳凝凝试验可可作作快快速速诊断。断。实验室室检查血象:血白细胞总数及中性粒细胞增高。实验室检查451.对症治症治疗和支持和支持疗法法早早期期应卧卧床床休休息息,给予予高高热量量,富富含含维生生素素B和和C,容易消化的,容易消化的饮食;食;保持水、保持水、电解解质和酸碱平衡;和酸碱平衡;出出血血严重重者者应立立即即输血血并并及及时应用用止止血血剂。肺肺大大出出血血者者,应使使病病人人保保持持镇静静,酌酌情情应用用镇静静剂;肝功能肝功能损害者害者应保肝治保肝治疗。治治疗措施措施1.对症治疗和支持疗法治疗措施462.抗菌治抗菌治疗早早期期应用用有有效效的的抗抗生生素素。有有提提前前退退热,缩短短病期,防止和减病期,防止和减轻黄疸、出血,保黄疸、出血,保护脏器。器。青青霉霉素素。首首次次剂量量为40万万u,以以后后每每日日120160万万u,分分34次次肌肌肉肉注注射射,避避免免发生生赫赫氏氏反反应。儿儿童童剂量量酌酌减减或或与与成成人人基基本本相相同同。疗程程7天天,或或体体温温正正常常后后24日日。重重症症病病例例加加大大剂量,并合用量,并合用肾上腺皮上腺皮质激素。激素。其其他他抗抗生生素素。四四环素素、庆大大霉霉素素、链霉霉素素、红霉霉素素、氯霉霉素素、多多西西环素素(强力力霉霉素素)、氨氨苄西林等。咪西林等。咪唑酸酸酯及甲及甲唑醇。醇。2.抗菌治疗47赫氏反赫氏反应多多发生生于于首首剂青青霉霉素素G注注射射后后30分分钟4小小时内,因大量内,因大量钩体被体被杀灭后后释放毒素所致。放毒素所致。主主要要症症状状为突突然然寒寒战、高高热、头痛痛、全全身身酸酸痛痛、心心率率、呼呼吸吸加加快快,原原有有的的症症状状加加重重,并并可可伴伴有有血血压下下降降、四四肢肢厥厥冷冷、休休克克、体体温温骤降降等等,一一般般持持续30分分钟至至1小小时,偶偶可可导致致肺肺弥弥漫漫性性出出血血,应立立即即应用用氢化化考考的的松松200300mg静静滴滴或或地地塞塞米米松松510mg静静注注,伴伴用用镇静降温、抗休克等治静降温、抗休克等治疗。赫氏反应483.后后发症治症治疗多多采采取取对症症治治疗。重重症症患患者者可可用用肾上上腺腺皮皮质激素以加速恢复,减少后激素以加速恢复,减少后遗症。症。1.结膜膜炎炎扩瞳瞳,1%阿阿托托品品溶溶液液、10%新新福福林林溶溶液液滴滴眼眼,1%新新福福林林结膜膜下下注注射射或或用用强力力扩瞳瞳剂(1%阿阿托托品品、4%可可卡卡因因、0.1%肾上上腺腺素素各各)结膜膜下下注注射射等等;眼眼部部热敷敷;局局部部用用可的松滴眼或可的松滴眼或结膜下注射。膜下注射。2.脑内内闭塞塞性性动脉脉炎炎大大剂量量青青霉霉素素G、肾上上腺腺皮皮质激激素素,亦亦可可用用血血管管扩张剂如如烟烟酸酸、氢溴溴酸酸樟樟柳柳碱碱(AT-3)、氨氨茶茶碱碱、理理疗及及针灸灸等等疗法。法。3.后发症治疗491.入侵途径、体内繁殖及全身感染中毒症状入侵途径、体内繁殖及全身感染中毒症状钩体体自自皮皮肤肤破破损处或或各各种种粘粘膜膜如如口口腔腔、鼻鼻、肠道道、眼眼结膜膜等等侵侵入入人人体体内内,经淋淋巴巴管管或或小小血血管管至至血血循循环和和全全身身各各脏器器(包包括括脑脊脊液液和和眼眼部部),迅迅速速繁繁殖殖引引起起菌菌血血症症。钩体体穿穿透透能能力力极极强,可可引引起起严重重的的感感染染中中毒毒症症状状,以以及及肝肝、肾、肺肺、肌肌肉肉和和中中枢枢神神经系系统等等病病变。其病其病变基基础是全身毛是全身毛细血管血管损伤。发病机理病机理1.入侵途径、体内繁殖及全身感染中毒症状发病机理502.内内脏器官器官损害害各各脏器器损害害的的严重重度度因因钩体体菌菌型型、毒毒力力及及人人体体的的反反应不不同同,钩体体病病的的的的表表现复复杂多多样,病病变程程度度不不一一,临床床往往往往由由于于某某个个脏器器病病变突突出出,而而出出现不不同同的的临床床类型型,如如肺肺弥弥漫漫性性出出血血型型、黄黄疸疸出出血血型型、肾功功能能衰衰竭竭型型和和脑膜膜脑炎型等。炎型等。2.内脏器官损害513.中后期非特异性反中后期非特异性反应和特异性反和特异性反应非非特特异异性性反反应 血血液液中中的的中中性性粒粒细胞胞增增多多,但但不不化化脓,仅出出现轻微微炎炎症症反反应。网网状状内内皮皮细胞胞增增生生明明显,有有明明显的的吞吞噬噬能能力力。出出现腹腹股沟及其他表浅淋巴股沟及其他表浅淋巴结肿大。大。特特异异性性免免疫疫反反应 发病病后后1周周左左右右,先先后后出出现IgM、IgG。病病程程1月月左左右右其其效效价价达达高高峰峰。抗抗体体出出现后后钩体体血血症症逐逐渐消消失失。肾脏中中的的钩体体不不受受血血液液中中特特异异性性抗抗体体的的影影响响,能能在在肾脏中中生存繁殖并常随尿液排出。生存繁殖并常随尿液排出。3.中后期非特异性反应和特异性反应521.肺肺脏主主要要病病变为出出血血,以以弥弥漫漫性性出出血血最最为显著著。是是人人体体对毒毒力力强、数数量量多多的的钩体体所所引引起起的的全全身身性性强烈烈反反应。组织学学检查可可见到到肺肺组织毛毛细血血管管完完整整,但但极极度度充充血血、淤淤血血以以致致溢溢血血(并并未未见明明显血血管管破破裂裂)。在在变性性的的内内皮皮细胞胞内内有有时可可见变性性的的钩体体。肺肺比比正正常常重重12倍倍,外外观呈呈紫紫黑黑色色。切切面面呈呈暗暗红色色。气管或支气管几乎全气管或支气管几乎全为血液充血液充满。病理改病理改变1.肺脏主要病变为出血,以弥漫性出血最为显著。是人体对毒力532.肾脏主主要要是是肾小小管管上上皮皮细胞胞变性性、坏坏死死。肾小小管管管管腔腔扩大大、管管腔腔内内充充满血血细胞胞或或透透明明管管型型,可可使使管管腔腔阻阻塞塞。间质性性肾小小球球肾炎炎是是钩体体病病的的基基本本病病变。电镜下下小小球球内内皮皮细胞胞无无改改变,免免疫疫复复合合物物和和补体体沉沉积在在肾小小球球基基底底膜膜上上。肾间质呈呈现水水肿,有有大大单核核细胞胞、淋淋巴巴细胞胞及及少少数数嗜嗜酸酸性性和和中中性性粒粒细胞胞浸浸润。多多数数肾组织内内可可找到找到钩体。体。2.肾脏主要是肾小管上皮细胞变性、坏死。肾小管管腔扩大、管543.肝肝脏肝肝组织损伤轻重重不不一一,病病程程越越长,损害害越越大大。病病变轻者者外外观无无明明显异异常常。严重重病病例例镜下下可可见肝肝细胞胞退退行行性性变,脂脂肪肪变,坏坏死死,严重重的的肝肝细胞胞排排列列紊紊乱乱;电镜下下可可见肝肝窦或或微微细胆胆小小管管的的微微绒毛毛肿胀,管管腔腔闭塞塞。肝肝细胞胞线粒粒体体肿胀,嵴突突消消失失。在在分分离离的的间隔隔中中可可找找到到钩体体。由由于于肝肝脏的的炎炎症症、坏坏死死,毛毛细胆胆管管的的阻阻塞塞及及溶溶血血等等多多种种因因素素可可导致致黄黄疸疸和和凝凝血血功功障障碍碍,甚者造成急性肝功能衰竭。甚者造成急性肝功能衰竭。3.肝脏肝组织损伤轻重不一,病程越长,损害越大。病变轻者外554.心心脏心心肌肌损害害常常常常是是钩体体病病的的重重要要病病变。心心包包有有少少数数出出血血点点、灶灶性性坏坏死死。间质炎炎症症和和水水肿。心心肌肌纤维普普遍遍浊肿、部部分分病病例例有有局局灶灶性性心心肌肌坏坏死死及及肌肌纤维溶溶解解。心心血血管管的的损伤主主要要表表现为全身毛全身毛细血管的血管的损伤。4.心脏心肌损害常常是钩体病的重要病变。心包有少数出血点、56传染源染源鼠鼠和和猪猪是是二二个个主主要要传染染源源。国国内内鼠鼠类中中,黑黑线姬鼠鼠、黄黄毛毛鼠鼠和和黄黄胸胸鼠鼠等等带菌菌率率较高高,所所带菌菌群群亦亦多多;家家畜畜中中,猪猪携携带的的菌菌群群与与人人的的流流行行菌菌群群完完全全一一致致,且且分分布布广广、数数量量多多;与与人人接接触触密密切切,猪猪尿尿能能污染染居居民民点点内内各各种种水水源源;带菌菌率率高高,排排菌菌时间长(370天天以以上上);尿尿量量大大,尿尿内内钩体体数数量量多多;猪猪圈圈潮潮湿湿多多水水,泥泥土土和和积水水内内存存在在大大量量钩体体。犬犬、牛牛等等也也是是重重要要的的传染染源源。血血清清学学检查证明明,蛇蛇、鸡、鸭、鹅、蛙蛙、兔等兔等动物有可能是物有可能是钩体的体的储存宿主。存宿主。流行病学流行病学传染源流行病学57传播途径播途径1.经皮皮肤肤 接接触触带菌菌野野生生动物物体体后后传染染给家家畜畜/人人,家家畜畜再再传染染给人人/野野生生动物物;人人群群经常常接接触触被被钩体体污染染的的环境境(水水和和土土壤壤等等),钩体体经破破损皮皮肤肤侵侵入入机机体体。(外外在在环境境如如土土壤壤等等偏偏碱碱,气温气温22以上,以上,钩体容易生体容易生长)。)。2.经鼻鼻腔腔粘粘膜膜或或消消化化道道粘粘膜膜 钩体体可可通通过消消化化道道、呼呼吸吸道道和和生生殖殖系系统的的粘粘膜膜侵侵入入机机体体。如如喝喝了大量疫水,吃了被了大量疫水,吃了被钩体体污染的食品染的食品时。3.其其他他从从羊羊水水、胎胎盘、脐血血、乳乳汁汁及及流流产儿儿的的肝肝肾组织中中都都能能分分离离出出钩体体,说明明可可通通过哺哺乳及先天性感染而乳及先天性感染而传播。播。传播途径58易感人群易感人群人人群群对本本病病普普遍遍易易感感。常常与与疫疫水水接接触触者者多多为农民民、渔民民、下下水水道道工工人人、屠屠宰宰工工人人及及饲养养员,因因而而从从事事农业、渔业劳动者者发病病率率较高高。从从外外地地进入入疫疫区区的的人人员,由由于于缺缺乏乏免免疫疫力力,往往往往比比本本地地人人易易感感。病病后后可可得得较强的的同同型型免免疫疫力力。在在气气温温较高高地地区区、屠屠宰宰场、矿区区等等,终年年可可见散散发病例。病例。易感人群59流行特征流行特征1.发病病年年龄分分布布以以1039岁为最最多多,男男性性占占80%以以上上。多多为青青壮壮年年农民民(从从事事牧牧、渔业劳动者者发病率亦高),病率亦高),农村儿童并非少村儿童并非少见,年,年龄2.好好发季季节为79月月,8、9月月达达高高峰峰,因因而而有有“打谷黄打谷黄”、“稻瘟病稻瘟病”之称。之称。3.流流行行形形式式根根据据我我国国钩体体病病的的流流行行特特点点,大大致致可可分分四四个个主主要要流流行行;雨雨水水型型;稻稻田田型型;洪水型;洪水型;散散发型。型。4.外来人外来人员易感性易感性强。流行特征601.常常规检查与血液生化与血液生化检查无无黄黄疸疸病病例例的的血血白白细胞胞总数数和和中中性性粒粒细胞胞数数正正常常或或轻度度升升高高;黄黄疸疸病病例例的的白白细胞胞计数数大大多多增增高高,中中性性粒粒细胞胞在在81%95%之之间;出出血患者可有血患者可有贫血、血小板减少。血、血小板减少。70%的的病病人人有有轻度度蛋蛋白白尿尿、白白细胞胞、红细胞胞或管型出或管型出现。黄疸病例有胆。黄疸病例有胆红素增高。素增高。血血清清转氨氨酶可可以以升升高高,但但增增高高的的幅幅度度与与病病情情的的轻重重并并不不平平行行。50%的的病病例例有有肌肌酸酸磷磷酸酸激激酶(CPK)增高(平均)增高(平均值是正常是正常值的的5倍)。倍)。辅助助检查1.常规检查与血液生化检查辅助检查612.特异性特异性检测病原体分离病原体分离 在在发病病10天天内内可可从从血血液液及及脑脊脊液液中中分分离离出出钩体。第二周尿中可体。第二周尿中可检出出钩体。体。超超速速离离心心集集菌菌后后镜检、荧光光抗抗体体染染色色、原原血血片片镀银染染色色及及甲甲苯苯蓝染染色色等等方方法法直直接接检查病病原体,阳性率在原体,阳性率在50%左右,有助于早期左右,有助于早期诊断。断。早早期期患患者者的的血血液液或或其其他他体体液液接接种种于于幼幼年年豚豚鼠鼠或或金金黄黄地地鼠鼠腹腹腔腔内内,晚晚期期病病例例可可用用尿尿液液接接种种于腹部皮下。于腹部皮下。35天后天后检查腹腔液或血液。腹腔液或血液。2.特异性检测62血清学血清学试验凝凝集集溶溶价价试验(凝凝溶溶试验)、酶联免免疫疫吸吸附附试验(ELISA)、间接接红细胞胞凝凝集集试验、间接接红细胞胞溶溶解解试验、间接接荧光光抗抗体体法法是是用用已已知知钩体体抗抗原原检测血血中中出出现的的相相应抗抗体体,不不能能做做到到早早期期诊断断。近近年年来来开开展展了了乳乳胶胶凝凝集集抑抑制制试验,反反向向间接接血血凝凝试验与与间接接荧光光抗抗体体染染色色试验等等可可以以测出出血血中中早早期期存存在在的的钩体体,已已取得了早期取得了早期诊断的初步成果。断的初步成果。血清学试验63凝集溶价凝集溶价试验(凝溶(凝溶试验)有有较高高的的特特异异性性和和敏敏感感性性,但但需需不不同同型型别活活菌菌操操作作,凝凝集集素素一一般般在在病病后后78天天出出现,逐逐渐升升高高,可可持持续数数月月到到数数年年。间隔隔两两周周双双份份血清,效价增高血清,效价增高4倍以上倍以上为阳性。阳性。凝集溶价试验(凝溶试验)64酶联免疫吸附免疫吸附试验(ELISA)比比凝凝溶溶试验阳阳性性出出现时间更更早早和和更更灵灵敏敏。显微微镜凝凝集集试验与与ELISA的的总符符合合率率达达86.2%。近近年年来来国国外外已已普普遍遍采采用用钩体体IgM抗抗体体技技术,有高度特异性。有高度特异性。酶联免疫吸附试验(ELISA)65间接接红细胞凝集胞凝集试验将将从从钩体体菌菌体体中中提提取取的的一一种种抗抗原原成成分分,将将其其吸吸附附于于人人“O”型型红细胞胞表表面面致致敏敏,遇遇到到同同种种抗抗体体,即即发生生红细胞胞凝凝集集现象象,本本试验具具钩体体感感染染的的属属特特异异性性而而无无群群或或型型的的特特异异性性,较凝凝溶溶试验阳阳性性出出现早早,操操作作简便便,不不需需特特殊殊设备,适合基,适合基层推广推广应用。用。间接红细胞凝集试验66间接接红细胞溶解胞溶解试验用用钩体体抗抗原原物物质将将新新鲜绵羊羊红细胞胞致致敏敏,在在补体体存存在在的的条条件件下下与与含含有有抗抗体体的的血血清清混混合合时发生生溶溶血血,较间接接红细胞胞凝凝集集试验的的灵灵敏敏性性为高。高。间接红细胞溶解试验67间接接荧光抗体法光抗体法将将标准准钩体体菌菌株株作作成成涂涂片片,然然后后将将检测病病人人的的血血清清滴滴在在已已知知菌菌株株的的玻玻片片上上,经洗洗涤,如如病病人人血血清清中中具具有有抗抗体体,抗抗原原抗抗体体结合合,再再用用抗抗人人球球蛋蛋白白荧光光抗抗体体与与此此复复合合物物结合合,发生生荧光光,即即为阳阳性性,此此法法无无型型特特异异法法。本本法法检出出抗抗体体时间及及阴阴转时间均均较显凝凝试验抗抗体体为早,具有一定的早期早,具有一定的早期诊断意断意义。间接荧光抗体法68早期早期诊断断钩端端螺螺旋旋体体DNA探探针技技术:一一种种敏敏感感性性高高的的早早期期诊断断方方法法。用用黄黄疸疸出出血血群群哥哥本本哈哈根根型型Wijnberg株株DNA制制备探探针,可可在在硝硝酸酸纤维素素滤膜膜上上检出出2pg的的同同源源DNA。且且致致病病性性钩体体不同血清群不同血清群Patoc株呈交株呈交义杂交交现象。象。DNA基基因因扩增增(PCR)技技术:一一个个新新型型诊断断方方法法。因因PCR只只要要有有引引物物便便可可进行行试验,且且方方法法简便便,适适用用于于大大数数量量标本本的的流流行行病病学学调查。早期诊断69-:完全无凝集,与:完全无凝集,与对照管相同。照管相同。(A)+:25%以上以上钩端螺旋体凝集呈小蜘蛛状,大多数游离且运端螺旋体凝集呈小蜘蛛状,大多数游离且运动活活泼。+:50%以上以上钩端螺旋体凝集呈蜘蛛状,端螺旋体凝集呈蜘蛛状,约有半数未凝集。有半数未凝集。(B)+:75%以上以上钩端螺旋体凝集呈蜘蛛状,其端螺旋体凝集呈蜘蛛状,其间有少数游离。有少数游离。(C)+:几乎全部:几乎全部钩端螺旋体凝集呈巨大蜘蛛状。端螺旋体凝集呈巨大蜘蛛状。(DEF)-:完全无凝集,与对照管相同。(A)+:25%以上钩端701.管理管理传染源染源疫疫区区内内应灭鼠鼠,加加强猪猪、犬犬、羊羊、牛牛等等家家畜畜的的检疫工作。疫工作。发现病人及病人及时隔离。隔离。2.切断切断传染途径染途径对流流行行区区的的水水稻稻田田、池池溏溏、沟沟溪溪、积水水坑坑及及准准备开开荒荒的的地地区区进行行调查;加加强疫疫水水、粪便便管管理理,修修建建厕所所,改改良良猪猪圈圈。不不让畜畜粪尿尿污染染附附近近池池溏溏、稻稻田田和和积水水;对污染染的的水水源源、积水水可可用用漂漂白白粉粉及及其其他他有有效效药物物进行行喷洒洒消消毒毒;管管理理好好饮食食,防防止止带菌菌鼠鼠的的排排泄泄物物污染染食品。食品。预防防1.管理传染源预防713.保保护易感人群易感人群个个人人防防护在在流流行行区区和和流流行行季季节,禁禁止止青青壮壮年年及及儿儿童童在在疫疫水水中中游游泳泳、涉涉水水或或捕捕鱼。与与疫疫水水接接触触的的工工人人、农民民尽尽量量穿穿长统靴靴和和戴戴胶胶皮皮手套,并防止皮肤破手套,并防止皮肤破损、减少感染机会。、减少感染机会。免免疫疫接接种种 皮皮下下注注射射多多价价菌菌苗苗。被被注注射射者者可可产生生对同同型型钩体体的的免免疫疫力力,维持持1年年左左右右。接接种种对象象为易易感感人人群群及及疫疫水水接接触触者者。预防防接接种种宜宜在在本本病病流流行行前前1个个月月,2次次注注射射的的间隔隔时间为710天天。接接种种后后1个个月月左左右右产生生免免疫疫力力。新疫区需新疫区需连续普种普种34年,以使疫情年,以使疫情稳定。定。3.保护易感人群724.预防性治防性治疗对实验室室、流流行行病病学学工工作作人人员以以及及新新进疫疫区区的的劳动者者,疑疑似似感感染染本本病病,但但尚尚无无明明显症症状状者者,可可每每日日肌肌注注青青霉霉素素G80120万万u,连续23天做天做为预防用防用药。4.预防性治疗731.病人血液的直接病人血液的直接镜检取取早早期期病病人人血血液液一一滴滴,加加蒸蒸馏水水一一滴滴,使使血血细胞胞溶溶解解,在在暗暗视野野显微微镜下下检查有有否否活活动的的钩端螺旋体。端螺旋体。取取早早期期病病人人静静脉脉血血12mL于于无无菌菌试管管中中待待凝凝固固。离离心心沉沉淀淀,吸吸取取血血清清与与血血细胞胞交交界界处略略显白白色色的的悬液液。涂涂片片后后暗暗视野野显微微镜检查有有否活否活动的的钩端螺旋体。端螺旋体。附附录-病原学和血清学病原学和血清学诊断方法断方法1.病人血液的直接镜检附录-病原学和血清学诊断方法742培养分离病原体培养分离病原体病人血液培养病人血液培养采采集集早早期期病病人人血血液液,无无菌菌操操作作接接种种于于23管管Korthof培培养养基基中中,每每管管接接种种13滴滴,置置28培培养养。每每隔隔57d取取培培养养物物暗暗视野野显微微镜下下观察察有有无无钩端端螺螺旋旋体体生生长。若若连续培培养养60d,仍不,仍不见钩体,判体,判为阴性阴性结果。果。2培养分离病原体75病人尿液培养病人尿液培养接接取取病病后后两两周周以以上上病病人人中中段段尿尿3050ml于于无无菌菌离离心心管管中中,35004000rpm离离心心1h。取取沉沉渣渣接接种种于于24管管Korthof培培养养基基中中,28孵育。每隔孵育。每隔57d取材取材镜检。为提提高高检出出率率和和减减少少污染染,在在采采集集尿尿标本本的的前前一一晚晚给病病人人服服碳碳酸酸氢钠(NaHCO3)24g,同同时,在在培培养养基基中中加加入入100400g/ml5-氟氟脲嘧啶或或1/2000的磺胺的磺胺嘧啶。病人尿液培养763.显微微镜凝集凝集试验(MAT)抗原的抗原的选择将将 我我 国国 15群群 15型型 钩 端端 螺螺 旋旋 体体 代代 表表 株株 于于Korthof培培养养基基中中,28培培养养57d,暗暗视野野显微微镜检查,每每400倍倍视野野下下不不少少于于50条条,运运动活活泼并无自凝者可作并无自凝者可作显凝抗原。凝抗原。3.显微镜凝集试验(MAT)77抗原的制抗原的制备病病人人血血清清56水水浴浴灭活活30min,用用生生理理盐水水以以1 50(早早期期病病人人血血清清)或或1 100(恢恢复复期期)和和1 500两两个个稀稀释度度作作定定性性试验:两两个个稀稀释度度血血清清以以及及作作对照照用用的的生生理理盐水水各各取取50l,取取15个个代代表表株株的的培培养养液液依依次次加加入入每每列列的的三三个个孔孔中中。摇匀匀后后37孵孵育育2h。暗暗视野野显微微镜下下观察察凝凝集集情情况况。凝凝集集滴滴度度按按原原血血清清稀稀释倍倍数数2计算。算。终点凝集滴度的判定点凝集滴度的判定以以出出现凝凝集集(即即视野野中中50钩体体凝凝集集)的血清最高稀的血清最高稀释度作度作为终点凝集滴度。点凝集滴度。抗原的制备784.间接接酶联免疫吸附免疫吸附试验(间接接ELISA)将将超超声声波波抗抗原原包包被被于于聚聚苯苯乙乙烯微微量量反反应板板。然然后后,依依次次结合合待待测抗抗体体(第第一一抗抗体体)和和酶标抗抗体体(第第二二抗抗体体)。显色色后后,测读492nm处的的OD值,待待测标本本OD值超超过阴阴性性标本本倍倍者可判者可判为阳性。阳性。4.间接酶联免疫吸附试验(间接ELISA)795.斑点斑点酶联免疫吸附免疫吸附试验(DotELISA)将将超超声声波波抗抗原原包包被被于于45m的的硝硝酸酸纤维膜膜,依依次次结合合待待测抗抗体体(第第一一抗抗体体)和和酶标抗抗体体(第第二二抗抗体体)。过氧氧化化氢-四四氯-萘酚酚反反应,有有蓝色色斑斑点点者者为阳阳性性,无无蓝色色为阴阴性性。以以血血清清最最高高稀稀释度度出出现阳阳性性者者为滴滴度度判判定定终点点。病病人人血血清清滴滴度度大大于于等等于于1 20或或双双份份血血清清滴滴度度呈呈4倍增倍增长者有者有诊断意断意义。5.斑点酶联免疫吸附试验(DotELISA)806.Korthof培养基制培养基制备方法方法Korthof培养基成分培养基成分蛋白蛋白胨(可用胰蛋白(可用胰蛋白胨代替)代替)400mg氯化化钠(NaCl)700mg氯化化钾(KCl)20mg碳酸碳酸氢钠(NaHCO3)10mg磷酸二磷酸二氢钾(KH2PO4)120mg碳酸碳酸氢二二钠(Na2HPO412H2O)440mg氯化化钙(CaCl2)20mg(如如高高压灭菌菌或或煮煮沸沸后出沉淀,可省去此成分)后出沉淀,可省去此成分)蒸蒸馏水水 500ml6.Korthof培养基制备方法81制制备方法方法将将以以上上成成分分溶溶于于蒸蒸馏水水中中煮煮沸沸20min过滤,校校正正pH为,分分装装于于烧瓶瓶内内,每每瓶瓶100mL,15磅磅30min高高压灭菌。菌。兔兔血血清清5630min灭活活后后,以以无无菌菌操操作作加加入入上述溶液中。上述溶液中。灭活兔血清活兔血清终浓度度为810。制备方法82钩端螺旋体病说课文档课件83
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