2013高考生物第一轮复习 选修1 第3讲 植物的组织培养技术及dna和蛋白质技术教学ppt课件

选修一 生物技术实践生物第 3 讲植物的组织培养技术及DNA和蛋白质技术第 3 讲植物的组织培养技术及选修一 生物技术实践生物1菊花组织培养与月季花培养的比较菊花组织培养与月季花培养的比较 考点一：植物组织培养技术植物组织培养技术高频考点突破菊花菊花组织培养培养月季花月季花药培养培养相相同同点点原理原理细胞的全能性胞的全能性环节培养基配制方法、无菌技培养基配制方法、无菌技术及接种操作基及接种操作基本相同本相同条件条件受激素、受激素、pH、温度、光照等条件影响、温度、光照等条件影响1菊花组织培养与月季花培养的比较 考点一：植物组织培养技术选修一 生物技术实践生物不不同同点点选材材未开花植株的茎上部未开花植株的茎上部新萌生的新萌生的侧枝枝合适的花粉合适的花粉发育育时期期培养基培养基MS培养基培养基配方要求更配方要求更严格格流程流程制制备培养基培养基外植体外植体消毒消毒接种接种培养培养移栽移栽栽培栽培选材材消毒消毒接种接种培养培养鉴定和定和筛选移栽移栽不选材未开花植株的茎上部新萌生的侧枝合适的花粉培养基MS培养选修一 生物技术实践生物2.植物激素在组织培养过程中的重要作用植物激素在组织培养过程中的重要作用生生长素素和和细胞胞分分裂裂素素是是启启动细胞胞分分裂裂、脱脱分分化化和和再分化的关再分化的关键性激素，其作用及特点性激素，其作用及特点为：2.植物激素在组织培养过程中的重要作用选修一 生物技术实践生物激素使用激素使用实验结果果使用使用顺序序先生先生长素后素后细胞分裂素胞分裂素有利于有利于细胞分裂胞分裂先先细胞分裂素后胞分裂素后生生长素素细胞既分裂也分化胞既分裂也分化生生长素与素与细胞胞分裂素同分裂素同时使用使用分化分化频率提高率提高生生长素用素用量与量与细胞胞分裂素用分裂素用量的比例量的比例该比比值高高时利于根的分化，利于根的分化，抑制芽的形成抑制芽的形成该比比值低低时利于芽的分化，利于芽的分化，抑制根的形成抑制根的形成该比比值适中适中时促促进愈愈伤组织的生的生长激素使用实验结果使用先生长素后有利于细胞分裂先细胞分裂素后细选修一 生物技术实践生物3.MS培养基的成分及各成分作用培养基的成分及各成分作用 成分成分作用作用微量和大量元素微量和大量元素提供植物提供植物细胞生活所必需的无机胞生活所必需的无机盐蔗糖蔗糖提供碳源，提供碳源，维持持细胞渗透胞渗透压甘氨酸、甘氨酸、维生素、烟生素、烟酸、肌醇酸、肌醇满足离体植物足离体植物细胞在正常代胞在正常代谢途途径受一定影响后所径受一定影响后所产生的特殊生的特殊营养需求养需求3.MS培养基的成分及各成分作用 成分作用微量和大量元素提供选修一 生物技术实践生物【特别提醒】MS培养基与微生物培养基的区别：培养基与微生物培养基的区别：微微生生物物培培养养基基包包括括水水、无无机机盐盐、碳碳源源、氮氮源源和和生生长长因因子子，以以有有机机营营养养为为主主。MS培培养养基基则则需需提提供供大大量量的的无无机机营营养养，尤尤其其是是植植物物生生长长所所必必需需的的大大量量元元素素和和微微量量元元素。素。【特别提醒】选修一 生物技术实践生物【对位训练】1月月季季的的花花药药培培养养过过程程的的难难点点之之一一是是材材料料的的选选择择，下列有关材料选择的叙述中正确的是下列有关材料选择的叙述中正确的是A从花药来看，应当选择盛花期的花药从花药来看，应当选择盛花期的花药B从从花花粉粉来来看看，应应当当选选择择小小孢孢子子四四分分体体时时期期的的花花粉粉C从花蕾来看，应当选择略微开放的花蕾从花蕾来看，应当选择略微开放的花蕾D从从检检测测花花粉粉的的实实验验方方法法看看，应应该该用用显显微微镜镜观观察察已染色的花粉样品临时装片已染色的花粉样品临时装片【对位训练】选修一 生物技术实践生物解解析析本本题题考考查查了了花花药药培培养养中中有有关关材材料料的的选选取取方方法法。从从花花药药来来看看，应应当当选选择择初初花花期期的的花花药药；从从花花粉粉来来看看，应应当当选选择择单单核核期期的的花花粉粉；从从花花蕾蕾来来看看，应应当当选选择择完完全全未未开开放放的的花花蕾蕾。用用已已染染色色的的花花粉粉样样品品制制作作临临时时装装片片，才才能能观观察到细胞核的位置，以确定花粉发育的时期。察到细胞核的位置，以确定花粉发育的时期。答案答案D 解析本题考查了花药培养中有关材料的选取方法。从花药来看，应选修一 生物技术实践生物2(2012东东城城区区检检测测)下下图表表示示四四倍倍体体兰花花叶叶片片通通过植物植物组织培养形成植株的培养形成植株的过程，相关叙述正确的是程，相关叙述正确的是A和和过程会程会发生减数分裂生减数分裂B过程需生程需生长素而素而过程需程需细胞分裂素胞分裂素C过程有程有细胞增殖但无胞增殖但无细胞分化胞分化D此此兰花的花花的花药离体培养所得植株离体培养所得植株为二倍体二倍体2(2012东城区检测)下图表示四倍体兰花叶片通过植物组选修一 生物技术实践生物解解析析是是脱脱分分化化，是是再再分分化化，过过程程均均发发生生的的是是有有丝丝分分裂裂；过过程程需需要要生生长长素素和和细细胞胞分分裂裂素素的的共共同同调调节节；过过程程有有细细胞胞增增殖殖，但但没没有有发发生生细细胞胞分分化化；花药离体培养后得到的植株为单倍体。花药离体培养后得到的植株为单倍体。答案答案C 解析是脱分化，是再分化，过程均发生的是有丝分裂；选修一 生物技术实践生物1DNA与蛋白质在不同与蛋白质在不同NaCl溶液中溶解度不同溶液中溶解度不同考点二：DNA的粗提取和鉴定及的粗提取和鉴定及PCR技术技术2 molL1 NaCl溶液溶液0.14 molL1 NaCl溶液溶液溶解溶解规律律DNA溶解溶解析出析出蛋白蛋白质部分部分发生生盐析沉淀析沉淀溶解溶解NaCl溶液从溶液从2 molL1降低降低过程程中，溶解度逐中，溶解度逐渐增大增大1DNA与蛋白质在不同NaCl溶液中溶解度不同考点二：DN选修一 生物技术实践生物2.细胞内细胞内DNA复制与复制与PCR反应的比较反应的比较 比比较项目目体内复制体内复制PCR反反应解旋解旋在解旋在解旋酶酶作用下，作用下，细胞提供能量，双胞提供能量，双链部分解开部分解开加加热至至90，双，双链全部全部解开，不需解旋解开，不需解旋酶酶引物引物一小段一小段RNA可以是可以是RNA或或单链DNA分子片段分子片段合成子合成子链在引物基在引物基础上，一上，一条条链连续合成，另合成，另一条一条链分段合成分段合成分分别从两条从两条链的引物端的引物端开始，都是开始，都是连续合成，合成，控制温度控制温度722.细胞内DNA复制与PCR反应的比较 比较项目体内复制PC选修一 生物技术实践生物特点特点边解旋解旋边复制，半保复制，半保留复制留复制体外迅速体外迅速扩增增TaqDNA聚合聚合酶酶不需要不需要需要需要循循环次数次数受生物体自身控制受生物体自身控制30多次多次产物物完整完整DNADNA片段片段相同点相同点生物体内的生物体内的DNA复制和复制和PCR体外体外DNA扩增增都需要模板、四种脱氧核苷酸，且都需要在都需要模板、四种脱氧核苷酸，且都需要在一定的一定的缓冲溶液中冲溶液中进行行特点边解旋边复制，半保留复制体外迅速扩增TaqDNA聚合酶不选修一 生物技术实践生物3.PCR过程：过程：变性性当温度上升到当温度上升到90以上以上时，双，双链DNA解旋解旋为单链。复性复性温温度度下下降降到到50左左右右，两两种种引引物物通通过碱碱基基互互补配配对与与两条两条单链DNA结合。合。延伸延伸温温度度上上升升到到72左左右右，溶溶液液中中的的四四种种脱脱氧氧核核苷苷酸酸(A、T、C、G)在在DNA聚聚合合酶酶的的作作用用下下，根根据据碱碱基基互互补配配对原原则合合成成新的新的DNA链。3.PCR过程：选修一 生物技术实践生物4结果：结果：PCR一一般般要要经历三三十十多多次次循循环，每每次次循循环可可以分以分为变性、复性和延伸三步。性、复性和延伸三步。两两引引物物间固固定定长度度的的DNA序序列列呈呈指指数数扩增增(即即2n)。4结果：选修一 生物技术实践生物【对位训练】3在在“DNA的的粗粗提提取取与与鉴鉴定定”实实验验中中，将将提提取取获获得得的的DNA的黏稠物的黏稠物(还含有许多杂质还含有许多杂质)分别处理如下：分别处理如下：第第一一，放放入入0.14mol/L的的NaCl溶溶液液中中，搅搅拌拌后后过过滤滤，得滤液得滤液A和黏稠物和黏稠物a。第第二二，放放入入2mol/L的的NaCl溶溶液液中中，搅搅拌拌后后过过滤滤，得得滤液滤液B和黏稠物和黏稠物b。第第三三，放放入入冷冷却却的的95%的的酒酒精精溶溶液液中中，搅搅拌拌后后过过滤滤，得滤液得滤液C和黏稠物和黏稠物c。以以上上过过程程获获得得的的滤滤液液和和黏黏稠稠物物中中，因因含含DNA少少而而可可以丢弃的是以丢弃的是_。【对位训练】选修一 生物技术实践生物解解析析在在不不同同浓浓度度的的NaCl溶溶液液中中，DNA的的溶溶解解度度不不同同在在0.14mol/L的的NaCl溶溶液液中中DNA溶溶解解度度最最小小，DNA析析出出，呈呈丝丝状状物物，过过滤滤后后存存在在于于黏黏稠稠物物a中中；在在2 mol/L的的NaCl溶溶液液中中DNA溶溶解解度度最最大大，所所以以DNA溶溶解解，过过滤滤后后存存在在于于滤滤液液B中中；酒酒精精可可使使DNA分分子子凝凝集集，因因此此，在在冷冷却却的的95%的的酒酒精精溶溶液液中中DNA凝凝集集，呈呈丝丝状状物物，过过滤滤后存在于黏稠物后存在于黏稠物c中。中。答案答案A、b、C解析在不同浓度的NaCl溶液中，DNA的溶解度不同在0.1选修一 生物技术实践生物4PCR利利用用了了DNA热变性性的的原原理理，PCR仪实际上上也也是是一一种种能能自自动调控控温温度度的的仪器器，对PCR过程程中中“温温度度的的控控制制”的的下列下列说法法错误的是的是A酶酶促反促反应需要高的温度，是需要高的温度，是为了确保模板的了确保模板的单链B延伸的温度必延伸的温度必须大于复性温度，而小于大于复性温度，而小于变性温度性温度CDNA聚合聚合酶酶不能不能热变性，要用耐高温的聚合性，要用耐高温的聚合酶酶DDNA解旋解旋酶酶不能不能热变性，性，为了确保模板是了确保模板是单链4PCR利用了DNA热变性的原理，PCR仪实际上也是一种能选修一 生物技术实践生物解解析析PCR是是一一种种体体外外DNA扩扩增增技技术术。DNA双双链链的的解解开开不不需需要要解解旋旋酶酶，靠靠高高温温使使其其变变性性，双双螺螺旋旋结结构构解解体体，双双链链分分开开；复复性性前前，在在耐耐高高温温的的DNA聚聚合合酶酶的的作作用用下下根根据据碱碱基基互互补补配配对对原原则则合合成成新新的的DNA，因因此此延延伸伸的温度要大于复性温度，小于变性温度。的温度要大于复性温度，小于变性温度。答案答案D解析PCR是一种体外DNA扩增技术。DNA双链的解开不需要选修一 生物技术实践生物1一一般般步步骤骤：样样品品处处理理、粗粗分分离离、纯纯化化和和纯纯度鉴定。度鉴定。考点三：蛋白质的提取和分离蛋白质的提取和分离(以血红蛋白的提取和以血红蛋白的提取和分离为例分离为例)1一般步骤：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。考点三：蛋选修一 生物技术实践生物2样品处理样品处理(1)红细胞胞的的洗洗涤：洗洗涤红细胞胞的的目目的的是是去去除除杂蛋蛋白白，采采集集的的血血样要要及及时采采用用低低速速短短时间离离心心分分离离红细胞胞，然然后后用用胶胶头吸吸管管吸吸出出上上层透透明明的的黄黄色色血血浆，将将下下层暗暗红色色的的红细胞胞液液体体倒倒入入烧杯杯，再再加加入入五五倍倍体体积的的生生理理盐水水，缓慢慢搅拌拌10min，低低速速短短时间离离心心，如如此此重重复复洗洗涤三三次次，直直至至上上清清液液中没有黄色，表明中没有黄色，表明红细胞已洗胞已洗涤干干净。(2)血血红蛋蛋白白的的释放放：在在蒸蒸馏水水和和甲甲苯苯作作用用下下，红细胞胞破破裂裂释放放出出血血红蛋蛋白白。加加入入蒸蒸馏水水后后红细胞胞液液体体积与与原原血血液液体体积要要相相同同。加加入入甲甲苯苯的的目目的的是是溶溶解解细胞胞膜膜，有有利利于于血血红蛋蛋白的白的释放和分离。放和分离。2样品处理选修一 生物技术实践生物3粗分离粗分离(1)分分离离血血红蛋蛋白白溶溶液液：将将搅拌拌好好的的混混合合溶溶液液离离心心后后，试管管中中的的溶溶液液分分为4层。第第1层为无无色色透透明明的的甲甲苯苯层，第第2层为白白色色薄薄层固固体体，是是脂脂溶溶性性物物质的的沉沉淀淀层，第第3层是是红色色透透明明液液体体，这是是血血红蛋蛋白白的的水水溶溶液液，第第4层是是其其他他杂质的的暗暗红色色沉沉淀淀物物。将将试管管中中的的液液体体用用滤纸过滤，除除去去脂脂溶溶性性沉沉淀淀层，于分液漏斗中静置片刻后，分出下于分液漏斗中静置片刻后，分出下层的的红色透明液体。色透明液体。(2)透透析析：取取1 mL的的血血红蛋蛋白白溶溶液液装装入入透透析析袋袋中中，将将透透析析袋袋放放入入盛盛有有300 mL的的物物质的的量量浓度度为20 mmoL/L的的磷磷酸酸缓冲液中，透析冲液中，透析12h。透析可以去除。透析可以去除样品中分子量品中分子量较小的小的杂质。3粗分离选修一 生物技术实践生物4纯化：利用凝胶色谱柱可对血红蛋白进行纯化。纯化：利用凝胶色谱柱可对血红蛋白进行纯化。5纯度鉴定：使用最多的是纯度鉴定：使用最多的是SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。聚丙烯酰胺凝胶电泳。4纯化：利用凝胶色谱柱可对血红蛋白进行纯化。选修一 生物技术实践生物【对位训练】5(宁宁夏夏理理综综)已已知知蛋蛋白白质混混合合液液中中硫硫酸酸铵浓度度的的不不同同可可以以使使不不同同种种类的的蛋蛋白白质析析出出(或或沉沉淀淀)，随随着着硫硫酸酸铵浓度度增增加加，混混合合液液中中蛋蛋白白质析析出出的的种种类和和总量量增增加加。下下表表是是某某蛋蛋白白质混混合合液液中中的的不不同同蛋蛋白白质从从开开始始析析出出到到完完全全析析出出所所需要的蛋白需要的蛋白质混合液中的硫酸混合液中的硫酸铵浓度范度范围。蛋白蛋白质混合液中的混合液中的硫酸硫酸铵浓度度(%)析出的蛋白析出的蛋白质1520甲蛋白甲蛋白2330乙蛋白乙蛋白2535丙蛋白丙蛋白3840丁蛋白丁蛋白【对位训练】蛋白质混合液中的析出的蛋白质1520甲蛋白23选修一 生物技术实践生物请据表回答：据表回答：(1)若若只只完完全全析析出出甲甲蛋蛋白白，混混合合液液中中最最合合适适的的硫硫酸酸铵浓度度应为_。(2)向向该蛋蛋白白质混混合合液液中中加加入入硫硫酸酸铵溶溶液液(或或硫硫酸酸铵)，使使混混合合液液中中的的硫硫酸酸铵浓度度达达到到30%，会会析析出出若若干干种种蛋蛋白白质，它它们分分别是是_。(3)通通过改改变混混合合液液中中的的硫硫酸酸铵浓度度_(能能、不不能能)从从混混合合液液中中得得到到所所有有的的、不不含含有有其其他他蛋蛋白白质的的乙乙蛋蛋白白，原原因因是是_。请据表回答：选修一 生物技术实践生物(4)简要要写写出出从从该蛋蛋白白质混混合合液液中中分分离离出出全全部部丁丁蛋蛋白白的的实验设计思路。思路。(5)如如果果蛋蛋白白质析析出出物物中中还含含有有一一定定量量的的硫硫酸酸铵，可可用用半半透透膜膜除除去去析析出出物物中中的的硫硫酸酸铵。用用半半透透膜膜能能除除去去析析出出物物中中硫硫酸酸铵的原理是的原理是_。解解析析(1)从从表表中中可可以以看看出出，只只完完全全析析出出甲甲蛋蛋白白，混混合合液液中中最最合合适适的的硫硫酸酸铵铵浓浓度度为为20%。(2)表表中中信信息息反反映映混混合合液液中中的的硫硫酸酸铵铵浓浓度度达达到到30%，会会析析出出甲甲蛋蛋白白、乙乙蛋蛋白白、丙丙蛋蛋白白三三种种蛋蛋白白质质。(3)由由于于乙乙蛋蛋白白和和丙丙蛋蛋白白析析出出所所需需的的硫硫酸酸铵铵浓浓度度范范围围有有重重叠叠，因因此此改改变变混混合合液液中中的的硫硫酸酸铵铵浓浓度度，不不能能只只得得到到乙乙蛋白。蛋白。(4)简要写出从该蛋白质混合液中分离出全部丁蛋白的实验设计思选修一 生物技术实践生物答答案案(1)20%(2)甲甲蛋蛋白白、乙乙蛋蛋白白、丙丙蛋蛋白白(3)不不能能乙乙蛋蛋白白和和丙丙蛋蛋白白析析出出所所需需的的硫硫酸酸铵铵浓浓度度范范围围有有重重叠叠(4)向向该该蛋蛋白白质质混混合合液液中中加加入入硫硫酸酸铵铵溶溶液液(或或硫硫酸酸铵铵)，使使其其浓浓度度达达到到35%(或或35%硫硫酸酸铵铵浓浓度度38%范范围围内内的的任任意意一一个个浓浓度度)，分分离离析析出出物物与与溶溶液液，保保留留溶溶液液。取取保保留留溶溶液液，再再加加入入硫硫酸酸铵铵溶溶液液(或或硫硫酸酸铵铵)，使使硫硫酸酸铵铵在在溶溶液液中中的的浓浓度度达达到到40%(或或40%以以上上)，分分离离析析出出物物与与溶溶液液，析析出出物物即即为为丁丁蛋蛋白白。(5)半半透透膜膜是是一一种种选选择择性性透透过过膜膜，只只允允许许小小分分子子的的硫硫酸酸铵铵通通过过，不不允允许许大分子蛋白质通过大分子蛋白质通过 答案(1)20%(2)甲蛋白、乙蛋白、丙蛋白(3)不能选修一 生物技术实践生物【典例1】(2010安安徽徽理理综综)草草莓莓生生产上上传统的的繁繁殖殖方方式式易易将将所所感感染染的的病病毒毒传播播给后后代代，导致致产量量降降低低、品品质变差差。运运用用微微型型繁繁殖殖技技术可可以以培培育育出出无无病病毒毒幼幼苗苗。草草莓莓微微型型繁繁殖殖的的基本基本过程如下：程如下：答题技能培养方法体验一、植物组织培养技术【典例1】(2010安徽理综)草莓生产上传统的繁殖方式易将选修一 生物技术实践生物请回答：回答：(1)微微型型繁繁殖殖培培育育无无病病毒毒草草莓莓苗苗时，一一般般选取取_作作为外植体，其依据是外植体，其依据是_。(2)在在过程程中中，常常用用的的MS培培养养基基主主要要成成分分包包括括大大量量元元素素、微微量量元元素素和和_，在在配配制制好好的的培培养养基基中中，常常常常需需要要添添加加_，有有利利于于外外植植体体启启动细胞胞分分裂裂形形成成愈愈伤组织。接接种种后后25 d，若若发现外外植植体体边缘局局部部污染染，原原因因可可能能是是_。(3)在在过程程中中，愈愈伤组织在在诱导生生根根的的培培养养基基中中未未形形成根，但分化出了芽，其原因可能是成根，但分化出了芽，其原因可能是_。请回答：选修一 生物技术实践生物【解解析析】(1)因因茎茎尖尖(或或根根尖尖)病病毒毒极极少少，甚甚至至无无病病毒毒，所所以以常常用用其其作作为为外外植植体体培培育育无无病病毒毒植植株株。(2)在在植植物物组组织织培培养养的的培培养养基基中中，除除了了添添加加植植物物必必需需的的矿矿质质元元素素外外，还还要要添添加加有有机机物物，添添加加植植物物激激素素有有利利于于启启动动细细胞胞分分裂裂实实现现脱脱分分化化形形成成愈愈伤伤组组织织并并且且可可诱诱导导愈愈伤伤组组织织细细胞胞再再分分化化过过程程。若若对对外外植植体体消消毒毒不不彻彻底底，会会造造成成外外植植体体边边缘缘局局部部污污染染。(3)在在培培养养基基中中生生长长素素与与细细胞胞分分裂裂素素的的用用量量比比值值不不同同，诱诱导导生生根根发发芽芽结结果果不不同同，当比值低时，有利于发芽，比值高时，有利于生根。当比值低时，有利于发芽，比值高时，有利于生根。【解析】(1)因茎尖(或根尖)病毒极少，甚至无病毒，所以常选修一 生物技术实践生物【答答案案】(1)茎茎尖尖(或或根根尖尖)茎茎尖尖(或或根根尖尖)病病毒毒极极少少，甚甚至至无无病病毒毒(2)有有机机物物植植物物激激素素外外植植体体消消毒毒不不彻彻底底(3)培培养养基基中中生生长长素素类类物物质质用用量量与与细细胞胞分分裂裂素素类类物物质用量的比值偏低质用量的比值偏低【答案】(1)茎尖(或根尖)茎尖(或根尖)病毒极少，甚至选修一 生物技术实践生物【典例2】(2010江江苏苏生生物物)某某生生物物兴趣趣小小组开开展展DNA粗粗提取的相关探究活提取的相关探究活动，具体步，具体步骤如下：如下：材料材料处理：称取新理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各的花菜、辣椒和蒜黄各2份，份，每份每份10 g。剪碎后分成两。剪碎后分成两组，一，一组置置 于于20、另一、另一组置于置于20 条件下条件下 保存保存24 h。二、DNA的粗提取与鉴定【典例2】(2010江苏生物)某生物兴趣小组开展DNA粗提选修一 生物技术实践生物DNA粗提取：粗提取：第第一一步步：将将上上述述材材料料分分别放放入入研研钵中中，各各加加入入15 mL研磨液，充分研磨。用两研磨液，充分研磨。用两层纱布布过滤，取，取滤液液备用。用。第第二二步步：先先向向6只只小小烧杯杯中中分分别注注入入10 mL滤液液，再再加加入入20 mL体体积分分数数为95%的的冷冷酒酒精精溶溶液液，然然后后用用玻玻璃璃棒棒缓缓地向一个方向地向一个方向搅拌，使絮状物拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。在玻璃棒上。第第三三步步：取取6支支试管管，分分别加加入入等等量量的的2 mol/L NaCl溶溶液溶解上述絮状物。液溶解上述絮状物。DNA粗提取：选修一 生物技术实践生物DNA检测：在在上上述述试管管中中各各加加入入4 mL二二苯苯胺胺试剂，混混合合均均匀匀后后，置置于于沸沸水水中中加加热5 min，待待试管管冷冷却却后后比比较溶溶液液的的颜色深浅，色深浅，结果如下表：果如下表：(注：注：“”越多表示越多表示蓝色越深色越深)材料保存温度材料保存温度花菜花菜辣椒辣椒蒜黄蒜黄20 20 DNA检测：在上述试管中各加入4 mL二苯胺试剂，混合均匀后选修一 生物技术实践生物分析上述分析上述实验过程，回答下列程，回答下列问题：(1)该探究性探究性实验课题名称是名称是_。(2)第二步中第二步中“缓缓地地”搅拌，拌，这是是为了减少了减少_。(3)根据根据实验结果，得出果，得出结论并分析。并分析。结论1：与与20相相比比，相相同同实验材材料料在在20条条件件下下保存，保存，DNA的提取量的提取量较多。多。结论2：_。针对结论1，请提出合理的解提出合理的解释：_。(4)氯仿仿密密度度大大于于水水，能能使使蛋蛋白白质变性性沉沉淀淀，与与水水和和DNA均均不不相相溶溶，且且对DNA影影响响极极小小。为了了进一一步步提提高高DNA纯度度，依依据据氯仿仿的的特特性性，在在DNA粗粗提提取取第第三三步步的的基基础上上继续操操作作的的步步骤是是：_，然然后后用用体体积分分数数为95%的的冷冷酒酒精精溶液使溶液使DNA析出。析出。分析上述实验过程，回答下列问题：选修一 生物技术实践生物【解解析析】(1)该该实实验验中中把把不不同同的的材材料料在在不不同同条条件件(温温度度)下下处处理理，目目的的是是探探究究不不同同材材料料和和不不同同保保存存温温度度对对DNA提提取取量量的的影影响响。(2)“缓缓缓缓地地”搅搅拌拌是是为为了了减减少少DNA断断裂裂。(3)分分析析表表格格可可得得出出结结论论：相相同同材材料料在在20 条条件件下下保保存存，DNA的的提提取取量量较较多多。原原因因可可能能是是低低温温抑抑制制了了DNA酶酶的的活活性性，DNA降降解解速速度度慢慢。等等质质量量的的不不同同实实验验材材料料，在在相相同同保保存存温温度度下下，从从蒜蒜黄黄中中提提取取的的DNA最最多多。(4)依依据据氯氯仿仿的的特特性性，可可在在第第三三步步得到的溶液中加入氯仿；使蛋白质变性。得到的溶液中加入氯仿；使蛋白质变性。【解析】(1)该实验中把不同的材料在不同条件(温度)下处理选修一 生物技术实践生物【答答案案】(1)探探究究不不同同材材料料和和不不同同保保存存温温度度对对DNA提提取取量量的的影影响响(2)DNA断断裂裂(3)等等质质量量的的不不同同实实验验材材料料，在在相相同同的的保保存存温温度度下下，从从蒜蒜黄黄提提取取的的DNA量量最最多多低低温温抑抑制制了了相相关关酶酶的的活活性性，DNA降降解解速速度度慢慢(4)将将第第三三步步获获得得的的溶溶液液与与等等量量的的氯氯仿仿充充分分混混合合，静静置置一一段时间，吸取上清液段时间，吸取上清液【答案】(1)探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影选修一 生物技术实践生物【典例1】下列有关花药离体培养，说法错误的是下列有关花药离体培养，说法错误的是A对对材材料料的的选选择择最最常常用用的的方方法法是是焙焙花花青青铬铬矾矾法法，这这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色B材材料料消消毒毒时时需需先先用用酒酒精精浸浸泡泡，然然后后用用氯氯化化汞汞或或次次氯氯酸酸钙溶液浸泡，最后用无菌水冲洗钙溶液浸泡，最后用无菌水冲洗C接接种种花花药药后后一一段段时时间间内内不不需需要要光光照照，但但幼幼小小植植株株形形成成后需要光照后需要光照D若若接接种种的的花花药药长长出出愈愈伤伤组组织织或或形形成成胚胚状状体体后后，要要适适时时转换培养基，以便进一步分化成再生植株转换培养基，以便进一步分化成再生植株 易误警示一、植物组织培养实验操作中易误的几个问题【典例1】下列有关花药离体培养，说法错误的是易误警示一、植物选修一 生物技术实践生物【解解析析】确确定定花花粉粉发发育育的的时时期期最最常常用用的的方方法法是是醋醋酸酸洋洋红法，有些植物细胞核不易着色时，需采用焙花青红法，有些植物细胞核不易着色时，需采用焙花青铬矾法。铬矾法。(1)材材料料的的选选取取：菊菊花花的的组组织织培培养养实实验验中中，应应选选择择未未开开花花植植株株的的茎茎上上部部新新萌萌生生的的侧侧枝枝；月月季季花花药药的的培培养养实实验验中中，应应选选择择花粉发育过程中的单核靠边期的花粉进行培养。花粉发育过程中的单核靠边期的花粉进行培养。(2)外外植植体体消消毒毒：所所用用消消毒毒剂剂为为体体积积分分数数为为70%的的酒酒精精和和质量分数为质量分数为0.1%的氯化汞溶液，所使用的清洗液是无菌水。的氯化汞溶液，所使用的清洗液是无菌水。(3)培培养养过过程程：在在初初期期，菊菊花花的的组组织织培培养养需需光光照照，月月季季花花药的培养不需光照；而在后期均需光照。药的培养不需光照；而在后期均需光照。【答案答案】A【解析】确定花粉发育的时期最常用的方法是醋酸洋红法，有些植选修一 生物技术实践生物【典例2】(2012南南京京模模拟拟)下下列列关关于于DNA和和血血红蛋蛋白白的的提提取与分离取与分离实验的叙述中，的叙述中，错误的是的是A可可用用蒸蒸馏水水涨破破细胞胞的的方方法法从从猪猪的的红细胞胞中中提提取取到到DNA和蛋白和蛋白质B用用不不同同浓度度的的NaCl溶溶液液反反复复溶溶解解与与析析出出DNA可可除除去去部分部分杂质C透析法分离蛋白透析法分离蛋白质的依据是蛋白的依据是蛋白质不能通不能通过半透膜半透膜D进一一步步分分离离与与纯化化血血红蛋蛋白白时可可用用凝凝胶胶色色谱法法、离离心心法和法和电泳法等泳法等二、对DNA粗提取与血红蛋白提取易于混淆【典例2】(2012南京模拟)下列关于DNA和血红蛋白的提选修一 生物技术实践生物【解解析析】猪猪是是哺哺乳乳动动物物，哺哺乳乳动动物物成成熟熟的的红红细细胞胞中无细胞核和线粒体，不能从其红细胞中提取出中无细胞核和线粒体，不能从其红细胞中提取出DNA。【答案答案】A【解析】猪是哺乳动物，哺乳动物成熟的红细胞中无细胞核和线粒选修一 生物技术实践生物【纠错笔记】提取物质提取物质DNA血红蛋白血红蛋白提取方法提取方法盐析法盐析法凝胶色谱法、电泳法凝胶色谱法、电泳法提取提取原理原理DNA在不同浓度的在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同溶液中溶解度不同DNA不溶于酒精，但某不溶于酒精，但某些蛋白质则溶于酒精些蛋白质则溶于酒精根据相对分子质量根据相对分子质量的大小的大小各种分子带电性质各种分子带电性质差异差异步骤步骤溶解在溶解在2 mol/L的的NaCl溶液中溶液中加水稀释至加水稀释至0.14 mol/L NaCl溶液使溶液使DNA析出过析出过滤滤加入冷却酒精析出加入冷却酒精析出样品处理样品处理粗提取粗提取纯化纯化纯度鉴定纯度鉴定【纠错笔记】提取物质DNA血红蛋白提取方法盐析法凝胶色谱法、