高考生物一轮复习 专题三 酶的应用与植物组织培养课件 新人教版选修1

选 修 1 生 物 技 术 实 践 专 题 三 酶 的 应 用 与 植 物 组 织 培 养 考纲考情识记要点1.酶 的 存 在 与 简单 制 作 方 法 、 酶活 力 测 定 的 一 般原 理 和 方 法 2 酶 在 食 品 制造 和 洗 涤 等 方 面的 应 用 3 制 备 和 应 用固 定 化 酶 4 植 物 的 组 织培 养 我的问题(记 录 下来 ， 重 点 突 破 )_ _ 1.无 论 是 菊 花 的 组 织 培 养 还 是 月 季 的 花 药 培 养 ， 其 理论 基 础 都 是 植 物 细 胞 的 全 能 性 。2 植 物 组 织 培 养 包 括 脱 分 化 和 再 分 化 等 过 程 ， 培 养过 程 除 了 需 要 各 种 营 养 物 质 外 ， 还 需 要 植 物 激 素 的 调节 。3 产 生 花 粉 植 株 的 途 径 有 两 条 ： 一 种 是 花 粉 通 过 胚状 体 阶 段 发 育 为 植 株 ； 另 一 种 是 花 粉 在 诱 导 培 养 基 上先 形 成 愈 伤 组 织 ， 再 将 其 诱 导 分 化 成 植 株 。4 固 定 化 细 胞 使 用 的 都 是 活 细 胞 ， 为 了 保 证 其 生 长 、增 殖 的 需 要 ， 应 该 为 其 提 供 一 定 的 营 养 物 质 。5 固 定 化 细 胞 保 证 了 细 胞 的 完 整 性 ， 因 而 酶 的 环 境改 变 小 ， 对 酶 活 性 的 影 响 较 小 。 Z 整 合 核 心 考 点 1 酶 在 果 汁 生 产 、 洗 涤 等 方 面 的 应 用 (1)果 胶 酶 在 果 汁 生 产 中 的 作 用 果 胶 a 果 胶 的 成 分 与 存 在 ： 果 胶 是 的 主 要 组 成 成 分之 一 ， 它 是 由 聚 合 而 成 的 一 种 高 分 子 化 合 物 ， 不 溶 于 水 。 b 果 胶 与 果 汁 加 工 ： 果 胶 影 响 ， 使 果 汁 浑 浊 。 果 胶 酶 a 成 分 ： 果 胶 酶 并 不 是 特 指 某 一 种 酶 ， 而 是 分 解 果 胶 的 一 类 酶 的 总 称 。 b 作 用 ： 将 果 胶 分 解 成 可 溶 性 的 ， 使 出 汁 率 提 高 ， 也使 浑 浊 的 果 汁 变 得 澄 清 。 植 物 细 胞 壁 以 及 胞 间 层半 乳 糖 醛 酸 出 汁 率半 乳 糖 醛 酸 果 胶 酶 的 应 用 a 水 果 加 工 业 ： 水 果 中 的 果 胶 经 果 胶 酶 水 解 后 ， 可 降 低 果汁 的 _， 有 助 于 压 榨 ； 在 葡 萄 酒 酿 造 中 加 入 果 胶酶 能 起 到 _作 用 ， 还 可 促 使 葡 萄 汁 中 的 酒 石 酸 发 生 沉淀 ； 果 胶 酶 可 用 于 橘 子 脱 囊 衣 ， 制 造 果 粉 和 低 糖 果 冻 。 b 饲 料 工 业 ： 果 胶 酶 与 酶 、 半 纤 维 素 酶 等 配 合 ，可 降 解 植 物 细 胞 壁 中 的 果 胶 和 纤 维 素 ， 促 使 淀 粉 、 脂 质 、维 生 素 和 蛋 白 质 等 释 放 出 来 ， 从 而 提 高 了 饲 料 的 营 养 价 值 ；果 胶 酶 可 降 低 饲 料 的 黏 度 ， 促 进 饲 料 在 动 物 消 化 道 内的 。 (2)加 酶 洗 衣 粉 在 洗 涤 中 的 应 用 加 酶 洗 衣 粉 ： 指 含 的 洗 衣 粉 。黏 度澄 清 纤 维 素消 化 吸 收 酶 制 剂 酶 制 剂 的 种 类 与 洗 涤 原 理种 类 洗 涤 原 理 洗 涤 的 污 渍 种 类蛋 白 酶 蛋 白 质 _分 子 肽 或氨 基 酸 血 渍 、 奶 渍 及 各 种 食 品 类 的 蛋 白 质污 垢脂 肪 酶 脂 肪 _ 食 品 的 油 渍 、 人 体 皮 脂 、 口 红淀 粉 酶 淀 粉 _ 来 自 面 条 等 的 污 垢_酶 使 纤 维 的 结 构 变 得 蓬 松 棉 纺 品 的 表 面 浮 毛小甘 油 和 脂 肪 酸麦 芽 糖 、 葡 萄 糖纤 维 素 2.固 定 化 酶 和 固 定 化 细 胞 (1)概 念 ： 利 用 物 理 或 化 学 方 法 将_的 技 术 。 (2)方 法 及 适 用 对 象 一 般 来 讲 ， 酶 更 适 合 用 法 固 定 化 ， 而细 胞 多 采 用 法 固 定 化 ， 这 是 因 为 个 大 的 细 胞 难 以 被吸 附 或 结 合 ， 而 个 小 的 酶 则 易 从 包 埋 材 料 中 漏 出 。酶 或 细 胞 固 定 在 一 定 空 间 内 化 学 结 合 和 物 理 吸 附 包 埋 1.影响果汁产量的物质及处理方法 (1)影响果汁产量的物质纤维素和果胶是组成水果的重要物质，这两种物质的存在使制作果汁时存在两个问题：一是果肉的出汁率低，耗时长；二是榨取的果汁浑浊、黏度高，容易发生沉淀。 (2)处理方法酶解法常用的酶及其作用特点如下： 【特别提醒】果胶酶和纤维素酶都是复合酶，并不特指某一种酶，而是一类酶的总称。 (3)探究影响果胶酶活性因素实验的分析实验原则：遵循单一变量原则、对照原则，严格控制变量，尽量减少无关变量的影响。实验原理：果胶酶活性受温度、pH或酶抑制剂的影响，在最适温度或pH时，其活性最高，果肉的出汁率、果汁的澄清度都与果胶酶的活性大小成正相关。 (4)三个实验的变量分析实验名称自变量因变量注意事项探究温度对果胶酶活性的影响温度果汁量(澄清度)底物和酶在混合时的温度是相同的温度梯度越小，实验结果越精确苹果泥和果胶酶用量在各个试管应相同pH应为最适pH探究pH对果胶酶活性的影响pH果汁量(澄清度)温度应为最适温度pH梯度可用NaOH和盐酸调节用玻璃棒搅拌使反应充分进行探究果胶酶的用量果胶酶的用量果汁量(澄清度)制备苹果匀浆后迅速加热，使苹果浆中果胶酶变性温度、pH应为最适且保持不变 【特别提醒】在探究温度或pH的影响时，不同的温度梯度之间或不同的pH梯度之间构成了相互对照，通过相互对照可确定果胶酶活性的温度或pH的最适值。 2不同加酶洗衣粉的洗涤原理及洗涤效果的实验设计 (1)实验变量的控制实验目的自变量的控制比较普通洗衣粉与加酶洗衣粉的洗涤效果洗衣粉的种类探究加酶洗衣粉的最适温度水温(水温梯度比较小)不同种类加酶洗衣粉的洗涤效果加酶洗衣粉种类 (2)影响洗涤效果的因素酶制剂的种类、污物的类型、水温、水量、水质、衣物的质料、衣物的大小、洗衣粉的用量、浸泡时间、洗涤时间等。 (3)使用时的注意事项温度对酶制剂影响较大，温度低，酶的活性受到抑制，不能充分发挥作用；温度高，酶变性失活。故温度应控制在4060 为宜。酶制剂有极强的选择性，应根据不同的污垢选用不同的酶。加酶洗衣粉不宜长期储存，一般储存期为半年，超过一年酶的活性显著下降。酶在强酸、强碱中活性降低以至失活，所以加酶洗衣粉 不能与强酸、强碱同用。 3 固 定 化 酶 与 固 定 化 细 胞 的 比 较项目固定化酶固定化细胞固定酶的种类一种一系列适用方法化学结合法、物理吸附法包埋法特点优点酶既可与反应物结合，又可与产物分离，固定在载体上的酶可反复利用成本低，操作容易缺点一种酶只能催化一种或一类化学反应可能导致反应效率下降实例固定化葡萄糖异构酶固定化酵母细胞 1 (2015江苏卷)下 列 关 于 固 定 化 酶 和 固 定 化 细 胞 的 叙 述 ，错 误 的 是 ( ) A 固 定 化 酶 的 主 要 目 的 是 实 现 酶 的 重 复 利 用 B 溶 解 氧 交 换 受 阻 是 固 定 化 酶 应 用 的 重 要 限 制 因 素 C 固 定 化 细 胞 用 于 生 产 能 分 泌 到 细 胞 外 的 产 物 D 凝 胶 与 被 包 埋 细 胞 之 间 不 是 通 过 共 价 键 结 合 解析固定化酶可以反复使用，其主要目的就是实现酶的重复利用；限制固定化酶的因素是温度、pH等，而不是溶解氧的多少；细胞分泌到细胞外的产物人们才容易分离，所以固定化细胞用于生产能分泌到细胞外的产物；凝胶与被包埋细胞之间并没有通过化学键结合，仅仅是将包埋细胞通过凝胶固定住。答案B 2 下 列 说 法 不 正 确 的 是 ( ) A 在 探 究 果 胶 酶 用 量 实 验 中 ， 虽 然 实 验 的 变 量 发 生 了 变 化 ，但 通 过 设 置 梯 度 来 确 定 最 适 值 的 思 想 方 法 是 不 变 的 B 植 物 、 霉 菌 、 酵 母 菌 和 细 菌 均 能 产 生 果 胶 酶 C 通 过 测 定 滤 出 的 苹 果 汁 的 体 积 大 小 无 法 来 判 断 果 胶 酶 活性 的 高 低 D 人 们 使 用 果 胶 酶 、 纤 维 素 酶 等 来 解 决 制 作 果 汁 面 临 的 问题解析纤维素和果胶是组成水果的重要物质，这两种物质的存在使制作果汁时存在两个问题：一是果肉的出汁率低，耗时长；二是榨 取的果汁浑浊、黏度高，容易发生沉淀。可以用果汁澄清度与果汁产量的多少确认果胶酶活性的高低。答案C 3 下 列 关 于 “ 探 究 加 酶 洗 衣 粉 和 普 通 洗 衣 粉 的 洗 涤 效 果 ”的 叙 述 ， 合 理 的 是 ( ) A 先 用 热 水 溶 解 洗 衣 粉 ， 再 将 水 温 调 节 到 最 适 温 度 B 实 验 的 观 察 指 标 可 以 是 相 同 洗 涤 时 间 内 污 渍 的 残 留 程 度 C 相 同 pH时 加 酶 洗 衣 粉 洗 涤 效 果 好 于 普 通 洗 衣 粉 D 衣 物 质 地 和 洗 衣 粉 用 量 不 会 影 响 实 验 结 果 解析本题考查“探究加酶洗衣粉的洗涤效果”实验，意在考查考生对影响酶活性的因素与实验的自变量和因变量等相关知识的分析能力。高温会导致加酶洗衣粉中酶变性失活，所以不能用热水溶解洗衣粉，A项错误；本实验的目的是探究两种洗衣粉的洗涤效果，所以观察指标可以是相同洗涤时间内污渍的残留程度或达到同样洗涤效果所需时间的长短，B项正确；酶的活性受pH影响，在酶作用的适宜条件下，加酶洗衣粉的洗涤效果好于普通洗衣粉，C项错误；酶具有专一性，加有蛋白酶的洗衣粉不能用于真丝、羊毛等衣料衣物的洗涤，适当增加洗衣粉的用量会使洗涤效果增强，D项错误。答案B 4 (2015海南单科)生 产 果 汁 时 ， 用 果 胶 酶 处 理 果 泥 可 提 高果 汁 的 出 汁 量 。 回 答 下 列 相 关 问 题 ： (1)某 同 学 用 三 种 来 源 的 果 胶 酶 进 行 三 组 实 验 ， 各 组 实 验 除酶 的 来 源 不 同 外 ， 其 他 条 件 都 相 同 ， 测 定 各 组 的 出 汁 量 ，据 此 计 算 各 组 果 胶 酶 活 性 的 平 均 值 并 进 行 比 较 。 这 一 实 验的 目 的 是 _。 (2)现 有 一 种 新 分 离 出 来 的 果 胶 酶 ， 为 探 究 其 最 适 温 度 ， 某同 学 设 计 了 如 下 实 验 ： 取 试 管 16支 ， 分 别 加 入 等 量 的 果 泥 、果 胶 酶 、 缓 冲 液 ， 混 匀 ， 平 均 分 为 4组 ， 分 别 置 于 0 、 5 、 10 、 40 下 保 温 相 同 时 间 ， 然 后 ， 测 定 各 试 管 中 的出 汁 量 并 计 算 各 组 出 汁 量 平 均 值 。 该 实 验 温 度 设 置 的 不 足之 处 有 _和 _。比 较 不 同 来 源 果 胶 酶 的 活 性 温 度 范 围 设 置 不 合 理 温 度 梯 度 设 置 不 合 理 (3)某 同 学 取 5组 试 管 (A E)分 别 加 入 等 量 的 同 种 果 泥 ， 在 A、B、 C、 D4个 实 验 组 的 试 管 中 分 别 加 入 等 量 的 缓 冲 液 和 不 同量 的 同 种 果 胶 酶 ， 然 后 ， 补 充 蒸 馏 水 使 4组 试 管 内 液 体 体 积相 同 ； E组 加 入 蒸 馏 水 使 试 管 中 液 体 体 积 与 实 验 组 相 同 。 将5组 试 管 置 于 适 宜 温 度 下 保 温 一 定 时 间 后 ， 测 定 各 组 的 出 汁量 。 通 过 A D组 实 验 可 比 较 不 同 实 验 组 出 汁 量 的 差 异 。 本实 验 中 ， 若 要 检 测 加 入 酶 的 量 等 于 0而 其 他 条 件 均 与 实 验 组相 同 时 的 出 汁 量 ， E组 设 计 _(填 “ 能 ” 或 “ 不能 ” )达 到 目 的 ， 其 原 因 是 _。不 能 未 加 入 缓 冲 液 解析(1)利用不同来源的果胶酶处理果泥，检测各组出汁量，据此可以比较不同来源的果胶酶的活性大小。(2)探究果胶酶的最适温度时，一般在2070 范围内，每隔5进行梯度设计。显然题中温度设置过低，温度梯度设置不均。(3)本实验的目的是检测不同量的同种果胶酶下的出汁量的差异，为保证单一变量，A，E组都应加入等量缓冲溶液。 1 菊 花 的 组 织 培 养 (1)植 物 组 织 培 养 的 原 理 和 程 序 原 理 ： _。植 物 细 胞 的 全 能 性 (2)植 物 组 织 培 养 的 影 响 因 素 选 材 ： 不 同 植 物 组 织 或 同 一 植 物 组 织 的 不 同 部 分 ， 培 养的 难 易 程 度 差 别 很 大 ， 菊 花 的 组 织 培 养 ， 一 般 选 择 。 培 养 基 ： 植 物 组 织 培 养 需 要 适 宜 的 培 养 基 ， 常 用 的 是 ， 在 配 制 好 的 培 养 基 中 ， 常 常 需 要 添 加 细 胞 分 裂 素 和生 长 素 两 种 植 物 激 素 。 其 他 条 件 ： 等 条 件 对 于 植 物 组 织 的 培 养 也 很重 要 。 未 开 花 植 株 的 茎 上 部 新 萌 生 的 侧 枝MS培 养 基 pH、 温 度 和 光 照 (3)实 验 操 作 配 制 好 的 培 养 基 要 进 行 。 外 植 体 要 先 用 消 毒 6 7 s， 取 出 后 用 无 菌 水 清 洗 ，再 用 消 毒 ， 最 后 再 用 清 洗 。 接 种 时 要 始 终 在 进 行 ， 对 于 接 种 工 具 要用 灭 菌 。 在 18 22 的 中 培 养 ， 得 到 试 管 苗 后 进 行 移 栽 。高 压 蒸 汽 灭 菌70%酒 精0.1%的 氯 化 汞 无 菌 水火 焰 灼 烧 酒 精 灯 火 焰 旁无 菌 箱 2 月 季 的 花 药 培 养 (1)被 子 植 物 花 粉 的 发 育 过 程 花 粉 母 细 胞 (小 孢 子 母 细 胞 ) 时 期 单 核 期 期 精 子 。 (2)产 生 花 粉 植 株 产 生 花 粉 植 株 的 两 种 途 径 上 述 两 种 途 径 并 无 绝 对 界 限 ， 主 要 取 决 于_。 四 分 体 双 核 培 养 基 中 激 素 的 种 类 及 其 浓 度 配 比 (3)影 响 花 药 培 养 的 因 素 主 要 影 响 因 素 ： 与 。 其 他 条 件 ： 如 亲 本 植 株 的 生 长 条 件 、 材 料 的 预 处理 、 接 种 _等 。 花 药 培 养 成 功 率 最 高 的 时 期 为 期 ， 为 此 常 选 择_的 花 蕾 做 实 验 材 料 。材 料 的 选 择 培 养 基 的 组 成低 温 密 度 单 核完 全 未 开 放 植物的组织培养应注意的问题 1植物组织培养技术和花药离体培养技术的异同 2.花 粉 植 株 (单 倍 体 植 株 )产 生 的 两 种 途 径 3植物激素与组织培养生长素和细胞分裂素是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键性激素，其作用及特点为： (1)在生长素存在的情况下，细胞分裂素的作用呈现加强的趋势。 (2)使用顺序不同，结果不同，具体如下：使用顺序实验结果先使用生长素，后使用细胞分裂素有利于细胞分裂，但细胞不分化先使用细胞分裂素，后使用生长素细胞既分裂又分化同时使用分化频率提高 (3)用 量 比 例 不 同 ， 结 果 也 不 同 ： 【特别提醒】(1)在剥离花药时，要尽量不损伤花药，否则接种后容易从受伤部位产生愈伤组织，同时还要彻底去除花丝，因为与花丝相连的花药不利于愈伤组织或胚状体的形成。 (2)花药开裂长出愈伤组织或释放出胚状体时，应及时转移到分化培养基上。 为 了 探 究 6 BA和 IAA对 某 菊 花 品 种 茎 尖 外 植 体 再 生 丛 芽 的影 响 ， 某 研 究 小 组 在 MS培 养 基 中 加 入 6 BA和 IAA， 配 制 成四 种 培 养 基 (见 表 )， 灭 菌 后 分 别 接 种 数 量 相 同 、 生 长 状 态 一致 、 消 毒 后 的 茎 尖 外 植 体 ， 在 适 宜 条 件 下 培 养 一 段 时 间 后 ，统 计 再 生 丛 芽 外 植 体 的 比 率 (m)， 以 及 再 生 丛 芽 外 植 体 上 的丛 芽 平 均 数 (n)， 结 果 如 下 表 。培 养 基 编 号 浓 度 /mgL 1 m/% n/个6 BA IAA1 0.5 0 76.7 3.12 0.1 77.4 6.13 0.2 66.7 5.34 0.5 60.0 5.0 回 答 下 列 问 题 ： (1)按 照 植 物 的 需 求 量 ， 培 养 基 中 无 机 盐 的 元 素 可 分 为_和 _两 类 。 上 述 培 养 基 中 ， 6 BA属 于_类 生 长 调 节 剂 。 (2)在 该 实 验 中 ， 自 变 量 是 _， 因 变 量 是_， 自 变 量 的 取 值 范 围 是 _。 (3)从 实 验 结 果 可 知 ， 诱 导 丛 芽 总 数 最 少 的 培 养 基 是_号 培 养 基 。 (4)为 了 诱 导 该 菊 花 试 管 苗 生 根 ， 培 养 基 中 一 般 不 加 入_(填 “ 6 BA”或 “ IAA”)。大 量 元 素 微 量 元 素 细 胞 分 裂 素 IAA浓 度 再 生 丛 芽 外 植 体 的 比 率 (m)和 再 生 丛 芽 外 植 体 上 的 丛 芽 平 均 数 (n) 0 0.5 mgL 1 1 6 BA 解析本题考查组织培养中细胞分裂素和生长素的作用，同时考查考生的实验分析能力，难度较小。按照植物的需求量，在培养基中加入的无机盐可分为大量元素和微量元素。6BA是细胞分裂素类生长调节剂，由于该实验探究的是6BA和IAA对菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响，而6BA的浓度在各实验组中相同，因此实验的自变量是IAA浓度，取值范围是00.5 mgL1，因变量是再生丛芽外植体的比率及再生丛芽外植体上的丛芽平均数，即表中的m和n。再生外植体数乘以外植体上的丛芽平均数即为丛芽总数，计算可知诱导丛芽总数最少的是1号培养基。在植物组织培养中，生长素用于诱导细胞的分裂和根的分化，细胞分裂素主要促进细胞分裂和分化出不定芽，因此为了诱导生根，培养基中一般不加6BA(细胞分裂素类生长调节剂)而加入IAA(生长素类生长调节剂)。 T 突 破 考 疑 考 技 1酶的应用易错点 (1)在苹果泥和果胶酶混合之前，一定要保证底物和酶达到所要求的温度或pH条件。以避免混合后条件的变化，确保实验结果的可靠性。 (2)相同条件下的酶促反应速率的快慢可以表示酶活性的高低，但酶活性与酶促反应速率仍然是两个完全不同的概念，其影响因素也不完全相同，如酶的浓度、反应物的浓度可以影响酶促反应速率，但不能影响酶的活性。 2固定化实验中的易错点 (1)海藻酸钠溶液的浓度对包埋酵母细胞数量的影响：海藻酸钠溶液浓度过高，将很难形成凝胶珠；浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数量少。 (2)海藻酸钠溶液配制注意事项： 海藻酸钠溶化时要用小火或间断加热，避免海藻酸钠发生焦糊。将溶化后的海藻酸钠先冷却至室温，再与酵母细胞混合，避免高温杀死酵母细胞。固定化酵母细胞时，应将海藻酸钠酵母细胞的混合液用注射器缓慢滴加到CaCl 2溶液中，而不是注射，以免影响凝胶珠的形成。 3植物组织培养实验操作中易错点 (1)材料的选取：菊花的组织培养实验中，应选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝；月季花药的培养实验中，应选择花粉发育过程中的单核靠边期的花粉进行培养。 (2)外植体消毒：所用消毒剂为体积分数为70%的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞溶液，所使用的清洗液是无菌水。 (3)培养过程：在初期，菊花的组织培养需光照，月季花药的培养不需光照；而在后期均需光照。 (4)月季花药培养得到的并不都是单倍体植株：花粉壁发育成二倍体，花药发育成单倍体。 (5)花药开裂长出愈伤组织或释放出胚状体时，应及时转移到分化培养基上。 1(2015江苏单科)如 图 为 制 备 人 工 种 子 部 分 流 程 示 意 图 ， 下 列 叙 述 正确 的 是 ( ) A 胚 状 体 是 外 植 体 在 培 养 基 上 脱 分 化 形 成 的 一 团 愈 伤 组 织 B 该 过 程 以 海 藻 酸 钠 作 为 营 养 成 分 ， 以 CaCl 2溶 液 作 为 凝 固 剂 C 可 在 海 藻 酸 钠 溶 液 中 添 加 蔗 糖 ， 为 胚 状 体 提 供 碳 源 D 包 埋 胚 状 体 的 凝 胶 珠 能 够 隔 绝 空 气 ， 有 利 于 人 工 种 子 的 储 藏 解析胚状体可由愈伤组织经再分化形成，具有生根发芽的能力；海藻酸钠是包埋的载体，不提供营养成分，CaCl2能使海藻酸钠形成凝胶珠；植物组织培养中常用蔗糖作为碳源；人工种子储藏过程中胚状体细胞需要进行有氧呼吸，不能完全隔绝空气。答案C 2 (2016江苏高三调研)在 酵 母 细 胞 固 定 化 的 实 验 中 ， 下 列操 作 与 目 的 不 相 符 的 是 ( ) A 干 酵 母 加 入 蒸 馏 水 搅 拌 均 匀 后 ， 放 置 一 段 时 间 ， 使 酵 母细 胞 活 化 B 采 用 小 火 间 断 加 热 的 方 法 ， 防 止 海 藻 酸 钠 发 生 焦 糊 C 将 活 化 的 酵 母 细 胞 加 入 海 藻 酸 钠 溶 液 ， 轻 轻 搅 拌 ， 以 免产 生 气 泡 D 用 注 射 器 滴 加 溶 液 时 要 接 近 CaCl2溶 液 的 液 面 ， 防 止 凝 胶珠 出 现 “ 尾 巴 ” 解析实验中，为了防止凝胶珠出现“尾巴”，注射器应离CaCl 2溶液的液面远一些。答案D 3 (2015山东理综)乳 糖 酶 能 够 催 化 乳 糖 水 解 为 葡 萄 糖 和 半乳 糖 ， 具 有 重 要 应 用 价 值 。 乳 糖 酶 的 制 备 及 固 定 化 步 骤 如 下 ： (1)筛 选 产 乳 糖 酶 的 微 生 物 L时 ， 宜 用 _作 为 培 养基 中 的 唯 一 碳 源 。 培 养 基 中 琼 脂 的 作 用 是 _。从 功 能 上 讲 ， 这 种 培 养 基 属 于 _。 (2)培 养 微 生 物 L前 ， 宜 采 用 _方 法 对 接 种 环 进 行 灭 菌 。乳 糖 凝 固 剂 选 择 培 养 基 灼 烧 (3)纯 化 后 的 乳 糖 酶 可 用 电 泳 法 检 测 其 分 子 量 大 小 。 在 相 同 条件 下 ， 带 电 荷 相 同 的 蛋 白 质 电 泳 速 度 越 快 ， 说 明 其 分 子 量 越_。 (4)乳 糖 酶 宜 采 用 化 学 结 合 法 (共 价 键 结 合 法 )进 行 固 定 化 ， 可通 过 检 测 固 定 化 乳 糖 酶 的 _确 定 其 应 用价 值 。 除 化 学 结 合 法 外 ， 酶 的 固 定 化 方 法 还 包 括_、 _、 离 子 吸 附 法 及 交 联 法等 。 小 (酶 )活 性 或 ： (酶 )活 力 包 埋 法 物 理 吸 附 法 解析(1)该选择培养基的唯一碳源应为乳糖，只有能利用乳糖的微生物能在该培养基上生存，而其他微生物将因缺乏碳源而无法生存，利用这个原理可以筛选产乳糖酶的微生物L；固体培养基中琼脂是很好的凝固剂；从功能上讲这种培养基属于选择培养基。(2)接种环的灭菌宜采用灼烧法。(3)电泳过程中若蛋白质所带电荷相同，则电泳速度只与蛋白质的分子量大小有关，蛋白质分子量越小，电泳速度越快。(4)固定化酶常要通过测定其活性来确定其应用价值；酶的固定化方法包括包埋法、化学结合法、物理吸附法等。 4 (2014浙江自选模块)下 面 是 关 于 固 定 化 酶 和 细 菌 培 养 实验 的 问 题 。 请 回 答 ： (1)某 兴 趣 小 组 欲 利 用 固 定 化 酶 进 行 酶 解 淀 粉 的 实 验 ， 分 组 见下 表 。 将 吸 附 了 淀 粉 酶 的 石 英 砂 装 入 柱 中 后 ， 需 用 蒸 馏 水 充 分 洗涤 固 定 化 酶 柱 ， 以 除 去 _。 按 上 表 分 组 ，将 配 制 好 的 淀 粉 溶 液 加 入 到 固 定 化 酶 柱 中 ， 然 后 取 一 定 量 的流 出 液 进 行 KII 2检 测 。 若 流 出 液 呈 红 色 ， 表 明 有 _生 成 ； 若 各 组 呈 现 的 颜 色 有 显 著 差 异 ， 则 流 出 液 中 淀 粉 水 解产 物 浓 度 最 高 的 是 _组 。组 别 固 定 化 酶 柱 长 度 (cm) 淀 粉 溶 液 的 流 速 (mLmin 1)甲乙丙丁 10101515 0.30 50 30 5未 吸 附 的 淀 粉 酶 糊 精 丙 (2)下 列 关 于 上 述 固 定 化 酶 实 验 的 叙 述 ， 错 误 的 是 ( ) A 固 定 化 酶 柱 长 度 和 淀 粉 溶 液 流 速 决 定 了 酶 柱 中 酶 的 含 量 B 淀 粉 溶 液 流 速 过 快 会 导 致 流 出 液 中 含 有 淀 粉 C 各 组 实 验 所 用 的 淀 粉 溶 液 浓 度 应 相 同 D 淀 粉 溶 液 的 pH对 实 验 结 果 有 影 响 A 解析(1)将吸附了酶的石英砂装入柱中后，有的酶未吸附到固定化酶柱上，故应用蒸馏水进行洗涤。KII2用来检测糊精的生成，颜色反应为红色。从固定化酶柱长度(酶量)、淀粉溶液的流速两方面分析，丙组固定化酶柱最长，酶量最多，溶液流速最慢，酶与淀粉接触更加充分，故丙组淀粉水解产物浓度最高。 (2)酶柱的长度决定了酶的总量，而与溶液的流速无关，故A项错误。溶液流速过快，缩短了酶促反应的时间，淀粉水解不彻底，故B项正确。根据对照实验单一变量原则，C项正确。酶的活性受温度、pH影响，故D项正确。 5 (2014江苏理综)为 了 获 得 植 物 次 生 代 谢 产 物 ， 先 用 植 物外 植 体 获 得 愈 伤 组 织 ， 然 后 在 液 体 培 养 基 中 悬 浮 培 养 。 请 回答 下 列 问 题 ： (1)外 植 体 经 诱 导 后 形 成 愈 伤 组 织 的 过 程 称 为 _。 (2)在 愈 伤 组 织 悬 浮 培 养 时 ， 细 胞 干 重 、 蔗 糖 浓 度 和 pH的 变化 如 图 所 示 。 细 胞 干 重 在 12 d后 下 降 的 原 因 有_； 培 养 液 中 蔗 糖 的 作 用 是_、 _。 脱 分 化 蔗 糖 浓 度 下 降 ， pH降 低 提 供 能 源 调 节 渗 透 压 (3)多 倍 体 愈 伤 组 织 细 胞 产 生 的 次 生 代 谢 产 物 量 常 高 于 二 倍 体 。二 倍 体 愈 伤 组 织 细 胞 经 _处 理 ， 会 产 生 染色 体 加 倍 的 细 胞 。 为 检 测 愈 伤 组 织 细 胞 染 色 体 数 目 ， 压 片 前常 用 纤 维 素 酶 和 _酶 解 离 愈 伤 组 织 。 若 愈 伤 组 织 细 胞(2n)经 诱 导 处 理 后 ， 观 察 到 染 色 体 数 为 8n的 细 胞 ， 合 理 的 解释 是 _、_。秋 水 仙 素 (低 温 ) 果 胶 经 加 倍 到 4n的 细 胞 处 于 有 丝 分 裂 后 期 经 加 倍 到 8n的 细 胞 处 于 有 丝 分 裂 中 期 (4)为 了 更 好 地 获 得 次 生 代 谢 产 物 ， 生 产 中 采 用 植 物 细 胞 的 固定 化 技 术 ， 其 原 理 与 酵 母 细 胞 固 定 化 类 似 。 下 列 说 法 正 确 的有 _(填 序 号 )。 选 取 旺 盛 生 长 的 愈 伤 组 织 细 胞 包 埋 必 须 在 光 照 条 件 下 培 养 培 养 过 程 中 需 通 空 气 固 定 化 后 植 物 细 胞 生 长 会 变 慢 解析本题考查了植物细胞培养、染色体变异等知识。 (1)由外植体形成愈伤组织的过程，叫作脱分化。 (2)由曲线很容易看出随着培养的进行，蔗糖浓度下降，pH下降，导致细胞干重降低。培养基中蔗糖作为碳源，为细胞提供能量，另外，蔗糖还能调节培养液的渗透压。 (3)诱导染色体加倍，常用的方法是用秋水仙素(低温)处理植物的组织细胞，这样细胞中染色体数目就由2n变为4n，也有的由4n变为8n。 (4)为更好地获得次生代谢产物，应选取生长旺盛、代谢快的愈伤组织细胞。愈伤组织的培养要严格避光，因为在光照条件下容易分化产生维管等组织，不利于产生大量的愈伤组织。为了保证愈伤组织进行有氧呼吸，应通气培养。愈伤组织包埋以后，与外界物质交换过程受到影响，所以生长会变缓慢。