陈纭老师第七章苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析

第 七 章 苯 乙 胺 类 拟 肾 上 腺 素 药 物的 分 析安 徽 医 科 大 学 陈 纭 QQ:29583133 手 机 ： 13856020743 具 有 收 缩 血 管 、 升 高 血 压 、 舒 张 支 气 管 等 药理 作 用 ， 临 床 用 于 升 压 、 平 喘 、 充 血 治 疗 等 ， 应用 广 泛 。 具 有 碱 性 的 脂 肪 乙 胺 侧 链 ， 易 被 氧 化 结 构 特 点 苯 环 上 有 活 泼 的 酚 羟 基 取 代 代 表 药 物 ： 拟 肾 上 腺 素 类 药 物 第 一 节 结 构 与 性 质R1 CH CH NH R2OH R3* 拟 肾 上 腺 素 类 药 物 常 见 的 苯 乙 胺 类 药 物HOHO COHH CH2NHCH3肾上腺素HOHO COHH CH2NH2重酒石酸去甲肾上腺素CCCOOHCOOHOHH HHO HO CHOHCH2NHCH3 HCl盐酸去氧肾上腺素HO CHOHCH2NHCH(CH3)2 HClHO盐酸异丙肾上腺素 常见的苯乙胺类药物H2SO4 2HOCH2OH CHOHCH2 NH C(CH3)3硫酸沙丁胺醇 常见的苯乙胺类药物ClH 2NCl CHOHCH2 NH C(CH3)3 HCl盐酸克仑特罗(瘦肉精 ) 主 要 性 质 1、 酚 羟 基 特 性 多 数 药 物 苯 环 上 有 酚 羟 基 ； 肾 上 腺 素 、 重酒 石 酸 去 甲 肾 上 腺 素 、 盐 酸 异 丙 肾 上 腺 素 等 分子 结 构 中 苯 环 的 3， 4位 上 都 有 2个 邻 位 酚 羟 基 与 重 金 属 离 子 络 合 呈 色 置 空 气 中 或 遇 光 易 氧 化 变 色 在 碱 性 溶 液 中 更 易 变 色 发 生 三 氯 化 铁 反 应 2、 弱 碱 性 烃 氨 基 侧 链 ， 氮 为 仲 胺 氮 ， 显 弱 碱 性 ，游 离 碱 溶 于 有 机 溶 剂 ， 难 溶 于 水 ； 而 盐能 溶 于 水3、 具 手 性 碳 原 子 ， 旋 光 性4、 苯 环 上 的 取 代 基 可 供 分 析 用5、 有 紫 外 吸 收 与 红 外 吸 收 特 征 第 二 节 鉴 别 试 验一 、 与 铁 盐 的 反 应药 物 与 三 氯 化 铁 反 应 显 色肾 上 腺 素 翠 绿 色 ， 加 氨 试 液 ， 显 紫 色 紫 红 色重 酒 石 酸 去 甲 肾 上 腺 素 翠 绿 色 ， 加 碳 酸 氢 钠 试 液 ， 显 蓝 色 红 色盐 酸 去 氧 肾 上 腺 素 紫 色盐 酸 异 丙 肾 上 腺 素 深 绿 色 ， 滴 加 新 制 的 5 碳 酸 氢 钠 试 液 ， 显 蓝 色 红 色硫 酸 沙 丁 胺 醇 紫 色 ， 加 碳 酸 氢 钠 试 液 ， 橙 黄 色 混 浊 二 、 与 甲 醛 -硫 酸 反 应 与 甲 醛 -硫 酸 试 液 反 应 ， 形 成 具 有 醌 式 结 构的 有 色 化 合 物 。 可 用 于 区 别 同 类 药 物 。药 物 与 甲 醛 硫 酸 试 液 反 应肾 上 腺 素 红 色重 酒 石 酸 去 甲 肾 上 腺 素 淡 红 色盐 酸 去 氧 肾 上 腺 素 玫 瑰 红 橙 红 深 棕 红 盐 酸 异 丙 肾 上 腺 素 棕 色 至 暗 紫 色 三 、 氧 化 反 应 呈 不 同 颜 色加 氧 化 剂 氧 化药 物 H 碘 、 过 氧 化 氢 、铁 氰 化 钾具 有 酚 羟 基 例 ： 盐 酸 异 丙 肾 上 腺 素 加 硫 代 硫 酸 钠 使 过 量碘 的 棕 色 消 失 溶 液 显 淡 红 色 H + 例 :肾 上 腺 素 例 :重 酒 石 酸 去 甲 肾 上 腺 素(与 异 丙 肾 上 腺 素 和 肾 上 腺 素 区 别 ) 无 色 或 微 红 色 或 淡 紫 色重 酒 石 酸 去 甲 肾 上 腺 素 256.3 IpH肾 上 腺 素 和 盐 酸 异 丙 肾 上 腺 素 可 被 氧化 产 生 明 显 的 红 棕 色 或 紫 色在 pH为 6.5的 条 件 下 ，是 无 法 区 分 H 2O2 肾 上 腺 素 红显 血 红 色H + 棕 色 多 聚 体 是 鉴 别 芳 环 氨 基 醇 的 特 殊 反 应 ； 可 用 于 盐 酸麻 黄 碱 （ 盐 酸 伪 麻 黄 碱 ） 、 盐 酸 去 氧 肾 上 腺 素 鉴别 ：四 、 氨 基 醇 的 双 缩 脲 反 应盐 酸 麻 黄 碱 显 蓝 紫 色 乙 醚 醚 层 紫 红 色水 层 蓝 色CuSO4+NaOH 盐 酸 去 氧 肾 上 腺 素 溶 液 CuSO4试 液NaOH 试 液 显 紫 色 加 乙 醚 振 摇醚 层 不 显 色与 盐 酸 麻 黄 碱 区 别 五 、 脂 肪 伯 胺 的 Rimini实 验 分 子 结 构 中 含 有 脂 肪 伯 氨 基 的 化 合 物 ， 显脂 肪 族 伯 胺 专 属 的 Rimini显 色 反 应 例 ： 显 红 紫 色重 酒 石 酸 间 羟 胺 、 碳 酸 氢 钠亚 硝 基 铁 氰 化 钠 、 丙 酮 丙 酮 中 不 能 含 有 甲 醛 六 、 紫 外 特 征 吸 收 与 红 外 吸 收 光 谱 中 国 药 典 规 定 利 用 紫 外 特 征 吸 收 与 红 外吸 收 光 谱 可 以 用 来 鉴 别 苯 乙 胺 类 药 物 。例 ： 盐 酸 异 丙 肾 上 腺 素 可 采 用 其 水 溶 液 (浓度 为 0.O5mg/ml)在 280nm处 的 吸 收 度 为 0.50，进 行 鉴 别 ;盐 酸 异 丙 肾 上 腺 素 亦 采 用 红 外 吸收 光 谱 进 行 鉴 别 。 第 三 节 特 殊 杂 质 的 检 查一 、 酮 体 检 查杂 质 来 源 ： 原 料 残 存 （ 氢 化 不 完 全 ）检 查 范 围 ： 肾 上 腺 素 、 重 酒 石 酸 去 甲 肾 上 腺 素 、盐 酸 去 氧 肾 上 腺 素 和 盐 酸 异 丙 肾 上 腺 素 等 药检 查 原 理 ： 利 用 酮 体 在 310nm处 有 最 大 吸 收 ， 而药 物 本 身 在 此 波 长 几 乎 没 有 吸 收 。检 查 方 法 吸 收 度 法 例 ： 以 重 酒 石 酸 去 甲 肾 上 腺 素 为 例 。 例 ： 重 酒 石 酸 去 甲 肾 上 腺 素 2.0mg/ml，3 1 0 n m 处 测 定 ， A 0.05， 酮 体 的 限量 0.05% 药 物 检 查 杂 质 溶 剂 样 品浓 度 测 定波 长 A肾 上 腺 素 肾 上 腺 酮 HCL 2.0（mg/ml) 310nm 0.05盐 酸 去 氧 肾 上 腺 素 酮 体 水 0.2重 酒 石 酸 去 甲 肾 上 腺 素 去 甲 肾 上 腺 酮 0.05盐 酸 异 丙 肾 上 腺 素 酮 体 0.15 二 、 光 学 纯 度 的 检 查 中 国 药 典 采 用 比 旋 度 法 进 行 光 学 纯 度 检 查 。（ 表 7-5） 目 前 常 用 的 方 法 ： 液 相 色 谱 法 和 毛 细 管 法 三 、 有 关 物 质 的 检 查 盐 酸 去 氧 肾 上 腺 素 、 硫 酸 沙 丁 胺 醇 TLC 盐 酸 苯 乙 双 胍 -PC 盐 酸 氨 溴 索 HPLC采 用 TLC法 中 的 高 低 浓 度 对 比 法 进 行 检 查 盐 酸 氨 溴 索 的 检 查 方 法对 照 样 品 制 备 ： 本 品 供 试 品 溶 液 对 照 溶 液供 试 样 品 制 备 ： 本 品 甲 醇 溶 解 加 甲 醛 溶 液 加 热 吹 干 溶 剂 用 水 和 流 动 相 溶 解 HPLC分 析色 谱 条 件 ： RP-HPLC 0.01mol/lNH4H2PO4-CH3CN (50:50); 248 nm分 析 ： 对 照 溶 液 主 成 分 峰 为 满 量 程 的 20 25%， 记 录 至主 成 分 峰 保 留 时 间 的 2倍 ， 注 入 供 试 品 溶 液 ， 如 有 杂 峰 ，各 杂 峰 的 面 积 之 和 不 得 大 于 对 照 液 主 峰 面 积 的 三 分 之一 。 Main peak主 峰杂 质 AA 31 第 四 节 含 量 测 定 原 料 药 :非 水 溶 液 滴 定 法 、 溴 量 法 、 亚 硝 酸 钠 法 制 剂 :紫 外 分 光 光 度 法 、 比 色 法 和 高 效 液 相 色 谱 法等 。(一 )非 水 溶 液 滴 定 法 原 料 药 ,脂 烃 胺 基 侧 链 ， 显 弱 碱 性 测 定 条 件 :用 冰 醋 酸 做 溶 剂 ， 加 入 醋 酸 汞 试 液 消除 氢 卤 酸 的 干 扰 ， 并 以 结 晶 紫 指 示 液 指 示 终 点 ，0.1mol/L的 高 氯 酸 作 滴 定 液 。 同 时 作 空 白 试 验 。 （ 一 ） 酸 碱 滴 定 的 局 限 酸 碱 滴 定 是 在 水 溶 液 中 进 行 的 溶 剂 -水 局 限 性 ：(1)许 多 弱 酸 或 弱 碱 , Ka或 Kb小 于 10-8， 不 能 直接 滴 定 (2)有 些 有 机 酸 或 有 机 碱 在 水 中 溶 解 度 小 ， 使 滴定 不 能 直 接 准 确 进 行 (3)-些 多 元 酸 或 碱 ， 混 合 酸 或 碱 由 于 Ka(Kb)值 较接 近 ， 不 能 分 步 或 分 别 滴 定 。 非 水 滴 定 法 ： 非 水 酸 碱 滴 定 ， 氧 化 还 原 滴定 ， 配 位 滴 定 及 沉 淀 滴 定 等 （ 二 ） 非 水 溶 剂1、 溶 剂 分 类（ 1） 质 子 溶 剂 能 给 出 质 子 或 接 受 质 子 的 溶 剂 ， 称 为 质 子 溶 剂 。 酸 性 溶 剂按 接 受 质 子 的 能 力 大 小 ， 可 分 为 碱 性 溶 剂 两 性 溶 剂 酸 性 溶 剂 给 出 质 子 的 能 力 较 强 的 溶 剂 ， 称 为 酸 性 溶 剂 。如 甲 酸 、 冰 醋 酸 、 丙 酸 等 是 常 用 的 酸 性 溶 剂 。 适 于 作 滴 定 弱 碱 性 物 质 的 介 质 。 碱 性 溶 剂 能 接 受 质 子 的 溶 剂 称 为 碱 性 溶 剂 。 如 乙 二 胺 、乙 醇 胺 、 丁 胺 等 为 常 用 的 碱 性 溶 剂 。 碱 性 溶 剂适 于 作 滴 定 弱 酸 性 物 质 的 介 质 。 两 性 溶 剂 既 易 接 受 质 子 又 易 给 出 质 子 的 溶 剂 称 为 两性 溶 剂 。 特 点 ： 溶 质 是 较 强 的 酸 时 ， 溶 剂 显 碱 性 溶 质 是 较 强 的 碱 时 ， 溶 剂 显 酸 性 种 类 有 ： 醇 类 ;如 甲 醇 、 乙 醇 、 异 丙 醇 、 乙二 醇 等 两 性 溶 剂 (或 与 极 性 小 的 溶 剂 混 合 )适 于 作 滴定 不 太 弱 的 酸 、 碱 的 介 质 （ 2） 无 质 子 溶 剂 分 子 中 无 转 移 性 质 子 的 溶 剂 称 为 无 质 子 溶 剂 偶 极 亲 质 子 溶 剂 溶 剂 分 子 中 无 转 移 性 质 子 ， 与 水 比 较 几 乎 无酸 性 亦 无 两 性 ， 但 却 有 较 弱 的 接 受 质 子 的 倾向 和 程 度 不 同 的 成 氢 键 的 能 力 。 种 类 ： 酰 胺 类 、 酮 类 、 乙 腈 、 二 甲 基 亚 砜 、 吡啶 等 皆 是 。 其 中 二 甲 基 甲 酰 胺 、 吡 啶 和 二 甲 基 亚 砜 的碱 性 较 明 显 ， 成 氢 键 的 能 力 较 丙 酮 、 乙 腈 强 。 适 于 作 弱 酸 或 酸 强 度 不 同 的 混 合 物 的 滴 定 介 二 甲 基 酰 胺 和 吡 啶 也 常 被 认 为 是 碱 性 溶 剂 。 惰 性 溶 剂 溶 剂 分 子 本 身 几 乎 无 酸 碱 性 ， 不 参 与 溶 质 酸碱 反 应 ， 也 无 成 氢 键 的 能 力 ， 这 种 溶 剂 称 为惰 性 溶 剂 种 类 ： 苯 、 甲 苯 、 氯 仿 等 惰 性 溶 剂 常 与 质 子 溶 剂 混 合 使 用 ， 以 改 善 样品 的 溶 解 性 能 ， 增 大 滴 定 突 跃 ， 从 而 使 终 点时 指 示 剂 变 色 敏 锐 （ 三 ） 溶 剂 的 选 择(1)对 供 试 品 的 溶 解 能 力 要 大 ， 并 能 溶 解 滴 定 产 物(2) 能 增 强 供 试 品 的 酸 碱 性 ， 而 又 不 引 起 副 反 应(3) 溶 剂 应 能 使 滴 定 突 跃 明 显 。 降 低 溶 剂 的 介 电 常 数( )， 能 使 滴 定 突 跃 明 显 。 溶 剂 的 极 性 大 小 是 以 介 电 常 数 为 判 断 的 ， 介 电常 数 大 的 极 性 大 ， 介 电 常 数 小 的 极 性 小 。(4) 考 虑 使 用 完 全 、 价 廉 、 粘 度 小 、 挥 发 性 低 、 易 于回 收 和 精 制 等 。 （ 四 ） 基 本 原 理 非 水 碱 量 法 (五 )一 般 方 法 具 弱 碱 性 ， 在 冰 醋 酸 或 醋 酐 等 酸 性 溶 液 中 ， 用高 氯 酸 滴 定 液 直 接 滴 定 ， 以 指 示 剂 或 电 位 法 确 定终 点 。 并 用 空 白 试 验 校 正 （ 六 ） 问 题 讨 论1、 适 用 范 围 ： 主 要 用 于 Kb 10-8的 有 机 碱 盐例 ： Kb在 10-8 10-10时 ， 选 用 冰 醋 酸 做 溶 剂 Kb在 10-10 10-12时 ， 选 用 冰 醋 酸 和 醋 酐 的 混合 溶 液 做 溶 剂 K b在 10-12时 ， 选 用 醋 酐 做 溶 剂 2、 酸 根 的 影 响 在 醋 酸 介 质 中 的 酸 性 排 序 为 ： 高 氯 酸 氢 溴 酸 硫 酸 盐 酸 硝 酸例 ： 氢 卤 酸 盐 结 论 ： 加 入 的 醋 酸 汞 量 不 足 时 ， 会 影 响 滴 定 终 点 而使 结 果 偏 低 过 量 的 醋 酸 汞 (理 论 量 的 1 3倍 )并 不 影 响 测定 的 结 果 磷 酸 盐 ： 直 接 滴 定硫 酸 盐 ： 硫 酸 为 二 元 酸 ， 但 在 非 水 介 质 中 只 显 示一 元 酸 解 离 为 HSO4 ， 目 视 终 点 灵 敏 度 较 差 ，电 位 突 跃 也 不 明 显 ， 用 大 量 醋 酐 代 替 冰 醋 酸 ，为 溶 剂 ， 可 以 提 高 终 点 的 灵 敏 度硝 酸 盐 ： 硝 酸 会 使 指 示 剂 退 色 ， 用 电 位 滴 定 法 指示 终 点 3、 标 准 溶 液 的 稳 定 性（ 1） 配 制 和 标 定注 意 ： 冰 醋 酸 和 高 氯 酸 的 除 水 标 定 用 邻 苯 二 甲 酸 氢 钾 作 基 准 ， 以 结 晶紫 为 指 示 剂（ 2） 温 度 的 校 正 水 的 体 积 膨 胀 系 数 较 小 ， 0.21*10-3/ 冰 醋 酸 的 体 积 膨 胀 系 数 为 1.1*10-3/要 求 ： 温 差 超 过 10 ， 重 新 标 定 温 差 未 超 过 10 ， 按 公 式 校 正 4、 终 点 指 示 法 电 位 法 和 指 示 剂 法 在 以 冰 醋 酸 作 溶 剂 ， 用 高 氯 酸 酸 滴 定 弱 碱 时 ，最 常 用 的 指 示 剂 是 结 晶 紫 ， 其 酸 式 色 为 黄 色 ， 碱 式色 为 紫 色 。特 点 ： 在 不 同 的 酸 度 下 ， 变 色 较 为 复 杂 ， 由 碱 区 到 酸 区 的颜 色 变 化 为 紫 、 蓝 紫 、 蓝 绿 、 绿 、 黄 在 滴 定 不 同 强 度 的 碱 时 ， 终 点 颜 色 不 同 滴 定 较 强 碱 时 ， 以 蓝 色 或 蓝 绿 色 为 终 点 滴 定 较 弱 碱 时 ， 以 黄 绿 色 或 黄 色 为 终 点 (二 )溴 量 法 盐 酸 去 氧 肾 上 腺 素 、 重 酒 石 酸 间 羟 胺 原 料 药采 用 溴 量 法 测 定 含 量 。例 ： 以 盐 酸 去 氧 肾 上 腺 素 为 例 讨 论 溴 量 法原 理 ： 操 作 要 点(1) 操 作 过 程 中 必 须 防 止 逸 失(2)溴 液 不 能 太 过 量 : 过 量 ： 溴 代 反 应 中 会 引 起 酚 羟 基 的 氧 化 或 溴 化 一 般 加 入 的 溴 液 以 过 量 2%为 宜 (3)进 行 空 白 试 验 ： 校 正 操 作 中 溴 及 碘 的 可 能 逸 失 盐 类 可 溶 解 于 水 ， 不 溶 于 有 机 溶 剂 标 准 酸 直 接 滴 定提 取 液 蒸 干游 离 碱药 物残 渣 用 中 性 乙 醇 溶 解有 机 溶 剂 提 取碱 性 试 剂 碱 化 三 、 提 取 酸 碱 滴 定 法依 据 性 质 游 离 碱 不 溶 于 水 ， 易 溶 于 有 机 溶 剂方 法 一 ： 终 点酸 （ 过 量 ） 提 取 液游 离 碱药 物 滴 定甲 基 红 、低 温 蒸 去 乙 醚定 量 过 量 的 酸有 机 溶 剂 提 取碱 性 试 剂 碱 化 NaOH方 法 二 ： 硫 酸 苯 丙 胺 的 含 量 测 定 ： B H 2SO4 + NaOH + NaCl 乙 醚 提 取 B+ H 2SO4 蒸 去 乙 醚NaOH标 准 液 滴 定 终 点 四 、 紫 外 分 光 光 度 法 和 比 色 法 利 用 药 物 分 子 结 构 中 的 芳 伯 氨 基 进 行 重 氮 化 偶 合 反 应 ， 以 及 分 子 结 构 中 的 Ar-OH与 Fe3络 合 显 色 ， 进 行 比 色 测 定 。分 之 结 构 中 的 苯 乙 胺 结 构 采 用 紫 外 法 测 定分 子 结 构 中 的 酚 羟 基 可 与 亚 铁 离 子 络 合 显 色分 子 结 构 中 的 芳 伯 氨 基 进 行 重 氮 化 反 应 显 色用 于 制 剂 的 含 量 测 定 五 、 高 效 液 相 色 谱 法例 ： 重 酒 石 酸 去 甲 肾 上 腺 素 注 射 液 离 子 对 反 相 高 效 液 相 色 谱 法 内 标 法 定 量 调 节 溶 液 pH为 3.8， 加 入 离 子 对 试 剂 十 二 烷 基磺 酸 钠 六 、 亚 硝 酸 钠 法 例 ： 盐 酸 克 伦 特 罗 原 料 药 含 量 测 定 其 它 分 析 技 术 与 方 法高 效 毛 细 管 电 泳 法 用 于 饲 料 中 盐 酸 克 伦 特 罗 与 沙 丁胺 醇 含 量 的 测 定毛 细 管 ： 75 m(i.d) 50 cm， 有 效 长 度 39 cm， 未 涂层 石 英 毛 细 管 柱 (河 北 永 年 锐 沣 色 谱 器 件 有 限 公 司 )；缓 冲 液 ： 60 mmol L的 柠 檬 酸 一 柠 檬 酸 钠 缓 冲 溶液 ， pH 为 6.32； 分 离 温 度 25 ； 分 离 电 压 12 kV；检 测 波 长 200 nm； 压 力 进 样 ： 3.4 kPa , 20 s 实 验前 ， 依 次 用 0.1 mol L的 NaOH 溶 液 、 水 和 缓 冲 溶液 冲 洗 毛 细 管 5、 2、 2 min， 两 次 进 样 间 用 缓 冲 溶液 冲 洗 2 min 空 白 饲 料盐 酸 克 伦 特 罗 沙 丁 胺 醇 练习与思考A型 题 1 盐 酸 普 鲁 卡 因 注 射 液 中 检 查 的 特 殊 杂 质 是A.水 杨 醛 B. 间 氨 基 酚 C.水 杨 酸 D.对 氨 基 苯 甲 酸 E. 氨 基 酚2 对 乙 酰 氨 基 酚 中 检 查 的 特 殊 杂 质 是A.水 杨 醛 B. 间 氨 基 酚 C. 对 氨 基 酚 D.苯 甲 酸 E.苯 酚3 肾 上 腺 素 和 盐 酸 去 氧 肾 上 腺 素 中 检 查 的 特 殊 杂 质 是A.水 杨 醛 B. 间 氨 基 酚 C. 对 氨 基 酚 D.酮 体 E. 苯 甲 酸 B型 题 A。 硫 酸 铜 反 应 B.氧 化 反 应 C. 还 原 反 应 D.水 解 后 重 氮 化 -偶 合 反 应 E. 重 氮 化 -偶 合 反 应 1. 盐 酸 利 多 卡 因 2. 肾 上 腺 素 3. 盐 酸 普 鲁 卡 因 4 对 乙 酰 氨 基 酚 AB ED练习与思考