《中药化学》PPT课件

2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 一 纸 色 谱 （ PC）二 薄 层 色 谱 （ TLC） 三 纸 电 泳 （ PE）四 高 效 薄 层 色 谱 （ HPTLC） 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 一 、 纸 色 谱 （ PC）双 向 纸 色 谱 层 析 ： 分 离 黄 酮 及 黄 酮 苷第 一 向 ： 醇 性 展 开 剂 ， 如 n-BuOH-HOAc-H2O（ 4： 1： 5， 上层 ， BAW ） 、 t-BuOH-HOAc-H2O（ 3： 1： 1， TBA ） 、水 饱 和 正 丁 醇 等 正 相 ， 极 性 小 的 化 合 物 Rf值 大 。 适 合 游 离 黄 酮 。第 二 向 ： 水 性 展 开 剂 ， 如 水 、 2 5 乙 酸 等 。 反 相 ， 极 性 大 的 化 合 物 Rf值 大 。 适 合 黄 酮 苷 。显 色 ： UV、 UV/AlCl 3、 UV/NH3等 。 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITYBAW（ 4:1:5,上 层 ） 第 一 向 ： 醇 性 展 开 剂黄 酮 苷黄 酮 苷 元 90 第 二 向 ： 水 性 展 开 剂2 乙 酸黄 酮 苷 元 黄 酮 苷一 、 纸 色 谱 （ PC） 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY （ 1） 硅 胶 ： 适 用 于 极 性 小 的 弱 酸 性 黄 酮 类 化 合 物 。 展 开 剂 ： 多 用 有 机 溶 剂 ， 如 氯 仿 /甲 醇 。（ 2） 聚 酰 胺 ： 游 离 黄 酮 苷 元 及 其 苷 。 展 开 剂 ： 极 性 强 ， 大 多 含 醇 、 酸 或 水 。（ 3） 纤 维 素 ： 分 离 黄 酮 苷 元 及 苷 。 展 开 剂 ： 醇 性 或 水 性 。 显 色 ： UV、 UV/AlCl 3、 UV/NH3等 。 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 一 、 紫 外 光 谱 （ UV）二 、 红 外 光 谱 （ IR）三 、 质 谱 （ MS）四 、 核 磁 （ NMR） 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 原 理 ： 是 分 子 中 某 些 价 电 子 吸 收 了 一 定 波 长 的 电 磁 波 ,由 低 能级 跃 近 到 高 能 级 而 产 生 的 一 种 光 谱 。 引 起 分 子 中 电 子 能 级 跃 迁 光 波 波 长 范 围 ： 100-800 nm.max： 跃 迁 电 子 的 能 级 差max： 电 子 跃 迁 的 机 率 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 类 型 ： -* 5-OH 邻 二 酚 OH HCl/H2OAlCl3 Al3+OO OHOHOHOAl3+ Al3+OO OOOHOOO OHOHHO OH （ 一 ） 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 相 同 时 ： 既 无 3-OH， 也 无 5-OH 不 同 时 ： 有 3-OH或 同 时 有 3-OH及 5-OH， 红 移 50-60nm； 只 有 5-OH, 红 移 35-55nm 相 同 时 ： A、 B环 无 邻 二 酚 羟 基 不 同 时 ： B环 有 邻 二 酚 -OH， 紫 移 30-40nm； B环 有 邻 三 酚 -OH， 紫 移 20nm。 邻 二 酚 -OH在 A环 ， 情 况 类 似 。（ 一 ） （ 确 定 3-OH、 5-OH 、 邻 二 酚 OH ） 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY UVmax nm： MeOH 259 266sh 299sh 359NaOMe 272 327 410NaOAc 271 325 393 NaOAc/H3BO3 262 298 387AlCl3/HCl 271 300 364sh 402AlCl3 275 303sh 433 Orha(1-6)glcOOHO OHHO OH 为 359 nm（ 350） 黄 酮 醇 或 3-O-苷 =410-359=51nm 4-OH =271-259=12nm 7-OH =387-359=28nm B环 有 邻 二 -OH =402-359=43nm 5-OH =402-433=- 31nm B环 有 邻 二 OH 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 有 苯 甲 酰 系 统 ， 无 桂 皮 酰 系 统 ， 带 有 很 强 吸 收 ， 带 以 肩峰 或 低 强 度 吸 收 峰 出 现 ， 区 分 黄 酮 及 黄 酮 醇 。 （ 二 ） 异 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY带 （ nm） 带 （ nm） 类 型245 270 310 330（ 肩 峰 ） 异 黄 酮270 295 300 330（ 肩 峰 ） 二 氢 黄 酮 （ 醇 ） （ 二 ） 异 加 入 诊 断 试 剂 ： 同 黄 酮 ， 但 诊 断 试 剂 仅 影 响 带 ， 即 A环 。OOOO OHHO OHOHHO OH 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 已 知 某 黄 酮 化 合 物 有 3-OCH3、 5-OH， 还 有 3个 -OH， 试 根 据已 知 信 息 确 定 这 三 个 羟 基 的 位 置 。 UV： （ 1） 加 入 NaOMe， 随 时 间 延 长 而 衰 退 ； （ 2） 加 入 NaOAc， I、 II均 红 移 ； （ 3） 加 入 NaOAc/H3BO3， I、 II不 变 。解 析 ： 由 （ 1） 知 ， 存 在 碱 敏 感 基 团 ， 如 3,4-OH、 3,3,4-OH、5,6,7-OH、 5,7,8-OH、 5,3,4-OH， 但 3-OCH3， 故 可 能 是3,4-OH、 5,6,7-OH、 5,7,8-OH。 由 （ 2） 知 ， 有 7-OH 、 4-OH 。 由 （ 3） 知 ， 无 邻 二 酚 -OH。 O O OH OHHO OCH3 HO 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 已 知 含 1个 葡 萄 糖 的 黄 酮 苷 ， 苷 元 是 槲 皮 素 ， 确 定 glc的 连 接 位置 。 UV（ max） ： I II MeOH 366 250 NaOMe 随 时 间 延 长 而 衰 退 NaOAc 405 264 NaOAc/H3BO3 366 250 AlCl3/HCl 428 265 （ 黄 酮 醇 ） （ 3-OH,4-OH或 邻 OH） （ 7-OH、 4-OH ）（ 无 邻 二 酚 -OH）（ 62, 3-OH和 5-OH） 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 洋 芹 素 葡 萄 糖 苷 ， 分 子 式 为 C21H20O10。 黄 色 ， 盐 酸 -镁 粉 反应 为 橙 红 色 ， 氧 氯 化 锆 -枸 橼 酸 反 应 黄 色 褪 去 ， UV光 谱 如 下 ，推 断 该 化 合 物 结 构 。 UV 苷 II I MeOH 268 333 NaOMe 269 386 NaOAc 267 387 NaOAc/H3BO3 267 340 UV苷 元 II I MeOH 267 336 NaOMe 275 392 NaOAc 274 376 NaOAc/H3BO3 268 338 黄 酮 或 黄 酮 醇 苷带 I红 移 53nm， 有 4-OH带 II 无 红 移 ， 无 7-OHA、 B环 上 无 邻 二 酚 -OH 黄 酮带 I红 移 56nm， 有 4-OH带 II红 移 7nm ， 有 7-OHA、 B环 上 无 邻 二 酚 -OH 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 类 型 MeOH 带 II 带 I 说 明黄 酮 250-285 304-350 两 峰 强 度 基 本 相 同 黄 酮 醇 （ 3-OR） 328-357 含 氧 基 ， 红 移 黄 酮 醇 （ 3-OH） 352-385 异 黄 酮 245-270 肩 峰 A环 基 团 影 响 带 II 二 氢 黄 酮 （ 醇 ） 270-295 低 强 度 小 峰 B环 基 团 不 影 响 带 I 诊 断 试 剂 带 II 带 I 说 明 作 用 NaOMe 40-60 50-60随 时 间 延 长 ，逐 渐 衰 减320-330 有 4-OH， 无 3-OH有 3-OH， 无 4- OH有 3,4-OH或 3,3,4-OH（ 衰 减 更 快 ）有 7-OH 判 断 4-OH NaOAc 5-20 有 7-OH及 4-OH 判 断 7-OHNaOAc/ H3BO3 5-10 12-30 有 6,7-OH或 7,8-OH B环 有 邻 二 酚 羟 基 判 断 邻 二 酚 -OH AlCl 3/HCl 50-6035-55 有 3,5-二 OH或 3-OH 有 5-OH， 无 3-OH 判 断 3-OH5-OHAlCl3与 AlCl3/HCl 30-40200 B环 有 邻 二 酚 羟 基B环 皆 有 邻 三 酚 羟 基A,B环 皆 无 邻 二 酚 羟 基 判 断 邻 二 酚OH 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 原 理分 子 吸 收 引 起 的 和 转 动 能 级 跃 迁 而 产 生的 吸 收 信 号 。4000-1500cm-1为 官 能 团 区 ， 用 于 官 能 团 鉴 定1500-500cm-1为 指 纹 区 ， 用 于 鉴 别 两 化 合 物 是 否 相 同 应 用 推 断 官 能 团 ， 如 苯 环 、 羰 基 、 羟 基 等 IR相 同 的 化 合 物 ， 能 确 定 为 同 一 个 化 合 物 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 4000 4001500 O H N H3600 3200 3000 2700 C H(饱 和 )O C H 1850 1550C O 1700 17003300 3000 C HC H 2200CNCC 1600 1450苯 环 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 1600-1500 cm-1 游 离 ： 3640-3610 cm-1 缔 合 ： 3500-3200 cm-1 C=O， 1690-1640 cm-1 OOHO OHOHOH OH 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 质 谱 能 够 提 供 的 信 息 ： 分 子 质 量 ： 低 分 辨 质 谱 可 以 确 定 分 子 质 量 分 子 式 ： 高 分 辨 质 谱 仪 可 以 确 定 分 子 式 鉴 定 某 些 官 能 团 ： 如 甲 基 (m/z 15)、 羰 基 (m/z 28)、 甲氧 基 (m/z 31)、 乙 酰 基 (m/z 43) 分 子 结 构 信 息 ： 由 分 子 结 构 与 裂 解 方 式 的 经 验 规 律 ,根据 碎 片 离 子 的 m/z及 相 对 丰 度 RA提 供 分 子 结 构 信 息 人 机 问 答 ： 给 出 可 能 的 化 合 物 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 常 用 术 语 ：基 峰 ： 离 子 强 度 最 大 的 峰 ， 其 相 对 强 度 或 丰 度 为 100。质 荷 比 ： 离 子 的 质 量 与 所 带 电 荷 之 比 ， 用 m/z表 示 。分 子 离 子 ： 丢 失 1个 电 子 生 成 的 带 正 电 荷 离 子 。碎 片 离 子 ： 分 子 离 子 裂 解 产 生 的 所 有 离 子 。重 排 离 子 ： 经 过 重 排 反 应 产 生 的 离 子 。准 分 子 离 子 ： 比 分 子 量 多 （ 或 少 ） 1质 量 单 位 的 离 子 。 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 1. 电 子 轰 击 电 离 （ electron impact ionization, EI）2. 化 学 电 离 （ chemical ionization, CI）3. 场 电 离 （ field ionization, FI）4. 场 解 吸 （ field desorption, FD）5. 快 原 子 轰 击 （ fast atom bombardment, FAB）6. 基 质 辅 助 激 光 解 吸 电 离 （ matrix-assisted laser desportion ionization, MALDI）7. 电 喷 雾 电 离 （ electrospray ionization, ESI）8. 大 气 压 化 学 电 离 （ atmospheric pressure chemical ionization, APCI）MS分 类 离 子 源 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 黄 酮 类 化 合 物 的 MS（ 一 ） 黄 酮 苷 元 （ El-MS） 黄 酮 苷 元 在 电 子 轰 击 质 谱 （ El-MS） 中 分 子 离 子 峰 M+较 强 ， 且为 基 峰 。（ 二 ） 黄 酮 苷 （ FD-MS 、 FAB-MS、 ESI-MS ） 黄 酮 苷 极 性 强 、 难 气 化 以 及 对 热 不 稳 定 ， EI 测 不 到 分 子 离 子 峰 ，采 用 FD-MS和 FAB-MS、 ESI-MS等 软 电 离 质 谱 技 术 ， 可 获 得 强的 分 子 离 子 峰 M +、 准 分 子 离 子 峰 M+H+、 M+Na+峰 。 峰 强度 大 ， 且 给 出 糖 基 碎 片 （ 外 侧 糖 、 内 侧 糖 ） 。 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 途 径 -I：（ RDA裂 解 ）途 径 -II：两 种 裂 解 方 式 相 互 竞 争 、 相 互 制 约 。 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 化 合 物 A1+. B1+.黄 酮 120 1025， 7-二 氢 黄 酮 152 1025， 7， 4-三 羟 基 黄 酮 152 1185， 7-二 羟 基 ， 4-甲 氧 基 黄 酮 152 132黄 酮 类 化 合 物 的 质 谱 数 据 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 大 多 数 黄 酮 醇 苷 元 的 分 子 离 子 峰 M+是 基 峰 ， 裂 解 主 要 按方 式 进 行 ， 得 到 的 B2+.、 及 其 失 去 CO而 形 成 的 B2-28+离 子 具 有 诊 断 价 值 。 根 据 B2+.和 分 子 离 子 之 间 的 质 荷 比 之 差 ， 可 以 推 断 黄 酮 醇 中A环 和 C环 的 取 代 情 况 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 具 有 2-OH或 2-OCH3的 黄 酮 醇 ， 易 失 去 -OH或 -OCH3形 成 新的 五 元 杂 环 。 -OR M-31 + (R=CH 3)M-17 + (R=H)(R=H, or CH3)M +O OOHOO OROH 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 黄 酮 苷 类 化 合 物 在 FD-MS、 FAB-MS、 ESI-MS谱 可 给 出强 烈 的 M+及 M+H+。 还 给 出 糖 基 的 某 些 碎 片 ， 为 化 合 物的 结 构 鉴 定 提 供 了 重 要 的 信 息 。 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 黄 酮 苷 元 类 化 合 物 的 两 种 裂 解 方 式 ： 黄 酮 ： 裂 解 方 式 I 黄 酮 醇 ： 裂 解 方 式 II判 断 A、 B环 的 取 代 情 况 ： 根 据 A1+.、 B1+.、 B2+. 碎 片 离 子 可 以 判 断 A、 B环 上 -OH的 取 代 ； B2+与 M+的 m/z差 可 知 A、 C环 的 取 代 。 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY NMR是 由 磁 性 核 受 幅 射 而 发 生 跃 迁 所 形 成 的 吸 收 光 谱 。 研 究最 多 、 应 用 最 广 的 是 1H核 和 13C核 的 NMR 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 化 学 位 移 （ Chemical shift,） ： 用 于 判 断 H的 化 学 环 境和 磁 环 境 1H核 自 旋 裂 分 及 偶 合 常 数 J (Hz) (Coupling constant)： 用 于判 断 H与 H的 关 系 积 分 面 积 ： 用 于 确 定 H个 数 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 常 见 质 子 的 化 学 位 移 (ppm)： 烷 氢 ： RCH3， 0.7-1.2 R2CH2， 1.3 R3CH， 1.5 烯 氢 ： C=C-H， 4.5-7.5 芳 氢 ： Ar-H， 6-9.5 醇 ： HO-C-H， 3.4-4； HO-C-H， 1-5.5 酸 ： HOOC-C-H， 2-2.6； HOOC-C-H， 10.5-12 羰 基 ： O=C-C-H， 2-2.7 醛 基 ： R-CHO， 9-10 酚 ： ArO-H， 4.8-8.01 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 偶 合 常 数 ：偕 偶 （ Jgem） :sp3 J=1016Hz sp2 C=CH2 J=03Hz N=CH2 J=7.617Hz 邻 偶 （ Jvic） :烯 型 ： Jcis=612Hz Jtrans=1218Hz 芳 环 ： J=69Hz Jae=26Hz Jaa=813Hz Jee=28Hz远 程 偶 合 ： 苯 环 J m=13Hz Jp=01Hz 1 C CH HHH 6-12Hz 0-3Hz 12-18Hz H H H H H H 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 黄 酮 中 的 主 要 氢 质 子 ：1. A环 质 子2. B环 质 子3. C环 质 子4. 糖 基 上 的 质 子5. 取 代 基 上 的 质 子 O O OO HO OH HO HO OH OH OCH3 A C B 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY H6 6.9-5.7（ d， J6,8=2.5Hz） H8 6.9-5.7（ d， J8,6=2.5Hz）H6 H8， H-6较 H-8高 场7-羟 基 苷 化 后 H-6和 H-8信 号 均 向 低 场 移 动 A 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY O O HO OH OH 槲 皮 素 OH OH H-6 H-8 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY (2) 7-羟 基 黄 酮H5 8.0（ d， J5,6=9)H6 7.1-6.3（ dd,J6,5=9,J6,8=2.5）H8 7.1-6.3（ d,J8,6=2.5）H-5较 H-6、 H-8低 场 ， 是 由 于 羰 基 的 去 屏 蔽 效 应 的 影 响 。H-6、 H-8较 5, 7-二 OH黄 酮 低 场 ， 且 相 互 位 置 可 能 颠 倒 。A 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 56 32 ORB2.B环 质 子(1) 4-氧 化 黄 酮H2,6 7.5（ d, J=8.5）H3,5 6.8（ d, J=8.5）H-3, 5H-2, 6 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY O OH HO OH OHH-2, 6 H-3, 5 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY (2) 3,4-二 氧 化 黄 酮 ：H6 7.3-7.9（ dd， J6,5=8.5； J6,2=2.5）H2 7.2-7.8（ d， J2,6=2.5）H5 7.1-6.7（ d， J5,6=8.5） 562 ORORB 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY O O HO OH OH 槲 皮 素 OH OH H-2 H-5 H-6 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY (3) 3,4,5-三 氧 化 黄 酮 ： 若 R1=R2=R3=H， 则 H-2,6为 单 峰 ， 6.7-7.5 若 上 述 条 件 不 成 立 ， 则 H-2,6分 别 为 二 重 峰 （ J=2Hz） 62 OR2OR1OR3B 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY H3 6.3（ s） （ 易 与 H6、 H8混 ， 但 峰 形 不 同 ， 单 峰 ） H-3, 6.33O H OC 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 32OO Hl H-2位 于 羰 基 位 ， 受 羰 基 去 屏 蔽 作 用 ， 且 通 过 碳 与 氧 相连 ， 故 较 一 般 芳 香 质 子 低 场 ， 7.6-7.8。 C H2 7.6-7.8（ s） 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY H-2, dd, 5.2 Jtrans = 11Hz（ 反 偶 ） Jcis = 5Hz（ 顺 偶 ） 两 个 H-3, 分 别 为 dd峰 ， 中 心 位 于 2.8 H-3e J = 17Hz（ 偕 偶 ） ， 5Hz（ 顺 偶 ） H-3a J = 17Hz（ 偕 偶 ） ， 11Hz（ 反 偶 ） 23C 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY H-2与 H-3为 反 式 双 直 立 键 ， J=11Hz， 双 重 峰 H-2 4.8-5.0 H-3 4.1-4.3 3-OR苷 化 ， 供 电 子 能 力 下 降 ， 两 个 氢 的 向 低 场 位 移 。 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY （ 5） 查 耳 酮 ： 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY （ 6） 橙 酮 ： 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 在 糖 的 1H-NMR中 ： 端 基 质 子 4.55.5 ppm 其 它 质 子 3.54.5 ppm 鼠 李 糖 的 C-CH3 0.71.2 ppm （ d J=6.5Hz） 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 端 基 质 子 的 峰 位 于 成 苷 的 位 置 以 及 糖 的 种 类 有 关 ：葡 萄 糖 苷 ： C3-OR， 1-H ： 5.7-6.0 C-5, C-6, C-7, C-4-OR , 1-H： 4.8-5.2鼠 李 糖 苷 ： C3-OR， 1-H ： 5.0-5.1 C-7-OR , 1-H： 5.1-5.3 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY OHHe-O OR OHHO H HO H OROHH H OH OHOR-O He OHHO H HO H HOHH OR OH C3 HaC2 123 a e Jaa = 6-9HzC3 HaC2123 a Jae = 2-3.5Hz-D-葡萄糖 -D-葡萄糖 a H-2为 a键 :可 通 过 糖 上 C1-H与 C2-H的 偶 合 常 数 ， 来 判 断 苷 键 的 构 型 （ 、 ） 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY H-2为 e键 :无 法 用 J值 判 断 苷 键 的 构 型 。 2 1O HH CH3OH HOH OHH ORH 2 1O HH CH3OH HOH OHH H OR -L-鼠 李 糖 苷 J12 = Jee = 2-3 Hz -L-鼠 李 糖 苷 J12 = Jae = 2-3 Hz 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 双 糖 苷 ： 末 端 糖 上 的 H-1因 离 黄 酮 母 核 较 远 ， 受 到的 去 屏 蔽 作 用 较 小 ， 因 而 较 与 苷 元 直 接 相 连 的 糖 的 H-1处于 较 高 场 的 位 置 。 H1末 端 H1与 苷 元 相 连 O O O HO OH OH OH O O OH OH OH O OHHO HO 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY (5)其 他 质 子酚 -OH： H5-OH 12.4 H7-OH 10.9 H3-OH 9.7 C6-CH3， C8-CH3： 2.45-2.05,C6-CH3 C8-CH3-OCH3： 4.1-3.5（ 3H, s） -OCOCH3： 糖 -OH乙 酰 化 ， 2.1-1.65（ 3H, s） 酚 -OH乙 酰 化 ， 2.5-2.3（ 3H, s） 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 某 黄 酮 化 合 物 1H-NMR数 据 如 下 ： ppm： 6.18 (1H,d, J=2H) 6.38 (1H,s) 6.50 (1H,d,J=2Hz) 6.90 (2H,d,J=8Hz) 7.70 (2H,d,J=8Hz) 6-H 3-H8-H3,5-H2,6-H 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 化 学 位 移 （ Chemical shift,） 用 于 判 断 13C的 化 学 环 境 和 磁 环 境 峰 高 或 峰 面 积 常 规 13C谱 不 提 供 积 分 曲 线 等 定 量 数 据 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 各 种 常 见 的 13C核 的 化 学 位 移 如 下 ： 050100150200220 150-220 100-150 50-80 0-60烷 烃 类 饱 和 碳 原 子苯 环 碳氰 基 碳 COCO /ppmC 酮 类醛类酸类酯与酰胺 类 188-228ppm185-208ppm165-182ppm155-180ppm 双 键 碳 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY (二 )黄 酮 类 化 合 物 的 13CNMR O O OH HO OH O O HO OH OH OH OH 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY C=O C-2(或 C-) C-3(或 C-) 归 属168.6169.8(s) 137.8140.7(d) 122.1122.3(s) 异 橙 酮 类 174.5184.0(s) 160.5163.2(s) 104.7111.8(d) 黄 酮 类149.8155.4(d) 122.3125.9(s) 异 黄 酮 类147.9(s) 136.0(d) 黄 酮 醇 类182.5182.7(s) 146.1147.7(s) 111.6111.9(d)(=CH-) 橙 酮 类 188.0197.0(s) 136.9145.4(d) 116.6128.1(d) 查 耳 酮 类75.080.3(d) 42.844.6(t) 二 氢 黄 酮 类82.7(d) 71.2(d) 二 氢 黄 酮 醇 类 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 确 定 黄 酮 类 化 合 物 的 取 代 图 示 ： O O OH HO OH OH OH 147.7 177.4 137.3104.6 162.6 116.3121.7 116.1 124.294.5 165.6 99.3 158.3X Zi Zo Zm ZpOH 26.9 -12.7 1.4 -7.3OCH3 30.2 -14.7 0.9 -8.1 128.5 (二 )黄 酮 类 化 合 物 的 13CNMR 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY (二 )黄 酮 类 化 合 物 的 13CNMR O O OH HO OH OH OH 147.7 177.4 137.3104.6 162.6 116.3121.7 116.1 124.294.5 165.6 99.3 158.3 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY O O OH HO OH OH OH 147.7 177.4 137.3104.6 162.6 116.3121.7 116.1 124.294.5 165.6 99.3 158.3 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY O OH HO OH OH 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 黄 酮 母 核 ： A环 ： 5,7-OH， 6-H(d) , 8-H(d) = 6.9-5.7 7-OH， 6-H(dd) , 8-H(d) = 7.1-6.3； 5-H(d) = 8 B环 ： 4-OR， H-2,6(d) , H-3,5(d) = 7.9-6.5 3,4-OR， H-6(dd， 2, 8 Hz) ； H-2(d, 2 Hz) ； H-5(d, 2 Hz) 3,4,5-OR， 取 代 基 相 同 ： s， H-6(d) ,H-2(d) = 7.5-6.5 C环 ： 黄 酮 H-3(s) = 6.3糖 基 质 子 ： 葡 萄 糖 ， H-其 他 H-1(d) = 6.0-4.8 鼠 李 糖 ， H-1(d) = 5.0其 他 质 子 ： Ar-OH 5-OH=12.4 7-OH=10.9 3-OH=9.7 -OCH3 = 4.1-3.5 -COCH3 = 2.1 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY O O OH HO OH OH OH 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY O O OH HO OH OH OH 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY O O OH HO OH OH OH 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY O O OH HO OH OH OH 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY O O OH HO OH OH OH 147.7 177.4 137.3104.6 162.6 116.3121.7 116.1 124.294.5 165.6 99.3 158.3 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 从 唇 形 科 植 物 中 分 得 一 成 分 为 淡 黄 色 结 晶 I， 分 子 式 为 C21H22O11。 定 性 反 应 ： 三 氯 化 铁 ， 蓝 绿 色 盐 酸 -镁 粉 反 应 ， 橙 色 Molish反 应 ， 紫 色 环 氧 氯 化 锆 -枸 橼 酸 反 应 ， 黄 色 褪 去 UV（ max） ： II I MeOH 256 266sh 348 NaOMe 264 301sh 394 NaOAc 259 406 NaOAc/H 3BO4 258 353 AlCl3/HCl 273 295sh 357 387 示 有 酚 -OH 示 为 黄 酮 类 化 合 物示 有 糖 或 苷示 有 5-OHI为 348nm， 示 无 3-OHI红 移 46nm， 示 有 4 -OH无 7-OH无 邻 二 酚 -OH I红 移 ， 示 有 5-OH 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY IRmaxcm-1 ： 3350(-OH)， 1659(C=O)， 1603， 1490(苯 )。 1HNMR(DMSO-d6 TMS)： ppm 6.3(1H,s) 6.7(1H,d,J=2.5) 7.0(1H,d,J=2.5) 6.8(2H,d,J=8.0) 8.1(2H,d,J=8.0) I用 酸 水 解 ， 水 解 产 物 为 II和 母 液 ， 母 液 经 PC鉴 定 为 一 鼠 李 糖 （ 鼠 李糖 苷 ） ； II经 重 结 晶 ， 测 定 其 分 子 式 为 C 15H10O6， 盐 酸 -镁 粉 、 三 氯 化 铁 反应 阳 性 ， 与 锆 盐 -枸 橼 酸 反 应 黄 色 褪 去 ， Molish反 应 为 阴 性 （ 无 糖 基 ） 。3-H 6-H8-H3,5-H2,6-H O O HO HO OH O O rhaO HO OH 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 从 黄 芩 根 中 分 离 出 成 分 I的 数 据 如 下 ： 浅 黄 色 结 晶 ， mp.300-302 (dec)。 化 学 检 查 ： 三 氯 化 铁 ， 阳 性 盐 酸 -镁 粉 反 应 ， 阳 性 Gibbs反 应 ， 阴 性 氨 性 氯 化 锶 反 应 ， 阴 性 元 素 分 析 C16H12O6。 MS m/z(%)： 300(M+,55.6)， 285(100)（ M-15为 基 峰 ， 示 有 -OCH3） ， 118(19.4)（ B环 产 生 的 碎 片 ） 。 UV（ max） ： MeOH 277 328 NaOAc 284 390 AlCl 3 /HCl 274 373 NaOMe 284 395 示 有 酚 -OH 示 为 黄 酮 类 化 合 物示 C8无 H， 即 被 取 代示 无 邻 二 酚 -OHI为 328nm， 示 无 3-OHII红 移 ， 示 有 7-OH示 有 5-OH 示 有 4-OH 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY IRmaxcm-1 ： 3430， 3200(-OH)， 1660(C=O)， 1610，1580(苯 )。 1HNMR(DMSO-d6)： ppm 3.82(3H,s) 6.20(1H,s) 6.68(1H,s) 6.87(2H,d,J=9) 7.81(2H,d,J=9) O O HO HO OHOCH3 -OCH36-H 3-H3,5-H2,6-H 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 百 蕊 草 素 （ I） 的 结 构 测 定 : 浅 黄 色 结 晶 ， mp.190-192 化 学 检 查 ： 三 氯 化 铁 ， 暗 褐 色 盐 酸 -镁 粉 反 应 ， 紫 红 色 Molish反 应 ， 紫 色 环 氧 氯 化 锆 -枸 橼 酸 反 应 ， 黄 色 褪 去 氨 性 氯 化 锶 反 应 ， 阴 性 UV（ max） ： II I MeOH 264 346 NaOMe 273 390 320sh NaOAc 271 395 NaOAc/H 3BO3 264 346 AlCl3/HCl 272 303 348 395 示 有 酚 -OH 示 为 黄 酮 类 化 合 物示 有 糖 或 苷示 有 5-OH示 无 邻 二 酚 -OHI为 346nm， 示 无 3-OHI红 移 44nm， 示 有 4-OHII红 移 ， 示 有 7-OH无 邻 二 酚 -OH示 有 5-OH 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITYCH2OH H3COOHO HO OHO OHO OH O OHO OHOH 用 5%硫 酸 水 解 ， 过 滤 ， （ 1） 沉 淀 物 与 锆 盐 -枸 橼 酸 试 剂 反 应 ， 黄 色 不褪 ， 沉 淀 物 的 UV加 入 NaOMe后 ， 随 测 定 时 间 延 长 而 衰 退 ； （ 2） 母 液 用氢 氧 化 钡 中 和 ， 过 滤 ， 滤 液 经 浓 缩 后 进 行 PPC， 检 出 葡 萄 糖 和 鼠 李 糖 ； 百 蕊 草 素 （ I） 测 1HNMR： ppm 0.95(3H,d,J=6) 3.52-5.70 (12H,m) 6.83, (1H,d,J=2) 7.26(1H,d,J=2) 7.20 (2H,d,J=9) 8.01(2H,d,J=9) 文 献 值 ： glc-rha在 1,4连 接 时 ， mp.190-192 。 rha-CH3糖 -HA环 H 6A环 H 8B环 H 3,5B环 H 2,6 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY 1.名 词 解 释 黄 酮 类 化 合 物 交 叉 共 轭 体 系 双 向 层 析 盐 酸 镁 粉 反 应 四 氢 硼 钠 反 应 二 氯 化 锆 枸 橼 酸 反 应 氨 性 氯 化 锶 反 应2.问 答 题 （ 1） 认 识 黄 酮 类 化 合 物 的 基 本 母 核 及 二 级 结 构 。 （ 2） 比 较 不 同 类 型 的 黄 酮 化 合 物 的 颜 色 、 溶 解 度 及 酸 性 ， 并 说 明 理 由 。 （ 3） 分 别 用 光 谱 法 及 化 学 法 区 分 或 鉴 别 各 黄 酮 类 化 合 物 。 （ 4） 根 据 黄 酮 类 化 合 物 的 性 质 ， 简 述 提 取 、 分 离 及 检 识 黄 酮 类 化 合 的 方 法 ， 说 明 pH值 对 此 过 程 的 影 响 ， 并 设 计 流 程 图 。 （ 5） 黄 酮 及 黄 酮 苷 进 行 纸 层 析 时 ， 分 别 以 醇 性 展 开 剂 、 水 性 展 开 剂 展 开 ， 比 较 Rf值 大 小 。 （ 6） 说 明 在 聚 酰 胺 柱 和 Sephadex LH-20柱 上 ， 以 甲 醇 为 洗 脱 剂 时 ， 不 同 黄 酮 类 化 合 物 的 流 出 顺 序 ， 并 说 明 理 由 。 （ 7） 简 述 黄 酮 及 黄 酮 醇 质 谱 裂 解 规 律 ， 并 比 较 异 同 点 。 （ 8） 如 何 利 用 化 学 显 色 法 及 波 谱 法 推 断 黄 酮 类 化 合 物 的 结 构 ？ 2012 SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY Thank You for Your Attention!