基因分析仪的使用与应用毛细管电泳带电悬浮颗粒或大分子在一定课件

310基因分析仪的使用与应用基因分析仪的使用与应用310基因分析仪的使用与应用1毛细管毛细管电泳电泳v带电悬浮颗粒或大分子在一定介质中因电场作用电场作用而发生移位运动的物理化学现象。v 颗粒或大分子的迁移速率迁移速率取决于电电势差、颗粒带电量势差、颗粒带电量和颗粒大小、形状。颗粒大小、形状。v1937年瑞典化学家Tiselius蒂塞利乌斯运用电泳成功分离血清蛋白，获得1948年诺贝尔化学奖，开创了电泳技术的新纪元。毛细管电泳2vv毛细管电泳（毛细管电泳（CE）以毛细管为分离通道，高压直流电场为驱动力的新型液相分析技术。可将有生物化学意义的复杂化合物在不改变不改变不改变不改变其性质其性质其性质其性质的前提下进行分离应用：蛋白质分离、糖分析、DNA测序、手性分离、单细胞分离。毛细管电泳（CE）3毛细管电泳（毛细管电泳（CE）分离）分离vv开始阶段，样品开始阶段，样品自由迁移自由迁移，位置由速，位置由速度决定度决定vv组分分开后，位置由组分分开后，位置由介质性质介质性质决定决定毛细管电泳（CE）分离4自由迁移组分沿毛细管轴的速度V一定时间t所迁移距离L定长分离：固定位置安装检测器记录分子通过该位置的情况(tR)，可得图形信号电泳谱图自由迁移组分沿毛细管轴的速度V定长分离：固定位置安装检测器记5电泳介质不连续介质不连续介质：由前导(TE)终末(TE）电解质组成。各组分分开形成的区带按速度大小排列，区带与LE，TE都以等速前进。连续介质连续介质：区带相互分开，以各自速度独立迁移.PH梯度梯度：弱解离样品变速迁移按平均速度分析。两性样品在PHPI（等电点）位置，没有净电荷，不受电场作用.分离区带停止在各自对应的等电点位置上。电泳介质不连续介质：由前导(TE)终末(TE）电解质组成。6毛细管电泳仪基本结构图毛细管电泳仪基本结构图 毛细管电泳仪基本结构图 71 仪器原理简介仪器原理简介v毛细管凝胶电泳毛细管凝胶电泳v四色荧光标记四色荧光标记v两大软件模块两大软件模块 Sequncing Gene Scan1 仪器原理简介毛细管凝胶电泳8310 DNA 测序仪原理简图测序仪原理简图310 DNA 测序仪原理简图9基因序列测定基因序列测定基因序列测定10基因扫描分析基因扫描分析基因扫描分析11主主 要要 特特 点点v1.分辨率分辨率v2.灵敏度灵敏度v3.高效性，高信息含量高效性，高信息含量v4.自动化自动化:灌胶、进样、数据收集灌胶、进样、数据收集主 要 特 点1.分辨率122 仪器使用仪器使用v注意室温恒定注意室温恒定2052 仪器使用注意室温恒定205133 应用范围应用范围v1.基因测序基因测序v未知序列未知序列v序列比较序列比较v真菌细菌鉴定分型的真菌细菌鉴定分型的 rRNA测序测序v器官移植配型分析的器官移植配型分析的HLA基因测序基因测序vHIV病毒突变检测病毒突变检测v2.SNP分型分型 77,000个个SNP位点位点3 应用范围1.基因测序14