动物细胞工程课件

2.2 2.2 动物细胞工程动物细胞工程1谢谢观赏2019-6-252.2 动物细胞工程1谢谢观赏2019-6-25动物细胞培养动物细胞培养动物细胞融合动物细胞融合生产单克隆抗体生产单克隆抗体核移植技术核移植技术动物动物细胞细胞工程工程技术技术其他动物细胞工其他动物细胞工程技术的基础程技术的基础2谢谢观赏2019-6-25动物细胞培养动物细胞融合生产单克隆抗体核移植技术动物细胞工程 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术动物细胞培养和核移植技术3谢谢观赏2019-6-25 2.2.1 动物细胞培养和核移植技术3谢谢观赏20动物细胞培养技术动物细胞培养技术 （一）、（一）、概念概念 是指从动物机体内取出相关的组织，将是指从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。让这些细胞生长和增殖。（二）、过程过程4谢谢观赏2019-6-25动物细胞培养技术（一）、概念（二）、过程4谢谢观赏2转入培养液中转入培养液中进行原代培养进行原代培养5谢谢观赏2019-6-25转入培养液中进行原代培养5谢谢观赏2019-6-25相关的概念：相关的概念：1 1 细胞贴壁：细胞贴壁：悬液中分散的细胞贴附在瓶壁上生长的特点悬液中分散的细胞贴附在瓶壁上生长的特点 2 2 接触抑制：接触抑制：贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖的现象停止分裂增殖的现象 3 3 原代培养：原代培养：人们通常将动物组织消化后的初次培养。人们通常将动物组织消化后的初次培养。6谢谢观赏2019-6-25相关的概念：6谢谢观赏2019-6-25归纳：归纳：取取 的组织、器官的组织、器官细胞悬浮液细胞悬浮液 酶酶 贴满瓶壁的细胞贴满瓶壁的细胞单个细胞单个细胞动物胚胎或幼龄动物动物胚胎或幼龄动物胰蛋白胰蛋白加入培养液培养加入培养液培养 传代培养传代培养原代培养原代培养7谢谢观赏2019-6-25归纳：取 的组织、器官思考题：思考题：1 1、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？做动物细胞培养材料？2 2、为什么培养前要将组织细胞分散成单个、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？细胞？因为这些组织或器官，分裂能力旺盛，易于培养。因为这些组织或器官，分裂能力旺盛，易于培养。成块组织使细胞靠在一起限制了细胞的生长和增殖，成块组织使细胞靠在一起限制了细胞的生长和增殖，且细胞不能与培养液充分接触，不利于培养。且细胞不能与培养液充分接触，不利于培养。8谢谢观赏2019-6-25思考题：1、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细3、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？的物质是什么成份？催化蛋白质水解。细胞间的物质主要是蛋白质催化蛋白质水解。细胞间的物质主要是蛋白质(胶原蛋白等胶原蛋白等)。4、细胞膜的主要成份是什么？、细胞膜的主要成份是什么？蛋白质和磷脂蛋白质和磷脂5、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？、胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？能能9谢谢观赏2019-6-253、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份6 6、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？织分散成单个细胞要注意什么问题呢？7 7、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么、能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？为什么？注意时间的控制注意时间的控制 不能，因为两者的最适不能，因为两者的最适PHPH不同，而正常组织细胞的不同，而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适生存环境与胰蛋白酶的最适PHPH较接近较接近10谢谢观赏2019-6-256、既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要1 1、无菌、无毒的环境、无菌、无毒的环境 保证细胞保证细胞顺利的生顺利的生长增殖长增殖（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）添加一定量的抗生素，定期更换培养液）（葡萄糖、氨基酸、促生长因子（葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量无机盐、微量元素元素、维生素、动物血清等。）维生素、动物血清等。）（四）、动物细胞培养的条件（四）、动物细胞培养的条件2 2、营养、营养11谢谢观赏2019-6-251、无菌、无毒的环境保证细胞顺利的生长增殖（添加一定量的抗生3 3、温度和、温度和PHPH 哺乳动物：哺乳动物：36.5 0.5,36.5 0.5,多数细胞多数细胞PH:7.27.4PH:7.27.4 培养箱中提供培养箱中提供O O2 2和和COCO2 2（95%95%空气和空气和5%CO5%CO2 2 ）4、气体环境：、气体环境：12谢谢观赏2019-6-253、温度和PH哺乳动物：36.5 0.5,培养箱中细胞的全能性细胞的全能性大量的细胞大量的细胞植物体或组织植物体或组织培养结果培养结果葡萄糖、动物血清葡萄糖、动物血清蔗糖、植物激素蔗糖、植物激素培养基特有成分培养基特有成分液体培养基液体培养基固体培养基固体培养基培养基性质培养基性质细胞增殖细胞增殖原理原理动物细胞培养动物细胞培养植物组织培养植物组织培养比较项目比较项目植物组织培养和动物细胞培养的比较植物组织培养和动物细胞培养的比较13谢谢观赏2019-6-25细胞的全能性大量的细胞植物体或组织培养结果葡萄糖、动物血清蔗 1 1、许多有重要价值的蛋白质生物制品，如病毒疫苗、许多有重要价值的蛋白质生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等，都可以借助于动物细胞的大干扰素、单克隆抗体等，都可以借助于动物细胞的大规模培养来生产。规模培养来生产。2 2、用取自烧伤病人皮肤的健康细胞进行培养，可以获、用取自烧伤病人皮肤的健康细胞进行培养，可以获得大量自身的皮肤细胞，为大面积烧伤的病人移植。得大量自身的皮肤细胞，为大面积烧伤的病人移植。3 3、培养的动物细胞用于检测有毒物质。、培养的动物细胞用于检测有毒物质。4 4、医学家培养各种正常的或病变的细胞，用于生理、医学家培养各种正常的或病变的细胞，用于生理、病理、药理等方面的研究。病理、药理等方面的研究。（五）、动物细胞培养技术的应用（五）、动物细胞培养技术的应用14谢谢观赏2019-6-25 1、许多有重要价值的蛋白质生物制品，如病毒疫苗、干扰素、15谢谢观赏2019-6-2515谢谢观赏2019-6-25（一）、概念：（一）、概念：将动物的一个细胞的细胞核将动物的一个细胞的细胞核,移如入一个已经去核移如入一个已经去核的卵母细胞中的卵母细胞中.使其重组并发育成一个新的胚胎使其重组并发育成一个新的胚胎,这这个新的胚胎最终发育为动物个体个新的胚胎最终发育为动物个体.克隆动物：用核移植的方法得到的动物。克隆动物：用核移植的方法得到的动物。动物细胞核移植动物细胞核移植16谢谢观赏2019-6-25（一）、概念：将动物的一个细胞的细胞核,移如入一个已经去核（二）、分类：（二）、分类：胚胎细胞核移植胚胎细胞核移植：体细胞核移植体细胞核移植：细胞分化程度低，恢复细胞分化程度低，恢复全能性容易全能性容易 细胞分化程度高，恢复细胞分化程度高，恢复全能性困难全能性困难17谢谢观赏2019-6-25（二）、分类：胚胎细胞核移植：体细胞核移植：细胞分化程度低，体细胞的核移植过程体细胞的核移植过程18谢谢观赏2019-6-25体细胞的核移植过程18谢谢观赏2019-6-25（四）、体细胞核移植技术的应用前景（四）、体细胞核移植技术的应用前景 1、在畜牧业中可以加速家畜遗传改良的进程，促进、在畜牧业中可以加速家畜遗传改良的进程，促进优良畜群繁育。优良畜群繁育。2、保护濒危物种、保护濒危物种3、转基因克隆动物可、转基因克隆动物可以作为生物反应器来以作为生物反应器来生产医用蛋白质，另生产医用蛋白质，另外还可以作为组织器外还可以作为组织器官的移植的供体官的移植的供体19谢谢观赏2019-6-25（四）、体细胞核移植技术的应用前景 1、在畜牧业中可以加速家（五）、体细胞核移植技术存在的问题（五）、体细胞核移植技术存在的问题 1、成功率底下。、成功率底下。2、绝大多数的克隆动物存在着畸形率高、死亡率、绝大多数的克隆动物存在着畸形率高、死亡率高、易出现早衰等问题。高、易出现早衰等问题。3、克隆动物的食品安全性问题存在着争议。、克隆动物的食品安全性问题存在着争议。20谢谢观赏2019-6-25（五）、体细胞核移植技术存在的问题 1、成功率底下。20谢谢 2 2、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是细胞是 （）A A获得不死性的细胞获得不死性的细胞 B B1010代以内细胞代以内细胞 C C原代细胞原代细胞 D D传代细胞传代细胞1 1、动物细胞工程技术的基础是、动物细胞工程技术的基础是 （）A.A.动物细胞融合动物细胞融合 B.B.单克隆抗体单克隆抗体 C.C.胚胎移植胚胎移植 D.D.动物细胞培养动物细胞培养A AD D课堂反馈练习课堂反馈练习21谢谢观赏2019-6-25 2、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是 3 3、在动物细胞培养的有关叙述中正确的是：（、在动物细胞培养的有关叙述中正确的是：（）A A、动物细胞培养的目的只是为了获得大量的细胞、动物细胞培养的目的只是为了获得大量的细胞 分泌蛋白分泌蛋白B B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散C C、细胞的癌变发生在原代培养向传代培养的过渡、细胞的癌变发生在原代培养向传代培养的过渡 过程中过程中D D、培养至、培养至5050代后传代细胞遗传物质没有发生改变代后传代细胞遗传物质没有发生改变B B22谢谢观赏2019-6-253、在动物细胞培养的有关叙述中正确的是：（）B224 4、一般说来，动物细胞体外培养需要满足以下条件（、一般说来，动物细胞体外培养需要满足以下条件（）无毒的环境无毒的环境 无菌的环境无菌的环境 培养基需要加入血培养基需要加入血清清 温度与动物体温相似温度与动物体温相似 需要需要O O2 2，不需要，不需要COCO2 2 COCO2 2能调节培养液能调节培养液PHPHA A、B B、C C、D D、D D23谢谢观赏2019-6-254、一般说来，动物细胞体外培养需要满足以下条件（）无毒5 5、下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据、下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答：此回答：（1 1）容器）容器A A中放置的是动物器官或组织。它一中放置的是动物器官或组织。它一般取自般取自_。（2 2）容器）容器A A中的动物器官或组织首先要进行的中的动物器官或组织首先要进行的处理是处理是 ，然后用，然后用 酶处理，酶处理，这是为了使细胞分散开来，这样做的目的是这是为了使细胞分散开来，这样做的目的是 。动物胚胎或幼龄动物动物胚胎或幼龄动物剪碎剪碎胰蛋白胰蛋白使细胞与培养液充分接触，便于培养使细胞与培养液充分接触，便于培养24谢谢观赏2019-6-255、下图是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答：动物胚胎25谢谢观赏2019-6-2525谢谢观赏2019-6-25