寄生虫PPT全面版课件

1寄生虫寄生虫6第1页/共86页1寄生虫6第1页/共86页革兰阳性球菌n n是指革兰染色为阳性的一群球菌，与医学是指革兰染色为阳性的一群球菌，与医学有关的兼性厌氧球菌有有关的兼性厌氧球菌有9 9属属n n通常引起化脓性感染，故又称化脓性球菌通常引起化脓性感染，故又称化脓性球菌（pyogenic cocci）n n本章主要介绍本章主要介绍n n葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属。葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属。葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属。葡萄球菌属、链球菌属、肠球菌属。n n专性厌氧球菌在第十六章厌氧菌中介绍。专性厌氧球菌在第十六章厌氧菌中介绍。第2页/共86页革兰阳性球菌是指革兰染色为阳性的一群球菌，与医学第2页/共8 第一节葡萄球菌属n n葡萄球菌属（葡萄球菌属（Staphylococcus）在自然界广在自然界广泛分布。泛分布。n n存在于人和动物的皮肤黏膜上的菌株存在于人和动物的皮肤黏膜上的菌株n n可致多种化脓性感染可致多种化脓性感染n n疖、痈、脓肿、菌血症等疖、痈、脓肿、菌血症等疖、痈、脓肿、菌血症等疖、痈、脓肿、菌血症等n n烫伤样皮肤综合症烫伤样皮肤综合症烫伤样皮肤综合症烫伤样皮肤综合症n n毒性休克综合症毒性休克综合症毒性休克综合症毒性休克综合症第3页/共86页 第一节 葡萄球菌属葡萄球菌属（Staphylococcu一、分类n n葡萄球菌属目前有葡萄球菌属目前有葡萄球菌属目前有葡萄球菌属目前有35353535个种、个种、个种、个种、17171717个亚种个亚种个亚种个亚种n n凝固酶凝固酶凝固酶凝固酶n n凝固酶阳性葡萄球菌凝固酶阳性葡萄球菌凝固酶阳性葡萄球菌凝固酶阳性葡萄球菌n n凝固酶阴性葡萄球菌凝固酶阴性葡萄球菌凝固酶阴性葡萄球菌凝固酶阴性葡萄球菌（Coagulase negative staphylococcus,CoNS Coagulase negative staphylococcus,CoNS）n n噬菌体分型噬菌体分型噬菌体分型噬菌体分型n n可将金黄色葡萄球菌分成可将金黄色葡萄球菌分成可将金黄色葡萄球菌分成可将金黄色葡萄球菌分成4 4 4 45 5 5 5群群群群26262626型型型型n n质粒分型、血清学分型、抗生素分型和细菌质粒分型、血清学分型、抗生素分型和细菌质粒分型、血清学分型、抗生素分型和细菌质粒分型、血清学分型、抗生素分型和细菌DNADNA的的的的RFLPRFLP或或或或PFGEPFGE分型，用来研究细菌的致病性、耐分型，用来研究细菌的致病性、耐分型，用来研究细菌的致病性、耐分型，用来研究细菌的致病性、耐药性、流行病学特点和细菌鉴别的关系药性、流行病学特点和细菌鉴别的关系药性、流行病学特点和细菌鉴别的关系药性、流行病学特点和细菌鉴别的关系第4页/共86页一、分类葡萄球菌属目前有35个种、17个亚种第4页/共86页分类n n引起人类疾病的重要菌种有引起人类疾病的重要菌种有引起人类疾病的重要菌种有引起人类疾病的重要菌种有n n金黄色葡萄球菌（金黄色葡萄球菌（金黄色葡萄球菌（金黄色葡萄球菌（）n n表皮葡萄球菌（表皮葡萄球菌（表皮葡萄球菌（表皮葡萄球菌（）n n头状葡萄球菌（头状葡萄球菌（头状葡萄球菌（头状葡萄球菌（）n n人葡萄球菌（人葡萄球菌（人葡萄球菌（人葡萄球菌（）n n腐生葡萄球菌（腐生葡萄球菌（腐生葡萄球菌（腐生葡萄球菌（）n n其余尚有一些能在人体中分离到其余尚有一些能在人体中分离到其余尚有一些能在人体中分离到其余尚有一些能在人体中分离到n n溶血葡萄球菌、沃氏葡萄球菌、模仿葡萄球菌、里昂溶血葡萄球菌、沃氏葡萄球菌、模仿葡萄球菌、里昂溶血葡萄球菌、沃氏葡萄球菌、模仿葡萄球菌、里昂溶血葡萄球菌、沃氏葡萄球菌、模仿葡萄球菌、里昂葡萄球菌、施氏葡萄球菌、巴氏葡萄球菌、耳葡萄球葡萄球菌、施氏葡萄球菌、巴氏葡萄球菌、耳葡萄球葡萄球菌、施氏葡萄球菌、巴氏葡萄球菌、耳葡萄球葡萄球菌、施氏葡萄球菌、巴氏葡萄球菌、耳葡萄球菌、孔氏葡萄球菌、木糖葡萄球菌、解糖葡萄球菌、菌、孔氏葡萄球菌、木糖葡萄球菌、解糖葡萄球菌、菌、孔氏葡萄球菌、木糖葡萄球菌、解糖葡萄球菌、菌、孔氏葡萄球菌、木糖葡萄球菌、解糖葡萄球菌、山羊葡萄球菌、普氏葡萄球菌、中间葡萄球菌等。山羊葡萄球菌、普氏葡萄球菌、中间葡萄球菌等。山羊葡萄球菌、普氏葡萄球菌、中间葡萄球菌等。山羊葡萄球菌、普氏葡萄球菌、中间葡萄球菌等。第5页/共86页分类引起人类疾病的重要菌种有第5页/共86页无菌体液如脑脊液和关节穿刺液可使用涂二、触酶阴性的革兰阳性球菌兼性厌氧，最适生长温度35，10和45均能生长葡萄球菌属目前有35个种、17个亚种不含细胞色素氧化酶和触酶凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌是人类重要致病菌无乳链球菌是新生儿菌血症和脑膜炎的常见菌B群链球菌对成人侵袭力较弱根据伯杰鉴定细菌手册第9版，链球菌目前分为40个种和亚种与Fmm可确定为米勒链球菌二、临床意义n n凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌是人类重要致病菌凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌是人类重要致病菌凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌是人类重要致病菌凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌是人类重要致病菌n n可引起社区和医院感染可引起社区和医院感染可引起社区和医院感染可引起社区和医院感染n n感染常以急性、化脓性为特征，如果未经有效治疗，感染常以急性、化脓性为特征，如果未经有效治疗，感染常以急性、化脓性为特征，如果未经有效治疗，感染常以急性、化脓性为特征，如果未经有效治疗，感染可扩散至周围组织或经菌血症转移至其他器官感染可扩散至周围组织或经菌血症转移至其他器官感染可扩散至周围组织或经菌血症转移至其他器官感染可扩散至周围组织或经菌血症转移至其他器官n n常见的感染常见的感染常见的感染常见的感染n n疖、痈、外科切口、创伤等局部化脓性感染和骨髓炎、化脓疖、痈、外科切口、创伤等局部化脓性感染和骨髓炎、化脓疖、痈、外科切口、创伤等局部化脓性感染和骨髓炎、化脓疖、痈、外科切口、创伤等局部化脓性感染和骨髓炎、化脓性关节炎、肺炎、心内膜炎、脑膜炎、菌血症等全身性感染性关节炎、肺炎、心内膜炎、脑膜炎、菌血症等全身性感染性关节炎、肺炎、心内膜炎、脑膜炎、菌血症等全身性感染性关节炎、肺炎、心内膜炎、脑膜炎、菌血症等全身性感染第6页/共86页无菌体液如脑脊液和关节穿刺液可使用涂二、临床意义凝固酶阳性的临床意义n n致病性主要与各种侵袭性酶类和多种毒素有关致病性主要与各种侵袭性酶类和多种毒素有关致病性主要与各种侵袭性酶类和多种毒素有关致病性主要与各种侵袭性酶类和多种毒素有关n n肠毒素引起食物中毒，表现为急性胃肠炎肠毒素引起食物中毒，表现为急性胃肠炎肠毒素引起食物中毒，表现为急性胃肠炎肠毒素引起食物中毒，表现为急性胃肠炎n n噬菌体噬菌体噬菌体噬菌体II II群产生的剥脱毒素（或称表皮溶解素）可引起群产生的剥脱毒素（或称表皮溶解素）可引起群产生的剥脱毒素（或称表皮溶解素）可引起群产生的剥脱毒素（或称表皮溶解素）可引起人类烫伤样皮肤综合征人类烫伤样皮肤综合征人类烫伤样皮肤综合征人类烫伤样皮肤综合征n n多见于新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人多见于新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人多见于新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人多见于新生儿、幼儿和免疫功能低下的成人n n皮肤呈弥漫性红斑和水疱形成，继以表皮上层大量脱落皮肤呈弥漫性红斑和水疱形成，继以表皮上层大量脱落皮肤呈弥漫性红斑和水疱形成，继以表皮上层大量脱落皮肤呈弥漫性红斑和水疱形成，继以表皮上层大量脱落n n由噬菌体由噬菌体由噬菌体由噬菌体群产生的毒性休克综合征毒素群产生的毒性休克综合征毒素群产生的毒性休克综合征毒素群产生的毒性休克综合征毒素-I I（Toxic Toxic shock syndrome toxin I,TSST-1shock syndrome toxin I,TSST-1）n n属超抗原家族，刺激属超抗原家族，刺激属超抗原家族，刺激属超抗原家族，刺激T T细胞诱发细胞诱发细胞诱发细胞诱发TNFTNF和和和和IL-1IL-1n n可致机体多个器官的功能紊乱或引起毒性休克综合征可致机体多个器官的功能紊乱或引起毒性休克综合征可致机体多个器官的功能紊乱或引起毒性休克综合征可致机体多个器官的功能紊乱或引起毒性休克综合征(TSS)(TSS)第7页/共86页临床意义致病性主要与各种侵袭性酶类和多种毒素有关第7页/共8临床意义n nCoNSCoNS是人体皮肤黏膜正常菌群之一是人体皮肤黏膜正常菌群之一是人体皮肤黏膜正常菌群之一是人体皮肤黏膜正常菌群之一n n是医院感染的主要病原菌是医院感染的主要病原菌是医院感染的主要病原菌是医院感染的主要病原菌n n表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌n n人工瓣膜性心内膜炎、静脉导管感染、腹膜透析性腹膜炎、人工瓣膜性心内膜炎、静脉导管感染、腹膜透析性腹膜炎、人工瓣膜性心内膜炎、静脉导管感染、腹膜透析性腹膜炎、人工瓣膜性心内膜炎、静脉导管感染、腹膜透析性腹膜炎、血管移植物感染和人工关节感染等血管移植物感染和人工关节感染等血管移植物感染和人工关节感染等血管移植物感染和人工关节感染等n n腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌n n女性尿路感染的重要病原菌女性尿路感染的重要病原菌女性尿路感染的重要病原菌女性尿路感染的重要病原菌n n其他凝固酶阴性葡萄球菌其他凝固酶阴性葡萄球菌其他凝固酶阴性葡萄球菌其他凝固酶阴性葡萄球菌n n重要的条件致病菌和免疫受损患者的感染菌重要的条件致病菌和免疫受损患者的感染菌重要的条件致病菌和免疫受损患者的感染菌重要的条件致病菌和免疫受损患者的感染菌n n产生荚膜多糖或糖萼有关产生荚膜多糖或糖萼有关产生荚膜多糖或糖萼有关产生荚膜多糖或糖萼有关n n增强细菌与外来物质（生物性瓣膜、导管等）表面的增强细菌与外来物质（生物性瓣膜、导管等）表面的增强细菌与外来物质（生物性瓣膜、导管等）表面的增强细菌与外来物质（生物性瓣膜、导管等）表面的粘附或在其表面形成一层生物膜而保护细菌对抗杀菌粘附或在其表面形成一层生物膜而保护细菌对抗杀菌粘附或在其表面形成一层生物膜而保护细菌对抗杀菌粘附或在其表面形成一层生物膜而保护细菌对抗杀菌物质作用。物质作用。物质作用。物质作用。第8页/共86页临床意义CoNS是人体皮肤黏膜正常菌群之一第8页/共86页 三、生物学特性n nmm、革兰阳性球菌革兰阳性球菌革兰阳性球菌革兰阳性球菌n n呈单个、成双、短链（液体培养基或脓汁中）或成簇排呈单个、成双、短链（液体培养基或脓汁中）或成簇排呈单个、成双、短链（液体培养基或脓汁中）或成簇排呈单个、成双、短链（液体培养基或脓汁中）或成簇排列呈葡萄串样，无鞭毛和芽胞，某些菌株能形成荚膜列呈葡萄串样，无鞭毛和芽胞，某些菌株能形成荚膜列呈葡萄串样，无鞭毛和芽胞，某些菌株能形成荚膜列呈葡萄串样，无鞭毛和芽胞，某些菌株能形成荚膜n n在金黄色葡萄球菌的细胞壁有葡萄球菌在金黄色葡萄球菌的细胞壁有葡萄球菌在金黄色葡萄球菌的细胞壁有葡萄球菌在金黄色葡萄球菌的细胞壁有葡萄球菌A A蛋白，具有抗蛋白，具有抗蛋白，具有抗蛋白，具有抗原性原性原性原性n n大多为兼性厌氧菌大多为兼性厌氧菌大多为兼性厌氧菌大多为兼性厌氧菌,对营养要求不高，最适生长条对营养要求不高，最适生长条对营养要求不高，最适生长条对营养要求不高，最适生长条件件件件35373537，pH7.47.6pH7.47.6。普通培养基上形成直径普通培养基上形成直径普通培养基上形成直径普通培养基上形成直径23232323mmmm不透明的圆形凸起菌落不透明的圆形凸起菌落不透明的圆形凸起菌落不透明的圆形凸起菌落n n产生金黄色、白色、柠檬色等非水溶性色素附着在产生金黄色、白色、柠檬色等非水溶性色素附着在产生金黄色、白色、柠檬色等非水溶性色素附着在产生金黄色、白色、柠檬色等非水溶性色素附着在菌落上。菌落上。菌落上。菌落上。第9页/共86页 三、生物学特性m、革兰阳性球菌第9页/共86页生物学特性生物学特性n n金黄色葡萄球菌血琼脂平板上菌落周围有透金黄色葡萄球菌血琼脂平板上菌落周围有透金黄色葡萄球菌血琼脂平板上菌落周围有透金黄色葡萄球菌血琼脂平板上菌落周围有透明溶血环。能在含明溶血环。能在含明溶血环。能在含明溶血环。能在含10%15%10%15%10%15%10%15%NaClNaCl琼脂中生长琼脂中生长琼脂中生长琼脂中生长n n该菌的抵抗力比其他无芽胞细菌强，耐干燥该菌的抵抗力比其他无芽胞细菌强，耐干燥该菌的抵抗力比其他无芽胞细菌强，耐干燥该菌的抵抗力比其他无芽胞细菌强，耐干燥n n近年来耐药性增强，对多种抗菌药物不敏感近年来耐药性增强，对多种抗菌药物不敏感近年来耐药性增强，对多种抗菌药物不敏感近年来耐药性增强，对多种抗菌药物不敏感n n生化反应活泼、能分解多种糖类和蛋白质，生化反应活泼、能分解多种糖类和蛋白质，生化反应活泼、能分解多种糖类和蛋白质，生化反应活泼、能分解多种糖类和蛋白质，触酶阳性触酶阳性触酶阳性触酶阳性n n该属细菌该属细菌该属细菌该属细菌DNA G+C mol%DNA G+C mol%为为为为3039303930393039第10页/共86页生物学特性金黄色葡萄球菌血琼脂平板上菌落周围有透第10页/共酶和毒素n n葡萄球菌属产生多种酶和毒素葡萄球菌属产生多种酶和毒素n n产生产生2 2种血浆凝固酶种血浆凝固酶n n结合凝固酶或聚集因子结合凝固酶或聚集因子结合凝固酶或聚集因子结合凝固酶或聚集因子n n是结合在菌体表面的凝固酶，能与血浆中的纤维蛋是结合在菌体表面的凝固酶，能与血浆中的纤维蛋是结合在菌体表面的凝固酶，能与血浆中的纤维蛋是结合在菌体表面的凝固酶，能与血浆中的纤维蛋白原交联使菌体快速凝集白原交联使菌体快速凝集白原交联使菌体快速凝集白原交联使菌体快速凝集n n游离凝固酶游离凝固酶游离凝固酶游离凝固酶n n是细菌分泌到菌体外的凝固酶，能被血浆中的协同是细菌分泌到菌体外的凝固酶，能被血浆中的协同是细菌分泌到菌体外的凝固酶，能被血浆中的协同是细菌分泌到菌体外的凝固酶，能被血浆中的协同因子（因子（因子（因子（cofactorcofactor）激活形成复合物，再使纤维蛋白激活形成复合物，再使纤维蛋白激活形成复合物，再使纤维蛋白激活形成复合物，再使纤维蛋白原转变成纤维蛋白，而使血浆凝固原转变成纤维蛋白，而使血浆凝固原转变成纤维蛋白，而使血浆凝固原转变成纤维蛋白，而使血浆凝固第11页/共86页酶和毒素葡萄球菌属产生多种酶和毒素第11页/共86页酶和毒素n n耐热核酸酶耐热核酸酶耐热核酸酶耐热核酸酶n n葡萄球菌溶素葡萄球菌溶素葡萄球菌溶素葡萄球菌溶素n n有有有有、等等等等n n破坏红细胞、白细胞、血小板以及肝细胞等破坏红细胞、白细胞、血小板以及肝细胞等破坏红细胞、白细胞、血小板以及肝细胞等破坏红细胞、白细胞、血小板以及肝细胞等n n肠毒素肠毒素肠毒素肠毒素n n是一组对热稳定的可溶性蛋白质，耐热是一组对热稳定的可溶性蛋白质，耐热是一组对热稳定的可溶性蛋白质，耐热是一组对热稳定的可溶性蛋白质，耐热10030100301003010030min,min,分子量为分子量为分子量为分子量为2626262630303030kDakDa，能够抵抗胃肠液中蛋白酶的水解能够抵抗胃肠液中蛋白酶的水解能够抵抗胃肠液中蛋白酶的水解能够抵抗胃肠液中蛋白酶的水解作用作用作用作用n n根据抗原性和等电点的不同可分为根据抗原性和等电点的不同可分为根据抗原性和等电点的不同可分为根据抗原性和等电点的不同可分为A A、B B、C1C1、C2C2、C3 C3、D D、E E、GG和和和和H H等等等等9 9 9 9个血清型，以个血清型，以个血清型，以个血清型，以A A、D D 型多见型多见型多见型多见n n编码肠毒素基因大多位于染色体上（编码肠毒素基因大多位于染色体上（编码肠毒素基因大多位于染色体上（编码肠毒素基因大多位于染色体上（D D型由质粒编码）型由质粒编码）型由质粒编码）型由质粒编码）第12页/共86页酶和毒素耐热核酸酶第12页/共86页酶和毒素n n毒性休克综合征毒素毒性休克综合征毒素n n透明质酸酶、磷脂酶、触酶、杀白细胞透明质酸酶、磷脂酶、触酶、杀白细胞素和表皮剥脱毒素等素和表皮剥脱毒素等n n携带诱导性的青霉素酶和乙酰基转移酶质粒，携带诱导性的青霉素酶和乙酰基转移酶质粒，通过转导进行质粒的转移通过转导进行质粒的转移n n部分菌株通过获得外源性的部分菌株通过获得外源性的macA基因而基因而产生青霉素结合蛋白产生青霉素结合蛋白2 2a（PBP2a），），导导致对所有致对所有内酰胺类抗生素耐药内酰胺类抗生素耐药 第13页/共86页酶和毒素毒性休克综合征毒素第13页/共86页 四、微生物检验四、微生物检验四、微生物检验四、微生物检验（一）检验程序（一）检验程序（一）检验程序（一）检验程序 第14页/共86页 四、微生物检验 （一）检验程序 第14页/共86页（二）标本采集n n根据感染的部位，采集不同的标本。根据感染的部位，采集不同的标本。n n该属细菌广泛分布在人体皮肤和黏膜，采该属细菌广泛分布在人体皮肤和黏膜，采取时避免病灶周围正常菌群污染取时避免病灶周围正常菌群污染。第15页/共86页（二）标本采集根据感染的部位，采集不同的标本。第15页/共8（三）标本直接检查n n无菌体液如脑脊液和关节穿刺液可使用涂无菌体液如脑脊液和关节穿刺液可使用涂片、革兰染色后直接显微镜检查，查见细片、革兰染色后直接显微镜检查，查见细菌菌具有重要临床价值。具有重要临床价值。n n其他体液标本如同时伴有炎性细胞时则直接其他体液标本如同时伴有炎性细胞时则直接显微镜检查结果也具有参考价值。显微镜检查结果也具有参考价值。n n涂片检查发现有形态相似的革兰阳性球菌，涂片检查发现有形态相似的革兰阳性球菌，则可初步报告则可初步报告“查见类似葡萄球菌属革兰查见类似葡萄球菌属革兰阳性阳性球菌球菌”，并进一步进行分离和鉴定予以证，并进一步进行分离和鉴定予以证实。实。第16页/共86页（三）标本直接检查无菌体液如脑脊液和关节穿刺液可使用涂第1（四）分离培养与鉴定n n脓液、分泌物等脓液、分泌物等n n接种于血琼脂平板接种于血琼脂平板接种于血琼脂平板接种于血琼脂平板n n有污染的标本如粪便等有污染的标本如粪便等n n应接种在选择平板上，如甘露醇高盐平板、哥应接种在选择平板上，如甘露醇高盐平板、哥应接种在选择平板上，如甘露醇高盐平板、哥应接种在选择平板上，如甘露醇高盐平板、哥伦比亚多粘菌素奈啶酸平板伦比亚多粘菌素奈啶酸平板伦比亚多粘菌素奈啶酸平板伦比亚多粘菌素奈啶酸平板n n血液标本则用肉汤增菌培养基血液标本则用肉汤增菌培养基第17页/共86页（四）分离培养与鉴定脓液、分泌物等第17页/共86页葡萄球菌属内各菌种鉴定方法第18页/共86页葡萄球菌属内各菌种鉴定方法 第18页/共86页1.菌落性状n n金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌n n直径直径直径直径6 6 6 6 8mn8mn8mn8mn，金黄色或橙色，菌落周围出现或不出现透明溶血环金黄色或橙色，菌落周围出现或不出现透明溶血环金黄色或橙色，菌落周围出现或不出现透明溶血环金黄色或橙色，菌落周围出现或不出现透明溶血环n n表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌n n直径为直径为直径为直径为5 5 5 5 6 6 6 6mmmmmmmm，某些产粘液菌株能粘附在琼脂平板表面，无色或白色某些产粘液菌株能粘附在琼脂平板表面，无色或白色某些产粘液菌株能粘附在琼脂平板表面，无色或白色某些产粘液菌株能粘附在琼脂平板表面，无色或白色n n溶血葡萄球菌溶血葡萄球菌溶血葡萄球菌溶血葡萄球菌n n直径直径直径直径5 5 5 5 9 9 9 9mmmmmmmm，不透明，无色素或奶油色、黄色，不透明，无色素或奶油色、黄色，不透明，无色素或奶油色、黄色，不透明，无色素或奶油色、黄色n n里昂葡萄球菌里昂葡萄球菌里昂葡萄球菌里昂葡萄球菌n n直径直径直径直径4 4 4 4 7 7 7 7mmmmmmmm，边缘整齐稍扁，奶色、黄色和沃氏葡萄球菌相似边缘整齐稍扁，奶色、黄色和沃氏葡萄球菌相似边缘整齐稍扁，奶色、黄色和沃氏葡萄球菌相似边缘整齐稍扁，奶色、黄色和沃氏葡萄球菌相似n n腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌n n直径直径直径直径5 5 5 5 8 8 8 8mmmmmmmm，白色或柠檬色白色或柠檬色白色或柠檬色白色或柠檬色n n菌落外观疑为葡萄球菌者应进行革兰染色证实菌落外观疑为葡萄球菌者应进行革兰染色证实菌落外观疑为葡萄球菌者应进行革兰染色证实菌落外观疑为葡萄球菌者应进行革兰染色证实n n甘露醇高盐平板上金黄色葡萄球菌菌落为黄色甘露醇高盐平板上金黄色葡萄球菌菌落为黄色甘露醇高盐平板上金黄色葡萄球菌菌落为黄色甘露醇高盐平板上金黄色葡萄球菌菌落为黄色第19页/共86页1.菌落性状 金黄色葡萄球菌第19页/共86页2凝固酶试验 n n有玻片法和试管法两种有玻片法和试管法两种n n玻片凝固酶试验玻片凝固酶试验-测定结合型凝固酶测定结合型凝固酶n n试验时挑取少数菌落培养物（不能用生试验时挑取少数菌落培养物（不能用生长高盐琼脂上的菌落）加入长高盐琼脂上的菌落）加入1 1滴血浆，滴血浆，1010秒内观察细菌聚集和凝块形成秒内观察细菌聚集和凝块形成n n金黄色葡萄球菌、中间型葡萄球菌呈现金黄色葡萄球菌、中间型葡萄球菌呈现阳性反应阳性反应第20页/共86页2凝固酶试验 有玻片法和试管法两种第20页/共86页2凝固酶试验n n试管凝固酶试验试管凝固酶试验试管凝固酶试验试管凝固酶试验-测定分泌型凝固酶测定分泌型凝固酶测定分泌型凝固酶测定分泌型凝固酶n n以孵育过夜的牛心脑浸液肉汤培养物和血浆在以孵育过夜的牛心脑浸液肉汤培养物和血浆在以孵育过夜的牛心脑浸液肉汤培养物和血浆在以孵育过夜的牛心脑浸液肉汤培养物和血浆在37373737水浴中孵育水浴中孵育水浴中孵育水浴中孵育4 4 4 4h h，观察凝块形成。如试验结果为阴性观察凝块形成。如试验结果为阴性观察凝块形成。如试验结果为阴性观察凝块形成。如试验结果为阴性者再置室温者再置室温者再置室温者再置室温1824182418241824h h，因某些菌种（中间葡萄球菌、因某些菌种（中间葡萄球菌、因某些菌种（中间葡萄球菌、因某些菌种（中间葡萄球菌、猪葡萄球菌）的凝集出现所需时间长于猪葡萄球菌）的凝集出现所需时间长于猪葡萄球菌）的凝集出现所需时间长于猪葡萄球菌）的凝集出现所需时间长于4 4 4 4h hn n必须注意必须注意必须注意必须注意n n某些菌株产生的葡激酶在延长孵育时间后可使凝块溶解某些菌株产生的葡激酶在延长孵育时间后可使凝块溶解某些菌株产生的葡激酶在延长孵育时间后可使凝块溶解某些菌株产生的葡激酶在延长孵育时间后可使凝块溶解使之产生假阴性使之产生假阴性使之产生假阴性使之产生假阴性n n若使用的不是无菌血浆可产生假阳性或假阴性结果；若使用的不是无菌血浆可产生假阳性或假阴性结果；若使用的不是无菌血浆可产生假阳性或假阴性结果；若使用的不是无菌血浆可产生假阳性或假阴性结果；n n细菌不是纯培养物或污染可导致假阳性细菌不是纯培养物或污染可导致假阳性细菌不是纯培养物或污染可导致假阳性细菌不是纯培养物或污染可导致假阳性第21页/共86页2凝固酶试验试管凝固酶试验-测定分泌型凝固酶第21页/共83耐热核酸酶试验 n n大多数金黄色葡萄球菌、施氏葡萄球菌、大多数金黄色葡萄球菌、施氏葡萄球菌、中间葡萄球菌、猪葡萄球菌能产生耐热核中间葡萄球菌、猪葡萄球菌能产生耐热核酸酶。酸酶。n n表皮葡萄球菌、模仿葡萄球菌、肉葡萄球表皮葡萄球菌、模仿葡萄球菌、肉葡萄球菌含微弱耐热核酸酶。菌含微弱耐热核酸酶。第22页/共86页3耐热核酸酶试验 大多数金黄色葡萄球菌、施氏葡萄球菌、中间4磷酸酶试验 n n大多数的表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌、大多数的表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌、施氏葡萄球菌、中间葡萄球菌和猪葡萄球施氏葡萄球菌、中间葡萄球菌和猪葡萄球菌为阳性。菌为阳性。n n将待测菌种点种在加有硝基酚磷酸盐的将待测菌种点种在加有硝基酚磷酸盐的pH5.66.8 MH琼脂上，孵育琼脂上，孵育18241824h，菌落菌落周围出现黄色为阳性。周围出现黄色为阳性。第23页/共86页4磷酸酶试验 大多数的表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌、施氏5吡咯烷酮芳基酰胺酶试验 n n溶血葡萄球菌、里昂葡萄球菌、施氏葡萄溶血葡萄球菌、里昂葡萄球菌、施氏葡萄球菌和中间葡萄球菌为阳性。球菌和中间葡萄球菌为阳性。n n将孵育将孵育2424h斜面培养物接种在含吡咯烷酮斜面培养物接种在含吡咯烷酮-萘基酰胺（萘基酰胺（PYR）肉汤中，使细菌浓度肉汤中，使细菌浓度调整为调整为2 2号麦氏管浊度，号麦氏管浊度，3535孵育孵育2 2h，加入加入PYR试剂后试剂后2 2分钟内呈现深紫红色为阳性。分钟内呈现深紫红色为阳性。第24页/共86页5吡咯烷酮芳基酰胺酶试验 溶血葡萄球菌、里昂葡萄球菌、施6其他鉴定试验 n n常用的葡萄球菌属种间细菌的鉴定生化试常用的葡萄球菌属种间细菌的鉴定生化试验验n n鸟氨酸脱羧酶试验、脲酶试验、鸟氨酸脱羧酶试验、脲酶试验、鸟氨酸脱羧酶试验、脲酶试验、鸟氨酸脱羧酶试验、脲酶试验、-半乳糖苷酶、半乳糖苷酶、半乳糖苷酶、半乳糖苷酶、3-3-3-3-羟基丁酮酸试验、新生霉素敏感试验、多粘羟基丁酮酸试验、新生霉素敏感试验、多粘羟基丁酮酸试验、新生霉素敏感试验、多粘羟基丁酮酸试验、新生霉素敏感试验、多粘菌素菌素菌素菌素B B耐药试验、糖产酸试验耐药试验、糖产酸试验耐药试验、糖产酸试验耐药试验、糖产酸试验第25页/共86页6其他鉴定试验 常用的葡萄球菌属种间细菌的鉴定生化试验第2（五）肠毒素检测n n动物学试验动物学试验动物学试验动物学试验n n经典的方法是采用幼猫腹腔注射经典的方法是采用幼猫腹腔注射经典的方法是采用幼猫腹腔注射经典的方法是采用幼猫腹腔注射(肉汤培养物或呕吐物肉汤培养物或呕吐物肉汤培养物或呕吐物肉汤培养物或呕吐物)，4 4 4 4h h 内发生呕吐腹泻和体温升高或死亡等现象者，提内发生呕吐腹泻和体温升高或死亡等现象者，提内发生呕吐腹泻和体温升高或死亡等现象者，提内发生呕吐腹泻和体温升高或死亡等现象者，提示金黄色葡萄球菌肠毒素存在示金黄色葡萄球菌肠毒素存在示金黄色葡萄球菌肠毒素存在示金黄色葡萄球菌肠毒素存在n n 琼脂扩散试验或琼脂扩散试验或琼脂扩散试验或琼脂扩散试验或ELISAELISA法测定法测定法测定法测定n n用琼脂扩散试验测定待测标本中的金黄色葡萄球菌肠用琼脂扩散试验测定待测标本中的金黄色葡萄球菌肠用琼脂扩散试验测定待测标本中的金黄色葡萄球菌肠用琼脂扩散试验测定待测标本中的金黄色葡萄球菌肠毒素与相应抗毒素在琼脂糖中进行双相扩散，观察有毒素与相应抗毒素在琼脂糖中进行双相扩散，观察有毒素与相应抗毒素在琼脂糖中进行双相扩散，观察有毒素与相应抗毒素在琼脂糖中进行双相扩散，观察有无沉淀线产生无沉淀线产生无沉淀线产生无沉淀线产生n n将抗毒素包被在固相载体中以双抗体夹心将抗毒素包被在固相载体中以双抗体夹心将抗毒素包被在固相载体中以双抗体夹心将抗毒素包被在固相载体中以双抗体夹心ELISAELISA法检测法检测法检测法检测样本中的肠毒素样本中的肠毒素样本中的肠毒素样本中的肠毒素第26页/共86页（五）肠毒素检测动物学试验第26页/共86页第二节链球菌属n n链球菌属（链球菌属（Streptococcus）n n细菌种类多，分布广细菌种类多，分布广n n其中某些菌种为毒力强的致病菌其中某些菌种为毒力强的致病菌其中某些菌种为毒力强的致病菌其中某些菌种为毒力强的致病菌n n另一些则是作为正常菌群栖居于宿主的呼吸道、另一些则是作为正常菌群栖居于宿主的呼吸道、另一些则是作为正常菌群栖居于宿主的呼吸道、另一些则是作为正常菌群栖居于宿主的呼吸道、消化道、泌尿生殖道消化道、泌尿生殖道消化道、泌尿生殖道消化道、泌尿生殖道n n还有一些是皮肤上的过路菌和黏膜上的定居菌还有一些是皮肤上的过路菌和黏膜上的定居菌还有一些是皮肤上的过路菌和黏膜上的定居菌还有一些是皮肤上的过路菌和黏膜上的定居菌第27页/共86页第二节 链球菌属链球菌属（Streptococcus）第2一、分类n n链球菌属的分类较为复杂链球菌属的分类较为复杂n n传统分类传统分类n n以血平板上溶血现象以血平板上溶血现象以血平板上溶血现象以血平板上溶血现象n nLancefieldLancefield抗原血清分型抗原血清分型抗原血清分型抗原血清分型n n种系分类法种系分类法n n链球菌属的分类较以前的分类有较大的变化链球菌属的分类较以前的分类有较大的变化链球菌属的分类较以前的分类有较大的变化链球菌属的分类较以前的分类有较大的变化第28页/共86页一、分类链球菌属的分类较为复杂第28页/共86页传统分类n n根据链球菌属各种细菌在血平板上的溶血现象根据链球菌属各种细菌在血平板上的溶血现象根据链球菌属各种细菌在血平板上的溶血现象根据链球菌属各种细菌在血平板上的溶血现象n n甲型（甲型（甲型（甲型（）溶血性链球菌溶血性链球菌溶血性链球菌溶血性链球菌n n乙型（乙型（乙型（乙型（）溶血性链球菌溶血性链球菌溶血性链球菌溶血性链球菌n n不出现溶血的丙型（不出现溶血的丙型（不出现溶血的丙型（不出现溶血的丙型（）链球菌链球菌链球菌链球菌n n根据根据根据根据LancefieldLancefield抗原血清分型抗原血清分型抗原血清分型抗原血清分型n n分为分为分为分为A A、B B、C C、D D、等等等等20202020群群群群n n血清群与溶血特性没有相关性。对人类致病的主血清群与溶血特性没有相关性。对人类致病的主血清群与溶血特性没有相关性。对人类致病的主血清群与溶血特性没有相关性。对人类致病的主要是要是要是要是A A群群群群第29页/共86页传统分类根据链球菌属各种细菌在血平板上的溶血现象第29页/共种系分类法n n根据种系分类法的研究结果根据种系分类法的研究结果根据种系分类法的研究结果根据种系分类法的研究结果n n原来归属为原来归属为原来归属为原来归属为D D群链球菌的肠球菌和群链球菌的肠球菌和群链球菌的肠球菌和群链球菌的肠球菌和N N群链球菌已分别独群链球菌已分别独群链球菌已分别独群链球菌已分别独立为肠球菌属（立为肠球菌属（立为肠球菌属（立为肠球菌属（EnterococcusEnterococcus）和乳球菌属和乳球菌属和乳球菌属和乳球菌属（lactococcuslactococcus）n n遗传学和血清学分型不能统一遗传学和血清学分型不能统一遗传学和血清学分型不能统一遗传学和血清学分型不能统一n n在遗传学上相关的同种细菌其抗原可出现异质性在遗传学上相关的同种细菌其抗原可出现异质性在遗传学上相关的同种细菌其抗原可出现异质性在遗传学上相关的同种细菌其抗原可出现异质性n n毫无相关的菌种可出现同一抗原。毫无相关的菌种可出现同一抗原。毫无相关的菌种可出现同一抗原。毫无相关的菌种可出现同一抗原。n n根据伯杰鉴定细菌手册第根据伯杰鉴定细菌手册第根据伯杰鉴定细菌手册第根据伯杰鉴定细菌手册第9 9 9 9版，链球菌目前分为版，链球菌目前分为版，链球菌目前分为版，链球菌目前分为40404040个种和亚种个种和亚种个种和亚种个种和亚种第30页/共86页种系分类法根据种系分类法的研究结果第30页/共86页传统的分类方法n n 溶血性链球菌溶血性链球菌溶血性链球菌溶血性链球菌n nA A、C C、GG群抗原群抗原群抗原群抗原n nmm mm n nA A群的化脓性链球菌（群的化脓性链球菌（群的化脓性链球菌（群的化脓性链球菌（S.pyogenesS.pyogenes）、）、）、）、C C群、群、群、群、GG群的马链球菌（群的马链球菌（群的马链球菌（群的马链球菌（）和似马链球菌（和似马链球菌（和似马链球菌（和似马链球菌（）n nmmmm具具具具A A、C C、GG群抗原，统称米勒链球菌（群抗原，统称米勒链球菌（群抗原，统称米勒链球菌（群抗原，统称米勒链球菌（）n n咽喉炎链球菌、中间型链球菌和星座链球菌咽喉炎链球菌、中间型链球菌和星座链球菌咽喉炎链球菌、中间型链球菌和星座链球菌咽喉炎链球菌、中间型链球菌和星座链球菌n n还有还有还有还有 溶血和不溶血的细菌溶血和不溶血的细菌溶血和不溶血的细菌溶血和不溶血的细菌n nB B群抗原群抗原群抗原群抗原n n无乳链球菌（无乳链球菌（无乳链球菌（无乳链球菌（）第31页/共86页传统的分类方法溶血性链球菌第31页/共86页传统的分类方法n n溶血性链球菌溶血性链球菌n n包括肺炎链球菌（包括肺炎链球菌（包括肺炎链球菌（包括肺炎链球菌（）n n草绿色链球菌群（草绿色链球菌群（草绿色链球菌群（草绿色链球菌群（Viridans streptococciViridans streptococci）n n不溶血不溶血D群链球菌群链球菌n n牛链球菌（牛链球菌（牛链球菌（牛链球菌（S S.bovis.bovis）第32页/共86页传统的分类方法溶血性链球菌第32页/共86页二、临床意义n n化脓性链球菌是致病力最强的一种链球菌化脓性链球菌是致病力最强的一种链球菌化脓性链球菌是致病力最强的一种链球菌化脓性链球菌是致病力最强的一种链球菌n n能产生多种毒素能产生多种毒素能产生多种毒素能产生多种毒素n n链球菌溶素链球菌溶素链球菌溶素链球菌溶素OO和和和和S Sn n红疹毒素红疹毒素红疹毒素红疹毒素n nMM蛋白、脂磷壁酸蛋白、脂磷壁酸蛋白、脂磷壁酸蛋白、脂磷壁酸n n酶（链激酶、链道酶、透明质酸酶等）酶（链激酶、链道酶、透明质酸酶等）酶（链激酶、链道酶、透明质酸酶等）酶（链激酶、链道酶、透明质酸酶等）n n可引起急性咽炎、呼吸道感染、丹毒、脓疱病、可引起急性咽炎、呼吸道感染、丹毒、脓疱病、可引起急性咽炎、呼吸道感染、丹毒、脓疱病、可引起急性咽炎、呼吸道感染、丹毒、脓疱病、软组织感染、心内膜炎和脑膜炎等软组织感染、心内膜炎和脑膜炎等软组织感染、心内膜炎和脑膜炎等软组织感染、心内膜炎和脑膜炎等n n产毒株还可引起猩红热产毒株还可引起猩红热产毒株还可引起猩红热产毒株还可引起猩红热n n可致感染后的变态反应性疾病如急性肾小球肾炎、可致感染后的变态反应性疾病如急性肾小球肾炎、可致感染后的变态反应性疾病如急性肾小球肾炎、可致感染后的变态反应性疾病如急性肾小球肾炎、风湿热等风湿热等风湿热等风湿热等n n近年来报道引起毒素休克综合征近年来报道引起毒素休克综合征近年来报道引起毒素休克综合征近年来报道引起毒素休克综合征第33页/共86页二、临床意义化脓性链球菌是致病力最强的一种链球菌第33页/共临床意义n n无乳链球菌是新生儿菌血症和脑膜炎的常见菌无乳链球菌是新生儿菌血症和脑膜炎的常见菌无乳链球菌是新生儿菌血症和脑膜炎的常见菌无乳链球菌是新生儿菌血症和脑膜炎的常见菌n n该菌定居于妇女生殖道该菌定居于妇女生殖道该菌定居于妇女生殖道该菌定居于妇女生殖道n n能导致新生儿感染能导致新生儿感染能导致新生儿感染能导致新生儿感染n n早发型新生儿感染多发病于出生后早发型新生儿感染多发病于出生后早发型新生儿感染多发病于出生后早发型新生儿感染多发病于出生后24242424h h，以肺炎为主以肺炎为主以肺炎为主以肺炎为主n n晚发型为产后晚发型为产后晚发型为产后晚发型为产后7 7 7 7天至天至天至天至3 3 3 3月内，以脑膜炎和菌血症为主月内，以脑膜炎和菌血症为主月内，以脑膜炎和菌血症为主月内，以脑膜炎和菌血症为主n nB B群链球菌对成人侵袭力较弱群链球菌对成人侵袭力较弱群链球菌对成人侵袭力较弱群链球菌对成人侵袭力较弱n n主要有肾盂肾炎、子宫内膜炎主要有肾盂肾炎、子宫内膜炎主要有肾盂肾炎、子宫内膜炎主要有肾盂肾炎、子宫内膜炎n n糖尿病、泌尿生殖道功能失调、肿瘤和免疫机能低下糖尿病、泌尿生殖道功能失调、肿瘤和免疫机能低下糖尿病、泌尿生殖道功能失调、肿瘤和免疫机能低下糖尿病、泌尿生殖道功能失调、肿瘤和免疫机能低下者易受者易受者易受者易受B B群链球菌感染群链球菌感染群链球菌感染群链球菌感染第34页/共86页临床意义无乳链球菌是新生儿菌血症和脑膜炎的常见菌第34页/共临床意义n nC、G群群溶血性链球菌溶血性链球菌n n与化脓性链球菌有相似的毒力因子，引起上述与化脓性链球菌有相似的毒力因子，引起上述与化脓性链球菌有相似的毒力因子，引起上述与化脓性链球菌有相似的毒力因子，引起上述相似的感染相似的感染相似的感染相似的感染n n米勒链球菌是人体口腔、上呼吸道、消化米勒链球菌是人体口腔、上呼吸道、消化道、泌尿生殖道正常菌群道、泌尿生殖道正常菌群n n尽管在化脓性感染病灶中能分离到该菌，但大尽管在化脓性感染病灶中能分离到该菌，但大尽管在化脓性感染病灶中能分离到该菌，但大尽管在化脓性感染病灶中能分离到该菌，但大都是手术和创伤引起的内源性感染都是手术和创伤引起的内源性感染都是手术和创伤引起的内源性感染都是手术和创伤引起的内源性感染第35页/共86页临床意义C、G群溶血性链球菌第35页/共86页临床意义n n肺炎链球菌肺炎链球菌n n大叶性肺炎、支气管炎大叶性肺炎、支气管炎大叶性肺炎、支气管炎大叶性肺炎、支气管炎n n中耳炎、乳突炎、鼻窦炎、脑膜炎和菌血症中耳炎、乳突炎、鼻窦炎、脑膜炎和菌血症中耳炎、乳突炎、鼻窦炎、脑膜炎和菌血症中耳炎、乳突炎、鼻窦炎、脑膜炎和菌血症n n肺炎链球菌的荚膜在细菌的侵袭力上起着肺炎链球菌的荚膜在细菌的侵袭力上起着重要作用重要作用n n肺炎链球菌的溶血素、神经氨酸酶也是其主要肺炎链球菌的溶血素、神经氨酸酶也是其主要肺炎链球菌的溶血素、神经氨酸酶也是其主要肺炎链球菌的溶血素、神经氨酸酶也是其主要致病物质致病物质致病物质致病物质第36页/共86页临床意义肺炎链球菌第36页/共86页临床意义n n草绿色链球菌草绿色链球菌n n人体口腔、消化道、女性生殖道的正常菌群，人体口腔、消化道、女性生殖道的正常菌群，人体口腔、消化道、女性生殖道的正常菌群，人体口腔、消化道、女性生殖道的正常菌群，n n可引起心脏瓣膜异常患者的亚急性细菌性心内可引起心脏瓣膜异常患者的亚急性细菌性心内可引起心脏瓣膜异常患者的亚急性细菌性心内可引起心脏瓣膜异常患者的亚急性细菌性心内膜炎膜炎膜炎膜炎n n从血液中分离出该菌常被认为是污染的细菌从血液中分离出该菌常被认为是污染的细菌从血液中分离出该菌常被认为是污染的细菌从血液中分离出该菌常被认为是污染的细菌n n血液链球菌血液链球菌、温和链球菌温和链球菌、格氏链球菌格氏链球菌、口腔链球菌口腔链球菌、中间型链球菌中间型链球菌n n常分离自深部脓肿，特别是肝和脑的脓肿常分离自深部脓肿，特别是肝和脑的脓肿常分离自深部脓肿，特别是肝和脑的脓肿常分离自深部脓肿，特别是肝和脑的脓肿第37页/共86页临床意义草绿色链球菌第37页/共86页三、生物学特性三、生物学特性第38页/共86页三、生物学特性第38页/共86页1形态n n链球菌是直径小于链球菌是直径小于2 2m的球形或卵圆形革的球形或卵圆形革兰阳性球菌，呈链状排列，链的长短和细兰阳性球菌，呈链状排列，链的长短和细菌的种类及生长环境有关菌的种类及生长环境有关肺炎链球菌呈矛尖状，宽端相对尖端向肺炎链球菌呈矛尖状，宽端相对尖端向外，成双排列，无芽胞、无动力，但能外，成双排列，无芽胞、无动力，但能形成荚膜和粘液层形成荚膜和粘液层第39页/共86页1形态链球菌是直径小于2m的球形或卵圆形革兰阳性球菌，呈2培养特性n n兼性厌氧菌兼性厌氧菌兼性厌氧菌兼性厌氧菌n n肺炎链球菌和草绿色链球菌某些种需要肺炎链球菌和草绿色链球菌某些种需要肺炎链球菌和草绿色链球菌某些种需要肺炎链球菌和草绿色链球菌某些种需要COCO2 2n n营养要求高营养要求高营养要求高营养要求高n n须在培养基中加入血液、血清。最适生长温度须在培养基中加入血液、血清。最适生长温度须在培养基中加入血液、血清。最适生长温度须在培养基中加入血液、血清。最适生长温度3537353735373537，n n血平板上形成灰白色小菌落血平板上形成灰白色小菌落血平板上形成灰白色小菌落血平板上形成灰白色小菌落n n不同菌种的菌落可形成不同菌种的菌落可形成不同菌种的菌落可形成不同菌种的菌落可形成、三种特征性溶血现象三种特征性溶血现象三种特征性溶血现象三种特征性溶血现象n n液体培养基中表现为絮状和颗粒沉淀液体培养基中表现为絮状和颗粒沉淀液体培养基中表现为絮状和颗粒沉淀液体培养基中表现为絮状和颗粒沉淀n n肺炎链球菌肺炎链球菌肺炎链球菌肺炎链球菌n n荚膜多糖使菌落呈粘液状荚膜多糖使菌落呈粘液状荚膜多糖使菌落呈粘液状荚膜多糖使菌落呈粘液状n n产生自溶酶，培养产生自溶酶，培养产生自溶酶，培养产生自溶酶，培养48484848h h后出现后出现后出现后出现“脐窝状脐窝状脐窝状脐窝状”菌落菌落菌落菌落第40页/共86页 2培养特性兼性厌氧菌第40页/共86页3生化特性和抵抗力n n发酵葡萄糖和多种糖，不产气，乳酸为代发酵葡萄糖和多种糖，不产气，乳酸为代谢终末产物，触酶阴性谢终末产物，触酶阴性n n链球菌基因链球菌基因DNA中中G+C mol%为为34463446n n抵抗力抵抗力n n本菌属大多数细菌对干燥和消毒剂敏感本菌属大多数细菌对干燥和消毒剂敏感本菌属大多数细菌对干燥和消毒剂敏感本菌属大多数细菌对干燥和消毒剂敏感n n本菌属细菌较少引起细菌耐药性本菌属细菌较少引起细菌耐药性本菌属细菌较少引起细菌耐药性本菌属细菌较少引起细菌耐药性n n近年对青霉素耐药甚至多重耐药的肺炎链球菌的出近年对青霉素耐药甚至多重耐药的肺炎链球菌的出近年对青霉素耐药甚至多重耐药的肺炎链球菌的出近年对青霉素耐药甚至多重耐药的肺炎链球菌的出现并在全球播散，引起高度关注现并在全球播散，引起高度关注现并在全球播散，引起高度关注现并在全球播散，引起高度关注第41页/共86页3生化特性和抵抗力发酵葡萄糖和多种糖，不产气，乳酸为代谢终抗原结构n n抗原结构复杂抗原结构复杂n n多糖抗原多糖抗原多糖抗原多糖抗原n n位于细胞壁以此可将链球菌分类为位于细胞壁以此可将链球菌分类为位于细胞壁以此可将链球菌分类为位于细胞壁以此可将链球菌分类为A A、B B、C C、D D、F F、GG等等等等20202020群群群群n n蛋白抗原蛋白抗原蛋白抗原蛋白抗原n n主要有主要有主要有主要有MM蛋白、蛋白、蛋白、蛋白、F F蛋白和蛋白和蛋白和蛋白和GG蛋白等蛋白等蛋白等蛋白等第42页/共86页抗原结构抗原结构复杂第42页/共86页四、微生物检验n n检验程序检验程序 第43页/共86页四、微生物检验检验程序 第43页/共86页（二）标本采集n n咽拭子、痰液、脓汁和血液等标本采集后在咽拭子、痰液、脓汁和血液等标本采集后在2 2h内运送到实验室，立即进行检查和接种内运送到实验室，立即进行检查和接种n n对对B群溶血链球菌的检查，用无菌棉签采集群溶血链球菌的检查，用无菌棉签采集第第3535周周3737周妊娠妇女的阴道分泌物，置于周妊娠妇女的阴道分泌物，置于含多粘菌素含多粘菌素(10g/ml)和萘啶酸和萘啶酸(15g/ml)选选择性培养肉汤中孵育择性培养肉汤中孵育18241824h，再作分离培养再作分离培养第44页/共86页（二）标本采集咽拭子、痰液、脓汁和血液等标本采集后在2h内运（三）标本直接检查n n直接显微镜检查直接显微镜检查直接显微镜检查直接显微镜检查n n标本涂片、革兰染色、显微镜检查见链状排列革兰标本涂片、革兰染色、显微镜检查见链状排列革兰标本涂片、革兰染色、显微镜检查见链状排列革兰标本涂片、革兰染色、显微镜检查见链状排列革兰阳性球菌有助于无正常菌群污染标本的诊断阳性球菌有助于无正常菌群污染标本的诊断阳性球菌有助于无正常菌群污染标本的诊断阳性球菌有助于无正常菌群污染标本的诊断n n荚膜肿胀试验用于检查肺炎链球菌荚膜肿胀试验用于检查肺炎链球菌荚膜肿胀试验用于检查肺炎链球菌荚膜肿胀试验用于检查肺炎链球菌n n直接检测抗原直接检测抗原直接检测抗原直接检测抗原n n咽拭标本的咽拭标本的咽拭标本的咽拭标本的A A群链球菌和女性生殖道标本的群链球菌和女性生殖道标本的群链球菌和女性生殖道标本的群链球菌和女性生殖道标本的B B群链群链群链群链球菌可用抗原检测球菌可用抗原检测球菌可用抗原检测球菌可用抗原检测n n用凝集试验或用用凝集试验或用用凝集试验或用用凝集试验或用ELISAELISA方法等检测方法等检测方法等检测方法等检测n n该方法特异性和敏感度高，当标本所含的菌数太少该方法特异性和敏感度高，当标本所含的菌数太少该方法特异性和敏感度高，当标本所含的菌数太少该方法特异性和敏感度高，当标本所含的菌数太少可出现假阴性可出现假阴性可出现假阴性可出现假阴性第45页/共86页（三）标本直接检查直接显微镜检查 第45页/共86页（四）分离培养与鉴定n n用羊血琼脂平板培养有助于识别溶血特性和进一步用羊血琼脂平板培养有助于识别溶血特性和进一步用羊血琼脂平板培养有助于识别溶血特性和进一步用羊血琼脂平板培养有助于识别溶血特性和进一步鉴定鉴定鉴定鉴定n n初代分离需用初代分离需用初代分离需用初代分离需用5%5%5%5%COCO2 2环境，环境，环境，环境，3537353735373537孵育孵育孵育孵育24242424h hn n观察菌落性状观察菌落性状观察菌落性状观察菌落性状n n菌落周围呈现透明溶血环的为菌落周围呈现透明溶血环的为菌落周围呈现透明溶血环的为菌落周围呈现透明溶血环的为mmmmmmmm。草绿色溶血环草绿色溶血环草绿色溶血环草绿色溶血环的为的为的为的为 溶血性链球菌。有些菌落灰白色不出现溶血环溶血性链球菌。有些菌落灰白色不出现溶血环溶血性链球菌。有些菌落灰白色不出现溶血环溶血性链球菌。有些菌落灰白色不出现溶血环n n革兰染色为革兰阳性球菌，链状或短链状排列革兰染色为革兰阳性球菌，链状或短链状排列革兰染色为革兰阳性球菌，链状或短链状排列革兰染色为革兰阳性球菌，链状或短链状排列n n触酶试验阴性，触酶试验阴性，触酶试验阴性，触酶试验阴性，6.5%6.5%6.5%6.5%NaClNaCl不生长者不生长者不生长者不生长者n n可确定为链球菌属细菌可确定为链球菌属细菌可确定为链球菌属细菌可确定为链球菌属细菌第46页/共86页（四）分离培养与鉴定用羊血琼脂平板培养有助于识别溶血特性和进链球菌属内的鉴定试验第47页/共86页链球菌属内的鉴定试验第47页/共86页溶血性链球菌鉴定n n 溶血性链球菌鉴定溶血性链球菌鉴定溶血性链球菌鉴定溶血性链球菌鉴定n nLancefieldLancefield群特异性抗原鉴定群特异性抗原鉴定群特异性抗原鉴定群特异性抗原鉴定n n根据根据根据根据LancefieldLancefield分群的要求提取各菌落的抗原，分群的要求提取各菌落的抗原，分群的要求提取各菌落的抗原，分群的要求提取各菌落的抗原，与相应的分群血清进行凝集试验。与相应的分群血清进行凝集试验。与相应的分群血清进行凝集试验。与相应的分群血清进行凝集试验。n n与与与与B B群抗血清凝集的菌株可直接确认为无乳链球菌群抗血清凝集的菌株可直接确认为无乳链球菌群抗血清凝集的菌株可直接确认为无乳链球菌群抗血清凝集的菌株可直接确认为无乳链球菌n n与与与与FmmFmm可确定为米勒链球菌可确定为米勒链球菌可确定为米勒链球菌可确定为米勒链球菌n n与与与与A A、C C、GG群抗血清凝集的菌株不能确定种类，还需群抗血清凝集的菌株不能确定种类，还需群抗血清凝集的菌株不能确定种类，还需群抗血清凝集的菌株不能确定种类，还需根据菌落大小和生化反应进一步鉴定根据菌落大小和生化反应进一步鉴定根据菌落大小和生化反应进一步鉴定根据菌落大小和生化反应进一步鉴定 第48页/共86页溶血性链球菌鉴定溶血性链球菌鉴定第48页/共86页溶血性链球菌鉴定n nPYR试验试验n n化脓性链球菌产生的吡咯烷酮芳基酰胺酶水解吡化脓