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实验实验11植物的植物的组织组织培养培养部分部分:浅尝现代生物技术浅尝现代生物技术实验11植物的组织培养部分:浅尝现代生物技术1实验目的实验目的:1.进行菊花的组织培养进行菊花的组织培养2.尝试植物激素的应用尝试植物激素的应用实验目的:1.进行菊花的组织培养2 通过必修课的学习,我们已经了解到大通过必修课的学习,我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么,多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么,有没有不用种子来培育植物的方法呢?有没有不用种子来培育植物的方法呢?组织培养组织培养营养繁殖营养繁殖扦插扦插嫁接嫁接压条压条 通过必修课的学习,我们已经了解到大多绿色开花植3扦插扦插嫁接嫁接压条压条 扦插嫁接压条 4组织培养就是取一部分植物组织,如叶、芽、茎、根、组织培养就是取一部分植物组织,如叶、芽、茎、根、花瓣或花粉等,在无菌条件下接种在三角瓶中的琼脂培养基花瓣或花粉等,在无菌条件下接种在三角瓶中的琼脂培养基上,给予一定的温度和光照,使之产生愈伤组织,或进而生上,给予一定的温度和光照,使之产生愈伤组织,或进而生根发芽。根发芽。一、组织培养概述一、组织培养概述1.概念概念组织培养就是取一部分植物组织,如叶、芽、茎、根、花瓣或花52、植物组织培养的原理是什么?、植物组织培养的原理是什么?植物细胞具有全能性,即生物体的细胞,具有使后代细植物细胞具有全能性,即生物体的细胞,具有使后代细胞形成完整个体的能力。胞形成完整个体的能力。3.植物组织培养的基本过程植物组织培养的基本过程:离体离体的植物的植物器官、组织、器官、组织、细胞细胞脱分化脱分化愈愈伤伤组组织织再分化再分化根根芽芽植植物物体体2、植物组织培养的原理是什么?植物细胞具有全能性,即生物体的6植物组织培养过程示意图植物组织培养过程示意图 2、上面的示意图中还有什么地方不够完善的?、上面的示意图中还有什么地方不够完善的?没有进行没有进行灭菌灭菌处理,试管也没有做密封等。处理,试管也没有做密封等。植物组织培养过程示意图 2、上面的示意图中还有什么地方不够完74.植物组织培养条件植物组织培养条件 含有全部营养成分的培养基、一定的温度、含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空气、无菌环境、适合的空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等。、适时光照等。生长素生长素/细胞分裂素细胞分裂素高高 利于根和愈伤组织的形成利于根和愈伤组织的形成适中适中 有利于根芽的分化有利于根芽的分化低低 有利于芽的形成有利于芽的形成4.植物组织培养条件 含有全部营养成分的培养基、一定8二、菊花的组织培养二、菊花的组织培养(一一)设备及用品设备及用品1.100ml三角瓶或大口培养瓶三角瓶或大口培养瓶 2.镊子镊子 3.超净台超净台 4.灭灭菌锅菌锅 5.封口膜和橡皮圈封口膜和橡皮圈 6.有棉球的广口瓶有棉球的广口瓶 7.酒精灯酒精灯 8.三角漏斗三角漏斗 9.培养皿培养皿(二二)材料材料1.MS培养基培养基(用于配置发芽和生根培养基用于配置发芽和生根培养基)2.奈乙酸用少量奈乙酸用少量0.1mol/LNaOH溶液溶解溶液溶解,苄基腺嘌呤用苄基腺嘌呤用少量少量0.1mol/LHCL溶解溶解3.发芽培养基发芽培养基(灭菌灭菌)4.生根培养基生根培养基(灭菌灭菌)二、菊花的组织培养(一)设备及用品1.100ml三角瓶或9(三三)步骤步骤1.取外植体取外植体超净台上将无菌幼苗切段超净台上将无菌幼苗切段,每段至少每段至少1张叶片张叶片2.生芽培养生芽培养生芽培养基中生芽培养基中,放入放入1-3段切段段切段(茎部插入培养基茎部插入培养基,盖上盖上封口膜封口膜.日光灯下保持日光灯下保持1825的温度培养的温度培养,每天光照每天光照不少于不少于14.5h3.生根培养生根培养23周后周后,将丛状苗在无菌条件下转入生根培养基中将丛状苗在无菌条件下转入生根培养基中,在上述条件下继续培养在上述条件下继续培养.4.适应锻炼适应锻炼将苗转移至草炭土或蛭石中将苗转移至草炭土或蛭石中,用玻璃罩或塑料布保持用玻璃罩或塑料布保持80以上的湿度以上的湿度,23天后打开减低湿度进行锻炼天后打开减低湿度进行锻炼,直直到将罩全部打开处于自然湿度下为止到将罩全部打开处于自然湿度下为止(三)步骤1.取外植体超净台上将无菌幼苗切段,每段至少1张叶105.定植定植将苗转移到土中培养将苗转移到土中培养6.自然生长的茎进行组织培养方法自然生长的茎进行组织培养方法:70乙醇乙醇中浸中浸泡泡10分钟分钟5次次氯酸钠氯酸钠溶液中溶液中浸泡浸泡5min5次次氯酸钠氯酸钠溶液中溶液中浸泡浸泡5min5次次氯酸钠氯酸钠溶液中溶液中浸泡浸泡5min超净超净台上台上用无用无菌水菌水清洗清洗将茎将茎移至移至生芽生芽培养培养基中基中5.定植将苗转移到土中培养6.自然生长的茎进行组织培养方法:11植物的组织培养PPT课件12课后题课后题:1.不同植物、不同组织的生根和生芽是否都可使用与本实不同植物、不同组织的生根和生芽是否都可使用与本实验相同的生长素和细胞分裂素浓度?验相同的生长素和细胞分裂素浓度?2.本实验用人工合成的激素,而不用植物中存在的天然激本实验用人工合成的激素,而不用植物中存在的天然激素,为什么?素,为什么?不可相同不可相同天然激素都有相应的使之分解的酶,所以使用天然激素都有相应的使之分解的酶,所以使用时间短,而人工合成的,没有分解酶,作用时时间短,而人工合成的,没有分解酶,作用时间长,效果显著。间长,效果显著。课后题:1.不同植物、不同组织的生根和生芽是否都可使用与本实133.如果在自然界取植物样本进行组织培养如果在自然界取植物样本进行组织培养,你认为应采取什你认为应采取什么措施保证样本不被污染么措施保证样本不被污染?(1)操作环境清洁()操作环境清洁(2)植物样本的洁净()植物样本的洁净(3)操作)操作敏捷迅速敏捷迅速3.如果在自然界取植物样本进行组织培养,你认为应采取什么措施14 脱分化:脱分化:将来自已分化组织的已停止分裂的细胞从植将来自已分化组织的已停止分裂的细胞从植物体部分的抑制性影响下解脱出来,恢复细胞的分物体部分的抑制性影响下解脱出来,恢复细胞的分裂活性。裂活性。再分化再分化:经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下经脱分化的组织或细胞在一定的培养条件下可有转变为各种不同细胞类型的能力。可有转变为各种不同细胞类型的能力。愈伤组织愈伤组织 脱分化:将来自已分化组织的已停止分裂的细胞从植物体部分的抑151、外植体带菌、外植体带菌2、培养基及接种、培养基及接种器具灭菌不彻底器具灭菌不彻底3、接种操作时带入、接种操作时带入4、环境不清洁、环境不清洁污染途径污染途径1、外植体带菌2、培养基及接种器具灭菌不彻底3、接种操作时带16污染的预防措施污染的预防措施(一)防止外植体带菌(一)防止外植体带菌(二)保证培养基及接种器具彻底灭菌(二)保证培养基及接种器具彻底灭菌(三)操作人员严格遵守无菌操作规程(三)操作人员严格遵守无菌操作规程(四)保证接种与培养环境清洁(四)保证接种与培养环境清洁污染的预防措施(一)防止外植体带菌17MS固体培养基成分及比例固体培养基成分及比例MS固体培养基成分及比例181、快乐总和宽厚的人相伴,财富总与诚信的人相伴,聪明总与高尚的人相伴,魅力总与幽默的人相伴,健康总与阔达的人相伴。2、人生就有许多这样的奇迹,看似比登天还难的事,有时轻而易举就可以做到,其中的差别就在于非凡的信念。3、影响我们人生的绝不仅仅是环境,其实是心态在控制个人的行动和思想。同时,心态也决定了一个人的视野和成就,甚至一生。4、无论你觉得自己多么了不起,也永远有人比更强;无论你觉得自己多么不幸,永远有人比你更不幸。5、也许有些路好走是条捷径,也许有些路可以让你风光无限,也许有些路安稳又有后路,可是那些路的主角,都不是我。至少我会觉得,那些路不是自己想要的。6、在别人肆意说你的时候,问问自己,到底怕不怕,输不输的起。不必害怕,不要后退,不须犹豫,难过的时候就一个人去看看这世界。多问问自己,你是不是已经为了梦想而竭尽全力了?7、人往往有时候为了争夺名利,有时驱车去争,有时驱马去夺,想方设法,不遗余力。压力挑战,这一切消极的东西都是我进取成功的催化剂。8、真想干总会有办法,不想干总会有理由;面对困难,智者想尽千方百计,愚者说尽千言万语;老实人不一定可靠,但可靠的必定是老实人;时间,抓起来是黄金,抓不起来是流水。9、成功的道路上,肯定会有失败;对于失败,我们要正确地看待和对待,不怕失败者,则必成功;怕失败者,则一无是处,会更失败。1、快乐总和宽厚的人相伴,财富总与诚信的人相伴,聪明总与高尚的人相伴,魅力总与幽默的人相伴,健康总与阔达的人相伴。2、人生就有许多这样的奇迹,看似比登天还难的事,有时轻而易举就可以做到,其中的差别就在于非凡的信念。3、影响我们人生的绝不仅仅是环境,其实是心态在控制个人的行动和思想。同时,心态也决定了一个人的视野和成就,甚至一生。4、无论你觉得自己多么了不起,也永远有人比更强;无论你觉得自己多么不幸,永远有人比你更不幸。5、也许有些路好走是条捷径,也许有些路可以让你风光无限,也许有些路安稳又有后路,可是那些路的主角,都不是我。至少我会觉得,那些路不是自己想要的。6、在别人肆意说你的时候,问问自己,到底怕不怕,输不输的起。不必害怕,不要后退,不须犹豫,难过的时候就一个人去看看这世界。多问问自己,你是不是已经为了梦想而竭尽全力了?7、人往往有时候为了争夺名利,有时驱车去争,有时驱马去夺,想方设法,不遗余力。压力挑战,这一切消极的东西都是我进取成功的催化剂。8、真想干总会有办法,不想干总会有理由;面对困难,智者想尽千方百计,愚者说尽千言万语;老实人不一定可靠,但可靠的必定是老实人;时间,抓起来是黄金,抓不起来是流水。14、成长是一场和自己的比赛,不要担心别人会做得比你好,你只需要每天都做得比前一天好就可以了。15、最终你相信什么就能成为什么。因为世界上最可怕的二个词,一个叫执着,一个叫认真,认真的人改变自己,执着的人改变命运。只要在路上,就没有到不了的地方。16、你若坚持,定会发光,时间是所向披靡的武器,它能集腋成裘,也能聚沙成塔,将人生的不可能都变成可能。17、人生,就要活得漂亮,走得铿锵。自己不奋斗,终归是摆设。无论你是谁,宁可做拼搏的失败者9、成功的道路上,肯定会有失败;对于失败,我们要正确地看待和对待,不怕失败者,则必成功;怕失败者,则一无是处,会更5、别着急要结果,先问自己够不够格,付出要配得上结果,工夫到位了,结果自然就出来了。6、你没那么多观众,别那么累。做一个简单的人,踏实而务实。不沉溺幻想,更不庸人自扰。7、别人对你好,你要争气,图日后有能力有所报答,别人对你不好,你更要争气望有朝一日,能够扬眉吐气。8、奋斗的路上,时间总是过得很快,目前的困难和麻烦是很多,但是只要不忘初心,脚踏实地一步一步的朝着目标前进,最后的结局交给时间来定夺。9、运气是努力的附属品。没有经过实力的原始积累,给你运气你也抓不住。上天给予每个人的都一样,但每个人的准备却不一样。不要羡慕那些总能撞大运的人,你必须很努力,才能遇上好运气。10、你的假装努力,欺骗的只有你自己,永远不要用战术上的勤奋,来掩饰战略上的懒惰。11、时间只是过客,自己才是主人,人生的路无需苛求,只要你迈步,路就在你的脚下延伸,只要你扬帆,便会有八面来风,启程了,人的生命才真正开始。12、不管做什么都不要急于回报,因为播种和收获不在同一个季节,中间隔着的一段时间,我们叫它为坚持。失败。11、学会学习的人,是非常幸福的人。米南德12、你们要学习思考,然后再来写作。布瓦罗13、在寻求真理的长河中,唯有学习,不断地学习,勤奋地学习,有创造性地学习,才能越重山跨峻岭。华罗庚14、许多年轻人在学习音乐时学会了爱。莱杰15、学习是劳动,是充满思想的劳动。乌申斯基16、我们一定要给自己提出这样的任务:第一,学习,第二是学习,第三还是学习。列宁17、学习的敌人是自己的满足,要认真学习一点东西,必须从不自满开始。对自己,“学而不厌”,对人家,“诲人不倦”,我们应取这种态度。毛泽东18、只要愿意学习,就一定能够学会。列宁19、如果学生在学校里学习的结果是使自己什么也不会创造,那他的一生永远是模仿和抄袭。列夫托尔斯泰20、对所学知识内容的兴趣可能成为学习动机。赞科夫21、游手好闲地学习,并不比学习游手好闲好。约翰贝勒斯22、读史使人明智,读诗使人灵秀,数学使人周密,自然哲学使人精邃,伦理学使人庄重,逻辑学使人善辩。培根23、我们在我们的劳动过程中学习思考,劳动的结果,我们认识了世界的奥妙,于是我们就真正来改变生活了。高尔基24、我们要振作精神,下苦功学习。下苦功,三个字,一个叫下,一个叫苦,一个叫功,一定要振作精神,下苦功。毛泽东25、我学习了一生,现在我还在学习,而将来,只要我还有精力,我还要学习下去。别林斯基、学习外语并不难,学习外语就像交朋友一样,朋友是越交越熟的,天天见面,朋友之间就亲密无间了。高士其2、对世界上的一切学问与知识的掌握也并非难事,只要持之以恒地学习,努力掌握规律,达到熟悉的境地,就能融会贯通,运用自如了。高士其3、学和行本来是有联系着的,学了必须要想,想通了就要行,要在行的当中才能看出自己是否真正学到了手。否则读书虽多,只是成为一座死书库。谢觉哉、你的假装努力,欺骗的只有你自己,永远不要用战术上的勤奋,来掩饰战略上的懒惰。11、时间只是过客,自己才是主人,人生的路无需苛求,只要你迈步,路就在你的脚下延伸,只要你扬帆,便会有八面来风,启程了,人的生命才真正开始。12、不管做什么都不要急于回报,因为播种和收获不在同一个季节,中间隔着的一段时间,我们叫它为坚持。13、你想过普通的生活,就会遇到普通的挫折。你想过最好的生活,就一定会遇上最强的伤害。这个世界很公平,想要最好,就一定会给你最痛。1、快乐总和宽厚的人相伴,财富总与诚信的人相伴,聪明总与高尚19
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