细胞化学染色

细胞化学染色细胞化学染色沧州医专医学技术系沧州医专医学技术系 侯振江侯振江细胞化学染色细胞化学染色，是一种以，是一种以形态形态为基础，结为基础，结合运用合运用化学化学或或生物化学生物化学技术对血细胞内各技术对血细胞内各种化学成分作种化学成分作定位定位、定性定性及及半定量半定量分析的分析的方法。方法。用于研究用于研究血细胞生理血细胞生理、病理病理和化学结构；和化学结构；临床上为某些血液病的诊断、鉴别诊断、临床上为某些血液病的诊断、鉴别诊断、疗效观察、预后监测和发病机制的探讨，疗效观察、预后监测和发病机制的探讨，提供重要依据。提供重要依据。血细胞化学染色的基本要求是在血细胞化学染色的基本要求是在原位原位显示细胞成分和结构，反应产物应是显示细胞成分和结构，反应产物应是有色沉淀物有色沉淀物，具有一定的，具有一定的稳定稳定性。性。血细胞化学染色可显示血细胞化学染色可显示糖原糖原、脂类脂类、酶酶、蛋白质蛋白质等。等。（一）（一）固定固定固定有固定有物理法物理法与与化学法化学法，物理法物理法为干燥和火焰固定，为干燥和火焰固定，化学法化学法最常用的是甲醛、乙醇、最常用的是甲醛、乙醇、丙酮和醋酸等。丙酮和醋酸等。血细胞化学染色流程血细胞化学染色流程（二）（二）显示显示 1、偶氮偶联法偶氮偶联法：利用人工合成的酶底物，：利用人工合成的酶底物，在酶作用下，产生分解产物，再与重氮盐在酶作用下，产生分解产物，再与重氮盐结合引起偶氮偶联，使其形成不溶性的偶结合引起偶氮偶联，使其形成不溶性的偶氮色素，以此证明酶的存在。氮色素，以此证明酶的存在。2、联苯胺法联苯胺法：粒细胞和单核细胞中的过氧：粒细胞和单核细胞中的过氧化物酶作用于过氧化氢，释放新生态氧，化物酶作用于过氧化氢，释放新生态氧，使无色的联苯胺形成蓝色沉淀。使无色的联苯胺形成蓝色沉淀。3 3、普鲁士蓝法普鲁士蓝法：细胞内、外铁与酸性亚铁：细胞内、外铁与酸性亚铁氰化钾作用，形成蓝色亚铁氰化铁沉淀。氰化钾作用，形成蓝色亚铁氰化铁沉淀。4 4、雪夫反应雪夫反应：过碘酸氧化细胞内糖类中乙：过碘酸氧化细胞内糖类中乙二醇基形成乙醛基，醛基与雪夫试剂作用，二醇基形成乙醛基，醛基与雪夫试剂作用，使无色品红形成红色沉淀。使无色品红形成红色沉淀。5 5、金属沉着法金属沉着法其他尚有物理学方法，如脂溶性染料染色其他尚有物理学方法，如脂溶性染料染色（显示脂质）、荧光显示、放射自显影以（显示脂质）、荧光显示、放射自显影以及体外活体染色亦常用于临床血液细胞学及体外活体染色亦常用于临床血液细胞学诊断。诊断。（三）（三）细胞化学定量细胞化学定量粗略估量粗略估量，以染色反应的强弱，受色的深浅，以染色反应的强弱，受色的深浅，人为地区别为阴性和各种程度的阳性。人为地区别为阴性和各种程度的阳性。百分法百分法，只能反映细胞阳性率，不能反映受，只能反映细胞阳性率，不能反映受色强弱。色强弱。积分法积分法，是常用的半定量法，将等级估量与，是常用的半定量法，将等级估量与百分率相结合它既反映了细胞阳性率的高低，百分率相结合它既反映了细胞阳性率的高低，又反映了细胞受色的强弱。又反映了细胞受色的强弱。下面介绍几种常用的细胞化学染色方下面介绍几种常用的细胞化学染色方法法这些方法学在白血病的鉴别诊断上具这些方法学在白血病的鉴别诊断上具有重要意义。有重要意义。一、过氧化物酶染色（一、过氧化物酶染色（POX）（一）（一）四甲基联苯胺法四甲基联苯胺法【原理原理】粒细胞粒细胞和和单核细胞单核细胞的胞浆内的的胞浆内的髓髓过氧化物酶过氧化物酶（POX orMPO）分解）分解过氧过氧化氢化氢，释放，释放新生态氧新生态氧，使，使无色无色联苯胺氧化联苯胺氧化成成蓝色蓝色联苯胺，后者进一步变成联苯胺，后者进一步变成棕色棕色化合化合物沉着于物沉着于细胞质细胞质内。内。【试剂试剂】1%TMB亚硝基铁氰化钠饱和溶液亚硝基铁氰化钠饱和溶液1%过氧化氢溶液过氧化氢溶液稀过氧化氢溶液稀过氧化氢溶液瑞氏染色液瑞氏染色液【操作操作】1.取取0.1%TMB乙醇溶液乙醇溶液lml，加亚硝基铁氰加亚硝基铁氰化钠饱和溶液化钠饱和溶液10ml，溶液呈淡溶液呈淡棕黄色棕黄色。2.在新鲜干燥的血片上，加混合溶液在新鲜干燥的血片上，加混合溶液0.5ml,放置放置lmin后，再加稀过氧化氢溶液后，再加稀过氧化氢溶液0.7ml，染色染色6min。3.瑞氏染液复染瑞氏染液复染1520min。4.油镜镜检。油镜镜检。【结果结果】细胞质内有细胞质内有蓝黑色颗粒蓝黑色颗粒者为阳性。者为阳性。（）（）无颗粒沉着；无颗粒沉着；（）颗粒细小颗粒细小，分布稀疏；，分布稀疏；（+）颗粒较粗，局灶分布；颗粒较粗，局灶分布；（+）颗粒粗大，分布较密，占胞质颗粒粗大，分布较密，占胞质 1/22/3；（+）颗粒粗大，呈团块分布；颗粒粗大，呈团块分布；（+）全部胞质均部满颗粒，可覆盖胞核。全部胞质均部满颗粒，可覆盖胞核。【临床意义临床意义】（1）粒系粒系：POX主要分布在主要分布在粒细胞粒细胞和和单核细胞单核细胞内，随内，随着粒细胞着粒细胞成熟成熟的程度而逐渐增强，中性分的程度而逐渐增强，中性分叶核粒细胞为叶核粒细胞为强强阳性阳性。嗜酸嗜酸性粒细胞阳性程度性粒细胞阳性程度最强最强，其阳性颗粒，其阳性颗粒比中性粒细胞粗大，有折光。比中性粒细胞粗大，有折光。碱性碱性粒细胞为粒细胞为阴性阴性。（2）单核细胞单核细胞：原始单原始单核细胞为核细胞为阴性阴性反应，反应，幼稚单幼稚单核细胞和核细胞和成熟单成熟单核细胞呈核细胞呈弱阳性弱阳性反应，颗粒细小，弥散分布。反应，颗粒细小，弥散分布。（3）其他细胞其他细胞淋巴淋巴细胞、细胞、浆浆细胞、细胞、幼红幼红细胞、细胞、组织组织细细 胞、胞、巨核巨核细胞均呈细胞均呈阴性阴性反应。反应。（4）血小板过氧化物酶血小板过氧化物酶主要定位于主要定位于幼稚型幼稚型巨核细胞的核膜上，可巨核细胞的核膜上，可作为原巨核细胞的一种标志物，有助于作为原巨核细胞的一种标志物，有助于FAB M7的识别。的识别。（5）过氧化物酶染色过氧化物酶染色主要用于主要用于鉴别急性白血病类型鉴别急性白血病类型，急性髓细胞白血病多呈急性髓细胞白血病多呈阳性阳性反应，以反应，以M3和和M2型反应最型反应最强强，MI和和M5型反应较型反应较弱弱，故有助于区别故有助于区别M3和和M5型。型。急性淋巴细胞白血病急性淋巴细胞白血病呈呈POX阴性阴性反应，故反应，故为为急性髓细胞急性髓细胞和和淋巴细胞白血病鉴别淋巴细胞白血病鉴别的重的重要指标。要指标。AML-M1M1-POX(+)二、苏丹黑二、苏丹黑B染色染色【原理原理】苏丹黑苏丹黑B(sudan black B,SB)是一种能是一种能溶溶解于脂肪解于脂肪中的中的色素色素染料，可使细胞内的染料，可使细胞内的中中性脂肪性脂肪、磷脂磷脂和和类固醇类固醇着色，即使细胞内着色，即使细胞内微细结构的脂类物质也能显示出来。微细结构的脂类物质也能显示出来。【试剂试剂】1.10%甲醛液。甲醛液。2.苏丹黑苏丹黑B乙醇溶液乙醇溶液【操作操作】1干燥血片或骨髓片在甲醛蒸气中固定。干燥血片或骨髓片在甲醛蒸气中固定。2自来水冲洗。自来水冲洗。3放人染色液中，放人染色液中，37 染色染色3060min。4用用70%乙醇脱色乙醇脱色12min，水洗水洗lmin。.5瑞氏染液复染瑞氏染液复染2030min。【结果结果】脂类呈黑色或脂类呈黑色或棕黑色棕黑色颗粒，定位于细胞浆中颗粒，定位于细胞浆中（+）颗粒很小，细小、稀疏，或胞质局部面积的颗粒很小，细小、稀疏，或胞质局部面积的1/4有致密的颗粒。有致密的颗粒。（+）颗粒较少，或胞质面积的）颗粒较少，或胞质面积的1/2出现黑色颗粒。出现黑色颗粒。（+）颗粒较密，或胞质面积的）颗粒较密，或胞质面积的3/4出现黑色颗粒。出现黑色颗粒。（+）颗粒极密，颗粒间颗粒极密，颗粒间无间隙无间隙。【临床意义临床意义】1.粒细胞系粒细胞系早幼粒早幼粒及以下阶段随着细胞成熟，及以下阶段随着细胞成熟，阳性颗粒阳性颗粒逐渐增加逐渐增加。早期原粒早期原粒细胞一般为细胞一般为阴性阴性，少数细小点状颗，少数细小点状颗粒代表线粒体被染色粒代表线粒体被染色晚期原粒晚期原粒细胞可出现细胞可出现阳性颗粒阳性颗粒，其颗粒限于，其颗粒限于胞浆的某一区域。胞浆的某一区域。2.单核细胞系单核细胞系阳性，阳性，颗粒细小，分布弥散，形状不规则。颗粒细小，分布弥散，形状不规则。原单核原单核细胞细胞为阴性为阴性。3红细胞系红细胞系、淋巴细胞系淋巴细胞系均呈均呈阴性阴性反应反应4尼曼一匹克细胞尼曼一匹克细胞和和戈谢细胞戈谢细胞均为均为阳性阳性反应。反应。5苏丹黑苏丹黑B和过氧化物酶染色临床意义相和过氧化物酶染色临床意义相似，主要用于似，主要用于急性白血病类型的鉴别急性白血病类型的鉴别。苏丹黑苏丹黑B染色较过氧化物酶染色更染色较过氧化物酶染色更敏感敏感，但，但特异性不如过氧化物酶染色（极少数急性特异性不如过氧化物酶染色（极少数急性淋巴细胞白血病可为阳性）。淋巴细胞白血病可为阳性）。M1-SBB(+)M2-SBB(+)三、过碘酸一雪夫（三、过碘酸一雪夫（PAS)染色染色【原理原理】胞浆内存在胞浆内存在糖原糖原或或多糖类多糖类物质（如粘多糖、物质（如粘多糖、粘蛋白、糖蛋白、糖脂等）中的粘蛋白、糖蛋白、糖脂等）中的乙二醇基乙二醇基（CHOH-CHOH）经过经过碘酸碘酸（periodic acid）氧化，转变为氧化，转变为二醛基二醛基（CHO-CHO），），与与雪夫雪夫(Schiff)试剂中的试剂中的无色品红无色品红结合，形结合，形成成紫红色染料紫红色染料而沉积于而沉积于胞浆胞浆中。该反应称中。该反应称为过碘酸一雪夫为过碘酸一雪夫(PAS)阳性反应。阳性反应。【结果结果】（1）粒细胞系：）粒细胞系：原粒原粒细胞多呈细胞多呈阴性阴性反应，也可反应，也可弱阳性弱阳性。自自早幼粒早幼粒细胞以后随着细胞的成熟程度，细胞以后随着细胞的成熟程度，阳性反应阳性反应逐渐增强逐渐增强。嗜酸粒嗜酸粒细胞颗粒本身不着色，但颗粒间的细胞颗粒本身不着色，但颗粒间的胞质胞质呈弥漫性呈弥漫性阳性阳性反应；反应；嗜碱粒嗜碱粒细胞为细胞为阳性阳性反应，颗粒紫红色，大反应，颗粒紫红色，大小不一。小不一。中性粒细胞糖原含量参考标准中性粒细胞糖原含量参考标准（-）胞质胞质无颗粒无颗粒（+）胞质呈胞质呈淡红色淡红色，无颗粒无颗粒（+）胞质呈胞质呈红色红色，有，有少量少量颗粒颗粒（+）胞质呈胞质呈暗红色暗红色，颗粒，颗粒较密较密（+）胞质呈）胞质呈紫红色紫红色，颗粒，颗粒极密极密过碘酸过碘酸-Schiff反应反应(PAS)（2）淋巴细胞系：）淋巴细胞系：大多数淋大多数淋巴细胞呈巴细胞呈阴阴 性性反应，反应，少数少数为（为（+）的）的阳性阳性反应。反应。淋巴细胞糖原含量程度参考标准淋巴细胞糖原含量程度参考标准 （-）胞质内胞质内无颗粒无颗粒 （+）胞质内胞质内有颗粒有颗粒 （+）有有较粗较粗红色颗粒红色颗粒 （+）有有粗大粗大红色颗粒红色颗粒 （+）颗粒颗粒粗大粗大并有并有红色块状红色块状 （3）红细胞系：）红细胞系：幼红幼红细胞和细胞和红红细胞呈细胞呈阴性阴性反应反应 红细胞系列糖原含量程度参考标准红细胞系列糖原含量程度参考标准 （-）胞质无颗粒胞质无颗粒 （+）有少数红色颗粒有少数红色颗粒 （+）有较粗红色颗粒或弥漫红色有较粗红色颗粒或弥漫红色 （+）有粗大红色颗粒或深红色有粗大红色颗粒或深红色 （+）有粗大红色块状或紫红色）有粗大红色块状或紫红色 （4）巨核细胞：）巨核细胞：巨核巨核细胞和细胞和血小板血小板染色反应均为染色反应均为阳性阳性 巨核细胞糖原含量程度参考标准巨核细胞糖原含量程度参考标准 （-）胞质无颗粒胞质无颗粒 （+）少量糖原包涵体少量糖原包涵体 （+）中等量糖原包涵体，定位于核膜中等量糖原包涵体，定位于核膜 出或分散胞质中，占胞质出或分散胞质中，占胞质1/3 （+）大量糖原包涵体分散于胞质的）大量糖原包涵体分散于胞质的1/2 （+）糖原包涵体充满整个胞质）糖原包涵体充满整个胞质 PAS 巨核细胞巨核细胞巨核细胞包涵体（5）单核细胞单核细胞呈呈阴性阴性或或阳性阳性，颗粒细小，往，颗粒细小，往往位于胞质往位于胞质边缘边缘；浆细胞浆细胞大多呈大多呈阴性阴性，少数为红色颗粒阳性；，少数为红色颗粒阳性；组织细胞组织细胞为为阴性阴性反应；反应；巨噬细胞巨噬细胞可呈可呈阳性阳性，为红色颗粒反应。，为红色颗粒反应。【临床意义临床意义】（1）M6与巨幼贫的鉴别与巨幼贫的鉴别 M6的幼红细胞的幼红细胞PAS可呈可呈强阳性强阳性，积分明，积分明显增高，显增高，巨贫巨贫、再障、溶贫时、再障、溶贫时PAS反应为反应为阴阴性性。（2）急性白血病的类型鉴别）急性白血病的类型鉴别 ALL，PAS呈大块状阳性，也可是阴性，呈大块状阳性，也可是阴性，AML为为阴性阴性，急性单核细胞白血病时，急性单核细胞白血病时原单原单核核细胞及细胞及幼单幼单核细胞核细胞PAS阳性阳性，积分增高，阳，积分增高，阳性颗粒小而多，呈弥散分布。性颗粒小而多，呈弥散分布。ALL-L1L1 PAS(+)AML-M5M5 PAS(+)AML-M6AML-M6 PAS(+)AML-M7M7 PAS(+)（3）巨核细胞）巨核细胞和和Sternberg细胞鉴别细胞鉴别 巨核巨核细胞细胞PAS强阳性强阳性，Sternberg细胞为阴细胞为阴性或弱阳性。性或弱阳性。（4）戈谢氏细胞强阳性戈谢氏细胞强阳性，尼曼尼曼-皮克皮克细胞细胞阴阴性或弱阳性性或弱阳性。（5）淋巴肉瘤、霍奇金病等，淋巴细胞的糖）淋巴肉瘤、霍奇金病等，淋巴细胞的糖原积分增高；一般的病毒感染，糖原积分原积分增高；一般的病毒感染，糖原积分在正常范围内。在正常范围内。四、中性粒细胞碱性磷酸酶染色四、中性粒细胞碱性磷酸酶染色偶氮偶联法（偶氮偶联法（Kaplow法）法）【原理原理】中性粒细胞胞浆中的中性粒细胞胞浆中的碱性磷酸酶碱性磷酸酶在在pH 9.29.8缓冲液中，能水解磷酸萘酚缓冲液中，能水解磷酸萘酚钠，并释放出钠，并释放出磷酸磷酸与与萘酚萘酚。再以。再以重氮盐重氮盐与与萘酚萘酚偶联成不溶性有色偶联成不溶性有色偶氮染料偶氮染料沉淀于沉淀于胞胞浆浆中。中。【结果结果】坚牢蓝坚牢蓝RR阳性为阳性为紫黑色紫黑色颗粒，颗粒，坚牢紫酱坚牢紫酱GBC阳性为阳性为棕红色棕红色沉淀。沉淀。“一一”阴性反应，胞浆中阴性反应，胞浆中无无阳性染色颗粒。阳性染色颗粒。“”胞浆中含有胞浆中含有少量少量颗粒或呈弥散浅红色（或颗粒或呈弥散浅红色（或弥散紫色）。弥散紫色）。“2”胞浆中含有胞浆中含有中等量中等量颗粒或弥散受色。颗粒或弥散受色。“3”胞浆中有胞浆中有丰富的丰富的颗粒或弥散深色，胞核颗粒或弥散深色，胞核清晰。清晰。“4”有有极丰富极丰富的粗大颗粒，充满胞浆，或弥的粗大颗粒，充满胞浆，或弥散深色，胞核不清晰。散深色，胞核不清晰。中性粒细胞碱性磷酸酶中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)偶氮偶联法 NAP积分法积分法 计数计数100个成熟中性粒细胞，按其反应强度分级，各个成熟中性粒细胞，按其反应强度分级，各级百分率与其级数乘积的总和，即为积分。级百分率与其级数乘积的总和，即为积分。例如：例如：NAP反应结果（反应结果（%）（-）（+）（+）（+）（+）20 40 20 15 5 积分积分=（020）+（220）+（315）+（45）=145 参考值：正常人血细胞碱性磷酸酶除成熟中性粒细胞（杆状核及分叶核）参考值：正常人血细胞碱性磷酸酶除成熟中性粒细胞（杆状核及分叶核）可见阳性外，其他血细胞均为阴性。可见阳性外，其他血细胞均为阴性。中性粒细胞中性粒细胞NAP活性积分值一般为活性积分值一般为1050分，但有时可高分，但有时可高达达162分分。【临床意义临床意义】（1）生理变化：）生理变化：新生儿新生儿NAP增高，成人较儿童减低，老增高，成人较儿童减低，老人更低；人更低；激烈运动激烈运动增高；增高；月经期月经期经前增高，行经后降低，经后期经前增高，行经后降低，经后期恢复正常；恢复正常；妊娠期妊娠期2-3月轻度增高，以后逐渐增高，月轻度增高，以后逐渐增高，分娩分娩时达到高峰，产后恢复正常。时达到高峰，产后恢复正常。（2）、病理变化）、病理变化 增高增高：严重：严重化脓性感染化脓性感染、类白血病反应、类白血病反应、AA、CML加速期、加速期、ALL、CLL、恶性淋巴、恶性淋巴瘤、癌转移、瘤、癌转移、MM、真红、骨髓纤维化等。、真红、骨髓纤维化等。减低减低：PNH、CML、恶性组织细胞病、恶性组织细胞病、MDS。（3）疾病鉴别诊断）疾病鉴别诊断 慢粒与类白的鉴别：慢粒与类白的鉴别：CML减低减低，类白增高类白增高。急性白血病的鉴别：急性白血病的鉴别：AML减低减低，ALL增高增高。PNH与与AA鉴别：鉴别：PNH减低减低，AA增高增高。病原微生物的鉴别：病原微生物的鉴别：病毒感染减低病毒感染减低，细菌感细菌感染增高染增高。NAP(+)CML-NAP(-)五、骨髓铁染色五、骨髓铁染色 【原理】【原理】正常人骨髓中的贮存铁主要存在于正常人骨髓中的贮存铁主要存在于骨髓骨髓小粒小粒和和幼红细胞幼红细胞中，骨髓中的铁在中，骨髓中的铁在酸性酸性环境下与环境下与亚亚铁氰化钾铁氰化钾作用，形成作用，形成普鲁士蓝普鲁士蓝反应，形成反应，形成蓝色蓝色的的亚亚铁氰化铁铁氰化铁沉淀，定位于含铁的部位，沉淀，定位于含铁的部位，从而反映骨髓从而反映骨髓中铁的储存量。化学反应过程为：中铁的储存量。化学反应过程为：4 Fe3+3 K4Fe（CN）6 Fe4Fe（CN）6312 K+（含铁物质）含铁物质）（亚铁氰化钾）（亚铁氰化钾）（亚铁氰化铁）（亚铁氰化铁）【结果】【结果】（1）细胞外铁的观察细胞外铁的观察：细胞外铁细胞外铁呈呈蓝色蓝色的颗粒状、小株状或团块状。的颗粒状、小株状或团块状。以油镜观察定级标准以油镜观察定级标准 （-）无铁粒可见。无铁粒可见。（+）少数铁粒或铁小珠。少数铁粒或铁小珠。（+）较多铁粒和铁小珠。较多铁粒和铁小珠。（+）很多铁粒、铁小珠和少数小块。很多铁粒、铁小珠和少数小块。（+）极多铁粒、铁小珠并有很多小块，密）极多铁粒、铁小珠并有很多小块，密集成堆。集成堆。正常范围：正常范围：+，“+”占占2/3，“+”占占1/3。细胞外铁细胞外铁（2）细胞内铁观察：）细胞内铁观察：细胞内铁细胞内铁指指有核红细胞有核红细胞胞质胞质内出现内出现蓝色蓝色颗颗粒，以油镜计粒，以油镜计100个中、晚幼红细胞，记录个中、晚幼红细胞，记录胞质中含有蓝色小颗粒（即胞质中含有蓝色小颗粒（即铁粒红细胞铁粒红细胞）的比值。并根据细胞铁颗粒的数目、大小、的比值。并根据细胞铁颗粒的数目、大小、染色深浅和颗粒分布情况，将铁粒幼红细染色深浅和颗粒分布情况，将铁粒幼红细胞分为如下四型：胞分为如下四型：型：仅含型：仅含1-2个铁颗粒。个铁颗粒。型：含型：含3-4个铁颗粒。个铁颗粒。型：含型：含6-9个以上铁颗粒。个以上铁颗粒。型：型：10个铁颗粒。个铁颗粒。正常范围：正常范围：30%90%，平均平均60%，多见多见型，少见型，少见型，无型，无、型。型。细胞内铁细胞内铁（3）环形铁粒幼红细胞环形铁粒幼红细胞：指含铁颗粒指含铁颗粒6个个，其中，其中2/3以上以上铁颗粒铁颗粒围绕核周排列成完整环形或不完整围绕核周排列成完整环形或不完整环形环形。正常或非铁粒幼细贫血正常或非铁粒幼细贫血无无环形铁粒幼细环形铁粒幼细胞，胞，铁粒幼细贫血铁粒幼细贫血中环形铁粒幼细胞中环形铁粒幼细胞6%。环形铁粒幼细胞环形铁粒幼细胞【临床意义】【临床意义】1缺铁性贫血缺铁性贫血时，时，骨骨髓髓细细胞胞外外铁铁明明显显减减少少，为为“一一”“士士”，细胞内铁平均，细胞内铁平均5.9%，仅为，仅为I型。型。经有效铁剂治疗后，外铁增多。经有效铁剂治疗后，外铁增多。因此骨髓铁染色是诊断因此骨髓铁染色是诊断缺铁性贫血缺铁性贫血及及指导指导铁剂治疗铁剂治疗的重要方法。的重要方法。2铁粒幼细胞性贫血铁粒幼细胞性贫血时，时，外铁外铁“2”一一“3”，内铁平均，内铁平均70%，其铁粒粗大，以，其铁粒粗大，以 型为主，型为主，出现较多环形铁粒幼细胞。出现较多环形铁粒幼细胞。因此，本实验是诊断因此，本实验是诊断铁粒幼细胞贫血铁粒幼细胞贫血的有效方法。的有效方法。MDS也可出现环形铁粒幼细胞。也可出现环形铁粒幼细胞。3.非缺铁性贫血非缺铁性贫血如如巨巨幼幼细细胞胞贫贫血血、溶溶血血性性贫贫血血、再再生生障障碍碍性贫血等骨髓铁正常或不同程度的增加。性贫血等骨髓铁正常或不同程度的增加。但但再再生生障障碍碍性性贫贫血血不不会会出出现现环环形形铁铁粒粒幼幼细细胞，可作为与胞，可作为与MDS鉴别的参考。鉴别的参考。4.继继发发性性贫贫血血的的部部分分患患者者细细胞胞内内铁铁可可减减少少，但细胞外铁不减少。但细胞外铁不减少。谢谢！谢谢！