恶性血液病肿瘤止血和血栓形成课件

恶性血液病肿瘤止血和血栓形成止血和血栓形成恶性血液病肿瘤止血和血栓形成1恶性血液病患者的整个病程中，几乎所有患者都存在不同程度的出血和血栓形成，在一定情况下影响了患者的生存和预后,因此越来越受到人们的重视。如AthalUH在2003年回顾性调查了19761999年不同学者已报道的急性淋巴细胞白血病患者中血栓栓塞(TE)发病的流行病学，报道中TE发病率最低为1.16%,最高可达36.7%；中枢神经系统TE占50%,常常是ALL患者致死原因。恶性血液病肿瘤止血和血栓形成课件2 StudyTotalnumberNumber(1976-1999)ofpatientsofpatientswithTETimingofTEIncidenceofTE(%)Inductionreinductionintensification(1)CCSG154718162-1.16%(2)SJCRHALL4601183-2.4%(3)DFCI81-001289N/AN/AN/A-4.1%(4)ALL-AIEOP5344-7.5%(5)Rodeghiero1422-14.2%(6)GIMEMA,2381010-4.2%(7)COALL2866N/AN/A-2.1%(8)GIMEMA2122-9.5%(9)DFCI87-001263-311.5%(10)BFM-90110019majority-1.7%(11)CCSG1511-7.7%(12)BFM902133-14.3%(13)DFCI91-00138617-174.5%(14)COALL92/97108312-2.8%(15)BFM90/9528932293-11.0%(16)ALL-AIEOP19953211-3.1%(17)Kankirawatana10566-5.7%(18)PARKAA662222-36.7%Table 1.Summary of publications reporting TE in patients with ALLAthale,U.H.etal.ThrombosisResearch,2003,111:125-131StudyTotalnu3VenousThromboembolismandCancerNewInsightsandTherapyAgnesLee,MD,MSc,FRCPCMcMasterUniversity,Hamilton,Ontario,CanadaDecember2004VenousThromboembolismandCan4ThrombosisandCancerCancerisanindependentriskfactorforVTE-increasesriskby4-to6-fold25%ofVTEcasesareassociatedwithcancer-acuteVTE20%haveknowncancer-idiopathicVTE10%havecancerwithin12monthsThrombosisandCancerCanceris5ThrombosisandCancerRiskofVTEincancerpatientsdependson:-tumourtype-stageorextentofcancer-location(venousobstruction)-anti-tumourtherapy(chemo,hormone,anti-VEGF)-tissuetrauma(surgery,centralvenouscatheters)-otherriskfactors(e.g.,immobility,previousVTE)ThrombosisandCancerRiskofV6ThrombosisandCancerCancersmoststronglyassociatedwithVTE-ovary120per10,000-brain117per10,000-pancreas110per10,000CancersmostcommoninpatientswithVTE-colorectal15%-20%-breast15%-20%-lung10%-15%Levitanetal.Medicine1999;78:285-291.ThrombosisandCancerCancersm7获得性易栓症获得性易栓症获得性易栓症是指因存在获得性血栓形获得性易栓症是指因存在获得性血栓形成危险因素或获得性抗凝蛋白、凝血因子、成危险因素或获得性抗凝蛋白、凝血因子、纤溶蛋白等的异常而容易发生血栓栓塞。纤溶蛋白等的异常而容易发生血栓栓塞。血栓类型以静脉血栓为主。血栓类型以静脉血栓为主。目前国内对获得性易栓症的重视度严重目前国内对获得性易栓症的重视度严重不足。不足。获得性易栓症获得性易栓症是指因存在获得性血栓形成危险因素8获得性易栓症发生血栓的危险程度获得性易栓症发生血栓的危险程度低度低度低度低度普通外科手术，口服避孕药普通外科手术，口服避孕药普通外科手术，口服避孕药普通外科手术，口服避孕药/妊娠，长途旅行，妊娠，长途旅行，妊娠，长途旅行，妊娠，长途旅行，因因因因子子子子VIIIVIII活性升高活性升高活性升高活性升高中度中度中度中度肿瘤手术肿瘤手术肿瘤手术肿瘤手术，败血症，长期制动，抗磷脂综合征，败血症，长期制动，抗磷脂综合征，败血症，长期制动，抗磷脂综合征，败血症，长期制动，抗磷脂综合征，骨髓增生性疾病，骨髓增生性疾病，骨髓增生性疾病，骨髓增生性疾病，PNHPNH高度高度高度高度全髋或膝关节置换，髋部骨折，全髋或膝关节置换，髋部骨折，全髋或膝关节置换，髋部骨折，全髋或膝关节置换，髋部骨折，急性早幼粒细胞急性早幼粒细胞急性早幼粒细胞急性早幼粒细胞白血病白血病白血病白血病极度极度极度极度分泌粘蛋白的腺癌分泌粘蛋白的腺癌分泌粘蛋白的腺癌分泌粘蛋白的腺癌获得性易栓症发生血栓的危险程度低度普通外科手术，口服避孕药/9遗传性易栓症遗传性易栓症一、一、抗凝蛋白缺陷抗凝蛋白缺陷AT-IIIAT-III、PCPC、PSPS等缺乏等缺乏二二、凝凝血血因因子子缺缺陷陷 APCAPC-R-R、凝凝血血酶酶原原基基因因突突20210A20210A、异异常常纤纤维维蛋蛋白白原原血症等血症等三三、纤纤溶溶蛋蛋白白缺缺陷陷 异异常常纤纤溶溶酶酶原原血血症症、tPAtPA缺缺乏症、乏症、PAI-1PAI-1增高症等增高症等四四、代代谢谢缺缺陷陷 高高同同型型半半胱胱氨氨酸酸血血症症、富富组氨酸糖蛋白增多症组氨酸糖蛋白增多症遗传性易栓症一、抗凝蛋白缺陷AT-II10 BFM协作组研究了289例ALL患儿，其中有58例患儿至少存在一种以上基因突变，包括四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因TT677、杂合型凝血酶原（PT）G20210A、杂合型FG1691A、家族性蛋白C缺乏、家族性蛋白S缺乏、家族性抗凝血酶-缺乏、家族性脂蛋白升高（30mg/dl），以上基因突变的发生率与健康儿童无差异。58例 中 有 27例 出 现 静 脉 血 栓（VTE）占46.6%;而231例无基因突变的患儿中仅5例发生VTE(2.2%)；若化疗中不用ASP可降低VTE的发生率，提示我们对有上述基因突变的ALL患者化疗中尽量不要应用ASP以减少血栓并发症。恶性血液病肿瘤止血和血栓形成课件11恶性肿瘤恶性肿瘤肿肿瘤瘤相相关关的的血血栓栓形形成成和和/或或血血栓栓性性静静脉炎称为脉炎称为Trousseau综合征。综合征。荟荟萃萃分分析析表表明明：恶恶性性肿肿瘤瘤患患者者中中静静脉脉血血栓栓形形成成的的发发生生率率高高达达320，以以腺癌为高。但大多被忽视。腺癌为高。但大多被忽视。恶性肿瘤肿瘤相关的血栓形成和/或血栓性静脉炎12AntineoplasticEffectsManystudieshavesuggestedanticoagulantsmayhaveanti-tumoureffectsLMWHcaninhibitangiogenesis,tumourcellProliferation,andmetastaticspreadDirectorindirectactivityinvolving-tissuefactorpathwayinhibitor-fibroblastgrowthfactor-keratinocytegrowthfactor-integrin-dependentadhesionAntineoplasticEffectsManystu13SurvivalbenefitwithLMWHRandomizedControlledTrialsFAMOUSMALTTurkishStudySurvivalbenefitwithLMWHRand14TurkishStudySinglecentre,randomizedstudyPatientswithSCLCRdalteparinandchemochemoaloneTreatmentduration:18weeksDalteparindose:5000IUSConcedailyChemo:cyclophosphamide,epirubicin,vincristinePrimaryoutcome:overallsurvivalat1yearAltinbasetal.JThrombHaemost2004;2:1266-1271.TurkishStudySinglecentre,ra15TurkishStudy84patientsrandomizedPatientsbalancedforage,gender,stage,smokinghistory,ECOGperformancestatusChemo+dalteparinChemoaloneP-value1-Mediansurvival,m13.08.00.01Altinbasetal.JThrombHaemost2004;2:1266-1271.TurkishStudy84patientsrando16近几十年来研究证实恶性血液病的止、凝血异常涉及初期止血和二期止血的整个过程,是多种因素综合作用的结果，但主要与三种因素及其之间的相互作用有关：疾病本身所致止凝血异常，如白血病细胞可释放促凝活性物质、骨髓增殖性疾病中血小板数量和功能的变化等均可导致机体出血或血栓形成治疗对机体止、凝血环境的改变遗传因素，某些基因的突变或缺失导致机体的易栓状态。近几十年来研究证实恶性血液病的止、凝血异常17恶性血液病初期止血异常恶性血液病初期止血异常大多数恶性血液病主要由于肿瘤细胞浸润骨髓替代了造血组织，虽然患者骨髓象增生活跃,但巨核细胞生成被抑制,引起血小板减少；而骨髓增生异常综合症（MDS）并不存在肿瘤细胞的广泛浸润，外周血小板减少却可以很严重，这与克隆性造血干、祖细胞发育异常导致巨核细胞生成异常有关，患者骨髓中常出现小巨核细胞或有多个小核的大巨核细胞。恶性血液病初期止血异常大多数恶性血液病主要由18恶性血液病中引起血小板减少的其它原因还有很多,如:感染、脾脏肿大、并发DIC等都会导致血小板减少。当患者血小板数1020109/L或血小板减少伴有严重出血风险时，应予血小板输注。恶性血液病中引起血小板减少的其它原因还有很多,如:感染、19但是有部分白血病和MDS患者血小板数正常甚至升高,亦有出血倾向,提示血小板功能存在缺陷。患者外周血小板可出现体积增大、形态及颗粒数量异常，ADP、肾上腺素或胶原诱导的血小板聚集反应降低,血小板促凝活性降低。恶性血液病肿瘤止血和血栓形成课件20MDS伴血小板功能异常简要病史简要病史：张娟，女性，皮肤、黏膜出血进行性加重三年。查血小板：10109/L;骨髓检查：增生活跃，原始粒细胞6.5%；血小板聚集试验：ADP10umPAGm:14%(正常对照：63%)Ristocetin1.6mg/mlPAGm:15%(正常对照:75%)血小板膜糖蛋白检测：阳性细胞百分数MnX阳性细胞百分数MnXGPIba36.9%0.626GPIIIa89.5%22.7GPIIb79.0%17.7PAIgGMnX:2.78（正常值范围）MDS伴血小板功能异常21除血小板数量减少和功能异常外，恶性血液病患者还可因肿瘤细胞浸润血管壁、肿瘤细胞阻塞滋养血管造成血管壁营养不良、感染等因素损伤血管内皮细胞而导致初期止血异常。如LopesBezerraLM等研究证实恶性血液病患者曲霉菌感染可以侵袭及损伤内皮细胞，刺激组织因子(TF)活化导致血栓形成。除血小板数量减少和功能异常外，恶性血液病患者还可因肿22骨髓增殖性疾病（MPD）是多能干细胞克隆性疾病，包括原发性血小板增多症（ET）、真性红细胞增多症（PV）、骨髓纤维化（MF）和慢性粒细胞增多症（CML）。出血和血栓形成是MPD重要的致残及致死原因。约30%病人有出血，10%病人死于出血，15%-40%死于血栓形成。血小板异常增多以ET常见并且常伴有幼稚型血小板增多，提示初期止血功能障碍多由血小板功能缺陷所致,并涉及血小板形态、聚集能力、致密颗粒和颗粒、血小板膜、花生四烯酸代谢等多方面异常（见表2）。MPD出血表现以皮肤黏膜为主，严重者可有脑出血、上消化道出血和动、静脉血栓形成(见表3）。骨髓增殖性疾病（MPD）是多能干细胞克隆性疾病，包括原231.血小板形态异常血小板形态异常 光镜下血小板大小不等，致密颗粒和颗粒减少，电镜下可见致密管道系统和开放管道系统肥大，特别见于CML急变期及MF。2.血小板功能缺陷血小板功能缺陷GPb-缺乏和增多；2-肾上腺素、凝血酶和前列腺素D2的受体减少，免疫球蛋白Fc受体增多；体外出现血小板自发聚集现象；肾上腺素（60%）、ADP（40%）、胶原（35%）诱导的血小板聚集及释放反应降低；血小板促凝活性降低。3.获得性贮存池病获得性贮存池病血小板的致密颗粒内的ATP、ADP、5-羟色胺（5-HT）及颗粒内的血小板第4因子（PF4）、-血栓球蛋白（-TG）等明显减少，类似血小板贮存池病的表现。4.花生四稀酸代谢异常花生四稀酸代谢异常血小板脂肪氧化酶活性降低，当伴环氧化酶合成活性亢进时，血小板生成TXA2的能力提高，易致血栓形成。表表2 骨髓增殖性疾病血小板异常表现骨髓增殖性疾病血小板异常表现1.血小板形态异常表2骨髓增殖性疾病血小板异常表24血栓栓塞血栓栓塞 动脉动脉(缺血缺血/梗塞梗塞)静脉静脉脑部脑部下肢下肢/肺肺四肢四肢脏器脏器,主要是肾脏主要是肾脏心脏心脏视网膜中央静脉视网膜中央静脉脏器脏器雷诺氏综合症雷诺氏综合症红斑性肢痛病红斑性肢痛病出血出血皮肤、黏膜皮肤、黏膜胃肠道胃肠道眼球内眼球内表表3.MPD血栓栓塞血栓栓塞/出血常出血常见部位部位Brodmann,S.etal.AnnHematlo,2000,79:312-318血栓栓塞表25从临床角度来看,MPD患者尤其是ET和PV出现血栓并致死的危险性高于出血,血栓类型多为动脉血栓（50%-70%），而血小板升高本身与血栓形成和出血关系不大，因此对于无症状者不主张应用骨髓抑制药如羟基脲、马利兰等减低血小板数,而小剂量使用阿司匹林（40mg/d）可有效预防血栓的形成，却不增加出血的危险性。恶性血液病肿瘤止血和血栓形成课件26恶性血液病二期止血异常恶性血液病二期止血异常 恶性血液病在血液凝固的二期止血过程中亦有多种异常，肿瘤细胞可通过促凝活性、纤维蛋白溶解活性和释放多种炎性细胞因子与止血系统相互作用。恶性血液病二期止血异常恶性血液病在血液凝固的二期止27 DICDIC不是一种独立的疾病而是一个由多种病不是一种独立的疾病而是一个由多种病因引起的出血性病理过程。因引起的出血性病理过程。国际血栓与止血学会的国际血栓与止血学会的DICDIC定义：定义：DICDIC是多种是多种原因与成分引起的全身性血管内凝血过程。原因与成分引起的全身性血管内凝血过程。DICDIC的病理变化主要在微血管，并引起微血管的病理变化主要在微血管，并引起微血管病变，严重时可导致脏器功能障碍。病变，严重时可导致脏器功能障碍。28UnderlyingConditionsAssociatedwithDICBasicdiseaseratioofthediseasetoall(%)UnderlyingConditionsAssociat29DICOccurrenceRateinLeukemiaandLymphomaNo.ofpatientsNo.ofDICincidence(%)HD200DICOccurrenceRateinLeukemi30研究表明APL止、凝血异常的病理机制主要是由于APL细胞表达并释放TF和癌促凝物质（CP）而直接活化机体凝血系统，其中CP不需依赖F可直接活化F。在一些急性髓细胞白血病发病时可在骨髓单个核细胞发现CP，但在治疗完全缓解后转阴性，这可能为我们临床评价治疗疗效提供了一个方法。研究表明APL止、凝血异常的病理机制主要是由于APL31肿瘤促凝物，肿瘤促凝物，CP半胱氨酸蛋白酶(EC3.4.22.26)，分子量68K直接活化因子xCP抗原增高：约85%的肿瘤患者血清。AML原始细胞可表达CP，以APL最高。CR后CP表达下调肿瘤促凝物，CP半胱氨酸蛋白酶(EC3.4.22.26)，32目前已证实恶性血液病肿瘤细胞可分泌多种炎性细胞因子如：TNF-、IL-1、脂多糖（LPS）等，同时通过一些细胞表面膜黏附分子黏附于血管内皮细胞，促使内皮细胞在炎性细胞因子刺激下由原来的抗凝活性转变为促凝活性（PCA），表达TF和纤溶酶原活化剂抑制物-1（PAI-1），同时血栓调节蛋白（TM）下降，TM-凝血酶水平降低致使蛋白C系统的激活降低。上述机制可能是引起APL及其它一些恶性血液病发生出血和血栓的重要原因(见图)。目前已证实恶性血液病肿瘤细胞可分泌多种炎性细胞因子如：33白血病并发白血病并发DIC诊断标准（诊断标准（1999年）年）1血血小小板板50109/L，或或有有两两项项以以上上血血小小板板活活化化分分子子标标志志物物升升高高：-TG，PF4，TXB2，P-选择素。选择素。2 血浆纤维蛋白原含量或呈进行性下降，血浆纤维蛋白原含量或呈进行性下降，3 3P试验阳性，或血浆试验阳性，或血浆FDP或或D-二聚体增高。二聚体增高。4 PT延长延长3s以上，或以上，或APTTT延长延长10s以上。以上。5 血浆血浆PLG：Ag小于小于200mg/L。6 AT活性小于活性小于60%或或PC活性下降。活性下降。7血浆凝血因子分子标志物水平升高：血浆凝血因子分子标志物水平升高：F1+2，TAT，FPA，SFMC。白血病并发DIC诊断标准（1999年）34APL患者血液患者血液Fg、SFC、FDP与与D-二聚体的改变二聚体的改变nFg(g/L)SFC(mg/L)FDP(pg/L)D-二聚体二聚体(pg/L)正常对照正常对照伴发伴发*151662788*非非*23661135DIC纠正纠正*25791679与与正正常常对对照照比比较较，*P005，*P001，*P 0001；与与DIC比比较较，P005，P001，P34.2mol/l(2mg/dl)。（3）有下列2项以上临床表现肝肿大右上腹疼痛腹水体重增加5%以上。（4）临床排除可引起上述症状和体症的其它原因。VOD的临床诊断标准：42研究发现VOD患者可出现一系列凝血指标的异常，包括蛋白C、蛋白S、抗凝血酶、D-二聚体、纤溶酶原（PLG）、2-纤溶酶抑制物（2-PI）、t-PA以及PAI-1等因子水平的异常，其中蛋白C降低及PAI-1升高已得到普遍的论证；同时细胞因子TNF-升高，促使内皮细胞释放促凝物质；前列腺素E1（PGE1）降低。临床上应用低分子量肝素、PGE1和去纤苷等药物防治VOD已取得了满意的效果。研究发现VOD患者可出现一系列凝血指标的异常，包括蛋白C、蛋43移植相关性血栓性微血管病（TA-TMA）TTP发病机制：发病机制：1，vWF-cp与UL-vWFvWF-cp基因变异，抗vWF-cp自身抗体，2，血管内皮损伤 抗内皮细胞自身抗体，细菌毒素，3，血小板活化移植相关性血栓性微血管病44继发性TTP继 发 性 TTP常 见 于 造 血 干 细 胞 移 植(HSCT)，妊 娠，药 物(Ticlopidine,Clopidogrel,Cyclosporine,干扰素，Simvastatin等)，自身免疫病，严重感染和恶性肿瘤等。继发性TTP继发性TTP常见于造血干细胞移植(HSCT45TA-TMA发病机制还不太清楚，与原发性TTP不同的是vWF裂解蛋白酶活性（ADAMTS13）没有下降或缺乏；患者血浆中vWF：Ag、TM、PAI-1、IL-8等明显升高，并且升高程度与TA-TMA严重程度正相关。HSCT前预处理包括深入化疗和放疗、宿主处于免疫抑制状态极易病毒和细菌感染、GVHD、免疫抑制剂环胞菌素A（CSA）的应用等均可导致血管内皮细胞损伤，止血平衡状态被打破，患者机体呈现高凝状态而并发TA-TMA。TA-TMA发病机制还不太清楚，与原发性TTP不同的是vWF46HSCT-TTP2例单倍体BMT患者出现TTP（临床血液杂志2003，16：191-192）16例allo-HSCT后出现TMA（BoneMarrowTransplantation2004,33:1143-50)1.肠型TMAs：便血910-3400ml/d2.结肠镜检查：血小板血栓（CD41，VWF）3.RBC碎片1.2%;LDH 500u/L 例尸解确诊为TMA，GVHD，加强免疫抑制治疗导致病情恶化。另9例活检诊断为TMA，减少免疫抑制剂，肠道症状改善。HSCT-TTP2例单倍体BMT患者出现TTP47HSCT-TTP 诊断 临床上根据上述“五联征”作出临床诊断 如果存在血小板减少,便血,微血管性溶血性贫血 时，应高度怀疑本病。外周血涂片发现破碎红细胞、LDH vWF多聚体分析发现UL-vWF检测vWF-cp活性水平(胶原结合试验,rvWF-A2为ADAMTS13的底物)检测vWF-cpAg水平(SZ112+SZ113)检测TSP-1?HSCT-TTP诊断48临床应用血浆置换等传统方法治疗TA-TMA，疗效差，病死率极高，将来是否能通过修复损伤内皮细胞达到治疗TA-TMA的目的值得进一步去研究。临床应用血浆置换等传统方法治疗TA-TMA，疗效差，病死率极49HSCT中常行中心静脉置管，可发生导管相关性血栓形成。CortelezziaA等发现行中心静脉插管的恶性血液病患者血栓发生率为15.5%,其中PICC置管者比CICC者更易发生血栓,并且出现时间也早,通过抗凝剂的应用可有效预防CVC相关性血栓的形成。FLeiden突变与CVC相关血栓的形成有关联，有报道FLeiden突变组发生CVC相关性血栓是非突变组的6倍。CVCCVC相关性血栓：相关性血栓：HSCT中常行中心静脉置管，可发生导管相关性血栓形成。Cor50CentralVenousCathetersThrombosisisapotentialcomplication-fibrinsheath-superficialphlebitis-ball-valveclot-deepveinthrombosisIncidenceupto60%fromhistoricaldata6thACCPguidelinesrecommendedroutineprophylaxiswithlow-dosewarfarinorLMWHCentralVenousCathetersThromb51肿瘤细胞与止血系统的相互作用ProcoagulantactivitiesTissuefactorCancerprocoagulantFVreceptorFibrinolyticactivitiesuPA,tPAuPARPAI-1肿瘤细胞与止血系统的相互作用Procoagulantact52目前已证实凝血系统的活化能促进血管生成,有利于恶性肿瘤细胞的生长、浸润和转移，因此以TF和凝血酶为靶位阻断凝血系统的活化可能是一个治疗恶性血液病的有效途径（见图）。目前已证实凝血系统的活化能促进血管生成,有利于恶53TFThrombinFibrinPARsAngiogenesisTUMOR GROWTH AND METASTASISClotting-dependentClotting-dependentClotting-dependentClotting-independentClottingindependentCOAGULATION CASCADECoagulation cascade,angiogenesis,and tumor growth and metastasisRickles,F.R.etal.Chest2003;124:58s-68sTFThrombinFibrinPARsAngiogenes54