泛发性脓疱型银屑病与HLADQB1等位基因的相关性研究

中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- q 定 义 与 分 型v在 最 近 新 版 的 Rook教 科 书 中 ， 泛 发 性 脓 疱型 银 屑 病 (GPP)被 定 义 为 银 屑 病 的 一 种 不 寻常 变 型 ， 并 以 急 性 、 亚 急 性 、 偶 而 慢 性 的损 害 上 发 生 无 菌 性 脓 疱 为 中 心 特 征 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- q 依 据 临 床 表 现 把 GPP分 为 5个 亚 型 。 即 ：v (1)急 性 泛 发 型 (Von Zumbusch型 )v (2)妊 娠 期 GPP(IP)v (3)儿 童 型 GPPv (4)环 型 GPPv (5)局 限 型 GPP(不 包 括 手 足 ) 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- q对 这 种 分 类 中 的 IP仍 有 争 议 :不 支 持 观 点 ： 病 史 、 诱 因 、 某 些 化 验 室 检 查 、 处 理 等 不 同 。支 持 观 点 ： 病 理 表 现 相 似 、 妊 娠 可 诱 发 GPP、 都 具 有 HLA-B27 抗 原 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- q寻 常 型 银 屑 病 (PSV)与 GPP的 关 系 可 概 括 为 :v临 床 表 现 的 包 容 性 ， 即 ： 二 者 皮 损 可 共 存 、转 化 。v免 疫 异 常 的 相 似 形 ， 即 ： 二 者 皮 损 处 都 有CD4+ 、 CD8+T细 胞 的 浸 润 , IL-6、 IL-8高 水平 表 达 ,白 细 胞 聚 集 形 成 微 脓 肿 。v遗 传 背 景 的 明 显 差 异 性 (后 述 )。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- q两 种 临 床 异 质 、 遗 传 异 质 GPP 亚 型 :v有 PsV病 史 的 GPP与 无 PsV病 史 的 GPP。vPsV阳 性 GPP发 病 年 龄 偏 晚 ， 诱 发 因 素 常 是先 前 的 糖 皮 质 激 素 治 疗 或 不 规 则 撤 退 。v PsV阴 性 GPP发 病 年 龄 偏 早 ， 诱 发 因 素 多为 上 呼 吸 道 感 染 。v遗 传 异 质 性 后 述 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- qHLA复 合 系 统vHLA位 与 人 6P21.31上 ,全 长 3600Kb,只 占 整 个 人类 基 因 组 的 1/3000,是 人 类 基 因 组 中 最 复 杂 的遗 传 系 统 。v目 前 已 鉴 定 出 224个 基 因 座 位 ,128个 有 功 能 性产 物 表 达 ,其 中 39.8%基 因 产 物 直 接 参 与 免 疫 应答 及 调 节 。 因 而 HLA系 统 多 与 免 疫 性 疾 病 有 关 。v与 疾 病 关 联 最 密 切 的 一 区 域 ， 现 已 肯 定 50多 种疾 病 与 HLA基 因 明 显 关 联 ， 即 HLA复 合 体 与 疾病 关 联 程 度 超 过 人 类 基 因 组 任 何 一 个 区 域 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- vHLA-DQB1位 于 HLA-II类 基 因 DQ亚 区 ， 目 前 已鉴 定 的 DQB1等 位 基 因 达 25个 ， 对 应 的 血 清 特异 性 抗 原 只 有 9种 ， 即 25个 等 位 基 因 编 码 的抗 原 只 有 9种 特 异 性 。vDQB1与 DQA1分 别 编 码 DQ分 子 的 链 和 链 。已 发 现 DQB1等 位 基 因 与 多 种 疾 病 关 联 。 最 典型 的 例 子 是 与 IDDM的 关 联 。 如 果 DQ 链 第57位 氨 基 酸 是 D， 则 对 IDDM呈 抗 性 ； 若 为 D以 外 的 其 它 氨 基 酸 ， 则 表 现 为 易 感 性 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- q研 究 HLA与 疾 病 相 关 ， 实 质 上 是 研 究 疾 病发 生 发 展 的 遗 传 倾 向 ， 因 而 属 于 病 因 学研 究 。q研 究 方 法 通 常 有 关 联 分 析 和 连 锁 分 析 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- v关 联 分 析 是 比 较 来 自 同 一 群 体 中 无 亲 缘 关系 的 患 病 个 体 与 非 患 病 个 体 (对 照 )在 某 一遗 传 标 记 位 点 (marker locus)上 的 特 定 等位 基 因 (如 HLA等 位 基 因 )与 疾 病 性 状 的 相 关程 度 。 一 般 通 过 患 病 人 群 和 健 康 人 群 作 HLA分 型 后 ， 用 统 计 学 方 法 (通 常 用 2-tesf)进 行 判 别 ， 故 属 于 病 例 对 照 研 究 ， 又 称群 体 相 关 研 究 （ population association studies） 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- v若 发 现 标 记 位 点 的 特 定 等 位 基 因 频 率 在 患病 组 与 对 照 组 之 间 有 显 著 性 差 异 ， 则 表 明该 特 定 等 位 基 因 与 所 研 究 的 疾 病 性 状 相 关联 ， 提 示 标 记 位 点 可 能 含 有 一 个 疾 病 易 感基 因 或 与 易 感 基 因 紧 密 连 锁 。 关 联 程 度 通过 计 算 相 对 危 险 度 (relative risk,RR)来估 计 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- q关 联 分 析 结 果 的 判 定v发 现 某 种 HLA等 位 基 因 或 抗 原 与 某 种 疾 病 关联 (有 统 计 学 意 义 )并 不 意 味 着 携 带 该 基 因就 一 定 患 病 ， 关 联 结 果 有 两 种 可 能 的 解 释 。v一 种 可 能 ： 关 联 成 分 与 疾 病 易 感 性 有 关 (原发 关 联 )。v另 一 种 可 能 ： 关 联 成 分 与 疾 病 易 感 性 无 关 ，而 仅 仅 是 遗 传 标 记 ， 但 由 于 该 基 因 位 点 存在 与 HLA连 锁 不 平 衡 的 其 他 未 知 基 因 ， 可 能也 造 成 机 体 对 疾 病 易 感 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- v如 HLA-DQB1*0405在 IDDM发 病 中 起 关 作用 ， 但 此 基 因 又 与 HLA-DRB1*0901及HLA-B*4601呈 连 锁 不 平 衡 ， 使 人 误 认为 HLA-DRB1*0901或 HLA-B*4601与 疾 病关 联 ， 实 际 上 只 有 HLA-DQB1*0405属 于该 病 的 原 发 关 联 成 分 ， 其 它 2个 等 位 基因 属 于 次 级 关 联 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- q关 联 分 析 的 实 际 意 义v关 联 分 析 可 提 示 相 关 位 点 或 特 定 的 等 位 基因 的 传 递 方 式 及 效 应 性 质 。 如 正 相 关 ， 促发 病 ； 负 相 关 ， 保 护 不 发 病 。 并 可 由 亚 型分 析 发 现 其 遗 传 异 质 性 (如 I型 与 II型 银 屑病 )。v 关 联 分 析 虽 只 能 将 致 病 基 因 粗 略 地 定 位 于某 个 位 置 ， 却 能 为 以 后 的 基 因 精 确 定 位 、克 隆 等 研 究 提 供 重 要 依 据 和 线 索 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- qHLA的 分 型 技 术v 血 清 学 方 法 ： 只 能 检 测 HLA基 因 产物 即 HLA抗 原 宽 特 异 性 ， 不 能 检 测HLA基 因 本 身 的 多 态 性 。v 细 胞 学 方 法 ： 由 于 分 型 细 胞 来 源 困难 ， 且 只 能 检 少 数 HLA-DW、 HLA-DPW抗 原 ， 现 已 基 本 不 用 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- v分 子 生 物 学 技 术 ： 即 DNA水 平 的 HLA分 型技 术 。 可 检 出 HLA多 态 性 ， 可 识 别 同 一 位点 的 不 同 等 位 基 因 ， 随 着 PCR技 术 方 法 的 改进 和 发 展 ， 其 精 度 和 分 辨 水 平 越 来 越 细 ，有 助 于 深 入 研 究 HLA基 因 的 结 构 和 功 能 。v常 用 的 方 法 ： 包 括 PCR-RFLP(限 制 性 片 段长 度 多 态 性 )、 PCR-SSO(序 列 特 异 寡 核 苷 酸探 针 )、 PCR-SSP(序 列 特 异 性 引 物 )及 PCR-SBT(序 列 直 接 分 型 )等 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- vPCR-SSP基 本 原 理 ： PCR反 应 的 特 异 性 取 决于 扩 增 引 物 与 模 板 DNA的 精 确 匹 配 。 应 用SSP引 物 使 HLA分 型 特 异 性 转 化 为 由 PCR反应 特 异 性 来 决 定 ， 因 为 SSP引 物 序 列 与 特 异性 等 位 基 因 的 核 苷 酸 序 列 完 全 匹 配 ， 只 要 控制 好 PCR反 应 条 件 ， 就 使 每 对 SSP仅 能 扩 增某 一 特 异 性 HLA等 位 基 因 ， 扩 增 产 物 通 过 琼脂 糖 电 泳 或 荧 光 检 测 ， 便 可 测 定 其 特 异 性 ，从 而 达 到 对 HLA等 位 基 因 分 型 的 目 的 ； 同 时反 应 体 系 中 加 入 了 参 照 引 物 ， 扩 增 HLA区 域内 一 段 保 守 序 列 ， 又 可 避 免 假 阴 性 结 果 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- vHLA与 银 屑 病 的 相 关 性 研 究vRussell(1972)首 次 报 道 了 HLA-B17与银 屑 病 明 显 相 关 。v银 屑 病 与 HLA的 相 关 已 明 确 ， 即 至 少 有一 个 银 屑 病 基 因 位 于 HLA位 点 或 在 附 近 。v比 较 一 致 的 意 见 认 为 :PsV与 HLA-A1、B13、 B17、 Cw6、 DR7等 相 关 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- vI型 银 屑 病 (40岁 以 前 发 病 )主 要 表 达 HLA-Cw6、 HLA-B57、 HLA-DR7；vII型 银 屑 病 (40岁 以 后 发 病 )则 高 度 表 达HLA-Cw2。v最 近 翟 宁 等 发 现 HLA-DQB1*0602与 东 北 汉 人PsV关 。 刘 涛 峰 等 则 发 现 皖 汉 人 PsV与 HLA-DQA1*0201明 显 相 关 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- v Dausset等 (1977)首 次 报 道 了 GPP与 HLA-A13、 B17、 B27相 关 后 ，v Karvonen和 Zachariae等 随 后 证 实 HLA-B27与 GPP强 相 关 ， 与 PsV不 相 关 ； 从 而 首 次 揭示 了 PsV与 GPP的 遗 传 背 景 具 有 差 异 性 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- v Ocklawaha等 （ 1996） 对 日 本 541例 GPP的流 行 病 学 研 究 发 现 ：v GPP与 HLA-A2、 B14、 B35有 弱 相 关 ；v PsV阳 性 的 GPP与 HLA-A1、 B37、 DRw10显著 相 关 ； PsV阴 性 的 GPP不 与 它 们 相 关 ，v 从 而 首 次 揭 示 PsV阳 性 的 GPP与 PsV阴 性 的GPP 具 有 遗 传 异 质 性 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- vOzawa等 则 首 次 从 DNA水 平 上 研 究 发 现 HLA-DQB1*0303与 PsV阴 性 的 GPP显 著 相 关 。v进 一 步 验 证 了 PsV阳 性 的 GPP与 PsV阴 性 的GPP 的 遗 传 异 质 性 。v我 国 只 有 宋 芳 吉 报 道 北 方 汉 族 GPP患 者 与HLA-B13显 著 相 关 ，v国 内 尚 未 有 HLA-II基 因 与 GPP相 关 的 研 究文 献 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- 目 的 本 文 采 用 PCR-SSP技 术 ， 对 山 东 籍 汉 人GPP患 者 和 健 康 对 照 进 行 HLA-DQB1等位 基 因 分 型 研 究 ， 目 的 在 于 ： 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- 1)探 讨 山 东 汉 人 GPP与 HLA-DQB1等 位 基 因 的相 关 性 。 从 而 从 DNA水 平 上 探 讨 GPP可 能 的发 病 机 制 。2) 获 得 山 东 汉 人 对 GPP易 感 或 保 护 的 相 关 基 因 。3)验 证 PsV阳 性 GPP与 PsV阴 性 GPP遗 传 异 质 性 ；以 及 探 讨 GPP各 临 床 类 型 的 遗 传 背 景 是 否 具有 差 异 性 ， 从 而 为 临 床 分 型 提 供 依 据 。4) 长 远 目 的 为 研 究 中 国 汉 人 与 GPP相 关 性 提 供一 些 遗 传 学 数 据 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- q实 验 仪 器 与 材 料 DNA扩 增 仪 稳 压 电 泳 仪 紫 外 线 分 析 仪 台 式 高 速 离 心 机 旋 涡 混 合 器 移 液 器 (2 l， 20 l， 200 l各 一 个 ) 序 列 特 异 性 引 物 （ SSP） PCR反 应 Buffer TaqDNA聚 合 酶 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- q实 验 对 象v病 例 资 料 ： 38例 GPP均 来 自 1990年 以 来 ，曾 在 我 院 住 院 治 疗 (包 括 多 次 住 院 )并 确 诊 的 GPP患 者 和 近 2年 来 门 诊 新 发 现 并 确 诊 的 GPP患 者 ， 所 有 患 者 均 为 山 东 籍 汉 族 人 ， 性 别 、 年 龄 不 限 。v对 照 资 料 ： 94例 全 部 来 自 山 东 中 医 药 大 学 ，山 东 籍 汉 族 大 学 生 及 教 职 工 自 愿 健 康 献 血员 ， 彼 此 间 无 血 缘 关 系 ， 个 体 及 家 族 中 无 银 屑 病 及 其 病 史 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- q标 本 收 集 ： 病 例 及 对 照 每 人 均 采 取 周围 静 脉 全 血 2ml， 置 于 含 有 ACD 0.5ml塑 料 试 管 里 ， 稍 混 匀 加 盖 后 ， -80 超低 温 冰 箱 保 存 。qDNA抽 提 ： 应 用 上 海 生 工 提 供 的 抽 提 试剂 盒 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- q PCR反 应 体 系 ： 每 个 PCR反 应 体 系 为 25 l。 其中 含 有 10 PCR Buffer 2.5ml； 0.4 mol特异 性 引 物 ； 0.2 mol内 对 照 引 物 ； 200 mol的 dNTP； 1.5 mmol MgCl2； 1 u Tag DNA酶 ； 2 l 模 板 DNA。qPCR反 应 参 数 ： 第 一 步 94 预 变 性 5 min。 第二 步 94 变 性 30 s 55-60 退 火 50 s 72 延 伸 30s 32个 循 环 。 第 3步 72 延 伸5min。 第 4步 4 保 存 2 h。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- q读 取 及 判 断 结 果 ： 每 条 泳 道 内 必 须 出现 阳 性 对 照 带 (796 bp)， 在 其 前 方 对 应 欲检 测 等 位 基 因 大 小 的 位 置 出 现 明 亮 的 带 时判 为 阳 性 ； 如 果 未 出 现 阳 性 对 照 带 ， 视 为PCR反 应 不 成 功 ,需 重 新 扩 增 。 电 泳 图 象 ，见 图 -1， -2， -3， -4， 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- M DQB1*0603、 0201、 0602200bp100bp 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- 无 PsV史 及 家 族 史 200bp100bp 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- 人 GPP 有 关 节 型 银 屑 病 史 200bp100bp 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- M DQB1*0603、 0201 儿 童 GPP PsV、 家 族 史 阳 性200bp100bp 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- q统 计 学 处 理v采 用 2检 验 ： 对 患 者 组 与 对 照 组 的 HLA-DQB1等 位 基 因 逐 一 进 行 关 联 分 析 。 应 用SPSS 10.0软 件 包 ， 把 相 关 数 据 输 入 计 算 机 计算 出 相 关 参 数 2、 P和 RR值 。v校 正 Pc(P correction)由 Bonferrn法 计 算 ， 即 PC = P 所 检 测 的 等 位 基 因 数 。v以 PC 0.05作 为 显 著 性 检 验 水 准 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- v等 位 基 因 频 率 (Allelic frenquency,AF)依据 Hardy-Weinberg平 衡 定 律 ， 由 公 式AF=1-(1-antigen frequency )1/2计 算 ， 其 中antigen frequency为 检 测 阳 性 数 占 检 测 总数 的 百 分 数 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- q临 床 情 况v一 般 情 况 ： 病 例 组 38例 ， 男 26例 ， 女 12例 。发 病 年 龄 最 小 2月 ， 最 大 72岁 ， 平 均 29岁 ；其 中 12岁 以 下 发 病 的 儿 童 8例 。 病 程 最 短 21天 ， 最 长 30年 。 PsV病 史 阳 性 18例 (包 括 1例关 节 型 银 屑 病 )， PsV病 史 阴 性 20例 。 有 PsV家 族 史 9例 。 对 照 组 94例 ， 男 59例 ， 女 36例 ，平 均 年 龄 21岁 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- v临 床 类 型 ： Von Zumbusch型 27 例 ； LGPP 6例 ； 妊 娠 期 GPP 3例 ； AC/GPP 2例 ； 8例 儿 童 均 为 Von Zumbush型 。v9例 做 病 理 检 查 ， 表 现 为 角 化 不 全 ， 表 皮 内中 性 粒 细 胞 移 入 ， 角 层 下 棘 层 上 部 Kogoj微脓 肿 ， 棘 层 不 同 程 度 的 肥 厚 ； 真 皮 浅 层 血管 扩 张 ， 周 围 淋 巴 细 胞 、 中 性 粒 细 胞 浸 润 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- q 实 验 结 果 ， 见 ： 表 1 表 2 表 3 表 4 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- 表 1 G PP患 者 与 对 照 组 H LA-DQB1等 位 基 因 频 率 分 布 比 较 等 位基 因 患 者 组 对 照 组n=38 n=94 2 P PC RR 频 数 频 率 频 数 频 率 DQB1*0602 11 0.157 10 0.055DQB1*0603 11 0.157 7 0.038DQB1*0604 1 0.013 23 0.131DQB 1*0201 15 0.222 7 0.038 6.78 0.009 0.117 3.42 10.6 0.001 0.013 5.06 8.674 0.003 0.039 0.08 19.98 0.0004 0.005 8.10 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- H L A - DQB1等 位 基因 P s V 阳 性GPP(n=18) 对 照 组 (n=94) 2 P PC RR频 数 频 率 频 数 频 率DQB1*0602 3 0.087 10 0.055 0.11 0.436 5.668 1.68DQB1*0603 9 0.292 7 0.038 19.00 0.0004 0.005 12.42DQB1*0201 13 0.472 7 0.038 38.91 0.0004 0.005 32.31表 2 PsV阳 性 G PP与 对 照 组 基 因 频 率 分 布 比 较 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- 表 3 PsV阴 性 G PP与 对 照 组 基 因 频 率 分 布 比 较H L A -DQB1等 位 基 因 P s V 阴 性GPP(n=20) 对 照 组 (n=94) 2 P PC RR频 数 频 率 频 数 频 率DQB1*0602 8 0.225 10 0.055 8.60 0.003 0.039 5.60DQB1*0603 2 0.051 7 0.038 0.00 0.657 8.541 1.38DQB 1*0201 2 0.051 7 0.038 0.00 0.657 8.541 1.38 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- H L A -DQB1等 位 基 因 P s V 阳 性GPP(n=20) P s V 阴 性GPP(n=20) 2 P PC RR频 数 频 率 频 数 频 率DQB1*0602 3 0.087 8 0.225 1.50 0.160 2.08 0.30DQB1*0603 9 0.292 2 0.051 7.37 0.007 0.091 9.00DQB1*0201 13 0.472 2 0.051 15.35 0.0004 0.005 23.40表 4 PsV 阳 性 G PP与 PsV 阴 性 G PP基 因 频 率 比 较 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- q本 实 验 结 果 显 示vHLA-DQB1*0201、 0603的 频 率 在 患 者 中 显著 升 高 ， 与 对 照 组 比 较 均 有 显 著 性 差 异(RR=8.10， PC0.01； RR=5.06， PC0.05)。v表 明 携 带 DQB1*0201、 0603这 两 个 等 位 基因 的 山 东 汉 族 人 群 患 GPP的 风 险 性 高 于 其他 人 群 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- 进 一 步 分 析 ：vDQB1*0201、 0603多 呈 杂 合 态 表达 (9/15， 9/11)。v而 对 照 组 无 一 例 表 达 。v表 明 杂 合 体 (0201/0603)患 GPP的风 险 性 最 高 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- vHLA-DQB1*0602的 频 率 患 者 组 较 对 照 组 也 明显 升 高 (RR=3.42， P=0.009)， 但 校 正 后 无统 计 学 差 异 (PC=0.117)。v本 研 究 认 为 扩 大 样 本 量 后 ， 可 能 会 出 现 阳性 关 联 。v依 据 是 ： DQB1*0201、 0603、 0602这 3个 等位 基 因 编 码 的 DQ分 子 有 共 同 的 结 构 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- v如 ： Khandnja发 现 ， 96%抗 dsDNA抗 体 阳 性的 SLE患 者 携 带 DQB1*0201或 DQB1*0602，v随 后 他 发 现 这 2个 基 因 编 码 的 DQ 链 第 14位aa都 是 甲 硫 氨 酸 ， 第 26位 都 是 亮 氨 酸 ， 而其 它 DQB1等 位 基 因 在 这 2个 位 置 的 氨 基 酸 差异 较 大 。v提 示 这 2个 基 因 编 码 的 抗 原 分 子 含 有 与 致 病肽 结 合 的 共 表 位 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- vHjelmstrom研 究 发 现 DQB1*0201、 0603与 MG强 相 关 。v他 采 用 同 源 模 型 技 术 构 建 出 这 2个 等 位 基 因编 码 的 DQ2和 DQ6分 子 结 构 。v提 出 了 P7和 P9 2个 共 同 的 可 能 的 易 感 肽 链结 合 区 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- v本 实 验 对 3份 DQB1*0201阳 性 的 扩 增 DNA测 序结 果 ：v3份 扩 增 DNA碱 基 序 列 在 第 30位 都 由 正 常 的 T变 为 G。 在 第 45位 ， 2份 由 T变 为 G， 1份 由 A变 为 C。 与 人 类 基 因 库 提 供 的 氨 基 酸 序 列 比对 ， 本 实 验 在 第 21-23位 的 氨 基 酸 序 列 与 正常 比 较 差 异 较 大 。v我 们 还 不 敢 判 定 这 些 碱 基 和 氨 基 酸 的 异 常与 GPP关 系 有 多 大 ， 但 至 少 带 给 我 们 一 点 启示 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- v本 实 验 显 示 ， 患 者 组 中 DQB1*0604的 频 率 明显 低 于 对 照 组 (RR=0.08， PC0.05)， 表 明 携带 DQB1*0604的 山 东 汉 人 患 GPP的 风 险 性 较小 。v国 外 研 究 表 明 ， 携 带 DQB1*0604的 白 人 对MG抵 抗 。v但 DQB*0604是 否 是 山 东 汉 人 或 国 人 对 GPP抵 抗 的 保 护 性 基 因 ， 有 待 于 进 一 步 研 究 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- v通 过 以 上 分 析 ， 结 合 本 科 题 研 究 。v 推 测 ： DQB1*0201、 0603、 0602这 3个等 位 基 因 编 码 的 DQ2和 DQ6分 子 链 中 可能 存 在 着 与 GPP易 感 的 肽 链 结 合 区 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- q PsV阳 性 GPP与 对 照 组 比 较 DQB1*0201、 0603的 频 率 在 PsV阳 性 GPP组中 显 著 高 于 对 照 组 (RR=32.31， PC=0.005；RR=12.42， PC=0.005)。q PsV阴 性 GPP与 对 照 组 比 较 DQB1*0602频 率 显 著 高 于 对 照 组 (RR=5.6，PC=0.039)。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- qPsV阳 性 GPP与 PsV阴 性 GPP比 较 DQB1*0201、 0603的 频 率 在 PsV阳 性 GPP组高 于 PsV阴 性 组 （ RR=23.4， PC=0.005； RR=9.0， P=0.007） 。 通 过 以 上 三 个 比 较 表 明 ： DQB1*0201、0603与 PsV阳 性 GPP关 联 ； DQB1*0602与PsV阴 性 GPP关 联 。 q本 实 验 结 果 强 烈 支 持 PsV阳 性 GPP与 PsV阴性 GPP具 有 遗 传 异 质 性 的 观 点 。q本 文 还 分 析 了 GPP各 临 床 类 型 DQB1等 位 基因 的 分 布 情 况 ， 结 果 各 临 床 类 型 之 间 的 差 异无 统 计 学 意 义 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- q本 实 验 结 果 与 日 本 研 究 不 一 致 ， 日 本 人GPP与 DQB1*0303强 相 关 。v根 据 Nishikai报 道 ， 日 本 人 SLE患 者 中DQB1*03亚 群 （ 0301、 0302、 0303） 的 频率 都 升 高 ， 推 测 DQB1*03亚 群 可 能 是 日 本人 的 优 势 基 因 。v所 以 本 实 验 结 果 与 日 本 研 究 不 一 致 ， 可 能与 种 族 不 同 有 关 。v但 也 不 能 排 除 与 其 它 等 位 基 因 强 烈 连 锁 不平 衡 的 结 果 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- q本 研 究 采 用 PCR-SSP法 ， 对 鲁 籍 38例 GPP和 94例 健 康 对 照 进 行 了 HLA-DQB1等 位 基 因 分 型 研究 ， 发 现 HLA-DQB1*0201、 0603与 GPP患 者 显著 相 关 ， 提 示 HLA-DQB1*0201、 0603可 能 是山 东 汉 人 GPP的 易 感 基 因 。 有 PsV病 史 的 GPP与 无 PsV病 史 的 GPP与 HLA-DQB1相 关 的 等 位 基因 不 同 ， 表 明 这 两 种 类 型 GPP的 遗 传 背 景 具有 差 异 性 。 本 研 究 提 供 了 一 些 中 国 汉 人 与GPP相 关 的 遗 传 学 数 据 ， 这 对 于 今 后 研 究 中国 汉 人 与 GPP的 相 关 性 具 有 重 要 意 义 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- q本 实 验 没 有 对 其 它 HLA位 点 等 位 基 因 进 行 分型 研 究 ， 因 而 无 法 推 测 山 东 汉 人 对 GPP易 感或 保 护 的 单 体 型 。qHLA各 等 位 基 因 座 位 之 间 存 在 广 泛 连 锁 ， 有些 基 因 连 锁 后 易 感 性 消 失 ， 有 些 反 而 增 强 ，因 而 推 断 与 疾 病 相 关 的 单 体 型 ， 比 研 究 单个 等 位 基 因 与 疾 病 的 相 关 性 更 有 助 于 阐 明疾 病 的 病 因 及 发 病 机 制 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr- q由 此 可 见 ， 研 究 中 国 汉 人 与 GPP的 相 关 性 ，重 点 研 究 与 GPP相 关 的 单 体 型 以 及 分 析 关 联基 因 所 编 码 的 分 子 结 构 将 是 以 后 研 究 的 方向 。 中 华 医 生 网 收 集 编 目 http:/www.dr-