邻菲罗啉分光光度法测定铁(一)

邻 菲 罗 啉 分 光 光 度 法 测 定 铁 （ 一 ）陈 睿 婷E-mail:ruiting_仪 器 分 析 实 验 紫 外 -可 见 分 光 光 度 法 紫 外 -可 见 分 光 光 度 法 是 研 究 物 质 分 子 在 紫 外 -可 见 光 区 分 子 吸 收光 谱 的 分 析 方 法 。入 射 光 I0 透 射 光 It 0lg lg tIA T I 吸 光 度 ： 单 光 束 紫 外 可 见 分 光 光 度 计 主 要 部 件原 理 ： 由 光 源 发 出 的 连 续 光 谱 ， 进 入 单 色 器 经 色 散 元 件 分 光 ，获 得 的 单 色 光 分 别 通 过 参 比 溶 液 和 样 品 溶 液 ， 进 行 光 强 度 （ 吸收 ） 的 测 定 。 0.575光 源 单 色 器 吸 收 池 检 测 器 显 示 （ 一 ） 、 掌 握 分 光 光 度 法 测 定 铁 的 原 理 及 方 法（ 二 ） 、 通 过 测 定 铁 的 条 件 试 验 ， 掌 握 分 光 光 度 法 测 定 铁 的 条件 及 方 案 的 拟 定 。（ 三 ） 、 掌 握 分 光 光 度 计 的 组 成 部 分 ， 操 作 注 意 事 项 和 如 何 使用 它 实 现 对 物 质 的 检 测 。（ 四 ） 、 掌 握 7200型 分 光 光 度 计 的 使 用 方 法 。一 、 实 验 目 的 Lamber-Beer定 律 Lambert-Beer定 律 是 说 明 物 质 对 单 色 光 的 吸 光 度 （ A） 与 吸光 物 质 的 浓 度 （ c） 和 液 层 厚 度 （ l） 间 的 关 系 的 定 律 ， 是 光 吸收 的 基 本 定 律 ， 是 紫 外 -可 见 光 度 法 定 量 的 基 础 。Sample (conc. C)Path length l入 射 光 I0 透 射 光 It A Ecl 浓 度（ 比 尔 定 律 ） 厚 度(朗 伯 定 律 ）吸 光 系 数吸 光 度 二 、 实 验 原 理 在 pH=2 9的 条 件 下 ， Fe2+与 邻 菲 罗 啉 （ 邻 二 氮 菲 ） 生 成 很稳 定 的 橙 红 色 的 络 合 物 ， 其 反 应 如 下 ：此 络 合 物 的 logK 稳 =21.3， =11000。 显 色 反 应 ： 使 得 无 色 物 质 通 过 反 应 生 成 有 色 物 质 ， 提 高测 定 灵 敏 度 和 选 择 性 。 邻 菲 罗 啉 -Fe2+配 合 物 的 紫 外 吸 收 光 谱510nm青 绿 色橙 红 色 4Fe3+2NH2OHHCl4Fe2+N2 +H2O+4H+ +2Cl-在 显 色 前 ， 首 先 用 盐 酸 羟 胺 把 Fe3+还 原 为 Fe2+： 测 定 时 ， 控 制 溶 液 酸 度 在 pH=2 9较 适 宜 ， 酸 度 过 高 ， 反应 速 度 慢 ， 酸 度 太 低 ， 则 Fe2+水 解 ， 影 响 显 色 。 通 常 在 pH值 5的 缓 冲 液 介 质 中 测 定 。 本 试 验 中 用 HAc-NaAc缓 冲 溶 液 三 、 仪 器 和 试 剂7200型 可 见 分 光 光 度 计 、 pHS-3B型 酸 度 计仪 器 ：铁 标 准 溶 液 （ CFe3+=10g/ml）10%盐 酸 羟 胺 水 溶 液0.1 邻 菲 罗 啉 水 溶 液1mol/L NaAc缓 冲 溶 液C(HCl)=0.1mol/L溶 液 C(NaOH)=0.4mol/L溶 液试 剂 ： 四 、 实 验 步 骤（ 一 ） 条 件 试 验F 1、 测 定 波 长 选 择 ： 吸 收 曲 线 (A-l曲 线 )的 绘 制 ， 选 择 最 大吸 收 波 长 作 为 测 定 波 长 ；F 2、 反 应 时 间 选 择 ： 邻 菲 罗 啉 铁 配 合 物 的 稳 定 性 ， 绘 制 A-t曲 线 ；F 3、 显 色 剂 用 量 ： 显 色 剂 浓 度 的 影 响 ， 绘 制 A-V曲 线 ；F 4、 pH选 择 ： 溶 液 酸 度 对 配 合 物 的 影 响 ， 绘 制 A-pH曲 线 。 1、 吸 收 曲 线 的 绘 制试 样 配 制 ： 铁 标 液CFe3+=10 g/mL 盐 酸 羟 胺10% NaAc缓 冲 液1mol/L 邻 菲 罗 啉0.1%参 比 溶 液 0.00mL 1mL 5mL 5mL试 液 5.00mL 1mL 5mL 5mL吸 收 曲 线 （ A-） 波 长 (nm) 450 460 470 480 490 500 510吸 光 度 A波 长 (nm) 520 530 540 550 560 570 吸 光 度 A 用 蒸 馏 水 定 容 至 50mL静 置 10分 钟 ， 测 试 2、 邻 菲 罗 啉 配 合 物 的 稳 定 性试 样 配 制 ： 与 实 验 1一 样 ， 可 共 用 。铁 标 液CFe3+=10 g/mL 盐 酸 羟 胺10% NaAc缓 冲 液1mol/L 邻 菲 罗 啉0.1%参 比 溶 液 0.00mL 1mL 5mL 5mL试 液 5.00mL 1mL 5mL 5mL曲 线 （ A-t） ：时 间 t (min) 5 15 30 60 90吸 光 度 A检 测 波 长 ： 510nm 用 蒸 馏 水 定 容 至 50mL0 2 4 6 10 15 45 60 3、 显 色 剂 浓 度 影 响试 样 配 制 ： 铁 标 液CFe3+=10 g/mL 盐 酸 羟 胺10% NaAc缓 冲 液1mol/L 邻 菲 罗 啉0.1%试 液 10.00mL 1mL 5mL x mL曲 线 （ c-A） 邻 菲 罗 啉 0.1% 0.10mL 0.30mL 0.50mL 1.00mL 3.00mL 5.00mL 10.00mL吸 光 度 A参 比 ： 蒸 馏 水 ； 检 测 波 长 ： 510nm 静 置 10分 钟 ， 测 试用 蒸 馏 水 定 容 至 50mL 4、 溶 液 酸 度 对 配 合 物 的 影 响试 样 配 制 ：铁 标 液10 g/mL 盐 酸 羟胺10% pH调 节溶 液 邻 菲 罗 啉0.1% pH值 吸 光 度1 10.00mL 2mL 5mL 0.4mol/LNaOH 5mL2 10.00mL 2mL 5mL 0.1mol/LHCl 5mL3 10.00mL 2mL 5mL NaAc缓 冲 5mL参 比 ： 蒸 馏 水 作 参 比 ； 检 测 波 长 ： 510nm溶 液 反 应 5分 钟 后 测 量 ， 加 样 顺 序 从 左 到 右 ， 看 溶 液 pH值 对 配合 物 稳 定 性 和 配 位 反 应 的 速 度 的 影 响 。 用 蒸 馏 水 定 容 至 50mL 1、 移 液 管 的 使 用 常 见 移 液 管 ： 标 有温 度 和 容 量 (注 意 是否 标 有 吹 ) 用 途 ： 准 确 移 取 一定 体 积 的 液 体 操 作 ： 洗 涤 (蒸 馏 水 )、润 洗 (3次 )、 移 液 、洗 涤 干 净注 意 事 项 ： 1、 整 个 操 作 过 程 中 ， 保 持 移 液 管 的 垂 直 ； 2、 读 数时 视 线 与 凹 液 面 平 齐 ； 3、 每 次 移 液 后 ， 锥 形 瓶 壁 用 蒸 馏 水 冲洗 （ 洗 瓶 的 头 不 要 碰 到 瓶 壁 ） 容 量 瓶 的 使 用 注 意 事 项 ：1、 使 用 前 要 检 漏 。 加 水 至 刻 度 ，塞 上 瓶 塞 ， 倒 立 ， 检 查 是 否 漏 水 ，瓶 塞 旋 转 180 ， 如 上 操 作 。2、 使 用 过 程 中 ， 防 止 瓶 塞 被 混淆 污 染 ， 不 能 随 意 放 置 桌 上 。3、 洗 涤 时 洗 至 不 挂 水 珠 ， 再 用蒸 馏 水 润 洗 3次 ， 用 铬 酸 洗 液 清洗 。4、 读 数 时 要 用 手 前 3指 轻 轻 夹 起容 量 瓶 ， 使 之 自 然 垂 直 ， 再 读 数 。5、 容 量 瓶 不 可 烘 干 ， 防 止 体 积变 化 。 7200可 见 分 光 光 度 计1、 选 择 模 式 ： mode 透 光 率 （ Transmittance ） 吸 光 度 （ Absorbance ）校 正 ： 透 光 率 模 式全 黑 比 色 皿 ： 0%空 白 溶 液 ： 100%测 试 ： 吸 光 度 模 式2、 波 长 选 择转 动 波 长 旋 钮每 次 测 量 前 都 要 重 新 校 正 。测 试 从 低 浓 度 到 高 浓 度 ， 测试 前 比 色 皿 要 用 待 测 液 润 洗 。 选择模式为透过率再按0%模式不变再按100%选择模式为吸光度读取读数 数 据 处 理用 excel作 图电 子 图 表 班 长 收 齐 后 压 缩发 送 到 ： ruiting_另 外 ， 实 验 报 告 每 人 一 份 ， 将 图 表 打 印 出 来 附 在 末 尾 。