分型及急性白血病课件

Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检验医学院检验医学院 1临床血液学检验技术临床血液学检验技术临床血液学检验技术临床血液学检验技术温州医科大学 基础检验系王霄霞 6001356622326311临床血液学检验技术温州医科大学临床血液学检验技术温州医科大学 基础检验系基础检验系1Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院2n第一章 造血及造血调控n第二章 血栓与止血n第三章 造血检验技术 n第四章 红细胞检验技术n第五章 白细胞检验技术n第六章 造血干细胞移植相关检验技术n第七章 血栓与止血疾病检验技术n第八章 红细胞疾病应用n第九章 白血病疾病应用n第十章 出血与血栓性疾病应用临床血液学检验技术目录临床血液学检验技术目录2第一章第一章 造血及造血调控临床血液学检验技术目录造血及造血调控临床血液学检验技术目录Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院3n第一节第一节 造血与淋巴组织肿瘤概述造血与淋巴组织肿瘤概述n第二节第二节 急性白血病急性白血病n第三节第三节 其他淋巴细胞系统恶性肿瘤其他淋巴细胞系统恶性肿瘤n第四节第四节 骨髓增生异常综合征骨髓增生异常综合征n第五节第五节 骨髓增殖性肿瘤骨髓增殖性肿瘤n第六节第六节 骨髓增生异常骨髓增生异常/骨髓增殖性肿瘤骨髓增殖性肿瘤n第七节第七节 浆细胞肿瘤浆细胞肿瘤n第八节第八节 其他白细胞疾病其他白细胞疾病第九章第九章 白细胞疾病应用白细胞疾病应用3第一节第一节 造血与淋巴组织肿瘤概述第九章造血与淋巴组织肿瘤概述第九章 白细胞疾病应用白细胞疾病应用Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院4n造血与淋巴组织肿瘤分型第一节第一节 造血与淋巴组织肿瘤概述（造血与淋巴组织肿瘤概述（P253P253）n传统分型nFAB分型nMICM分型nWHO分型n造血与淋巴组织肿瘤的临床特征白血病急性白血病慢性白血病4造血与淋巴组织肿瘤分型第一节造血与淋巴组织肿瘤分型第一节 造血与淋巴组织肿瘤概述（造血与淋巴组织肿瘤概述（PWenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院5白血病白血病leukemia淋巴细胞白血病淋巴细胞白血病lymphocytic leukemia慢性白血病慢性白血病(CL)chronic leukemia急性淋巴细胞白血病急性淋巴细胞白血病(ALL)acutelymphocytic leukemia结合两种分型慢性淋巴细胞白血病慢性淋巴细胞白血病(CLL)chroniclymphocytic leukemia急急性性髓髓细细胞胞白白血血病病(AML)acutemyelocytic leukemia慢性髓细胞白血病（慢性髓细胞白血病（CML）chronic myelocytic leukemia 急性白血病急性白血病(AL)acute leukemia髓细胞白血病髓细胞白血病myelocytic leukemia根据细胞系列来分根据自然病程、C成熟程度来分传统分型：传统分型：5白血病淋巴细胞白血病慢性白血病白血病淋巴细胞白血病慢性白血病(CL)急性淋巴细胞白血病急性淋巴细胞白血病(Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院6白血病（白血病（luekemia）的定义（）的定义（P260的的AL）n是一组来源于造血干细胞克隆性增殖的恶性血液病，其特点为骨髓中白血病细胞因恶性增殖、分化阻滞和凋亡受抑而大量增加，临床主要表现为贫血、出血、感染及浸润。俗称“血癌”n根据病程及起病情况分为：急性白血病 慢性白血病6白血病（白血病（luekemia）的定义（）的定义（P260的的AL）是一组来）是一组来Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院7急性和慢性白血病的定义急性和慢性白血病的定义nAcute leukemia（AL）nChronic leukemia（CL）指分化阻滞分化阻滞发生在较早较早阶段，骨髓及外周血（多数）中以原原始及幼稚细胞增生始及幼稚细胞增生为主。起病急、病程短，自然病程6个m指分化阻滞分化阻滞发生在较晚较晚阶段，骨髓及外周血中以成熟、较成成熟、较成熟的细胞增生熟的细胞增生为主。起病缓慢，病程较长，自然病程1年7急性和慢性白血病的定义急性和慢性白血病的定义Acute leukemia（AL）Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院8急性急性白血白血病病8急性白血病急性白血病Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院9慢性淋巴细胞白细胞慢性淋巴细胞白细胞n 9慢性淋巴细胞白细胞慢性淋巴细胞白细胞 Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院10慢性粒细胞白血病慢性粒细胞白血病10慢性粒细胞白血病慢性粒细胞白血病Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院11n造血与淋巴组织肿瘤分型造血与淋巴组织肿瘤分型第一节第一节 造血与淋巴组织肿瘤概述（造血与淋巴组织肿瘤概述（P253P253）n传统分型nFAB分型nMICM分型nWHO分型n造血与淋巴组织肿瘤的临床特征11造血与淋巴组织肿瘤分型第一节造血与淋巴组织肿瘤分型第一节 造血与淋巴组织肿瘤概述（造血与淋巴组织肿瘤概述（Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院12一、一、造血与淋巴组织肿瘤的分型造血与淋巴组织肿瘤的分型n MICM MICM 分型分型n WHO WHO 分型分型n FAB FAB 分型分型1986年提出MICM分型细胞形态学分型（Morphology,M）细胞免疫学分型（Immunology,I）细胞遗传学分型（Cytogenetics,C）分子生物学分型（Molecular biology,M）最早在1976年由法国、美国、英国组成FAB协助组提出的，主要根据细胞形态、原始细胞数及组化的一种形态学分型2000年世界卫生组织（WHO）首先提出的，2008年进行了修改，使分型更合理，更凸显出遗传学及分子生物学的重要作用12一、造血与淋巴组织肿瘤的分型一、造血与淋巴组织肿瘤的分型 MICM 分型分型 WHO 分分Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院acute non-lymphoblastic leukemia ANLL名称名称FAB分型分型国内分型国内分型M0急性急性髓髓细胞白血病细胞白血病微小分化微小分化型型-M1 急性急性粒粒细胞白血病未成熟型细胞白血病未成熟型(或称或称未分化型未分化型)-M2急性急性粒粒细胞白血病部分成熟型细胞白血病部分成熟型(或称或称部分分化型部分分化型)分为分为M2a、M2bM3急性急性早幼粒早幼粒细胞白血病（包括细胞白血病（包括M3V）分为分为M3a、M3bM4急性急性粒单粒单核细胞白血病（包括核细胞白血病（包括M4EO）分为分为M4a、M4b、M4c、M4EOM5急性急性单核单核细胞白血病细胞白血病-M5a 急性单核细胞白血病未分化型急性单核细胞白血病未分化型 M5b 急性单核细胞白血病部分分化型急性单核细胞白血病部分分化型-M6（急性）（急性）红白红白血病血病-M7急性急性巨核巨核细胞白血病细胞白血病-白血病细胞白血病细胞30%30%（NECNEC）,未未成熟成熟型型90%90%或或80%80%（NECNEC）acute non-lymphoblastic leukWenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院acute lymphoblastic leukemia,ALL（FAB分型）分型）细胞学特征ALL1ALL2ALL3细胞大小小细胞为主大小较一致大细胞为主大小不一大细胞为主大小较一致核染色质较粗结构较一致较疏松结构不一致均匀细点状结构一致核形规则偶有凹陷、折叠不规则常见凹陷、折叠较规则核仁小而不清少或不见清楚，1或多个明显，1或多个小泡状胞质量少不一定，常较多较多胞质嗜碱性轻或中度不一定，有些较深蓝深蓝色胞质空泡不定不定常明显，呈蜂窝状acute lymphoblastic leukemiaWenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院15造血与淋巴组织肿瘤的造血与淋巴组织肿瘤的WHOWHO分型框架（分型框架（20082008）急性髓细胞白血病（AML）和相关的原幼细胞肿瘤 骨髓增殖性肿瘤（MPN）髓系肿瘤 骨髓增生异常综合征（MDS）骨髓增生异常/骨髓增殖性肿瘤（MDS/MPN）髓系、淋系肿瘤伴EOS增多和PDGFRA、PDGFRB或FGFR1基因异常 淋巴母细胞肿瘤（白血病/淋巴瘤）造血和淋巴 成熟B细胞肿瘤组织肿瘤分类 淋系肿瘤 成熟T/NK细胞肿瘤(2008WHO)霍奇金淋巴瘤（HL）移植后淋巴细胞增殖紊乱（PTLD）系列模糊的急性白血病(AUL)树突细胞和 巨噬细胞/组织细胞肿瘤 树突细胞肿瘤 树突细胞肿瘤15造血与淋巴组织肿瘤的造血与淋巴组织肿瘤的WHO分型框架（分型框架（2008）Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院16造血与淋巴组织肿瘤的分型造血与淋巴组织肿瘤的分型（20082008，WHOWHO）n髓系肿瘤髓系肿瘤n淋系肿瘤淋系肿瘤n系列模糊的急性白血病系列模糊的急性白血病：细细胞胞分分化化不不明明或或无无法法证证明明向向某某系系分分化化的的一一组组白白血血病病。包包括了急性未分化型白血病和混合表型急性白血病括了急性未分化型白血病和混合表型急性白血病n组织细胞和树突状细胞肿瘤：组织细胞和树突状细胞肿瘤：包括包括8 8类，见表类，见表9-129-12（P260P260）16造血与淋巴组织肿瘤的分型（造血与淋巴组织肿瘤的分型（2008，WHO）髓系肿瘤）髓系肿瘤Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院17n造血与淋巴组织肿瘤分型造血与淋巴组织肿瘤分型第一节第一节 造血与淋巴组织肿瘤概述（造血与淋巴组织肿瘤概述（P253P253）n传统分型nFAB分型nMICM分型nWHO分型n造血与淋巴组织肿瘤的临床特征造血与淋巴组织肿瘤的临床特征17造血与淋巴组织肿瘤分型第一节造血与淋巴组织肿瘤分型第一节 造血与淋巴组织肿瘤概述（造血与淋巴组织肿瘤概述（Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院18n白血病：贫血、出血、感染及侵润白血病：贫血、出血、感染及侵润皮皮肤肤出出血血牙牙龈龈、唇唇浸浸润润二、二、造血与淋巴组织肿瘤的临床表现造血与淋巴组织肿瘤的临床表现18白血病：贫血、出血、感染及侵润皮肤出血牙龈二、造血与淋巴白血病：贫血、出血、感染及侵润皮肤出血牙龈二、造血与淋巴Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院19n淋巴瘤：无痛性、进行性淋巴瘤：无痛性、进行性LN肿大，不明原因发烧等，肿大，不明原因发烧等，后期可侵犯骨髓形成淋巴瘤白血病后期可侵犯骨髓形成淋巴瘤白血病浅浅表表淋淋巴巴结结肿肿大大二、二、造血与淋巴组织肿瘤的临床表现造血与淋巴组织肿瘤的临床表现19淋巴瘤：无痛性、进行性淋巴瘤：无痛性、进行性LN肿大，不明原因发烧等，后期可侵肿大，不明原因发烧等，后期可侵Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院20n第一节第一节 造血与淋巴组织肿瘤概述造血与淋巴组织肿瘤概述n第二节第二节 急性白血病急性白血病n第三节第三节 其他淋巴细胞系统恶性肿瘤其他淋巴细胞系统恶性肿瘤n第四节第四节 骨髓增生异常综合征骨髓增生异常综合征n第五节第五节 骨髓增殖性肿瘤骨髓增殖性肿瘤n第六节第六节 骨髓增生异常骨髓增生异常/骨髓增殖性肿瘤骨髓增殖性肿瘤n第七节第七节 浆细胞肿瘤浆细胞肿瘤n第八节第八节 其他白细胞疾病其他白细胞疾病第九章第九章 白细胞疾病应用白细胞疾病应用20第一节第一节 造血与淋巴组织肿瘤概述第九章造血与淋巴组织肿瘤概述第九章 白细胞疾病应用白细胞疾病应用Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院21第二节第二节 急性白血病急性白血病n急性白血病概述急性白血病概述n急性髓细胞白血病（AML）n急性淋巴白血病/淋巴瘤（ALL/LBL）（或称前驱型、淋巴母）21第二节第二节 急性白血病急性白血病概述急性白血病急性白血病概述Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院22一、急性白血病概述一、急性白血病概述n病因及机制n临床表现n实验室检查n细胞形态学检查：血象、骨髓象及组化n细胞免疫学检查：AML及ALLn细胞遗传学检查:AML及ALLn分子生物学检查:AML及ALL22一、急性白血病概述病因及机制临床表现实验室检查细胞形态学一、急性白血病概述病因及机制临床表现实验室检查细胞形态学Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院23急性白血病的病因及机制急性白血病的病因及机制n病因：n机制：病毒感染、物理因素、化学因素、遗传因素白血病干细胞、遗传学水平双次突变、表观遗传学异常、基因多态性、特定病毒基因整合指人特定宿主细胞23急性白血病的病因及机制病因：机制：病毒感染、物理因素、白急性白血病的病因及机制病因：机制：病毒感染、物理因素、白Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院24一、急性白血病概述一、急性白血病概述n病因及机制n临床表现n实验室检查n细胞形态学检查：血象、骨髓象及组化n细胞免疫学检查：AML及ALLn细胞遗传学检查:AML及ALLn分子生物学检查:AML及ALL24一、急性白血病概述病因及机制临床表现实验室检查细胞形态学一、急性白血病概述病因及机制临床表现实验室检查细胞形态学Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院25急性白血病临床表现急性白血病临床表现症状症状 特特 点点贫血贫血早期即有，随着病情进展而加重早期即有，随着病情进展而加重 发热发热多数感染所致，严重者可导致败血症多数感染所致，严重者可导致败血症出血出血以皮肤、粘膜为常见，出血以以皮肤、粘膜为常见，出血以急性早幼粒细胞急性早幼粒细胞白血病最为严重且易导致白血病最为严重且易导致DICDIC，其次为急单和，其次为急单和急粒单急粒单浸润浸润肝、脾、淋巴结常肿大，肝、脾、淋巴结常肿大，还有还有胸骨中下段压痛胸骨中下段压痛，并可浸润皮肤、粘膜等，并可浸润皮肤、粘膜等，以急单和急粒单以急单和急粒单为明显为明显25急性白血病临床表现症状急性白血病临床表现症状 特特 Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院26急性白血病患者口腔真菌感染26急性白血病患者口腔真菌感染急性白血病患者口腔真菌感染Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院27 急单患者牙龈浸润白血病患者皮肤出血27 急单患者牙龈浸润白血病患者皮肤出血急单患者牙龈浸润白血病患者皮肤出血Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院28一、急性白血病概述一、急性白血病概述n病因及机制n临床表现n实验室检查n细胞形态学检查：血象、骨髓象及组化n细胞免疫学检查：AML及ALLn细胞遗传学检查:AML及ALLn分子生物学检查:AML及ALLn微量残留白血病检测：AML及ALL28一、急性白血病概述病因及机制临床表现实验室检查细胞形态学一、急性白血病概述病因及机制临床表现实验室检查细胞形态学Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院29形态学检查形态学检查-血常规检查：血常规检查：n细胞数量：WBC、或正常，RBC及PLT常n白血性白血病:指WBC15109/L的白血病n非白血性白血病：指WBC15109/L的白血病nWBC RBC PLT nWBC RBC PLT nWBC RBC PLT 29形态学检查形态学检查-血常规检查：细胞数量：血常规检查：细胞数量：WBC、Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院30白细胞白细胞 白细胞白细胞30白细胞白细胞 白细胞白细胞Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院31形态学检查形态学检查-血常规检查：血常规检查：nWBC分类：可见一定数量白血病细胞，有的 还可见幼粒及NRBC。有的AML还可见棒状小体n棒状小体或奥氏小体（Auers body）：由嗜天青颗粒融合而成,瑞特染色后镜下呈紫红色或淡红色，且常呈棒状,为AML等髓系肿瘤的形态学标志n白血病裂孔现象：指外周血或骨髓中，只见原始细胞及成熟细胞而未见中间阶段细胞的现象31形态学检查形态学检查-血常规检查：血常规检查：WBC分类：可见一定数分类：可见一定数Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院32各种形态棒状小体各种形态棒状小体32各种形态棒状小体各种形态棒状小体Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院33形态学检查形态学检查-骨髓细胞形态学检查骨髓细胞形态学检查n骨髓增生极度活跃，明显活跃nWHO：20%（AML 或ALL/LBL）、20%但伴重现性遗传学异常。（FAB分型：原始细胞30%）n等同于原始细胞：除原始细胞外，包括幼单、幼淋、异常早幼粒细胞、异常中幼粒细胞等n其他系列：缺如或明显减少33形态学检查形态学检查-骨髓细胞形态学检查骨髓增生极度活跃骨髓细胞形态学检查骨髓增生极度活跃Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院34根据骨髓增生程度分类根据骨髓增生程度分类n增 生性白血病 n低增生性白血病骨髓有核细胞增生活跃以上见于绝大多数急性白血病骨髓有核细胞增生减低见于个别病例34根据骨髓增生程度分类增根据骨髓增生程度分类增 生性白血病生性白血病 低增生性白血病骨低增生性白血病骨Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院35形态学检查形态学检查-细胞化学染色细胞化学染色nPOX染色n特异性酯酶染色n非特异性酯酶染色+NaF抑制n PAS染色 粒系弥散，单系细颗粒状，淋系粗颗粒状如阳性为粒系常为单系国际推荐的最少组化：MPOMPO、NAS-DCENAS-DCE、-NAE为髓系如阳性如阳性强+抑制35形态学检查形态学检查-细胞化学染色细胞化学染色POX染色如阳性为粒系染色如阳性为粒系Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院36一、急性白血病概述一、急性白血病概述n病因及机制n临床表现n实验室检查n细胞形态学检查：血象、骨髓象及组化n细胞免疫学检查：AML及ALLn细胞遗传学检查:AML及ALLn分子生物学检查:AML及ALLn微量残留白血病检测：AML及ALL36一、急性白血病概述病因及机制临床表现实验室检查细胞形态学一、急性白血病概述病因及机制临床表现实验室检查细胞形态学Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院37n造血细胞分化为成熟细胞过程中出现的一系列免疫表型的变化，某些抗原表达只见于特定系列的不同发育阶段细胞上n采用单克隆抗体，利用一系列CD（即代表抗原，也代表相应的抗体）对细胞系列、细胞发育阶段做出判断，即为细胞免疫分型n不能完全区分正常血细胞和白血病细胞，可以判断细胞系列来源、分化阶段、成熟程度n辅助类型判断、指导治疗方案的制定，并判断预后n检查方法包括流式细胞仪检测及免疫组化（二）急性白血病免疫学分析37造血细胞分化为成熟细胞过程中出现的一系列免疫表型的变化，造血细胞分化为成熟细胞过程中出现的一系列免疫表型的变化，Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院38各系列血细胞常表达的各系列血细胞常表达的CD 分子分子（表（表9-13）一线抗体一线抗体二线抗体二线抗体髓细胞髓细胞CD117CD117、CD13CD13、CD33CD33、anti-MPOanti-MPOCD14CD14、CD15CD15、CD11CD11、CD61CD61、CD41CD41、CD42CD42、CD71CD71、CD36CD36、CD235aCD235aB B淋巴系淋巴系CD10CD10、CD19CD19、CyCD22CyCD22、CD22CD22、CyCD79aCyCD79aCD20CD20、CyCy、SmIgSmIgT T淋巴系淋巴系CD2CD2、CyCD3CyCD3、CD3CD3、CD7CD7CD1aCD1a、CD4CD4、CD5CD5、CD8CD8非系列特异性非系列特异性TdTTdT（胞核）、（胞核）、HLA-DRHLA-DR、CD34CD34CD34、HLA-DR、CD38、CD117 是早期造血细胞的标志；CD14是成熟单核细胞的标志；CD15、CD11b、CD16是偏成熟粒细胞分化的标志38各系列血细胞常表达的各系列血细胞常表达的CD 分子（表分子（表9-13）一线抗体二线）一线抗体二线Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院39髓系和淋系细胞髓系和淋系细胞CDCD有交叉表达有交叉表达n淋系抗原阳性的AML Ly+AML 如CD7+AML、CD19+AML、TdT+AML等n髓系抗原阳性的ALL My+ALL 如CD33+ALL、CD13+ALL、CD11b+ALL 39髓系和淋系细胞髓系和淋系细胞CD有交叉表达淋系抗原阳性的有交叉表达淋系抗原阳性的AML LWenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院40AMLAML的细胞免疫表型特征（表的细胞免疫表型特征（表9-149-14）注：M7表达CD41、CD42、CD61。M6表达CD71、CD235a。MPO 除M7及M6b外均阳性亚型亚型CD34CD34CD13CD13CD33CD33CD15CD15HLA-DRHLA-DRCD14CD14CD 117CD 117M2bM2b+/-+/-+/-+/-+常常-M3M3-+/-+/-+M4EOM4EO-+-+M0M0+至至 少少 一一 种种 阳阳 性性+多多-M1M1常常+常常+/-+/-+常常-+M2aM2a+/-+/-+常常-+/-+/-M4M4+/-+/-+/-+/-M5M5多多-+/-+/-+M6aM6a+/-+/-+/-+/-+/-+/-+/-+/-+/-+/-M6bM6b+/-+/-+/-+/-M7M7+/-+/-+-+40AML的细胞免疫表型特征（表的细胞免疫表型特征（表9-14）注：）注：M7表达表达CD4Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院41急性急性B B淋巴细胞白血病的免疫分型淋巴细胞白血病的免疫分型（EGILEGIL方案）表方案）表9-159-15CD34CD34HLA-DRCD22c/mc/mCD19CD38TdTTdTCD10CD20Ccd79aCcd79aCys sIg特殊表型特殊表型早早前前B细胞型胞型+-+-CD9+CD9+普通普通B细胞型胞型+/-+/-+-CD13/33+CD13/33+前前B细胞型胞型-+/-+/-+/-+/-+/-+/-+/-+/-CD24+CD24+成熟成熟B细胞型胞型-+-/+Ki-67+Ki-67+41急性急性B淋巴细胞白血病的免疫分型（淋巴细胞白血病的免疫分型（EGIL方案）表方案）表9-15Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院42急性急性T T淋巴细胞白血病的免疫分型淋巴细胞白血病的免疫分型（2008,WHO2008,WHO）表）表9-169-16CD7CD3c/mc/mTdTCD99CD99CD38CD38CD34CD1aCD2CD4/4/CD8特殊表型特殊表型早早前前T-ALL+/-+/-/-/-部分部分CD33+CD33+前前T-ALL+/-+-/-/-皮皮质T-ALL+-+/+/+部分部分CD10+CD10+髓髓质T-ALL+/-+-+/-或或-/+-/+CD10-CD10-42急性急性T淋巴细胞白血病的免疫分型（淋巴细胞白血病的免疫分型（2008,WHO）表）表9-Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院43一、急性白血病概述一、急性白血病概述n病因及机制n临床表现n实验室检查n细胞形态学检查：血象、骨髓象及组化n细胞免疫学检查：AML及ALLn细胞遗传学检查:AML及ALLn分子生物学检查:AML及ALLn微量残留白血病检测：AML及ALL43一、急性白血病概述病因及机制临床表现实验室检查细胞形态学一、急性白血病概述病因及机制临床表现实验室检查细胞形态学Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院44（三）急性白血病细胞遗传学检查（三）急性白血病细胞遗传学检查nAL:分为平衡型畸变、不平衡畸变nAML平衡型畸变：有些与形态学亚型有关，如t(15;17)-M3,t(8;21)-M2b,inv(16)-M4EO等nAML不平衡型畸变：染色体数目异常、染色体整条或部分丢失或增加，如+8、-5/5q-、-7/7q-、20q-及+21 等44（三）急性白血病细胞遗传学检查（三）急性白血病细胞遗传学检查AL:分为平衡型畸变、不平分为平衡型畸变、不平Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院45全染色体荧光原位杂交全染色体荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization FISH）45全染色体荧光原位杂交（全染色体荧光原位杂交（fluorescence in sWenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院46（三）急性白血病细胞遗传学检查（三）急性白血病细胞遗传学检查nB-ALL平衡型畸变:t(12;21)、t(1;19)、t(9;22)nT-ALL平衡型畸变:t(1;14)、t(10;14)、t(8;14)、t(7;9)和 t(11;14)等，多 数 累 及 TCR位 点:14q11（TCR，）、7q34-36（TCR）和7p15（TCR）nALL不平衡型畸变:染色体数目异常以超二倍体、亚二倍体、单倍体等为主46（三）急性白血病细胞遗传学检查（三）急性白血病细胞遗传学检查B-ALL平衡型畸变平衡型畸变:t(Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院47一、急性白血病概述一、急性白血病概述n病因及机制n临床表现n实验室检查n细胞形态学检查：血象、骨髓象及组化n细胞免疫学检查：AML及ALLn细胞遗传学检查:AML及ALLn分子生物学检查:AML及ALLn微量残留白血病检测：AML及ALL47一、急性白血病概述病因及机制临床表现实验室检查细胞形态学一、急性白血病概述病因及机制临床表现实验室检查细胞形态学Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院48（四）急性白血病分子生物学检查（四）急性白血病分子生物学检查nAML:如t（15；17）形成的PML-RAR融合基因见于M3，t（8；21）形成的AML1-ETO融合基因见于M2b，inv（16）或t（16；16）形成的CBF-MYH11 见于M4Eo等nALL：多累及IgH基因（B细胞，14q32）、TCR 基因（T细胞）重排,常存在B-ALL伴TCR 重排，T-ALL 伴IgH 重排的现象，这两个重排可作为淋巴细胞恶性增殖的指标48（四）急性白血病分子生物学检查（四）急性白血病分子生物学检查AML:如如t（15；17）Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院49一、急性白血病概述一、急性白血病概述n病因及机制n临床表现n实验室检查n细胞形态学检查：血象、骨髓象及组化n细胞免疫学检查：AML及ALLn细胞遗传学检查:AML及ALLn分子生物学检查:AML及ALLn微量残留白血病检测：AML及ALL49一、急性白血病概述病因及机制临床表现实验室检查细胞形态学一、急性白血病概述病因及机制临床表现实验室检查细胞形态学Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院50（五）、微量残留白血病检测（五）、微量残留白血病检测（P177-180）：）：（minimal residual leukemiaminimal residual leukemia，MRLMRL）是指白血病患者经过化疗或骨髓移植后，达到临床和血液学完全缓解，但体内仍残留微量白血病细胞（估计约106-108个）的状态。50（五）、微量残留白血病检测（五）、微量残留白血病检测（P177-180）：）：（mWenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院常用常用MRL的检测方法的检测方法 方法灵敏度主要优点主要缺点细胞遗传学1可发现异常核型不敏感且受分裂期影响FISH10-2-10-3可用于间期细胞较敏感受分裂象影响，本底高流式细胞仪法10-3-10-4快速、定量、较敏感需特殊探针，有时与正常细胞难以区分分子生物学方法（PCR,RT-PCR，实时PCR）10-4-10-6高度敏感、定量、可自动分析有假阴性或假阳性常用常用MRL的检测方法的检测方法 方法灵敏度主要优点主要缺点细胞遗传学方法灵敏度主要优点主要缺点细胞遗传学1Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院流式检测流式检测MRL n白血病免疫相关的免疫表型（LAIP）：指正常骨髓或外周血细胞不表达或低表达，而在白血病细胞上有表达或高表达的白血病相关抗原，如CD34+/CD11b+（不同步）、AML表达CD7（交叉）等流式检测流式检测MRL 白血病免疫相关的免疫表型（白血病免疫相关的免疫表型（LAIP）：指正常）：指正常Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院目前常用的目前常用的MRL的标志物的标志物 nPML-RARa融合基因 nAML1-ETO融合基因nCBF-MYH11融合基因nIgH、TCR基因重排等 目前常用的目前常用的MRL的标志物的标志物 PML-RARa融合基因融合基因 Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院MRL检测的临床意义检测的临床意义 n指导化疗及预后检测 n检测复发n作为制定新的缓解和治愈标准的依据 MRL检测的临床意义检测的临床意义 指导化疗及预后检测指导化疗及预后检测 Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院55急性白血病诊断流程有白血病临床表现有白血病临床表现血象检查血象检查不明原因血象异常不明原因血象异常骨髓细胞形态学检查骨髓细胞形态学检查+同时送血片同时送血片急急 性性 白白 血血 病病 骨骨 髓髓 象象细胞化学染色细胞化学染色如如MPO.NSE-DCE、NAS-DAE、PAS等染色等染色 做出急性白血病肯定性诊断，并提示亚型做出急性白血病肯定性诊断，并提示亚型其他疾病骨髓象其他疾病骨髓象 细胞免疫学分型细胞免疫学分型 细胞遗传学分型细胞遗传学分型 分子生物学分型分子生物学分型 做出急淋、急非淋做出急淋、急非淋肯定性诊断，并提肯定性诊断，并提示亚型示亚型 报告染色体报告染色体 核型核型其他检查其他检查报告检测报告检测结果结果报告检测报告检测结果结果临床医生综合各种分型结果临床医生综合各种分型结果确定急性白血病类型和亚型确定急性白血病类型和亚型55急性白血病诊断流程有白血病临床表现血象检查不明原因血象异急性白血病诊断流程有白血病临床表现血象检查不明原因血象异Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院56白血病的治疗白血病的治疗 n支持疗法：纠正贫血，防止感染，控制出血等。n联合化疗：化疗目的：尽快地杀死肿瘤，使机体恢复造血，达到完全缓解药的原则：联合、足量、间歇用药治疗过程：诱导缓解、巩固强化、维持 一个疗程7-10天，休息1-4周n骨髓移植：自体、异体骨髓移植56白血病的治疗白血病的治疗 支持疗法：纠正贫血，防止感染，控制出血等。支持疗法：纠正贫血，防止感染，控制出血等。Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院57白血病的疗效白血病的疗效 n儿童ALL：完全缓解率达90%，50%长期无病生存5年以上n成人ALL：完全缓解率达70%左右，30%长期无病生存nAML：完全缓解率达60%，20-30%长期无病生存nM3：完全缓解率达85%以上，50%长期无病生存5年以上57白血病的疗效白血病的疗效 儿童儿童ALL：完全缓解率达：完全缓解率达90%，50%长期长期Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院58缓解标准缓解标准(1)(1)完全缓解完全缓解(complete remission(complete remission，CR)CR)骨髓象骨髓象 原粒（原单原粒（原单+幼单或原淋幼单或原淋+幼淋）幼淋）5%5%，红细胞及巨核细胞系统正常，红细胞及巨核细胞系统正常血血 象象 Hb100g/L Hb100g/L（男）或（男）或90 g/L90 g/L（女）；（女）；NEUNEU绝对值绝对值1.5101.5109 9/L/L，分类无白血病，分类无白血病 细胞；细胞；PL10010PL100109 9/临临 床床 无贫血、出血、感染及白血病细胞浸润表现无贫血、出血、感染及白血病细胞浸润表现(2(2）部分缓解）部分缓解(partial remission(partial remission，PR)PR)原粒原粒型型+型（原单型（原单+幼单或原淋幼单或原淋+幼淋）幼淋）5%5%20%20%或临床、血象中有一项未达到完全缓解标准者或临床、血象中有一项未达到完全缓解标准者(3(3）未缓解（）未缓解（non-remissionnon-remission，NRNR）髓象、血象及临床均未达到上述标准者髓象、血象及临床均未达到上述标准者复发标准：有复发标准：有三项中三项中的任何的任何一项一项即为即为复发复发 骨骨髓髓中中原原粒粒（或或原原单单+幼幼单单或或原原淋淋+幼幼淋淋）5且且20 经经过过有有效效的的抗抗白白血血病病治治疗疗一一个个疗疗程程后后仍仍未未达达到到骨骨髓髓完完全全缓缓解解。骨骨髓髓原原粒粒（或或原原单单+幼幼单单或或原原淋淋+幼幼淋淋）20。骨骨髓髓外外有有白白血病细胞浸润者。血病细胞浸润者。持续完全缓解（持续完全缓解（CCR）:指从治疗后完全缓解之日起计算，期间无白血病复发达指从治疗后完全缓解之日起计算，期间无白血病复发达3-5年者年者长期存活长期存活:白血病确诊之日起，存活时间（包括无病或带病生存）白血病确诊之日起，存活时间（包括无病或带病生存）55年者年者临床治愈临床治愈:指停止化疗指停止化疗5 5年或无病生存达（年或无病生存达（DFSDFS）1010年者年者58缓解标准缓解标准(1)完全缓解完全缓解(complete remissWenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院59第二节第二节 急性白血病急性白血病n急性白血病概述n急性髓细胞白血病（急性髓细胞白血病（AML）n急性淋巴白血病/淋巴瘤（ALL/LBL）（或称前驱型、淋巴母）59第二节第二节 急性白血病急性白血病概述急性白血病急性白血病概述Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院60二、急性髓细胞白血病（二、急性髓细胞白血病（P265-276）nAML伴重现性细胞遗传学异常：是一类具有明确的染色体异常、特异性融合基因和特殊的临床表现，对化疗敏感、预后较好的AML。此类AML主要包括9 种亚型，约占AML 的30%nAML，非特指型：没有特异性染色体或基因异常。主要依据形态学、组化和免疫表型特征等。原始细胞20%是形态学诊断的主要标准60二、急性髓细胞白血病（二、急性髓细胞白血病（P265-276）AML伴重现性细伴重现性细Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院61急性髓细胞白血病（AML）相关的原幼细胞肿瘤1 1伴伴重现性细胞遗传学异常重现性细胞遗传学异常AMLAML2 2AMLAML伴病态造血相关改变伴病态造血相关改变3 3治疗相关的髓系肿瘤治疗相关的髓系肿瘤4 4急性髓细胞白血病急性髓细胞白血病（AMLAML，NOSNOS）5 5髓系肉瘤髓系肉瘤6 6DownDown综合征相关的髓系增殖症综合征相关的髓系增殖症7 7母细胞性浆细胞样母细胞性浆细胞样树突细胞肿瘤树突细胞肿瘤AMLAML伴伴t(8t(8；21)(q2221)(q22；q22)q22)；RUNX1-RUNX1T1 RUNX1-RUNX1T1 (相当于相当于M2bM2b)AMLAML伴伴inv(16)(p13inv(16)(p13；q22)q22)或或t(16t(16；16)(p1316)(p13；22)22)；CBF-MYH11 (相当于相当于M4EOM4EO)AML伴伴t(15；17)(q22；q11-12)；PML-RARa(相当于相当于M3)等等等等9种种61急性髓细胞白血病（急性髓细胞白血病（AML）相关的原幼细胞肿瘤）相关的原幼细胞肿瘤1伴重现性伴重现性Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院62（一）、（一）、AML伴重现性细胞遗传学异常伴重现性细胞遗传学异常AMLAML伴伴t（8；21）（）（q22；q22）；）；RUNX1-RUNX1T1AMLAML伴伴inv（16）（）（p13；q22）或或t（16；16）（）（p13；q22）；）；CBF-MYH11AMLAML伴伴t（15；17）（）（q22；q11-12）；）；PML-RARaAMLAML伴伴t t（9；11）（）（p22；q23）；）；MLLT3-MLLAMLAML伴伴t（6；9）（）（p23；q34）；）；DEK-DEK-NUP214NUP214AMLAML伴伴inv（3）（）（q21；q26.2）或）或t t（3；3）（）（q21；q26.2）；）；RPN1-EVI1 AMLAML伴伴t（1；22）（）（p13；q13）；）；RBM15-MKL1MKL1AMLAML伴伴NPM1突变（暂定类型）突变（暂定类型）AMLAML伴伴CEBPA突变（暂定类型）突变（暂定类型）62（一）、（一）、AML伴重现性细胞遗传学异常伴重现性细胞遗传学异常AML伴伴t（8；21Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院63检查血象免疫分型细胞化学染色骨髓象细胞遗传学和分子生物学检查概述1.AML1.AML伴伴t（8；21）（）（q22；q22）；）；RUNX1-RUNX1T1诊断和鉴别诊断63检查血象免疫分型细胞化学染色骨髓象细胞遗传学和分子生物学检查血象免疫分型细胞化学染色骨髓象细胞遗传学和分子生物学Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院64相当于相当于FAB分型中的分型中的M2b,个别为个别为M1及及M2an我国提出的，是M2中的一种特殊亚型n临床特点：起病缓慢、进展较慢 多见于青年人 常以贫血为首发症状 感染、出血发生率及程度均较低 肝、脾及淋巴结一般不肿大 疗效较好，CR高，缓解期长64相当于相当于FAB分型中的分型中的M2b,个别为个别为M1及及M2a我国提出我国提出Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院65M M2b2b 血象血象细胞计数细胞计数血涂片血涂片白细胞白细胞常常，有的，有的或正常或正常可见可见各阶段幼粒细胞（包括异各阶段幼粒细胞（包括异常中幼粒），常中幼粒），有的可见异常有的可见异常原原细胞、棒状小体、有核细胞、棒状小体、有核红细胞红细胞红细胞红细胞常常血小板血小板常常65M2b 血象细胞计数血涂片白细胞常血象细胞计数血涂片白细胞常，有的，有的或正常可见各或正常可见各Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院66M M2b2b 骨髓象骨髓象增生程度增生程度明显活跃明显活跃 或或 极度活跃极度活跃粒粒 系系明显或极度增生明显或极度增生以异常中性中幼粒细胞为主，常以异常中性中幼粒细胞为主，常2 20 0（WHOWHO）原始粒细胞及早幼粒细胞也增多，原始粒细胞及早幼粒细胞也增多，有的可见棒状小体有的可见棒状小体异常中幼粒细胞：异常中幼粒细胞：胞质中充满中性颗粒而无明显胞质中充满中性颗粒而无明显A A颗粒颗粒，胞核常椭圆形，胞核常椭圆形，染色质细致、有核仁染色质细致、有核仁 红红 巨巨 系系常减少常减少66M2b 骨髓象增生程度明显活跃骨髓象增生程度明显活跃 或或 极度活跃粒极度活跃粒 系系Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院67n胞核发育明显落后于胞质n核染色质细致，有核仁，核椭圆形n其胞质中却有丰富的中性颗粒，而A颗粒极少或无，有时还可见细胞内质、外质，“内质”中充满中性颗粒，“外质”中颗粒很少或无颗粒异常中性中幼粒细胞形态特点：异常中性中幼粒细胞形态特点：67胞核发育明显落后于胞质异常中性中幼粒细胞形态特点：胞核发育明显落后于胞质异常中性中幼粒细胞形态特点：Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院68M M2b2b骨髓片骨髓片1 1异常中性异常中性中幼粒中幼粒异常中性异常中性中幼粒中幼粒68M2b骨髓片骨髓片1异常中性异常中性异常中性异常中性Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院69M M2b2b骨髓片骨髓片2 269M2b骨髓片骨髓片2Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院70M M2b2b骨髓片骨髓片3 370M2b骨髓片骨髓片3Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院71M2b POX POX染色染色n POX染色71M2b POX染色染色 Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院72M2b NAS-DCE染色染色NAS-DCE染色72M2b NAS-DCE染色染色NAS-DCE染色染色Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院73M2b NSE染色染色NAS-DAE+NaF染色NAS-DAE染色73M2b NSE染色染色NAS-DAE+NaFWenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院74M2b NSE染色染色NAS-DAE+NaF染色NAS-DAE染色74M2b NSE染色染色NAS-DAE+NaFWenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院75PAS染色75PAS染色染色Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院76M M2b2b 细胞化学染色细胞化学染色细胞化学染色细胞化学染色 异常中性中幼粒细胞染色结果异常中性中幼粒细胞染色结果POXPOX染色染色NAS-DCENAS-DCE染色染色NAS-DAENAS-DAE染色染色-NBE-NBE染色染色PASPAS染色染色76M2b 细胞化学染色细胞化学染色细胞化学染色细胞化学染色 异常中性中幼粒细胞染色异常中性中幼粒细胞染色Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院77M M2b2b 细胞化学染色细胞化学染色细胞化学染色细胞化学染色 异常中性中幼粒细胞染色结果异常中性中幼粒细胞染色结果POXPOX染色染色均阳性，均阳性，常呈强阳性常呈强阳性NAS-DCENAS-DCE染色染色均阳性，均阳性，常呈强阳性常呈强阳性NAS-DAENAS-DAE染色染色均阳性，均阳性，常呈强阳性常呈强阳性，加，加NaFNaF不抑制不抑制-NBE-NBE染色染色均均阴性阴性PASPAS染色染色均阳性，常呈均阳性，常呈弥散阳性弥散阳性77M2b 细胞化学染色细胞化学染色细胞化学染色细胞化学染色 异常中性中幼粒细胞染色异常中性中幼粒细胞染色Wenzhou Medical University 温州医科大学温州医科大学检检 验验 医医 学学 院院78AMLAML的细胞免疫学检查的细胞免疫学检查 表表9-149-14注：M7表达CD41、CD42、CD61。M6表达CD71、CD235a。MPO 除M7及M6b外均阳性亚型亚型CD34CD34CD13CD13CD33CD33CD15CD15HLA-DRHLA-DRCD14CD14CD 117CD 117M2bM2b+/-+/-+/-+/-+常常-+/-+/-M3M3-+/-+/-+M4EOM4EO+/-+/-+-+M0M0+至至 少少 一一 种种 阳阳 性性+多多