钩端螺旋体病说课专选课件

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资源描述
钩端螺旋体病钩钩体体呈呈细细长长丝丝状状,圆圆柱柱形形,螺螺旋旋盘盘绕绕细细致致,有有12121818个个螺螺旋旋,规规则则而而紧紧密密。一一端端或或两两端端弯弯曲曲成成钩钩状状,使使菌菌体体呈呈C C或或S S字字形形。钩钩体体运运动动活活泼泼,沿沿长长轴轴旋旋转转运运动动。中中央央部部分分僵僵直直,两两端端柔柔软软,有有较较强强的的穿穿透透力力。对对人人、家家畜畜、野野生生动动物物都都有有致病性。致病性。钩钩体体长长度度一一般般为为4 420m20m,平平均均6 610m10m,直直径平均为径平均为0.10.10.2m0.2m。病原学病原学问题:采用何种方法对菌体进行观察和检查?问题:采用何种方法对菌体进行观察和检查?在暗示野显微镜下较易见到发亮的活动螺旋体。钩体在暗示野显微镜下较易见到发亮的活动螺旋体。钩体的结构:菌体、轴丝、外膜。的结构:菌体、轴丝、外膜。菌体由胞壁、胞浆膜、胞浆组成。菌体由胞壁、胞浆膜、胞浆组成。轴丝为钩体的运动器官,也是其支持结构。轴丝为钩体的运动器官,也是其支持结构。外膜薄而透明,具有抗原活性,产生保护性抗体。外膜薄而透明,具有抗原活性,产生保护性抗体。革兰氏染色阴性。但钩体不易着色。可用镀银染色或革兰氏染色阴性。但钩体不易着色。可用镀银染色或甲苯胺蓝染色等方法检测。也可用荧光抗体染色检测。甲苯胺蓝染色等方法检测。也可用荧光抗体染色检测。取血、尿及脑脊液检测病原,但阳性率不高。取血、尿及脑脊液检测病原,但阳性率不高。可超速离心集菌后直接镜检,以达到快速诊断目的。可超速离心集菌后直接镜检,以达到快速诊断目的。据据19861986年年国国际际微微生生物物学学会会统统计计,全全世世界界已已发发现现的的钩钩体体共共有有2323个个血血清清群群(serogroupserogroup),200200个个血血清清型型(serovarserovar)。我我国国已已知知有有1919群群161161型型,是是世世界界上上发发现现血血清清型型最最多多的的国国家家。其其中较常见的有中较常见的有1313个血清群、个血清群、1515个血清型。个血清型。钩钩端端螺螺旋旋体体的的型型别别不不同同,对对机机体体的的毒毒力力、致致病力也不同。病力也不同。钩钩端端螺螺旋旋体体在在宿宿主主体体内内主主要要存存在在于于肾肾脏脏、尿尿液液和和脊脊髓髓液液里里,在在急急性性发发热热期期,广广泛泛存存在在于于血液和各内脏器官。血液和各内脏器官。某某些些致致病病菌菌型型在在体体内内产产生生的的钩钩体体代代谢谢产产物物如如内内毒毒素素样样物物质质,细细胞胞毒毒性性因因子子、细细胞胞致致病病作作用物质及溶血素等可引发机体剧烈反应。用物质及溶血素等可引发机体剧烈反应。钩钩体体是是需需氧氧菌菌,常常用用柯柯氏氏(korthofkorthof)培培养养基基和和希希夫夫纳纳培培养养基基(pH pH 7.27.27.57.5)25253030培培养养。培培养养基基中中需需加加入入新新鲜鲜灭灭活活的的兔兔血血清清。钩钩端端螺螺旋旋体体严严格格需需氧氧,其其生生化化特特性性不不活活泼泼,不能发酵糖类。不能发酵糖类。如何进行采样和培养?如何进行采样和培养?早早期期钩钩体体血血症症时时取取病病人人血血液液,床床旁旁接接种种于于含含兔兔血血清清的的柯柯氏氏培培养养基基中中,置置28 28 孵孵育育,约约1 1周左右生长,阳性可达周左右生长,阳性可达30305050。钩钩端端螺螺旋旋体体对对外外界界环环境境有有较较强强的的抵抵抗抗力力,可可以以在在水水田田、池池塘塘、沼沼泽泽和和淤淤泥泥里里至至少少生生存存数数月。在低温下能存活较长时间。月。在低温下能存活较长时间。钩钩体体对对干干燥燥非非常常敏敏感感,干干燥燥环环境境下下数数分分钟钟即即可可死死亡亡,极极易易被被稀稀盐盐酸酸、70%70%酒酒精精、漂漂白白粉粉、来来苏苏儿儿、石石炭炭酸酸、肥肥皂皂水水和和0.5%0.5%升升汞汞灭灭活活。钩钩体体对对理理化化因因素素的的抵抵抗抗力力较较弱弱,如如紫紫外外线线、温热温热50505555,30min30min均可被杀灭。均可被杀灭。如何进行消毒?如何进行消毒?猪猪钩钩端端螺螺旋旋体体病病呈呈世世界界性性分分布布我我国国长长江江流流域域和和南南方方各各地地常常有有该该病病的的发发生生和和流流行行。近近年年来来黑黑龙龙江江、新新疆疆等等地地也也有有流流行行的的报报道道。在在夏夏、秋秋多多雨雨季节为流行高峰期。季节为流行高峰期。猪猪的的带带菌菌率率和和发发病病率率较较高高。一一般般呈呈隐隐性性感感染染,也时有暴发。其临诊症状表现形式多样。也时有暴发。其临诊症状表现形式多样。急急性性病病例例以以发发热热、贫贫血血、水水肿肿、黄黄疸疸、血血红红蛋蛋白尿、流产、皮肤和粘膜坏死为特征。白尿、流产、皮肤和粘膜坏死为特征。猪猪的的排排菌菌量量大大,排排菌菌期期长长,而而且且与与人人接接触触的的机机会最多,对人造成的威胁较大。会最多,对人造成的威胁较大。猪钩端螺旋体病猪钩端螺旋体病传传染染源源 主主要要是是发发病病猪猪和和带带菌菌猪猪。钩钩端端螺螺旋旋体体可可随随带带菌菌猪猪和和发发病病猪猪的的尿尿、乳乳和和唾唾液液等等排排于于体体外外污污染染环环境境;鼠鼠类类和和蛙蛙类类也也是是重重要要的的传传染染源源。它它们们都都是是该该菌菌的的自自然然贮贮存存宿宿主主。鼠鼠类类能能终终生生带带菌,通过尿液排菌,造成环境的长期污染。菌,通过尿液排菌,造成环境的长期污染。传传播播途途径径 主主要要途途径径为为皮皮肤肤,其其次次是是消消化化道道、呼吸道以及生殖道粘膜。呼吸道以及生殖道粘膜。易易感感性性 各各年年龄龄的的猪猪均均可可感感染染,但但仔仔猪猪发发病病较较多多,特特别别是是哺哺乳乳仔仔猪猪和和断断奶奶仔仔猪猪发发病病最最严严重重。中、大猪一般病情较轻。母猪不发病。中、大猪一般病情较轻。母猪不发病。流行病学流行病学 多多见见于于仔仔猪猪,特特别别是是哺哺乳乳仔仔猪猪和和保保育育猪猪,呈呈暴暴发发或或散散发发流流行行。潜潜伏伏期期1 12 2周周。临临诊诊症症状状表表现现为为突突然然发发病病,体体温温升升高高至至40404141,稽稽留留3 35 5天天。病病猪猪精精神神沉沉郁郁,厌厌食食,腹腹泻泻,皮皮肤肤干干燥燥,全全身身皮皮肤肤和和粘粘膜膜黄黄疸疸,后后肢肢出出现现神神经经性性无无力力,震震颤颤。有有的的病病例例出出现现血血红红蛋蛋白白尿尿,尿尿液液色色如如浓浓茶茶;粪粪便便呈呈绿绿色色,有有恶恶臭臭味味,可可见见血血粪粪。死死亡亡率达率达5050以上。以上。临诊症状(急性型)临诊症状(急性型)主主要要以以损损害害生生殖殖系系统统为为特特征征。病病初初体体温温有有不不同同程程度度升升高高,眼眼结结膜膜潮潮红红、浮浮肿肿,有有的的泛泛黄黄,有有的的下下颌颌、头头部部、颈颈部部和和全全身身水水肿肿。母母猪猪一一般般无无明明显显的的临临诊诊症症状状,有有时时可可表表现现出出发发热热、无无乳乳。妊妊娠娠不不足足4 45 5周周的的母母猪猪,感感染染后后4 47 7天天可可发发生生流流产产和和死死产产,流流产产率率可可达达20207070。怀怀孕孕后后期期的的母母猪猪感感染染后后可可产产弱弱仔仔,仔仔猪猪不不能能站站立立,不不会吸乳,会吸乳,1 12 2天死亡。天死亡。临诊症状(亚急性和慢性型)临诊症状(亚急性和慢性型)此此型型以以败败血血症症、全全身身性性黄黄疸疸和和各各组组织织器器官官广广泛泛性出血以及坏死为主要特征。性出血以及坏死为主要特征。皮皮肤肤、皮皮下下组组织织、浆浆膜膜和和粘粘膜膜、肝肝脏脏、肾肾脏脏以以及及膀膀胱胱等等组组织织黄黄染染和和不不同同程程度度的的出出血血;胸胸腔腔及及心心包包内内有有浑浑浊浊的的黄黄色色积积液液;肺肺淤淤血血、水水肿肿,表表面面有有出出血血点点;脾脾脏脏肿肿大大、淤淤血血,或或有有出出血血性性梗梗死死;肝肝脏脏肿肿大大,呈呈土土黄黄色色或或棕棕色色,质质脆脆,胆胆囊囊充充盈盈、淤淤血血,被被膜膜下下可可见见出出血血灶灶;肾肾脏脏肿肿大大、淤淤血血、出出血血;肠肠及及肠肠系系膜膜充充血血;肠肠系系膜膜、腹腹股股沟及颌下淋巴结肿大,呈灰白色。沟及颌下淋巴结肿大,呈灰白色。病理变化病理变化 (急性型)(急性型)各各部部位位组组织织水水肿肿,以以头头颈颈部部、腹腹部部、胸胸壁壁、四四肢肢最最明明显显;肾肾脏脏、肺肺脏脏、肝肝脏脏、心心外外膜膜出出血血明明显显;浆浆膜膜腔腔内内常常可可见见有有过过量量的的黄黄色色液液体体与与纤纤维维蛋白;肝脏、脾脏、肾脏肿大。蛋白;肝脏、脾脏、肾脏肿大。成年猪的慢性病例以肾脏病变最明显。成年猪的慢性病例以肾脏病变最明显。病理变化病理变化 (亚急性和慢性型)(亚急性和慢性型)1 1微微生生物物学学诊诊断断 采采集集病病猪猪血血液液、尿尿液液,或或病病死死猪猪的的肝肝、肾肾、脾脾和和脑脑等等组组织织。死死后后检检查查要要在在1-3h1-3h内内进进行行,否否则则菌菌体体大大部部分分会会发发生生溶溶解解。用用暗暗视视野野显显微微镜镜直直接接镜镜检检或或用用免免疫疫荧荧光光抗抗体体法法检检查查。组组织织中中的的菌菌体体可可染染色色后后检检查查。病病料料可可用用作病原体的分离培养。作病原体的分离培养。2 2血血清清学学诊诊断断 主主要要有有凝凝集集溶溶解解试试验验、微微量量补补体体结结合合试试验验、酶酶联联免免疫疫吸吸附附试试验验(ELISA)(ELISA)、炭炭凝凝集集试试验验、间间接接血血凝凝试试验验、间间接接荧荧光光抗抗体体法法以及乳胶凝集试验。以及乳胶凝集试验。诊断诊断1 1使使用用1010氟氟甲甲砜砜霉霉素素(肌肌注注,0.2ml/kg.b.w,0.2ml/kg.b.w,qd5)qd5)、磺磺胺胺类类药药物物(磺磺胺胺-5-5-甲甲氧氧嘧嘧啶啶,肌肌注注0.07g/kg.b.w0.07g/kg.b.w,bid5)bid5)。链链霉霉素素、土土霉霉素素等等四四环环素素类类抗抗生生素素也也有有一一定定的的疗疗效效。病病情情严严重重的的可可用用维生素、葡萄糖进行输液治疗。维生素、葡萄糖进行输液治疗。2 2感感染染猪猪群群可可用用土土霉霉素素拌拌料料(0.75(0.751.5g/kg)1.5g/kg)连连喂喂7 7天天,可可以以预预防防和和控控制制病病情情的的蔓蔓延延。妊妊娠娠母母猪猪产产前前1 1个个月月连连续续用用土土霉霉素素拌拌料料饲饲喂喂,可可以以防防止止发发生流产。生流产。治疗治疗1 1做好猪舍环境、水源、饲料的消毒工作。做好猪舍环境、水源、饲料的消毒工作。2 2及时发现、淘汰和处理带菌猪。及时发现、淘汰和处理带菌猪。3 3搞好灭鼠工作。搞好灭鼠工作。4 4用灭活菌苗对有病猪的猪群进行免疫接种。用灭活菌苗对有病猪的猪群进行免疫接种。预防预防是是绵绵羊羊和和山山羊羊共共患患的的一一种种传传染染病病,其其特特征征为为显显著著的的黄黄疸疸、血血尿尿、皮皮肤肤和和粘粘膜膜出出血血与与坏坏死死。全全年均可发病,以夏、秋放牧期间更为多见。年均可发病,以夏、秋放牧期间更为多见。传传染染的的主主要要来来源源是是病病畜畜和和鼠鼠类类。病病畜畜和和鼠鼠类类从从尿尿中中排排菌菌,污污染染饲饲料料和和水水源源,可可以以通通过过消消化化道道和和皮皮肤肤传传给给健健羊羊,有有时时也也可可通通过过鼠鼠咬咬伤伤、结结膜膜或或上上呼呼吸吸道道粘粘膜膜传传染染,间间或或可可能能通通过过交交配配传传染染或胎内感染。或胎内感染。羊钩端螺旋体病羊钩端螺旋体病(传染性黄疸传染性黄疸)最最急急性性、急急性性 体体温温升升高高到到404041.541.5,呼呼吸吸加加快快,脉脉速速。粘粘膜膜发发黄黄。尿尿呈呈红红色色,有有下下痢痢。眼眼发发生生结结膜膜炎炎,流流泪泪。鼻鼻腔腔流流出出黏黏液液脓脓性性或或脓脓性性分分泌泌物物,鼻鼻孔孔周周围围的的皮皮肤肤破破裂裂。病病期期持持续续5 510d10d,死亡率达,死亡率达5050以上。以上。亚亚急急性性 症症状状与与急急性性者者大大体体相相同同。体体温温升升高高后后可可迅迅速速降降到到常常温温。黄黄疸疸及及血血色色素素尿尿很很显显著著。耳耳部部、躯躯干干及及乳乳头头部部的的皮皮肤肤发发生生坏坏死死。胃胃肠肠道道显显著著弛弛缓缓,发发生生严严重重的的便便秘秘。虽虽然然可可能能痊痊愈愈,但但极为缓慢。死亡率为极为缓慢。死亡率为24242525。临诊症状临诊症状尸尸体体消消瘦瘦,可可见见粘粘膜膜呈呈深深浅浅不不同同的的黄黄色色。皮皮下下组组织织水水肿肿而而黄黄染染。胸胸、腹腹腔腔内内有有黄黄色色液液体体。肝肝脏增大,呈黄褐色,质脆弱或柔软。脏增大,呈黄褐色,质脆弱或柔软。肾肾脏脏的的病病变变具具有有诊诊断断意意义义。肾肾剧剧烈烈增增大大,被被膜膜很很容容易易剥剥离离,髓髓质质与与皮皮质质的的界界限限消消失失,组组织织柔柔软而脆。病期长久时,则肾脏变为坚硬。软而脆。病期长久时,则肾脏变为坚硬。肺肺脏脏黄黄染染,有有时时水水肿肿,心心脏脏淡淡红红,大大多多数数情情况况下带有淡黄色。膀胱黏膜出血。下带有淡黄色。膀胱黏膜出血。脑脑室室中中聚聚积积有有大大量量液液体体。血血液液稀稀薄薄如如水水,红红细细胞溶解,在空气中长时间不能凝固。胞溶解,在空气中长时间不能凝固。剖检剖检1 1直直接接镜镜检检钩钩端端螺螺施施体体 采采血血液液、尿尿液液、脑脑脊脊液液、肝肝、肾肾、脾脾、脑脑等等病病料料。血血液液、尿尿、脊脊髓髓液液以以3000rpm3000rpm离离心心30min30min,取取沉沉淀淀物物制制成成压压滴滴标标本本,在在暗暗视视野野显显微微镜镜下下检检查查;肝肝、肾肾、脾脾组组织织先先制制成成1:51:51:101:10悬悬液液,经经1500rpm1500rpm离离心心5 510min10min,其其上上清清液液再再以以3000rpm3000rpm离离心心30min30min,沉沉淀物制片镜检。淀物制片镜检。2 2血血清清学学检检查查 凝凝集集溶溶解解试试验验、补补体体结结合合试试验验、间间接接血血凝凝试试验验及及酶酶联联免免疫疫吸吸附附试试验验,均均可可用于诊断。用于诊断。诊断诊断1 1注意环境卫生,作好灭鼠、排水工作。注意环境卫生,作好灭鼠、排水工作。2 2对对新新进进入入场场的的羊羊只只,应应隔隔离离检检疫疫3030天天,必必要时进行血清学检查。要时进行血清学检查。3 3隔隔离离病病羊羊以以后后,将将其其他他假假定定健健康康的的羊羊转转移移到具有新饮水处的安全放牧地区。到具有新饮水处的安全放牧地区。4 4彻彻底底清清除除病病羊羊舍舍的的粪粪便便及及污污物物,用用10102020生生石石灰灰水水或或2 2NaOHNaOH严严格格消消毒毒。对对饲饲槽槽、水水桶桶及及其其他他日日常常用用具具,应应用用开开水水或或热热草草木木灰灰水水处理,将粪便堆集起来,进行生物热消毒。处理,将粪便堆集起来,进行生物热消毒。预防预防5 5当当羊羊群群或或牧牧场场发发生生本本病病时时,应应当当宣宣布布为为疫疫群群或或疫疫场场,采采取取一一定定的的限限制制措措施施。在在最最后后一一只只病病羊羊痊痊愈愈后后30d30d,并并进进行行预预防防消消毒毒的的情情况况下下,才可解除限制措施。才可解除限制措施。6 6在在常常发发病病地地区区,应应该该有有计计划划地地进进行行死死菌菌苗苗或或鸡鸡胚胚化化菌菌苗苗或或多多价价浓浓缩缩菌菌苗苗注注射射。免免疫疫期期可可达一年。达一年。急急性性型型 突突然然高高热热,粘粘膜膜发发黄黄,尿尿色色深深,有有大大量量白白蛋蛋白白、血血红红蛋蛋白白和和胆胆色色素素。常常见见皮皮肤肤干干裂裂、坏坏死和溃疡。于发病后死和溃疡。于发病后3 3-7-7日死亡。病死率较高。日死亡。病死率较高。亚亚急急性性型型 常常见见于于乳乳牛牛。体体温温有有不不同同程程度度升升高高,食食欲欲减减少少,粘粘膜膜黄黄疸疸,奶奶量量显显著著下下降降或或停停止止。乳乳色色变变黄黄如如初初乳乳状状并并常常有有血血凝凝块块,病病牛牛很很少少死死亡亡。经两月后逐渐好转,乳量恢复正常。经两月后逐渐好转,乳量恢复正常。流产是牛钩端螺旋体病的重要症状之一。一些流产是牛钩端螺旋体病的重要症状之一。一些牛群暴发本病的唯一症状就是流产。牛群暴发本病的唯一症状就是流产。牛钩端螺旋体病牛钩端螺旋体病由由致致病病性性钩钩端端螺螺旋旋体体所所引引起起的的急急性性传传染染病病。按按流流行行形形式式一一般般分分为为稻稻田田型型、洪洪水水型型和和雨雨水水型型。南南方方以以稻稻田田型型和和雨雨水水型型为为主主,北北方方以以洪洪水水型型和和雨雨水水型型为为主主。钩钩体体病病主主要要以以农农村村青青壮壮年发病为主,集中在农忙季节。年发病为主,集中在农忙季节。传染源传染源 鼠类、猪及其它家畜。鼠类、猪及其它家畜。传传播播途途径径 钩钩体体随随带带菌菌动动物物尿尿排排出出并并污污染染水水源源。人人接接触触疫疫水水时时,通通过过皮皮肤肤、粘粘膜膜感感染染。多发生在夏秋割稻季节或大雨洪水之后。多发生在夏秋割稻季节或大雨洪水之后。人钩端螺旋体病人钩端螺旋体病起病急骤。起病急骤。早早期期 有有高高热热、倦倦怠怠无无力力、全全身身酸酸痛痛、结结膜膜充充血、腓肠肌压痛、表浅淋巴结肿大;血、腓肠肌压痛、表浅淋巴结肿大;中中期期 可可伴伴有有肺肺弥弥漫漫性性出出血血,明明显显的的肝肝、肾肾、中枢神经系统损害;中枢神经系统损害;晚晚期期 多多数数病病人人痊痊愈愈。少少数数病病人人出出现现后后发发热热、眼结膜炎以及脑动脉闭塞性炎症等。眼结膜炎以及脑动脉闭塞性炎症等。致死原因致死原因 肺弥漫性出血。肝、肾功能衰竭。肺弥漫性出血。肝、肾功能衰竭。临床特征临床特征1.1.流行病学史流行病学史在在钩钩体体病病流流行行季季节节,发发病病前前一一个个月月内内有有疫疫区区旅旅居居史史,并并接接触触过过可可疑疑疫疫水水或或动动物物及及其其排泄物。排泄物。诊断标准诊断标准2.2.早期主要症状和体征早期主要症状和体征发发热热。短短期期内内体体温温可可达达3939左左右右,常常为为弛弛张张热热,可可伴伴有有畏畏寒寒等等症症状状;肌肌痛痛。全全身身肌肌痛痛,特特别别是是腓腓肠肠肌肌痛痛;乏乏力力。全全身身乏乏力力,特特别别是是腿腿软软明明显显;眼眼结结膜膜充充血血。轻轻者者主主要要在在眼眼球球结结膜膜、外外眦眦及及上上下下穹穹窿窿部部,重重者者除除角角膜膜周周围围外外的的全全球球结结膜膜血血管管扩扩张张呈呈网网状状,无无分分泌泌物物,不不痛痛,不不畏畏光光;腓腓肠肠肌肌压压痛痛。双双侧侧腓腓肠肠肌肌压压痛痛,重重者者拒拒按按;淋淋巴巴结结肿肿大大。主主要要为为表表浅浅淋淋巴巴结结及及股股淋淋巴巴结结,一一般般为为1 12cm2cm,质质偏偏软软,有有压压痛痛,无化脓。无化脓。3.3.实验室诊断实验室诊断从血液或脑脊液或尿液分离到钩端螺旋体。从血液或脑脊液或尿液分离到钩端螺旋体。从从血血液液或或尿尿液液或或脑脑脊脊液液检检测测到到钩钩端端螺螺旋旋体体核核酸。酸。病病人人血血清清中中抗抗钩钩端端螺螺旋旋体体抗抗体体恢恢复复期期效效价价比比早期升高早期升高4 4倍或倍或4 4倍以上。倍以上。1.1.败血症期败血症期起起病病至至1 1周周左左右右,血血液液中中存存在在钩钩体体。本本期期可可有有4 4种种临临床床类类型型:普普通通型型;肺肺出出血血型型;黄黄疸出血型;疸出血型;脑膜脑炎型。脑膜脑炎型。2.2.免疫反应期免疫反应期约约在在发发病病1 1周周左左右右,出出现现免免疫疫反反应应,再再度度出出现现短短期期发发热热,部部分分病病例例出出现现眼眼结结膜膜炎炎、视视神神经经炎炎,少少数数于于发发病病数数月月后后出出现现脑脑动动脉脉炎炎,引引起起头痛、瘫痪、失语等神经症状。头痛、瘫痪、失语等神经症状。临床表现过程临床表现过程黄黄疸疸出出血血型型、秋秋季季型型、澳澳洲洲型型、犬犬型型等等毒毒力力较较强强的的钩钩体体菌菌型型的的感感染染,常常引引起起黄黄疸疸、出出血血和肾功能衰竭;和肾功能衰竭;伤伤寒寒流流感感型型、7 7日日热热型型,特特别别是是波波摩摩那那型型等等毒毒力较弱的感染,则常引起钩体病的轻型。力较弱的感染,则常引起钩体病的轻型。病情的轻重还与人体免疫状态的高低有关。病情的轻重还与人体免疫状态的高低有关。普通型普通型突突然然畏畏寒寒、寒寒战战、发发热热,呈呈稽稽留留或或弛弛张张热热。全全身身酸酸痛痛,腓腓肠肠肌肌疼疼痛痛尤尤为为显显著著。患患者者衰衰弱弱无无力力。眼眼结结膜膜充充血血,不不痒痒亦亦无无分分泌泌物物。表表浅浅淋巴结肿大,以腹股沟淋巴结肿大为多见。淋巴结肿大,以腹股沟淋巴结肿大为多见。少少数数重重症症患患者者毒毒血血症症显显著著,于于发发病病2 25 5日日出出现现面面色色苍苍白白,四四肢肢冰冰冷冷,脉脉搏搏细细弱弱,血血压压下下降降,少少尿尿或或无无尿尿,进进入入休休克克。常常伴伴有有吐吐泻泻,而发热、充血等症状不明显。而发热、充血等症状不明显。肺出血型肺出血型败败血血症症出出现现3 35 5日日,开开始始出出现现咳咳嗽嗽,痰痰带带血血丝丝。患患者者面面色色苍苍白白,心心慌慌烦烦躁躁,呼呼吸吸、心心率率加加快快,肺肺湿湿啰啰音音进进行行性性增增多多,此此为为肺肺大大出出血血先先兆兆。数数小小时时内内可可发发展展至至面面色色极极度度苍苍白白、唇唇发发绀绀、肺肺满满布布湿湿啰啰音音。咯咯血血频频作作,若若未未能能控控制制,可可发发生生口口鼻鼻大大量量涌涌血血,呼呼吸吸困困难难或或因因呼呼吸道为血块梗阻而窒息。吸道为血块梗阻而窒息。黄疸出血型黄疸出血型发发病病3 36 6病病日日,开开始始出出现现黄黄疸疸,肝肝肿肿大大伴伴压压痛痛。黄黄疸疸于于1010病病日日左左右右达达高高峰峰,重重者者可可发发生生肝肝坏坏死死。重重症症常常有有鼻鼻衄衄、皮皮肤肤粘粘膜膜出出血血、呕呕血血、便便血血、尿尿血血、阴阴道道出出血血等等。尿尿中中常常见见细细胞胞、蛋蛋白白、管管型型。重重者者尿尿少少、尿尿闭闭,发发生生尿尿毒症、酸中毒。毒症、酸中毒。脑膜脑炎型脑膜脑炎型发发病病4 47 7日日,剧剧烈烈头头痛痛、呕呕吐吐、颈颈项项强强直直、克克氏氏征征阳阳性性。脑脑脊脊液液细细胞胞数数稍稍增增多多,蛋蛋白白轻轻度度增增加加,可可分分离离出出钩钩体体。少少数数重重症症患患者者呈呈现现脑脑炎炎症症状状,发发生生昏昏迷迷、惊惊厥厥,甚甚至至循循环环、呼呼吸衰竭。吸衰竭。血象:血白细胞总数及中性粒细胞增高。血象:血白细胞总数及中性粒细胞增高。病病原原分分离离:取取早早期期病病人人血血液液接接种种柯柯索索夫夫培培养基,分离钩体。养基,分离钩体。血血清清学学检检查查:凝凝集集溶溶解解试试验验,效效价价14001400以以上上为为阳阳性性;双双份份血血清清效效价价呈呈4 4倍倍以以上上增增长长者者可可确确诊诊。乳乳凝凝试试验验、反反向向乳乳凝凝试试验验可作快速诊断。可作快速诊断。实验室检查实验室检查1.1.对症治疗和支持疗法对症治疗和支持疗法早早期期应应卧卧床床休休息息,给给予予高高热热量量,富富含含维维生生素素B B和和C C,容易消化的饮食;,容易消化的饮食;保持水、电解质和酸碱平衡;保持水、电解质和酸碱平衡;出出血血严严重重者者应应立立即即输输血血并并及及时时应应用用止止血血剂剂。肺肺大大出出血血者者,应应使使病病人人保保持持镇镇静静,酌酌情情应应用用镇静剂;镇静剂;肝功能损害者应保肝治疗。肝功能损害者应保肝治疗。治疗措施治疗措施2.2.抗菌治疗抗菌治疗早早期期应应用用有有效效的的抗抗生生素素。有有提提前前退退热热,缩缩短短病期,防止和减轻黄疸、出血,保护脏器。病期,防止和减轻黄疸、出血,保护脏器。青青霉霉素素。首首次次剂剂量量为为4040万万u u,以以后后每每日日120120160160万万u u,分分3 34 4次次肌肌肉肉注注射射,避避免免发发生生赫赫氏氏反反应应。儿儿童童剂剂量量酌酌减减或或与与成成人人基基本本相相同同。疗疗程程7 7天天,或或体体温温正正常常后后2 24 4日日。重重症症病病例例加加大大剂量,并合用肾上腺皮质激素。剂量,并合用肾上腺皮质激素。其其他他抗抗生生素素。四四环环素素、庆庆大大霉霉素素、链链霉霉素素、红红霉霉素素、氯氯霉霉素素、多多西西环环素素(强强力力霉霉素素)、氨苄西林等。咪唑酸酯及甲唑醇。氨苄西林等。咪唑酸酯及甲唑醇。赫氏反应赫氏反应多多发发生生于于首首剂剂青青霉霉素素G G注注射射后后3030分分钟钟4 4小小时时内,因大量钩体被杀灭后释放毒素所致。内,因大量钩体被杀灭后释放毒素所致。主主要要症症状状为为突突然然寒寒战战、高高热热、头头痛痛、全全身身酸酸痛痛、心心率率、呼呼吸吸加加快快,原原有有的的症症状状加加重重,并并可可伴伴有有血血压压下下降降、四四肢肢厥厥冷冷、休休克克、体体温温骤骤降降等等,一一般般持持续续3030分分钟钟至至1 1小小时时,偶偶可可导导致致肺肺弥弥漫漫性性出出血血,应应立立即即应应用用氢氢化化考考的的松松200200300mg300mg静静滴滴或或地地塞塞米米松松5 510mg10mg静静注注,伴伴用用镇镇静降温、抗休克等治疗。静降温、抗休克等治疗。3.3.后发症治疗后发症治疗多多采采取取对对症症治治疗疗。重重症症患患者者可可用用肾肾上上腺腺皮皮质质激素以加速恢复,减少后遗症。激素以加速恢复,减少后遗症。1.1.结结膜膜炎炎扩扩瞳瞳,1%1%阿阿托托品品溶溶液液、10%10%新新福福林林溶溶液液滴滴眼眼,1%1%新新福福林林结结膜膜下下注注射射或或用用强强力力扩扩瞳瞳剂剂(1%1%阿阿托托品品、4%4%可可卡卡因因、0.1%0.1%肾肾上上腺腺素素各各0.1ml0.1ml)结结膜膜下下注注射射等等;眼眼部部热热敷敷;局局部部用用可的松滴眼或结膜下注射。可的松滴眼或结膜下注射。2.2.脑脑内内闭闭塞塞性性动动脉脉炎炎大大剂剂量量青青霉霉素素G G、肾肾上上腺腺皮皮质质激激素素,亦亦可可用用血血管管扩扩张张剂剂如如烟烟酸酸、氢氢溴溴酸酸樟樟柳柳碱碱(AT-3AT-3)、氨氨茶茶碱碱、理理疗疗及及针针灸灸等疗法。等疗法。1.1.入侵途径、体内繁殖及全身感染中毒症状入侵途径、体内繁殖及全身感染中毒症状钩钩体体自自皮皮肤肤破破损损处处或或各各种种粘粘膜膜如如口口腔腔、鼻鼻、肠肠道道、眼眼结结膜膜等等侵侵入入人人体体内内,经经淋淋巴巴管管或或小小血血管管至至血血循循环环和和全全身身各各脏脏器器(包包括括脑脑脊脊液液和和眼眼部部),迅迅速速繁繁殖殖引引起起菌菌血血症症。钩钩体体穿穿透透能能力力极极强强,可可引引起起严严重重的的感感染染中中毒毒症症状状,以以及及肝肝、肾肾、肺肺、肌肌肉肉和和中中枢枢神神经经系系统统等等病病变变。其病变基础是全身毛细血管损伤。其病变基础是全身毛细血管损伤。发病机理发病机理2.2.内脏器官损害内脏器官损害各各脏脏器器损损害害的的严严重重度度因因钩钩体体菌菌型型、毒毒力力及及人人体体的的反反应应不不同同,钩钩体体病病的的的的表表现现复复杂杂多多样样,病病变变程程度度不不一一,临临床床往往往往由由于于某某个个脏脏器器病病变变突突出出,而而出出现现不不同同的的临临床床类类型型,如如肺肺弥弥漫漫性性出出血血型型、黄黄疸疸出出血血型型、肾肾功功能能衰衰竭竭型型和和脑脑膜膜脑炎型等。脑炎型等。3.3.中后期非特异性反应和特异性反应中后期非特异性反应和特异性反应非非特特异异性性反反应应 血血液液中中的的中中性性粒粒细细胞胞增增多多,但但不不化化脓脓,仅仅出出现现轻轻微微炎炎症症反反应应。网网状状内内皮皮细细胞胞增增生生明明显显,有有明明显显的的吞吞噬噬能能力力。出出现现腹腹股沟及其他表浅淋巴结肿大。股沟及其他表浅淋巴结肿大。特特异异性性免免疫疫反反应应 发发病病后后1 1周周左左右右,先先后后出出现现IgMIgM、IgGIgG。病病程程1 1月月左左右右其其效效价价达达高高峰峰。抗抗体体出出现现后后钩钩体体血血症症逐逐渐渐消消失失。肾肾脏脏中中的的钩钩体体不不受受血血液液中中特特异异性性抗抗体体的的影影响响,能能在在肾肾脏脏中中生生存繁殖并常随尿液排出。存繁殖并常随尿液排出。1.1.肺肺脏脏主主要要病病变变为为出出血血,以以弥弥漫漫性性出出血血最最为为显显著著。是是人人体体对对毒毒力力强强、数数量量多多的的钩钩体体所所引引起起的的全全身身性性强强烈烈反反应应。组组织织学学检检查查可可见见到到肺肺组组织织毛毛细细血血管管完完整整,但但极极度度充充血血、淤淤血血以以致致溢溢血血(并并未未见见明明显显血血管管破破裂裂)。在在变变性性的的内内皮皮细细胞胞内内有有时时可可见见变变性性的的钩钩体体。肺肺比比正正常常重重1 12 2倍倍,外外观观呈呈紫紫黑黑色色。切切面面呈呈暗暗红红色色。气管或支气管几乎全为血液充满。气管或支气管几乎全为血液充满。病理改变病理改变2.2.肾肾脏脏主主要要是是肾肾小小管管上上皮皮细细胞胞变变性性、坏坏死死。肾肾小小管管管管腔腔扩扩大大、管管腔腔内内充充满满血血细细胞胞或或透透明明管管型型,可可使使管管腔腔阻阻塞塞。间间质质性性肾肾小小球球肾肾炎炎是是钩钩体体病病的的基基本本病病变变。电电镜镜下下小小球球内内皮皮细细胞胞无无改改变变,免免疫疫复复合合物物和和补补体体沉沉积积在在肾肾小小球球基基底底膜膜上上。肾肾间间质质呈呈现现水水肿肿,有有大大单单核核细细胞胞、淋淋巴巴细细胞胞及及少少数数嗜嗜酸酸性性和和中中性性粒粒细细胞胞浸浸润润。多多数数肾肾组组织织内内可可找到钩体。找到钩体。3.3.肝肝脏脏肝肝组组织织损损伤伤轻轻重重不不一一,病病程程越越长长,损损害害越越大大。病病变变轻轻者者外外观观无无明明显显异异常常。严严重重病病例例镜镜下下可可见见肝肝细细胞胞退退行行性性变变,脂脂肪肪变变,坏坏死死,严严重重的的肝肝细细胞胞排排列列紊紊乱乱;电电镜镜下下可可见见肝肝窦窦或或微微细细胆胆小小管管的的微微绒绒毛毛肿肿胀胀,管管腔腔闭闭塞塞。肝肝细细胞胞线线粒粒体体肿肿胀胀,嵴嵴突突消消失失。在在分分离离的的间间隔隔中中可可找找到到钩钩体体。由由于于肝肝脏脏的的炎炎症症、坏坏死死,毛毛细细胆胆管管的的阻阻塞塞及及溶溶血血等等多多种种因因素素可可导导致致黄黄疸疸和和凝凝血血功功障障碍碍,甚者造成急性肝功能衰竭。甚者造成急性肝功能衰竭。4.4.心心脏脏心心肌肌损损害害常常常常是是钩钩体体病病的的重重要要病病变变。心心包包有有少少数数出出血血点点、灶灶性性坏坏死死。间间质质炎炎症症和和水水肿肿。心心肌肌纤纤维维普普遍遍浊浊肿肿、部部分分病病例例有有局局灶灶性性心心肌肌坏坏死死及及肌肌纤纤维维溶溶解解。心心血血管管的的损损伤伤主主要要表表现现为全身毛细血管的损伤。为全身毛细血管的损伤。传染源传染源鼠鼠和和猪猪是是二二个个主主要要传传染染源源。国国内内鼠鼠类类中中,黑黑线线姬姬鼠鼠、黄黄毛毛鼠鼠和和黄黄胸胸鼠鼠等等带带菌菌率率较较高高,所所带带菌菌群群亦亦多多;家家畜畜中中,猪猪携携带带的的菌菌群群与与人人的的流流行行菌菌群群完完全全一一致致,且且分分布布广广、数数量量多多;与与人人接接触触密密切切,猪猪尿尿能能污污染染居居民民点点内内各各种种水水源源;带带菌菌率率高高,排排菌菌时时间间长长(370370天天以以上上);尿尿量量大大,尿尿内内钩钩体体数数量量多多;猪猪圈圈潮潮湿湿多多水水,泥泥土土和和积积水水内内存存在在大大量量钩钩体体。犬犬、牛牛等等也也是是重重要要的的传传染染源源。血血清清学学检检查查证证明明,蛇蛇、鸡鸡、鸭鸭、鹅鹅、蛙、兔等动物有可能是钩体的储存宿主。蛙、兔等动物有可能是钩体的储存宿主。流行病学流行病学传播途径传播途径1.1.经经皮皮肤肤 接接触触带带菌菌野野生生动动物物体体后后传传染染给给家家畜畜/人人,家家畜畜再再传传染染给给人人/野野生生动动物物;人人群群经经常常接接触触被被钩钩体体污污染染的的环环境境(水水和和土土壤壤等等),钩钩体体经经破破损损皮皮肤肤侵侵入入机机体体。(外外在在环环境境如如土土壤壤等等偏偏碱,气温碱,气温2222以上,钩体容易生长)。以上,钩体容易生长)。2.2.经经鼻鼻腔腔粘粘膜膜或或消消化化道道粘粘膜膜 钩钩体体可可通通过过消消化化道道、呼呼吸吸道道和和生生殖殖系系统统的的粘粘膜膜侵侵入入机机体体。如如喝喝了大量疫水,吃了被钩体污染的食品时。了大量疫水,吃了被钩体污染的食品时。3.3.其其他他从从羊羊水水、胎胎盘盘、脐脐血血、乳乳汁汁及及流流产产儿儿的的肝肝肾肾组组织织中中都都能能分分离离出出钩钩体体,说说明明可可通通过过哺哺乳及先天性感染而传播。乳及先天性感染而传播。易感人群易感人群人人群群对对本本病病普普遍遍易易感感。常常与与疫疫水水接接触触者者多多为为农农民民、渔渔民民、下下水水道道工工人人、屠屠宰宰工工人人及及饲饲养养员员,因因而而从从事事农农业业、渔渔业业劳劳动动者者发发病病率率较较高高。从从外外地地进进入入疫疫区区的的人人员员,由由于于缺缺乏乏免免疫疫力力,往往往往比比本本地地人人易易感感。病病后后可可得得较较强强的的同同型型免免疫疫力力。在在气气温温较较高高地地区区、屠屠宰宰场场、矿矿区区等等,终终年年可可见见散散发病例。发病例。流行特征流行特征1.1.发发病病年年龄龄分分布布以以10103939岁岁为为最最多多,男男性性占占80%80%以以上上。多多为为青青壮壮年年农农民民(从从事事牧牧、渔渔业业劳劳动者发病率亦高),农村儿童并非少见,年龄动者发病率亦高),农村儿童并非少见,年龄2.2.好好发发季季节节为为7 79 9月月,8 8、9 9月月达达高高峰峰,因因而而有有“打谷黄打谷黄”、“稻瘟病稻瘟病”之称。之称。3.3.流流行行形形式式根根据据我我国国钩钩体体病病的的流流行行特特点点,大大致致可可分分四四个个主主要要流流行行;雨雨水水型型;稻稻田田型型;洪水型;洪水型;散发型。散发型。4.4.外来人员易感性强。外来人员易感性强。1.1.常规检查与血液生化检查常规检查与血液生化检查无无黄黄疸疸病病例例的的血血白白细细胞胞总总数数和和中中性性粒粒细细胞胞数数正正常常或或轻轻度度升升高高;黄黄疸疸病病例例的的白白细细胞胞计计数数大大多多增增高高,中中性性粒粒细细胞胞在在81%81%95%95%之之间间;出出血血患者可有贫血、血小板减少。患者可有贫血、血小板减少。70%70%的的病病人人有有轻轻度度蛋蛋白白尿尿、白白细细胞胞、红红细细胞胞或或管型出现。黄疸病例有胆红素增高。管型出现。黄疸病例有胆红素增高。血血清清转转氨氨酶酶可可以以升升高高,但但增增高高的的幅幅度度与与病病情情的的轻轻重重并并不不平平行行。50%50%的的病病例例有有肌肌酸酸磷磷酸酸激激酶酶(CPKCPK)增高(平均值是正常值的)增高(平均值是正常值的5 5倍)。倍)。辅助检查辅助检查2.2.特异性检测特异性检测病原体分离病原体分离 在在发发病病1010天天内内可可从从血血液液及及脑脑脊脊液液中中分分离离出出钩钩体。第二周尿中可检出钩体。体。第二周尿中可检出钩体。超超速速离离心心集集菌菌后后镜镜检检、荧荧光光抗抗体体染染色色、原原血血片片镀镀银银染染色色及及甲甲苯苯蓝蓝染染色色等等方方法法直直接接检检查查病病原体,阳性率在原体,阳性率在50%50%左右,有助于早期诊断。左右,有助于早期诊断。早早期期患患者者的的血血液液或或其其他他体体液液接接种种于于幼幼年年豚豚鼠鼠或或金金黄黄地地鼠鼠腹腹腔腔内内,晚晚期期病病例例可可用用尿尿液液接接种种于腹部皮下。于腹部皮下。3 35 5天后检查腹腔液或血液。天后检查腹腔液或血液。血清学试验血清学试验凝凝集集溶溶价价试试验验(凝凝溶溶试试验验)、酶酶联联免免疫疫吸吸附附试试验验(ELISAELISA)、间间接接红红细细胞胞凝凝集集试试验验、间间接接红红细细胞胞溶溶解解试试验验、间间接接荧荧光光抗抗体体法法是是用用已已知知钩钩体体抗抗原原检检测测血血中中出出现现的的相相应应抗抗体体,不不能能做做到到早早期期诊诊断断。近近年年来来开开展展了了乳乳胶胶凝凝集集抑抑制制试试验验,反反向向间间接接血血凝凝试试验验与与间间接接荧荧光光抗抗体体染染色色试试验验等等可可以以测测出出血血中中早早期期存存在在的的钩钩体体,已已取取得了早期诊断的初步成果。得了早期诊断的初步成果。凝集溶价试验(凝溶试验)凝集溶价试验(凝溶试验)有有较较高高的的特特异异性性和和敏敏感感性性,但但需需不不同同型型别别活活菌菌操操作作,凝凝集集素素一一般般在在病病后后7 78 8天天出出现现,逐逐渐渐升升高高,可可持持续续数数月月到到数数年年。间间隔隔两两周周双双份份血清,效价增高血清,效价增高4 4倍以上为阳性。倍以上为阳性。酶联免疫吸附试验(酶联免疫吸附试验(ELISAELISA)比比凝凝溶溶试试验验阳阳性性出出现现时时间间更更早早和和更更灵灵敏敏。显显微微镜镜凝凝集集试试验验与与ELISAELISA的的总总符符合合率率达达86.2%86.2%。近近年年来来国国外外已已普普遍遍采采用用钩钩体体IgMIgM抗抗体体技技术术,有有高度特异性。高度特异性。间接红细胞凝集试验间接红细胞凝集试验将将从从钩钩体体菌菌体体中中提提取取的的一一种种抗抗原原成成分分,将将其其吸吸附附于于人人“O”O”型型红红细细胞胞表表面面致致敏敏,遇遇到到同同种种抗抗体体,即即发发生生红红细细胞胞凝凝集集现现象象,本本试试验验具具钩钩体体感感染染的的属属特特异异性性而而无无群群或或型型的的特特异异性性,较较凝凝溶溶试试验验阳阳性性出出现现早早,操操作作简简便便,不不需需特特殊殊设备,适合基层推广应用。设备,适合基层推广应用。间接红细胞溶解试验间接红细胞溶解试验用用钩钩体体抗抗原原物物质质将将新新鲜鲜绵绵羊羊红红细细胞胞致致敏敏,在在补补体体存存在在的的条条件件下下与与含含有有抗抗体体的的血血清清混混合合时时发发生生溶溶血血,较较间间接接红红细细胞胞凝凝集集试试验验的的灵灵敏敏性性为高。为高。间接荧光抗体法间接荧光抗体法将将标标准准钩钩体体菌菌株株作作成成涂涂片片,然然后后将将检检测测病病人人的的血血清清滴滴在在已已知知菌菌株株的的玻玻片片上上,经经洗洗涤涤,如如病病人人血血清清中中具具有有抗抗体体,抗抗原原抗抗体体结结合合,再再用用抗抗人人球球蛋蛋白白荧荧光光抗抗体体与与此此复复合合物物结结合合,发发生生荧荧光光,即即为为阳阳性性,此此法法无无型型特特异异法法。本本法法检检出出抗抗体体时时间间及及阴阴转转时时间间均均较较显显凝凝试试验验抗抗体体为为早,具有一定的早期诊断意义。早,具有一定的早期诊断意义。早期诊断早期诊断钩钩端端螺螺旋旋体体DNADNA探探针针技技术术:一一种种敏敏感感性性高高的的早早期期诊诊断断方方法法。用用黄黄疸疸出出血血群群哥哥本本哈哈根根型型WijnbergWijnberg株株DNADNA制制备备探探针针,可可在在硝硝酸酸纤纤维维素素滤滤膜膜上上检检出出2pg2pg的的同同源源DNADNA。且且致致病病性性钩钩体体不不同同血清群血清群PatocPatoc株呈交义杂交现象。株呈交义杂交现象。DNADNA基基因因扩扩增增(PCRPCR)技技术术:一一个个新新型型诊诊断断方方法法。因因PCRPCR只只要要有有引引物物便便可可进进行行试试验验,且且方方法法简便,适用于大数量标本的流行病学调查。简便,适用于大数量标本的流行病学调查。-:完全无凝集,与对照管相同。:完全无凝集,与对照管相同。(A A)+:25%25%以上钩端螺旋体凝集呈小蜘蛛状,大多数游离且运动活泼。以上钩端螺旋体凝集呈小蜘蛛状,大多数游离且运动活泼。+:50%50%以上钩端螺旋体凝集呈蜘蛛状,约有半数未凝集。以上钩端螺旋体凝集呈蜘蛛状,约有半数未凝集。(B)(B)+:75%75%以上钩端螺旋体凝集呈蜘蛛状,其间有少数游离。以上钩端螺旋体凝集呈蜘蛛状,其间有少数游离。(C)(C)+:几乎全部钩端螺旋体凝集呈巨大蜘蛛状。:几乎全部钩端螺旋体凝集呈巨大蜘蛛状。(DEF)(DEF)1.1.管理传染源管理传染源疫疫区区内内应应灭灭鼠鼠,加加强强猪猪、犬犬、羊羊、牛牛等等家家畜畜的检疫工作。发现病人及时隔离。的检疫工作。发现病人及时隔离。2.2.切断传染途径切断传染途径对对流流行行区区的的水水稻稻田田、池池溏溏、沟沟溪溪、积积水水坑坑及及准准备备开开荒荒的的地地区区进进行行调调查查;加加强强疫疫水水、粪粪便便管管理理,修修建建厕厕所所,改改良良猪猪圈圈。不不让让畜畜粪粪尿尿污污染染附附近近池池溏溏、稻稻田田和和积积水水;对对污污染染的的水水源源、积积水水可可用用漂漂白白粉粉及及其其他他有有效效药药物物进进行行喷喷洒洒消消毒毒;管管理理好好饮饮食食,防防止止带带菌菌鼠鼠的的排排泄泄物物污污染染食品。食品。预预 防防3.3.保护易感人群保护易感人群个个人人防防护护在在流流行行区区和和流流行行季季节节,禁禁止止青青壮壮年年及及儿儿童童在在疫疫水水中中游游泳泳、涉涉水水或或捕捕鱼鱼。与与疫疫水水接接触触的的工工人人、农农民民尽尽量量穿穿长长统统靴靴和和戴戴胶胶皮皮手套,并防止皮肤破损、减少感染机会。手套,并防止皮肤破损、减少感染机会。免免疫疫接接种种 皮皮下下注注射射多多价价菌菌苗苗。被被注注射射者者可可产产生生对对同同型型钩钩体体的的免免疫疫力力,维维持持1 1年年左左右右。接接种种对对象象为为易易感感人人群群及及疫疫水水接接触触者者。预预防防接接种种宜宜在在本本病病流流行行前前1 1个个月月,2 2次次注注射射的的间间隔隔时时间间为为7 71010天天。接接种种后后1 1个个月月左左右右产产生生免免疫疫力力。新疫区需连续普种新疫区需连续普种3 34 4年,以使疫情稳定。年,以使疫情稳定。4.4.预防性治疗预防性治疗对对实实验验室室、流流行行病病学学工工作作人人员员以以及及新新进进疫疫区区的的劳劳动动者者,疑疑似似感感染染本本病病,但但尚尚无无明明显显症症状状者者,可可每每日日肌肌注注青青霉霉素素G G 8080120120万万u u,连连续续2 23 3天做为预防用药。天做为预防用药。1.1.病人血液的直接镜检病人血液的直接镜检取取早早期期病病人人血血液液一一滴滴,加加蒸蒸馏馏水水一一滴滴,使使血血细细胞胞溶溶解解,在在暗暗视视野野显显微微镜镜下下检检查查有有否否活活动动的钩端螺旋体。的钩端螺旋体。取取早早期期病病人人静静脉脉血血1 12mL2mL于于无无菌菌试试管管中中待待凝凝固固。离离心心沉沉淀淀,吸吸取取血血清清与与血血细细胞胞交交界界处处略略显显白白色色的的悬悬液液。涂涂片片后后暗暗视视野野显显微微镜镜检检查查有有否活动的钩端螺旋体。否活动的钩端螺旋体。附录附录-病原学和血清学诊断方法病原学和血清学诊断方法2 2 培养分离病原体培养分离病原体病人血液培养病人血液培养采采集集早早期期病病人人血血液液,无无菌菌操操作作接接种种于于2 23 3管管KorthofKorthof培培养养基基中中,每每管管接接种种1 13 3滴滴,置置2828培培养养。每每隔隔5 57d7d取取培培养养物物暗暗视视野野显显微微镜镜下下观观察察有有无无钩钩端端螺螺旋旋体体生生长长。若若连连续续培培养养60d60d,仍仍不见钩体,判为阴性结果。不见钩体,判为阴性结果。病人尿液培养病人尿液培养接接取取病病后后两两周周以以上上病病人人中中段段尿尿303050ml50ml于于无无菌菌离离心心管管中中,350035004000rpm4000rpm离离心心1h1h。取取沉沉渣渣0.30.30.5ml0.5ml接接种种于于2 24 4管管KorthofKorthof培培养养基基中中,2828孵育。每隔孵育。每隔5 57d7d取材镜检。取材镜检。为为提提高高检检出出率率和和减减少少污污染染,在在采采集集尿尿标标本本的的前前一一晚晚给给病病人人服服碳碳酸酸氢氢钠钠(NaHCONaHCO3 3)2 24g4g,同同时时,在在培培养养基基中中加加入入100100400g/ml 400g/ml 5-5-氟氟脲嘧啶或脲嘧啶或1/20001/2000的磺胺嘧啶。的磺胺嘧啶。3.3.显微镜凝集试验(显微镜凝集试验(MATMAT)抗原的选择抗原的选择将将我我国国1515群群1515型型钩钩端端螺螺旋旋体体代代表表株株于于KorthofKorthof培培养养基基中中,2828培培养养5 57d7d,暗暗视视野野显显微微镜镜检检查查,每每400400倍倍视视野野下下不不少少于于5050条条,运运动动活活泼泼并并无自凝者可作显凝抗原。无自凝者可作显凝抗原。抗原的制备抗原的制备病病人人血血清清5656水水浴浴灭灭活活30min30min,用用生生理理盐盐水水以以150150(早早期期病病人人血血清清)或或11001100(恢恢复复期期)和和15001500两两个个稀稀释释度度作作定定性性试试验验:两两个个稀稀释释度度血血清清以以及及作作对对照照用用的的生生理理盐盐水水各各取取50l50l,取取1515个个代代表表株株的的培培养养液液依依次次加加入入每每列列的的三三个个孔孔中中。摇摇匀匀后后3737孵孵育育1.51.52h2h。暗暗视视野野显显微微镜镜下下观观察察凝凝集集情情况况。凝凝集集滴滴度度按按原原血血清清稀稀释释倍数倍数22计算。计算。终点凝集滴度的判定终点凝集滴度的判定以以出出现现凝凝集集(即即视视野野中中5050钩钩体体凝凝集集)的血清最高稀释度作为终点凝集滴度。的血清最高稀释度作为终点凝集滴度。4.4.间接酶联免疫吸附试验(间接间接酶联免疫吸附试验(间接ELISAELISA)将将超超声声波波抗抗原原包包被被于于聚聚苯苯乙乙烯烯微微量量反反应应板板。然然后后,依依次次结结合合待待测测抗抗体体(第第一一抗抗体体)和和酶酶标标抗抗体体(第第二二抗抗体体)。显显色色后后,测测读读492nm492nm处处的的ODOD值值,待待测测标标本本ODOD值值超超过过阴阴性性标标本本2.12.1倍倍者者可判为阳性。可判为阳性。5.5.斑点酶联免疫吸附试验(斑点酶联免疫吸附试验(DotDotELISAELISA)将将超超声声波波抗抗原原包包被被于于45m45m的的硝硝酸酸纤纤维维膜膜,依依次次结结合合待待测测抗抗体体(第第一一抗抗体体)和和酶酶标标抗抗体体(第第二二抗抗体体)。过过氧氧化化氢氢-四四氯氯-萘萘酚酚反反应应,有有蓝蓝色色斑斑点点者者为为阳阳性性,无无蓝蓝色色为为阴阴性性。以以血血清清最最高高稀稀释释度度出出现现阳阳性性者者为为滴滴度度判判定定终终点点。病病人人血血清清滴滴度度大大于于等等于于120120或或双双份份血血清清滴滴度度呈呈4 4倍增长者有诊断意义。倍增长者有诊断意义。6.Korthof6.Korthof培养基制备方法培养基制备方法KorthofKorthof培养基成分培养基成分蛋白胨(可用胰蛋白胨代替)蛋白胨(可用胰蛋白胨代替)400mg400mg氯化钠(氯化钠(NaClNaCl)700mg700mg氯化钾(氯化钾(KClKCl)20mg20mg碳酸氢钠(碳酸氢钠(NaHCONaHCO3 3)10mg10mg磷酸二氢钾(磷酸二氢钾(KHKH2 2POPO4 4)120mg120mg碳酸氢二钠(碳酸氢二钠(NaNa2 2HPOHPO4 412H12H2 2O O)440mg440mg氯氯化化钙钙(CaClCaCl2 2)20mg20mg(如如高高压压灭灭菌菌或或煮煮沸沸后出沉淀,可省去此成分)后出沉淀,可省去此成分)蒸馏水蒸馏水 500ml500ml制备方法制备方法将将以以上上成成分分溶溶于于蒸蒸馏馏水水中中煮煮沸沸20min20min过过滤滤,校校正正pHpH为为7.27.2,分分装装于于烧烧瓶瓶内内,每每瓶瓶100mL100mL,1515磅磅30min30min高压灭菌。高压灭菌。兔兔血血清清5630min5630min灭灭活活后后,以以无无菌菌操操作作加加入入上上述溶液中。灭活兔血清终浓度为述溶液中。灭活兔血清终浓度为8 81010。谢谢观看!
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