微生物消毒与灭菌课件

微生物消毒与灭菌微生物消毒与灭菌微生物消毒与灭菌1第一节第一节 物理消毒灭菌法物理消毒灭菌法 第一节物理消毒灭菌法2&物理因素对微生物的影响物理因素对微生物的影响物理因素物理因素温温 度度辐辐 射射干干 燥燥超声波超声波微微 波波滤过除菌滤过除菌高温高温低温低温物理因素对微生物的影响物理因素温度辐射干燥超声波3一、热力灭菌法一、热力灭菌法p高温对微生物虽具有明显的致死作用，但不高温对微生物虽具有明显的致死作用，但不同种类的微生物对热的敏感性有明显的的差同种类的微生物对热的敏感性有明显的的差异，细菌繁殖体最为敏感，其次是真菌和病异，细菌繁殖体最为敏感，其次是真菌和病毒，细菌的芽孢对热有很强的抵抗力。毒，细菌的芽孢对热有很强的抵抗力。一、热力灭菌法高温对微生物虽具有明显的致死作用，但不同种类的4p热力灭菌的原理热力灭菌的原理破坏菌体蛋白质、核酸和酶破坏菌体蛋白质、核酸和酶系统而致死微生物。系统而致死微生物。热力使蛋白质中的氢键破坏使之变性或凝固，热力使蛋白质中的氢键破坏使之变性或凝固，使双股使双股DNADNA分开为单股，受热活化的核酸酶使分开为单股，受热活化的核酸酶使单股的单股的DNA DNA 断裂，导致细菌死亡断裂，导致细菌死亡 p影响高温灭菌的因素：影响高温灭菌的因素：细菌对高温的耐受性与细菌种类、发育时期、细菌对高温的耐受性与细菌种类、发育时期、菌体浓度及细菌所处介质有关。菌体浓度及细菌所处介质有关。热力灭菌的原理破坏菌体蛋白质、核酸和酶系统而致死微生物。5l热力灭菌法分类：干热灭菌热力灭菌法分类：干热灭菌 和湿热灭菌两种方法。和湿热灭菌两种方法。二者比较：在同一温度下，后者效力比前者二者比较：在同一温度下，后者效力比前者为大。为大。l原因：原因：（1 1）湿热中细菌菌体蛋白较易凝固；）湿热中细菌菌体蛋白较易凝固；（2 2）湿热的穿透力比干热大；）湿热的穿透力比干热大；（3 3）湿热的蒸汽有潜热存在。）湿热的蒸汽有潜热存在。热力灭菌法分类：干热灭菌和湿热灭菌两种方法。6热力灭菌法热力灭菌法 高温杀灭细菌高温杀灭细菌l焚烧焚烧-最彻底的灭菌方法最彻底的灭菌方法l烧灼（火焰灭菌法）烧灼（火焰灭菌法）-直接用火焰灭菌方法直接用火焰灭菌方法l干烤干烤（热空气灭菌法、干热灭菌法）（热空气灭菌法、干热灭菌法）-加加热热160-180 2160-180 2小时小时干热灭菌法干热灭菌法l红外线红外线热力灭菌法高温杀灭细菌焚烧-最彻底的灭菌方法烧灼（7(2)(2)火焰灭菌法火焰灭菌法 :火焰直接烧灼，用于接种环火焰直接烧灼，用于接种环(针针)和试和试管口或瓶口的灭菌。管口或瓶口的灭菌。(1)(1)焚烧法：用火焚烧，是一种彻底的灭菌方法，仅适焚烧法：用火焚烧，是一种彻底的灭菌方法，仅适用于废弃的污染物品和有传染性的动物尸体等。用于废弃的污染物品和有传染性的动物尸体等。(2)火焰灭菌法:火焰直接烧灼，用于接种环(针)和试管口或8(3)(3)干烤（热空气灭菌法、干热灭菌法）干烤（热空气灭菌法、干热灭菌法）n灭菌对象：为玻璃器皿、金属器械及不宜遇水的灭菌对象：为玻璃器皿、金属器械及不宜遇水的油、脂、凡士林等。油、脂、凡士林等。n方法方法160160（160160170170），），1 12h2h（180180纸、纸、棉塞就可烧焦）棉塞就可烧焦）(3)干烤（热空气灭菌法、干热灭菌法）灭菌对象：为玻璃器皿、9p缺点缺点穿透力差，故需高温、长时间（繁殖体穿透力差，故需高温、长时间（繁殖体100100，1.5h1.5h杀灭；芽孢杀灭；芽孢140140，2h2h可杀灭）可杀灭）160160170170，1 12h2h可杀死繁殖体和芽孢。可杀死繁殖体和芽孢。降到室温（降到室温（6060）后再取）后再取物品物品p注意事项注意事项 温度不能超过温度不能超过170170 物品不宜包、放过紧过厚、物品不宜包、放过紧过厚、帖壁帖壁缺点穿透力差，故需高温、长时间（繁殖体100，1.5h10电热干燥箱电热干燥箱电热干燥箱电热干燥箱电热干燥箱11湿热灭菌法湿热灭菌法p高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法最有效的灭菌方法最有效的灭菌方法 121 2030121 2030分钟分钟p煮沸消毒法煮沸消毒法水煮水煮100 5100 5分钟分钟(繁殖体繁殖体)2)2小时小时(芽胞芽胞)p流通蒸汽消毒法流通蒸汽消毒法p巴氏消毒法巴氏消毒法p间歇蒸汽灭菌法间歇蒸汽灭菌法水蒸汽水蒸汽100 1530100 1530分钟分钟(繁殖体繁殖体)反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌较低的温度（较低的温度（61 3061 30分钟）杀灭致病菌分钟）杀灭致病菌湿热灭菌法高压蒸汽灭菌法最有效的灭菌方法1212012p方法：温度在方法：温度在100100左右，煮沸左右，煮沸101020 min20 min可杀可杀死所有细菌的繁殖死所有细菌的繁殖 体，芽胞常需煮沸体，芽胞常需煮沸1 12 h2 h才才被杀死被杀死 。若在水中加入若在水中加入2-5%2-5%酚，则酚，则10-15min10-15min可可杀灭芽胞；若在水中加入杀灭芽胞；若在水中加入1-2%Na1-2%Na2 2COCO3 3，可提高沸，可提高沸点既可促进芽胞的摧毁，亦可防止金属器械生锈。点既可促进芽胞的摧毁，亦可防止金属器械生锈。p应用：灭菌对象应用：灭菌对象:饮水、玻璃器皿、外科器械饮水、玻璃器皿、外科器械(1)(1)煮沸灭菌煮沸灭菌 :方法：温度在100左右，煮沸1020min可杀死所有细13煮沸消毒器煮沸消毒器煮沸消毒器煮沸消毒器煮沸消毒器14 (2)(2)巴氏消毒法巴氏消毒法 ：以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或：以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特定微生物，而又不致严重损害其营养成分和风味的消特定微生物，而又不致严重损害其营养成分和风味的消毒方法毒方法 。低温维持巴氏消毒法低温维持巴氏消毒法 636365 30min 65 30min 高温瞬时巴氏消毒法高温瞬时巴氏消毒法 717172 15s 72 15s；迅速；迅速冷却冷却1010以下（冷击法）以下（冷击法）超高温巴氏消毒法超高温巴氏消毒法 132132管道管道 1 12s2s ；迅；迅速冷却速冷却常温保存半年。常温保存半年。(2)巴氏消毒法：以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特定15(3)(3)流通蒸汽消毒法流通蒸汽消毒法 ：又叫常压蒸汽消毒法，用普通蒸笼：又叫常压蒸汽消毒法，用普通蒸笼或阿诺氏（或阿诺氏（ArnoldArnold）流通蒸汽灭菌器，在）流通蒸汽灭菌器，在1 1个大气压下，个大气压下，用用100100左右的水蒸汽，左右的水蒸汽，30min30min，可杀灭繁殖体。不杀芽孢，可杀灭繁殖体。不杀芽孢和霉菌的孢子。和霉菌的孢子。用于食品、食具及不耐用高温的物品消毒。如敷用于食品、食具及不耐用高温的物品消毒。如敷料、糖培养基、半乳糖培养基料、糖培养基、半乳糖培养基 (3)流通蒸汽消毒法：又叫常压蒸汽消毒法，用普通蒸笼或16(4)(4)间歇灭菌法间歇灭菌法 （反复多次流通蒸汽）（反复多次流通蒸汽）p利用连续利用连续3 3次的流通蒸汽消毒法，达到彻底灭菌的目的。次的流通蒸汽消毒法，达到彻底灭菌的目的。即将待灭菌物品放入蒸笼（灭菌器）内，加热（约即将待灭菌物品放入蒸笼（灭菌器）内，加热（约100100）15-30min15-30min，取出置室温，取出置室温(或或37)24h37)24h，次日重复，次日重复灭菌。连续灭菌。连续3 3次。次。p用于一些不宜用于一些不宜100100以上温度灭菌物质，以达到杀灭芽以上温度灭菌物质，以达到杀灭芽胞的目的。常用于含糖、半乳糖、牛乳、血清等培养基胞的目的。常用于含糖、半乳糖、牛乳、血清等培养基的灭菌。的灭菌。(4)间歇灭菌法（反复多次流通蒸汽）17（5）高压蒸汽灭菌法）高压蒸汽灭菌法p高压蒸汽灭菌器：高压蒸汽灭菌器：1515磅（磅（0.105MPa0.105MPa），），/平方英寸，平方英寸，121.3121.3温度下维持温度下维持151520min 20min。p 应用此法灭菌，一定要充分排除灭菌器内应用此法灭菌，一定要充分排除灭菌器内原有的冷空气。用于普通培养基、生理盐原有的冷空气。用于普通培养基、生理盐水、耐热药品、手术敷料等。水、耐热药品、手术敷料等。（5）高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌器：15磅（0.105MPa18高压蒸汽灭菌器高压蒸汽灭菌器高压蒸汽灭菌器高压蒸汽灭菌器手提式手提式立式立式高压蒸汽灭菌器手提式立式19微生物消毒与灭菌课件20 二、辐二、辐 射灭菌法射灭菌法辐射是能量通过空间传递的一种物理现象。能量可辐射是能量通过空间传递的一种物理现象。能量可借波动或粒子高速运行而传播。用于灭菌的辐射可分借波动或粒子高速运行而传播。用于灭菌的辐射可分为两种。为两种。p电离辐射电离辐射、x x射线及高能中子、质子射线及高能中子、质子等。等。p非电离辐射可见光、日光、紫外线等。非电离辐射可见光、日光、紫外线等。p辐射的杀菌作用随波长的降低而增强。辐射的杀菌作用随波长的降低而增强。紫外、紫外、x x、杀菌增强杀菌增强 可见光、红外线作用弱可见光、红外线作用弱紫紫宇宙线宇宙线x可见可见红外红外无线电波无线电波二、辐射灭菌法辐射是能量通过空间传递的一种物理现象。21(一）非电离辐射一）非电离辐射1.1.可见光线可见光线p可可见见光光线线是是指指在在红红外外线线和和紫紫外外线线之之间间肉肉眼眼可可见见的的光光线线，其其波波长长400400800nm800nm。可可见见光光线线对对微微生生物物一一般般无无多多大大影影响响，但但长长时时间间作作用用也也能能妨妨碍碍微微生生物物的的新新陈陈代代谢谢与与繁繁殖殖，故故培培养细菌和保存菌种，均应置于阴暗之处。养细菌和保存菌种，均应置于阴暗之处。p光感作用光感作用（photosensitization）某些染料（结晶某些染料（结晶紫、美蓝、伊红、汞溴红、沙黄等）加入培养基中，能紫、美蓝、伊红、汞溴红、沙黄等）加入培养基中，能增强可见光的杀菌作用。增强可见光的杀菌作用。p光光感感作作用用原原生生动动物物、细细菌菌、病病毒毒、噬噬菌菌体体等等均均有有灭灭活活作作用用。G G菌菌对对光光感感作作用用比比G G菌菌敏敏感感，美美蓝蓝、伊伊红红、汞汞溴溴红因作用于红因作用于G G菌，而沙黄作用于菌，而沙黄作用于G G菌。菌。(一）非电离辐射1.可见光线可见光线是指在红外线和紫外线之222.2.阳光阳光p直射日光有强烈的杀菌作用，直射日光有强烈的杀菌作用，p日光是天然杀菌因素日光是天然杀菌因素 细菌日光直射细菌日光直射30min30min数小时死亡。数小时死亡。碳疽芽孢直射碳疽芽孢直射20h20h死亡死亡p影响日光杀菌的因素（烟尘、玻璃、有机物、影响日光杀菌的因素（烟尘、玻璃、有机物、空气中的水分、温度），日光的杀菌效力因空气中的水分、温度），日光的杀菌效力因地、因时及微生物所处环境不同而异地、因时及微生物所处环境不同而异 。2.阳光直射日光有强烈的杀菌作用，233.3.紫外线紫外线p杀菌原理波长为杀菌原理波长为100100400nm400nm，以，以254nm254nm杀菌力最强，杀菌力最强，短波紫外线灯为短波紫外线灯为253.7nm253.7nm。杀菌作用细菌杀菌作用细菌DNADNA对紫外线的吸收高峰在对紫外线的吸收高峰在265265266nm266nm之间，之间，O O2 2 O O3 3 O O 氧化能力强的氧氧化能力强的氧原子原子-杀菌杀菌 诱发变异使诱发变异使DNADNA分子结构改变而诱发变异（影响分子结构改变而诱发变异（影响核酸同链上的胸腺嘧啶共价键结合形成胸腺嘧啶二聚核酸同链上的胸腺嘧啶共价键结合形成胸腺嘧啶二聚体，从而干扰了体，从而干扰了DNADNA的复制和转录）的复制和转录）p方法紫外线灯照射杀菌方法紫外线灯照射杀菌p应用手术室、病房、无菌室、实验室消毒（应用手术室、病房、无菌室、实验室消毒（G G-、G G+）3.紫外线杀菌原理波长为100400nm，以254nm24p光复活现象：微生物经致死量的紫外线照射后，若在光复活现象：微生物经致死量的紫外线照射后，若在3h3h内在遇到可见光照射，部分微生物可以恢复其活力，内在遇到可见光照射，部分微生物可以恢复其活力，这种现象称之。这种现象称之。p影响因素时间、强度、距离（一般要求距地面影响因素时间、强度、距离（一般要求距地面2m2m，时间，时间1 12h2h，1W1Wm m2 2）p紫外线作用的特点：紫外线作用的特点：穿透力弱，只能用于房间空气、物体表面消毒；穿透力弱，只能用于房间空气、物体表面消毒；对眼睛角膜和皮肤有损伤作用对眼睛角膜和皮肤有损伤作用，工作人员切勿在，工作人员切勿在紫外线灯照射下进行操作。紫外线灯照射下进行操作。杀菌效果与照射时间，距离和强度有关；杀菌效果与照射时间，距离和强度有关；光复活现象：微生物经致死量的紫外线照射后，若在3h内在遇到可25(二）电离辐射二）电离辐射p具有较高的能量和穿透能力产生极强的致死效应。具有较高的能量和穿透能力产生极强的致死效应。射线：电离辐射强射线：电离辐射强 ，穿透力差（，穿透力差（缺乏穿透力，不缺乏穿透力，不实用）实用）射线：电离辐射强射线：电离辐射强 ，穿透力强穿透力强 射线：电离辐射弱，射线：电离辐射弱，穿透力强，仅有抑菌作用和穿透力强，仅有抑菌作用和微弱的杀菌作用。微弱的杀菌作用。X X射线：杀菌力不如紫外线，穿透力强射线：杀菌力不如紫外线，穿透力强(二）电离辐射具有较高的能量和穿透能力产生极强的致死效应。26p用途：忌热用途：忌热塑料制品塑料制品物品物品（注射器、试管、吸（注射器、试管、吸管等）管等）的灭菌消毒、食品保藏和育种等方面的灭菌消毒、食品保藏和育种等方面 p 杀菌机制：射线使水电离为杀菌机制：射线使水电离为H H和和OHOH，这些游，这些游离基是强烈的还原剂和氧化剂，可直接作用于离基是强烈的还原剂和氧化剂，可直接作用于细菌本身细菌本身 。用途：忌热塑料制品物品（注射器、试管、吸管等）的灭菌消毒、食27（三）红外线（三）红外线l利用红外线烤箱灭菌，红外线是波长为利用红外线烤箱灭菌，红外线是波长为0.77-1000m0.77-1000m的电磁波，尤以的电磁波，尤以1-10m1-10m波长波长的热效应最高。多用于医疗器械的灭菌的热效应最高。多用于医疗器械的灭菌（三）红外线利用红外线烤箱灭菌，红外线是波长为0.77-1028（四）微波（四）微波p从几百兆赫至几十万兆赫频率的无线电波称为微波。从几百兆赫至几十万兆赫频率的无线电波称为微波。p微波灭菌，主要是利用微波的加热作用完成。灭菌物微波灭菌，主要是利用微波的加热作用完成。灭菌物品放在微波照射的交变电场中时，物品内部的分子随品放在微波照射的交变电场中时，物品内部的分子随着电场的变化而相应的旋转振动起来，电场变化快，着电场的变化而相应的旋转振动起来，电场变化快，分子振动也就跟着快；由于分子间的相互作用力即产分子振动也就跟着快；由于分子间的相互作用力即产生摩擦力，因此分子克服其摩擦力而产生热量，使整生摩擦力，因此分子克服其摩擦力而产生热量，使整个物品则热起来，起到了摩擦加热灭菌的作用。这种个物品则热起来，起到了摩擦加热灭菌的作用。这种灭菌法，所需时间短、加热均匀是其显著的优点。灭菌法，所需时间短、加热均匀是其显著的优点。p主要用于陶瓷、耐热玻璃容器和塑料器皿，金属器皿主要用于陶瓷、耐热玻璃容器和塑料器皿，金属器皿忌用。忌用。（四）微波从几百兆赫至几十万兆赫频率的无线电波称为微波。29三、超声波杀菌法三、超声波杀菌法p频率在频率在2000020000200000Hz200000Hz声波称为超声波。声波称为超声波。p超声波虽可使菌体裂解死亡，但往往有残超声波虽可使菌体裂解死亡，但往往有残存者，又因超声波费用颇大，故未应用于存者，又因超声波费用颇大，故未应用于消毒灭菌。消毒灭菌。p目前主要用于裂解细胞，提取细胞组分，目前主要用于裂解细胞，提取细胞组分，研究其抗原、酶类、细胞壁的化学性质以研究其抗原、酶类、细胞壁的化学性质以及从组织内提取病毒等。及从组织内提取病毒等。三、超声波杀菌法频率在20000200000Hz声波称为超30p超声波主要通过四方面的作用达到杀菌目的：超声波主要通过四方面的作用达到杀菌目的：震荡：使微生物细胞内含物强烈震荡而被破坏震荡：使微生物细胞内含物强烈震荡而被破坏氧化杀菌：因在水溶液中超声波能产生过氧化氢氧化杀菌：因在水溶液中超声波能产生过氧化氢产生热效应：破坏细胞的酶系统；产生热效应：破坏细胞的酶系统；空（腔）化作用：即在液体中形成许多真空状态的空（腔）化作用：即在液体中形成许多真空状态的小空腔，空腔崩破产生的巨大压力使细胞裂解。小空腔，空腔崩破产生的巨大压力使细胞裂解。超声波主要通过四方面的作用达到杀菌目的：31四、过滤除菌法四、过滤除菌法p滤过除菌滤过除菌 :通过机械阻留作用将液体或空气中的细通过机械阻留作用将液体或空气中的细菌等微生物除去的方法。但滤过除菌常不能除去病菌等微生物除去的方法。但滤过除菌常不能除去病毒、霉形体以及细菌毒、霉形体以及细菌L L型等小颗粒。型等小颗粒。p应用：应用：细菌滤器不耐热物品的灭菌（如不耐高温的细菌滤器不耐热物品的灭菌（如不耐高温的营养液、血清、毒素、抗生素、营养液、血清、毒素、抗生素、V V、酶、维生素等）、酶、维生素等）空气除菌超净工作台；空气除菌超净工作台；SPFSPF动物的饲养；动物的饲养；GMPGMP厂房的洁净度（四级）厂房的洁净度（四级）四、过滤除菌法滤过除菌:通过机械阻留作用将液体或空气中的细32微生物消毒与灭菌课件33滤菌过程滤菌过程滤菌过程34微生物消毒与灭菌课件35五、干燥及低温抑菌法五、干燥及低温抑菌法1.1.干燥干燥p干燥可致微生物死亡干燥可致微生物死亡 干燥缺水生化反应受阻新陈代谢障碍干燥缺水生化反应受阻新陈代谢障碍死亡。甚至引起菌体蛋白质变性和由于盐类浓度的死亡。甚至引起菌体蛋白质变性和由于盐类浓度的增高而逐渐导致死亡。增高而逐渐导致死亡。p各种微生物对干燥的耐受性差异很大各种微生物对干燥的耐受性差异很大 巴氏杆菌、淋球菌、鼻疽杆菌几天巴氏杆菌、淋球菌、鼻疽杆菌几天 破伤风、碳疽芽孢几年、几十年破伤风、碳疽芽孢几年、几十年 霉菌孢子抵抗力很强霉菌孢子抵抗力很强p应用：主要用于菌种和食品的保藏。应用：主要用于菌种和食品的保藏。五、干燥及低温抑菌法1.干燥362.低温对微生物的影响低温对微生物的影响 细菌对寒冷的抵抗力较强。因此，低温不细菌对寒冷的抵抗力较强。因此，低温不能用于灭菌。能用于灭菌。(1)微生物对低温有较强的抵抗力：微生物对低温有较强的抵抗力：微生物微生物 低温低温 代谢活动降低，生长繁殖停代谢活动降低，生长繁殖停止，可长期维持生命止，可长期维持生命 T升高到适宜升高到适宜 苏醒苏醒生长繁殖生长繁殖2.低温对微生物的影响细菌对寒冷的抵抗力较强。因此，37低温常用于保存菌种。低温常用于保存菌种。但是，反复冻融对微生物但是，反复冻融对微生物不宜。不宜。各种细菌对低温的抵抗力亦不同。各种细菌对低温的抵抗力亦不同。（细菌、酵母菌、霉菌（细菌、酵母菌、霉菌0 044；病毒、某些细菌；病毒、某些细菌20207070，最好在液氮中（，最好在液氮中（196196）可长期保存；）可长期保存；但是巴氏杆菌、脑膜炎双球菌等低温敏感，低温比在但是巴氏杆菌、脑膜炎双球菌等低温敏感，低温比在室温中死亡更快。）室温中死亡更快。）冷冻保存食品冷冻保存食品细菌生长繁殖停止细菌生长繁殖停止应应 用用低温常用于保存菌种。但是，反复冻融对微生物不宜。各种细38（2 2）冷冻真空干燥法）冷冻真空干燥法 方法方法低温（低温（-40-40）迅速冻结，抽出空气，迅速冻结，抽出空气，真空状态下迅速脱水干燥真空状态下迅速脱水干燥可维持生命达数年可维持生命达数年加保护剂加保护剂脱脂奶粉或不含相应抗体的血浆或血脱脂奶粉或不含相应抗体的血浆或血清（清（10105050）注意事项注意事项细菌、真菌不宜长期冰冻保存细菌、真菌不宜长期冰冻保存尤尤其是反复冻融对任何微生物都有很大的破坏力。其是反复冻融对任何微生物都有很大的破坏力。（2）冷冻真空干燥法方法低温（-40）迅速冻39在低温状态下真空抽去水分在低温状态下真空抽去水分用途：保存菌种用途：保存菌种冷冻真空干燥法：冷冻真空干燥法：在低温状态下真空抽去水分用途：保存菌种冷冻真空干燥法：40冷冻干燥机冷冻干燥机冷冻干燥机41第二节第二节 化学消毒法化学消毒法防腐消毒剂：防腐消毒剂：许多化学药物能够抑制或杀死微生物，已广泛许多化学药物能够抑制或杀死微生物，已广泛用于消毒、防腐，统称为防腐消毒剂。消毒剂它在杀灭病用于消毒、防腐，统称为防腐消毒剂。消毒剂它在杀灭病原微生物的同时，对动物体的组织细胞也有损害作用。原微生物的同时，对动物体的组织细胞也有损害作用。消毒剂消毒剂（disinfectant）：用于杀灭物体上病原体的化学药：用于杀灭物体上病原体的化学药品品防腐剂防腐剂（antiseptic）：用于抑制微生物生长繁殖的化学药：用于抑制微生物生长繁殖的化学药品或称抑菌剂。品或称抑菌剂。消毒剂和防腐剂区别：无严格的界限消毒剂和防腐剂区别：无严格的界限第二节化学消毒法防腐消毒剂：许多化学药物能够抑制或杀死微生42p化学治疗剂：化学治疗剂：用于消除宿主体内病原微生物或其他用于消除宿主体内病原微生物或其他寄生虫的化学药物称为化学治疗剂。化学治疗剂对寄生虫的化学药物称为化学治疗剂。化学治疗剂对于宿主和病原微生物的作用具有选择性，它们使其于宿主和病原微生物的作用具有选择性，它们使其生命活动受到抑制或使其死亡，而对宿主细胞毒副生命活动受到抑制或使其死亡，而对宿主细胞毒副作用甚小。作用甚小。p消毒剂与治疗剂的区别：对宿主组织细胞的作用。消毒剂与治疗剂的区别：对宿主组织细胞的作用。消毒剂特点：在杀灭病原微生物的同时，对肌体消毒剂特点：在杀灭病原微生物的同时，对肌体的组织细胞也有损害作用。因此，只用于局部（少的组织细胞也有损害作用。因此，只用于局部（少数不被吸收可由于消化道）、器械、环境。数不被吸收可由于消化道）、器械、环境。治疗剂特点：治疗剂特点：对宿主和病原微生物作用有选择性，对宿主和病原微生物作用有选择性，对宿主细胞副作用很小。可全身用药对宿主细胞副作用很小。可全身用药化学治疗剂：用于消除宿主体内病原微生物或其他寄生虫的化学药物43一、消毒剂的种类及应用一、消毒剂的种类及应用一、消毒剂的种类及应用44(一一)常用消毒剂种类常用消毒剂种类种类繁多消毒目的、对象、特点进行选择种类繁多消毒目的、对象、特点进行选择酸类消毒剂酸类消毒剂碱类消毒剂碱类消毒剂其它消毒剂其它消毒剂H+OH-SH醇脱水醇脱水Hg(一)常用消毒剂种类种类繁多消毒目的、对象、特点进行选451 1、酸类消毒剂、酸类消毒剂无机酸（三大强酸）：具有腐蚀性。但硼酸腐蚀无机酸（三大强酸）：具有腐蚀性。但硼酸腐蚀性较小（杀菌力亦弱），常用性较小（杀菌力亦弱），常用1-2%1-2%硼酸用粘膜硼酸用粘膜消毒。消毒。有机酸：如甲酸，醋酸，乳酸等均有杀菌作用，有机酸：如甲酸，醋酸，乳酸等均有杀菌作用，常用乳酸水蒸气或溶液杀灭细菌或病毒。常用乳酸水蒸气或溶液杀灭细菌或病毒。1、酸类消毒剂无机酸（三大强酸）：具有腐蚀性。但硼酸腐蚀性较46 2 2、碱类消毒剂、碱类消毒剂 碱类消毒剂对所有细菌及芽胞和病毒都碱类消毒剂对所有细菌及芽胞和病毒都有杀灭作用。尤其常用于病毒的消毒：有杀灭作用。尤其常用于病毒的消毒：10-20%10-20%石灰乳石灰乳 20-30%20-30%草木灰水草木灰水 1-3%NaOH1-3%NaOH2、碱类消毒剂473 3、其它常用消毒剂、其它常用消毒剂0.1%0.1%升汞用于非金属器械消毒升汞用于非金属器械消毒0.1%KMnO0.1%KMnO4 4和和3%H3%H2 2O O2 2用于粘膜和创伤消毒用于粘膜和创伤消毒707075%75%乙醇用于体表和体温表的消毒乙醇用于体表和体温表的消毒1 13%3%碘液用于皮肤、粘膜消毒碘液用于皮肤、粘膜消毒5 510%10%碘液可杀灭放线菌碘液可杀灭放线菌3、其它常用消毒剂0.1%升汞用于非金属器械消毒480.20.20.5%0.5%过氧乙酸用于塑料、玻璃、人造纤维消毒及皮肤过氧乙酸用于塑料、玻璃、人造纤维消毒及皮肤消毒。消毒。3 35%5%酚、酚、3-5%3-5%来苏儿用于环境消毒或空气消毒。来苏儿用于环境消毒或空气消毒。甲醛杀菌力较强，常用于器械消毒。甲醛杀菌力较强，常用于器械消毒。40%40%甲醛溶液用于烈性甲醛溶液用于烈性传染病的消毒，传染病的消毒，4 410%10%甲醛溶液浸泡甲醛溶液浸泡30min30min可杀灭繁殖体及真菌。可杀灭繁殖体及真菌。20%20%甲醛溶甲醛溶液浸泡液浸泡6h6h以上，可杀灭芽胞体。消毒房间：以上，可杀灭芽胞体。消毒房间：151525ml25ml福尔福尔马林马林/m/m加等量水薰蒸或加入加等量水薰蒸或加入KMnOKMnO4 4。要求湿度。要求湿度60608080；KMnOKMnO4 421g21g（1515）甲醛）甲醛42ml42ml（3030），），24h24h。0.20.5%过氧乙酸用于塑料、玻璃、人造纤维消毒及皮肤消49（二）常用的消毒剂使用方法及常用浓度（二）常用的消毒剂使用方法及常用浓度类别类别作用原理作用原理消毒剂消毒剂名称名称方法与浓度方法与浓度酸酸与与碱碱以以H+、OH-的解离的解离作用妨碍菌体代作用妨碍菌体代谢，杀菌力与浓度谢，杀菌力与浓度成正比成正比醋酸醋酸乳酸乳酸烧碱烧碱生石灰生石灰草木灰草木灰510ml/m3加等量水蒸发，空间消毒。加等量水蒸发，空间消毒。蒸汽熏蒸或蒸汽熏蒸或2%溶液喷雾，用于空气消毒溶液喷雾，用于空气消毒2%5%的苛性钠溶液（的苛性钠溶液（6070）消）消毒毒厩舍、饲槽、用具、车辆等。厩舍、饲槽、用具、车辆等。用用10%乳剂消毒厩舍、运动场等。乳剂消毒厩舍、运动场等。用用10%草木灰水煮沸草木灰水煮沸2h，过滤，再加，过滤，再加24倍水，消毒厩舍、运动场等。倍水，消毒厩舍、运动场等。卤卤族族元元素素以氯化作用、氧化以氯化作用、氧化作用破坏作用破坏-SH基，基，使酶活性受到抑制使酶活性受到抑制产生杀菌效果产生杀菌效果漂白粉漂白粉碘酊碘酊用用5%20%的混悬液消毒畜禽舍、饲槽、的混悬液消毒畜禽舍、饲槽、车辆等；以车辆等；以0.30.4g/kg的剂量消毒的剂量消毒饮水。饮水。2%5%的碘酊用于手术部位、注射部位的碘酊用于手术部位、注射部位酚类酚类使菌体蛋白变性或使菌体蛋白变性或凝固凝固石炭酸石炭酸3%5%用于器械、排泄物消毒。用于器械、排泄物消毒。（二）常用的消毒剂使用方法及常用浓度类别作用原理消毒剂名称方50（二）常用的消毒剂使用方法及常用浓度（二）常用的消毒剂使用方法及常用浓度 续续醇醇类类使菌体蛋白变性沉使菌体蛋白变性沉淀淀乙醇乙醇用用70%75%的乙醇作皮肤消毒，也用的乙醇作皮肤消毒，也用于体温计、器械等消毒。于体温计、器械等消毒。醛醛类类能与菌体蛋白的氨能与菌体蛋白的氨基酸结合，起到还基酸结合，起到还原作用原作用福尔福尔马林马林1%5%甲醛溶液或福尔马林气体熏蒸甲醛溶液或福尔马林气体熏蒸法消毒畜舍、禽舍、孵化器等用具和皮法消毒畜舍、禽舍、孵化器等用具和皮毛等。毛等。重重金金属属盐盐类类能与菌体蛋白质能与菌体蛋白质（酶）的（酶）的-SH基结基结合，使其失去活性；合，使其失去活性；重金属离子易使菌重金属离子易使菌体蛋白变性体蛋白变性升汞升汞硫柳硫柳汞汞0.01%水溶液用于消毒手和皮肤；水溶液用于消毒手和皮肤；0.05%0.1%用于非金属器皿消毒。用于非金属器皿消毒。0.1%溶液可作皮肤消毒；溶液可作皮肤消毒；0.01%适于作适于作生物制品的防腐剂。生物制品的防腐剂。氧氧化化剂剂使菌体酶类发生氧使菌体酶类发生氧化而失去活性化而失去活性过氧过氧乙酸乙酸用用3%10%溶液熏蒸或喷雾，一般按每溶液熏蒸或喷雾，一般按每平方米空间平方米空间0.250.5ml用量，适于畜禽用量，适于畜禽舍空气消毒。舍空气消毒。烷烷化化剂剂能与菌体蛋白发生能与菌体蛋白发生烷化烷化环氧环氧乙烷乙烷在密闭条件下，每平方米用在密闭条件下，每平方米用700900mg,消毒消毒24h，适于皮毛、裘皮、电，适于皮毛、裘皮、电动和光学仪器及医用胶手套等消毒。动和光学仪器及医用胶手套等消毒。（二）常用的消毒剂使用方法及常用浓度续醇类使菌体蛋白变51（二）常用的消毒剂使用方法及常用浓度（二）常用的消毒剂使用方法及常用浓度 续续表表面面活活性性剂剂阳离子表面阳离子表面活性剂能改活性剂能改变细菌胞浆变细菌胞浆膜的通透膜的通透性，甚至使性，甚至使其崩解，使其崩解，使菌体内的物菌体内的物质外渗而产质外渗而产生杀菌作生杀菌作用；或以薄用；或以薄层包围胞浆层包围胞浆膜，干扰其膜，干扰其吸收作用吸收作用新洁尔灭新洁尔灭(溴苄烷溴苄烷铵铵)0.5%的水溶液用于皮肤和手的消毒；的水溶液用于皮肤和手的消毒；0.1%用于玻璃器皿、手术器械、橡用用于玻璃器皿、手术器械、橡用品的消毒；品的消毒；0.15%2%用于禽舍空喷用于禽舍空喷雾消毒；雾消毒；0.1%可用于种蛋消毒可用于种蛋消毒(40433min)。度米芬度米芬(消毒宁消毒宁)对污染的表面用对污染的表面用0.1%0.5%喷洒，作喷洒，作用用1060min；浸泡金属器械可在其中；浸泡金属器械可在其中加入加入0.5%亚硝酸钠防锈；亚硝酸钠防锈；0.05%溶液用溶液用于食品厂、奶牛场的设备、用具消毒。于食品厂、奶牛场的设备、用具消毒。洗必泰洗必泰（双氯苯（双氯苯双胍乙烷）双胍乙烷）0.02%水溶液可消毒手；水溶液可消毒手；0.05%溶液溶液冲洗创面，也可消毒禽舍、手术室、用冲洗创面，也可消毒禽舍、手术室、用具等；具等；0.1%用于手术器械的消毒、食用于手术器械的消毒、食品厂器具、设备的消毒。品厂器具、设备的消毒。消毒净消毒净0.05%0.1%水溶液用于皮肤和手的消水溶液用于皮肤和手的消毒，也可用于玻璃器皿、手术器械、橡毒，也可用于玻璃器皿、手术器械、橡胶用品等的消毒，一般浸泡胶用品等的消毒，一般浸泡10min即可即可（二）常用的消毒剂使用方法及常用浓度续阳离子表面新洁尔52（二）理想消毒剂的条件（二）理想消毒剂的条件 p种类很多，其杀菌作用亦不相同，一般可根据种类很多，其杀菌作用亦不相同，一般可根据用途与消毒剂特点选择使用。用途与消毒剂特点选择使用。p最理想的消毒剂应是杀菌力强、价格低、无腐最理想的消毒剂应是杀菌力强、价格低、无腐蚀性、能长期保存、对动物无毒性或毒性较蚀性、能长期保存、对动物无毒性或毒性较小、无残留或对环境无污染的化学药物。小、无残留或对环境无污染的化学药物。（二）理想消毒剂的条件种类很多，其杀菌作用亦不相同，一般可53（三）消毒剂的杀菌机制（三）消毒剂的杀菌机制复杂而多样，根据对菌体的作用大致可分为复杂而多样，根据对菌体的作用大致可分为:使菌体蛋白变性、凝固及水解。使菌体蛋白变性、凝固及水解。p药物与菌体蛋白质结合变性（金属离子药物与菌体蛋白质结合变性（金属离子、蛋、蛋白质白质）变性或沉淀）变性或沉淀-（金属盐、醇类）（金属盐、醇类）p与蛋白质的氨基酸结合蛋白质脱水凝固变形与蛋白质的氨基酸结合蛋白质脱水凝固变形（醛类）（醛类）p使菌体蛋白质水解中和蛋白质电荷使菌体蛋白质水解中和蛋白质电荷-破坏其胶破坏其胶体稳定性而沉淀（碱或酸类）体稳定性而沉淀（碱或酸类）p改变改变DNADNA分子结构染料类（结晶紫）分子结构染料类（结晶紫）（三）消毒剂的杀菌机制复杂而多样，根据对菌体的作用大致可分为54损伤胞浆膜损伤胞浆膜n降低菌细胞的表面张力，使胞浆膜通透性增加，菌体降低菌细胞的表面张力，使胞浆膜通透性增加，菌体破裂溶解。破裂溶解。n表面活性剂和酚（石炭酸、来苏儿、醇类等脂溶剂）表面活性剂和酚（石炭酸、来苏儿、醇类等脂溶剂）干扰细菌的酶系统和代谢干扰细菌的酶系统和代谢（与菌体内的酶类结合，影响细胞代谢或酶丧失活性）。（与菌体内的酶类结合，影响细胞代谢或酶丧失活性）。使酶蛋白中的使酶蛋白中的SHSH改变二硫键，使酶失去活性氧化改变二硫键，使酶失去活性氧化剂（剂（高锰酸钾、过氧化氢、碘酊、漂白粉）、金属盐类）、金属盐类（汞、银）（汞、银）损伤胞浆膜55改变核酸的功能改变核酸的功能 如：染料龙胆紫可嵌入菌细胞双股如：染料龙胆紫可嵌入菌细胞双股DNADNA邻近邻近碱基对中，改变碱基对中，改变DNADNA分子结构，使细菌生长分子结构，使细菌生长繁殖受到抑制或死亡。繁殖受到抑制或死亡。改变核酸的功能56二、影响消毒剂作用的因素二、影响消毒剂作用的因素消毒剂消毒剂种类种类浓度浓度作用时间作用时间细菌细菌菌龄菌龄种类种类 环境环境有机物有机物温度温度酸碱度酸碱度二、影响消毒剂作用的因素消毒剂种类浓度作用时间细菌菌龄种类57（一）影响消毒剂作用的因素（一）影响消毒剂作用的因素1.1.消毒剂的性质、浓度与作用时间消毒剂的性质、浓度与作用时间2.2.环境中的有机物的存在（对细菌有保护作用、与消环境中的有机物的存在（对细菌有保护作用、与消毒剂发生反应）毒剂发生反应）意义：意义：3.3.微生物的种类和特性广谱、交替微生物的种类和特性广谱、交替 （G+G+、繁殖体、幼龄菌）、繁殖体、幼龄菌）清创、清扫最好的预防药物清创、清扫最好的预防药物（一）影响消毒剂作用的因素1.消毒剂的性质、浓度与作用时间清584.4.温度与酸碱度的影响温度与酸碱度的影响温度：升高温度：升高18182020；石炭酸升高；石炭酸升高1010，杀菌效果提高，杀菌效果提高5 58 8倍倍PHPH值：一般为电离的分子较易通过值：一般为电离的分子较易通过C C膜，杀菌效果好。碱膜，杀菌效果好。碱性溶液中，阳离子去污剂杀菌力强；酸性溶液中，阴性溶液中，阳离子去污剂杀菌力强；酸性溶液中，阴离子去污剂杀菌力强。离子去污剂杀菌力强。例如戊二醛本身呈中性，其水溶液呈弱酸性，当加例如戊二醛本身呈中性，其水溶液呈弱酸性，当加入碳酸氢钠后才发挥杀菌作用。新洁尔灭的杀菌作用入碳酸氢钠后才发挥杀菌作用。新洁尔灭的杀菌作用是是pHpH愈低所需杀菌浓度愈高，如在愈低所需杀菌浓度愈高，如在pH3pH3时，其所需杀时，其所需杀菌浓度较菌浓度较pH9pH9时要高时要高1010倍左右。倍左右。4.温度与酸碱度的影响595.5.消毒剂的相互颉颃消毒剂的相互颉颃：阴离子清洁剂肥皂与阳离子清洁剂苯扎阴离子清洁剂肥皂与阳离子清洁剂苯扎溴铵共用溴铵共用6.6.影响消毒效果的其他因素影响消毒效果的其他因素还有湿度、穿透力、表面张力及颉抗物还有湿度、穿透力、表面张力及颉抗物质等。质等。5.消毒剂的相互颉颃：60第三节抗生素和细菌素的杀菌作用第三节抗生素和细菌素的杀菌作用 自然界中各种微生物之间，或是在微生自然界中各种微生物之间，或是在微生物与高等动植物之间，经常呈现相互影响的作用，物与高等动植物之间，经常呈现相互影响的作用，如寄生、共生和颉抗现象等。导致颉抗的物质基如寄生、共生和颉抗现象等。导致颉抗的物质基础是抗生素、细菌素等细菌的代谢产物。此外植础是抗生素、细菌素等细菌的代谢产物。此外植物中也存在杀菌物质如黄连素物中也存在杀菌物质如黄连素(小蘖碱小蘖碱)，噬菌体，噬菌体则是可杀灭细菌的活的微生物。则是可杀灭细菌的活的微生物。第三节抗生素和细菌素的杀菌作用自然界中611、抗生素、抗生素(antibiotics)l某些微生物在代谢过程中产生的一类能抑制或杀某些微生物在代谢过程中产生的一类能抑制或杀死另一些微生物的物质称为抗生素。死另一些微生物的物质称为抗生素。l主要来源主要来源:放线菌放线菌(如链霉菌如链霉菌)，少数来源于某些霉，少数来源于某些霉菌菌 (如青霉菌等如青霉菌等)和细菌和细菌 (如多黏菌素如多黏菌素)，有些亦，有些亦能用化学方法合成或半合成。到目前为止，已发能用化学方法合成或半合成。到目前为止，已发现的抗生素达现的抗生素达25002500多种，但其大多数对人和动物多种，但其大多数对人和动物有毒性，临床上最常用的抗生素只有几十种。有毒性，临床上最常用的抗生素只有几十种。1、抗生素(antibiotics)某些微生物在代谢过程62l抗生素的作用原理抗生素的作用原理 抑制细菌细胞壁的合成。如青霉素、头孢类抑制细菌细胞壁的合成。如青霉素、头孢类影响细菌细胞膜的通透性。多粘菌素、杆菌肽影响细菌细胞膜的通透性。多粘菌素、杆菌肽抑制菌体蛋白质的合成。如氯、四、糖苷类抑制菌体蛋白质的合成。如氯、四、糖苷类抑制细菌核酸合成。如灰黄霉素、利福平。抑制细菌核酸合成。如灰黄霉素、利福平。抗生素的作用原理抑制细菌细胞壁的合成。如青霉素、头孢类63微生物消毒与灭菌课件64药敏试验结果及观察药敏试验结果及观察药敏试验结果及观察652.2.细菌素细菌素（bacteriocin）p细菌素是某种细菌产生的一种具有杀菌作用的蛋白质。细菌素是某种细菌产生的一种具有杀菌作用的蛋白质。只能对同种细菌不同菌株产生作用。只能对同种细菌不同菌株产生作用。p作用：杀菌范围较窄，有一定的特异性只作用于作用：杀菌范围较窄，有一定的特异性只作用于同种菌株的细菌以及与它相近的细菌。同种菌株的细菌以及与它相近的细菌。p特点：作用类似抗生素。但不裂解菌体，也不能在菌特点：作用类似抗生素。但不裂解菌体，也不能在菌体内繁殖（不同噬菌体）。体内繁殖（不同噬菌体）。p种类：大肠杆菌素（某些大肠杆菌；志贺氏杆菌）；种类：大肠杆菌素（某些大肠杆菌；志贺氏杆菌）；弧菌素；绿脓杆菌素；葡萄球菌素弧菌素；绿脓杆菌素；葡萄球菌素2.细菌素（bacteriocin）细菌素是某种细菌产生的一663.3.植物杀菌素植物杀菌素(phytocidin)p植物杀菌素：某些植物中存在有杀菌物质，这种植物杀菌素：某些植物中存在有杀菌物质，这种杀菌物质一般称植物杀菌素。杀菌物质一般称植物杀菌素。p中草药：如黄连、黄柏、黄芩、大蒜、金银花、中草药：如黄连、黄柏、黄芩、大蒜、金银花、连翘、鱼腥草、穿心莲、马齿苋、板蓝根等都含连翘、鱼腥草、穿心莲、马齿苋、板蓝根等都含有杀菌物质，其中有的已制成注射液或其他制剂有杀菌物质，其中有的已制成注射液或其他制剂的药品。的药品。3.植物杀菌素(phytocidin)植物杀菌素：某些植物中67第四节第四节 兽医微生物实验室的生物安全兽医微生物实验室的生物安全第四节兽医微生物实验室的生物安全68一、生物安全的概念和一般要求一、生物安全的概念和一般要求实验室的生物安全有三层含义：实验室的生物安全有三层含义：p其一主要是指防止病原微生物等及其他有害生物或物其一主要是指防止病原微生物等及其他有害生物或物质传入实验室，此种生物安全英文称质传入实验室，此种生物安全英文称“biosecurity”p其二主要是指防止病原微生物等传出实验室，此种生其二主要是指防止病原微生物等传出实验室，此种生物安全英文为物安全英文为“biosafety”。p其三是指实验室人员的自身安全防护，其三是指实验室人员的自身安全防护，biosecurity及及biosafety都包括此义。都包括此义。一、生物安全的概念和一般要求实验室的生物安全有三层含义：69 兽医微生物实验室主要从事病原微生物的检兽医微生物实验室主要从事病原微生物的检验及相关研究，我国政府对必病原微生物实验验及相关研究，我国政府对必病原微生物实验室的生物安全颁布了管理条例室的生物安全颁布了管理条例(中华人民共和中华人民共和国国务院令第国国务院令第424424号，号，2004)2004)。参验照国外同行。参验照国外同行的经验，结合我国的有关规定，兽医微生物实的经验，结合我国的有关规定，兽医微生物实验室的安全要点主要包括以下几方面验室的安全要点主要包括以下几方面:兽医微生物实验室主要从事病原微生物的检验及相关70p生物安全的潜在危险在于处理临床样本，样本的气溶生物安全的潜在危险在于处理临床样本，样本的气溶胶往往最易污染实验室并造成人员舍感染。所有送检胶往往最易污染实验室并造成人员舍感染。所有送检样本都应视为有传染性并做相应处理。不允许用嘴吸样本都应视为有传染性并做相应处理。不允许用嘴吸取液体，应采用相应器械。取液体，应采用相应器械。p涉及有害物质的实验室的人员应具备防范生物危害的涉及有害物质的实验室的人员应具备防范生物危害的知识，人员的数量及流动应予控制。实验室人员必须知识，人员的数量及流动应予控制。实验室人员必须穿戴全套防护服，甚至面罩、防护眼镜等。这些用品穿戴全套防护服，甚至面罩、防护眼镜等。这些用品用后应做灭菌处理。要有良好的卫生习惯，尤其要注用后应做灭菌处理。要有良好的卫生习惯，尤其要注意洗手。实验室内不允许吃、喝、涂抹化妆品及装隐意洗手。实验室内不允许吃、喝、涂抹化妆品及装隐形眼镜。实验室工作人员必须接种有关疫苗。形眼镜。实验室工作人员必须接种有关疫苗。生物安全的潜在危险在于处理临床样本，样本的气溶胶往往最易污染71p对所有污染材料及水，包括样本、试验器材、动物等对所有污染材料及水，包括样本、试验器材、动物等必须规定明确的消毒程序，并予实施。推荐使用含氯必须规定明确的消毒程序，并予实施。推荐使用含氯5.25%5.25%的消毒剂或其他消毒剂。的消毒剂或其他消毒剂。p最主要的防护并非设施，而是工作人员本身，造成事最主要的防护并非设施，而是工作人员本身，造成事故的最常见原因主要是由于工作人员缺乏有关知识、故的最常见原因主要是由于工作人员缺乏有关知识、训练和粗心大意。训练和粗心大意。p只有经培训的人员才能处理动物，操作时动物应予麻只有经培训的人员才能处理动物，操作时动物应予麻醉或镇静，避免伤害人及动物。醉或镇静，避免伤害人及动物。p实验室中处理的微生物提取物，特别是实验室中处理的微生物提取物，特别是DNADNA，亦可造，亦可造成污染，必须注意。成污染，必须注意。对所有污染材料及水，包括样本、试验器材、动物等必须规定明确的72二、兽医微生物实验室的生物安全分类二、兽医微生物实验室的生物安全分类 凡涉及微生物及其提取物或基因工程产凡涉及微生物及其提取物或基因工程产物操作的实验室，根据对病原微生物不同种物操作的实验室，根据对病原微生物不同种类的生物安全要求，对实验室的设计、设施类的生物安全要求，对实验室的设计、设施也有所不同。目前国际公认的微生物实验室也有所不同。目前国际公认的微生物实验室分为生物安全分为生物安全(biosafetylevel，BSL)1 1至至4 4级。级。其中其中BSL-1BSL-1最低，最低，BSL-4BSL-4最高。最高。二、兽医微生物实验室的生物安全分类凡涉73pBSL-1BSL-1实验室实验室 可从事已知不会对健康成人造成危可从事已知不会对健康成人造成危害、但对实验室工作人员和环境可能有微弱危害害、但对实验室工作人员和环境可能有微弱危害的、有明确特征的微生物的实验工作。实验室与的、有明确特征的微生物的实验工作。实验室与建筑物中的一般通道不隔开，一般在实验台上操建筑物中的一般通道不隔开，一般在实验台上操作，不要求使用或经常使用专用封闭设备。作，不要求使用或经常使用专用封闭设备。BSL-1实验室可从事已知不会对健康成人造成危害、但对实74pBSL-2BSL-2实验室与实验室与BSL-1BSL-1相似，适用于那些对人及环境有中相似，适用于那些对人及环境有中度可能危害的微生物实验工作。度可能危害的微生物实验工作。l不同点不同点:工作人员要经过操作病原因子的专门培训，工作人员要经过操作病原因子的专门培训，由专业人员进行指导和管理由专业人员进行指导和管理;工作时限制外人进入实验室工作时限制外人进入实验室;某些产生传染性气溶胶或溅出物的工作要在生物安全柜或某些产生传染性气溶胶或溅出物的工作要在生物安全柜或其他封闭设备内进行其他封闭设备内进行;对污染的锐器采取高度防护措施。对污染的锐器采取高度防护措施。凡从事微生物基因的操作，均需在凡从事微生物基因的操作，均需在BSL-2BSL-2实验室进行。实验室进行。BSL-2实验室与BSL-1相似，适用于那些对人及环境有中度75微生物消毒与灭菌课件76pBSL-3BSL-3实验室实验室 供处理危险病原体使用，适用于可以供处理危险病原体使用，适用于可以通过吸人途径引起严重的或致死性疾病的病原体的通过吸人途径引起严重的或致死性疾病的病原体的实验工作，例如从事高致病性禽流感、口蹄疫和艾实验工作，例如从事高致病性禽流感、口蹄疫和艾滋病研究或检测的实验室。滋病研究或检测的实验室。BSL-3BSL-3实验室的实验人员在处理病原体方面要经专门实验室的实验人员在处理病原体方面要经专门培训，并由有关专家进行监督管理。传染性材料的培训，并由有关专家进行监督管理。传染性材料的所有操作均要在生物安全柜或其他物理防护设施内所有操作均要在生物安全柜或其他物理防护设施内进行，工作人员要穿适宜的防护服和装备。进行，工作人员要穿适宜的防护服和装备。BSL-3 BSL-3 实验室要经过专业的设计和建造。实验室要经过专业的设计和建造。BSL-3实验室供处理危险病原体使用，适用于可以通过吸人途77pBSL-4BSL-4实验室实验室 有造成气溶胶感染和危及生命的病原微生有造成气溶胶感染和危及生命的病原微生物，如埃波拉病毒、尼帕病毒等研究的实验室，必须达物，如埃波拉病毒、尼帕病毒等研究的实验室，必须达到到BSL-4BSL-4的安全水平。的安全水平。BSL-4BSL-4实验室对防止微生物扩散到实验室对防止微生物扩散到环境中有特殊的工程和设计要求。环境中有特殊的工程和设计要求。每一名实验室工作人员在处理病原微生物方面均要有特每一名实验室工作人员在处理病原微生物方面均要有特殊的和全面的培训；要具有法定资格的科学家监督管理。殊的和全面的培训；要具有法定资格的科学家监督管理。实验室主任要严格控制进入实验室的人员。实验室应是实验室主任要严格控制进入实验室的人员。实验室应是独立的建筑物或是建筑物内的隔离区。要实施特殊的实独立的建筑物或是建筑物内的隔离区。要实施特殊的实验室安全工作细则。验室安全工作细则。在此种实验室的工作区内，所有的工作都要限制在在此种实验室的工作区内，所有的工作都要限制在E E级级生物安全柜内或者是安全柜与一套由生命维持系统供气生物安全柜内或者是安全柜与一套由生命维持系统供气的正压个人工作服联合使用。的正压个人工作服联合使用。BSL-4实验室有造成气溶胶感染和危及生命的病原微生物，如78三、动物病原微生物的分类三、动物病原微生物的分类 根据病原微生物的传染性、感染人和根据病原微生物的传染性、感染人和(或或)动物的危害动物的危害程度，世界动物卫生组织程度，世界动物卫生组织(OIE)(OIE)将动物病原分为将动物病原分为1 1至至4 4类。类。其中其中1 1类动物病原为可导致地方性流行、但不列入官方控类动物病原为可导致地方性流行、但不列入官方控制计划的病原微生物。制计划的病原微生物。2 2类动物病原为外来的或导致地方类动物病原为外来的或导致地方性流行的、并列入官方控制计划但实验室扩散风险低的性流行的、并列入官方控制计划但实验室扩散风险低的致病微生物。致病微生物。3 3类动物病原为外来的或导致地方性流行的类动物病原为外来的或导致地方性流行的、并列入官方控制计划的、实验室释放有中等危险的病、并列入官方控制计划的、实验室释放有中等危险的病原微生物。原微生物。4 4类动物病原为外来的或导致地方性流行的、类动物病原为外来的或导致地方性流行的、并列入官方控制的、实验室释放存在高危险性的病原微并列入官方控制的、实验室释放存在高危险性的病原微生物。生物。三、动物病原微生物的分类根据病原微生物的传染79 我国农业部于我国农业部于2005年颁布了动物病原微年颁布了动物病原微生物分类名录，其中一类病原微生物危害生物分类名录，其中一类病原微生物危害最大，依此类推，四类最小。有少数寄生最大，依此类推，四类最小。有少数寄生虫也列在名单之中。虫也列在名单之中。我国农业部于2005年颁布了动物病原微生物分类80一类动物病原微生物一类动物病原微生物 口蹄疫病毒、高致病口蹄疫病毒、高致病性禽流感病毒、猪水瘤病病毒