《高效液相色谱法》PPT课件

第 四 章 高 效 液 相 色 谱 法 H igh Performance Liquid Chromatography 本 章 要 求 了 解 高 效 液 相 色 谱 法 的 优 缺 点 了 解 高 效 液 相 色 谱 仪 的 结 构 掌 握 常 用 检 测 器 的 原 理 及 应 用 范 围 定 义 ： 以 液 体 作 为 流 动 相 的 色 谱 法 称 为 液 相 色 谱 法高 效 液 相 色 谱 法 （ HPLC） ： 20世 纪 60年 代 末 70年 代技 术 ： 高 压 泵 、 高 效 固 定 相 和 高 灵 敏 度 检 测 器特 点 ： 速 度 快 、 效 率 高 、 灵 敏 度 高 、 操 作 自 动 化一 、 概 述4.1 高 效 液 相 色 谱 法 简 介 1高 效 液 相 色 谱 法 与 经 典 液 相 色 谱 法 比 较 高 速 ： H PLC分 离 效 率 高 ， 速 度 快 ， 一 次 几 分 钟 和 几 十 分 钟就 可 完 成 。 色 谱 柱 的 寿 命 长 ， 可 达 两 年 以 上 。 高 效 ： H PLC高 压 (26 MPa)下 操 作 ， 填 料 颗 粒 小 (250 m)，规 则 均 匀 的 固 定 相 ， 传 质 阻 力 小 ， 柱 效 高 (N=400060000 块 /m)， 分 离 效 率 高 。 高 灵 敏 度 ： 现 代 高 效 液 相 色 谱 仪 普 遍 配 有 高 灵 敏 度 检 测 器 ，使 分 析 灵 敏 度 比 经 典 色 谱 有 大 提 高 （ 紫 外 检 测 器 最 小 检 测限 可 达 10 -9 g； 荧 光 检 测 器 最 小 检 测 限 可 达 10-1110-13 g。 高 自 动 化 ： H PLC进 样 量 小 (XX0 L)。 带 有 自 动 进 样 装 置和 工 作 站 。 2 高 效 液 相 色 谱 法 与 气 相 色 谱 法 的 比 较 适 用 范 围 GC适 用 于 沸 点 低 、 热 稳 定 性 好 、 中 小 分 子 量 的 化 合 物 ，HPLC不 受 此 种 限 制 。 气 相 色 谱 一 般 都 在 较 高 温 度 下 进 行 ，而 高 效 液 相 色 谱 法 则 经 常 可 在 室 温 条 件 下 工 作 。 流 动 相 GC流 动 相 仅 运 载 样 品 ， 不 起 分 离 作 用 ， 但 无 毒 ， 易 于处 理 。 而 HPLC流 动 相 除 了 运 载 样 品 外 ， 还 有 分 离 作 用 ， 可改 变 流 动 相 组 成 ， 进 行 有 效 的 分 离 。 但 流 动 相 一 般 有 毒 ， 费用 高 。 色 谱 柱 GC柱 很 长 ， 特 别 是 毛 细 管 柱 可 长 至 几 十 米 至 上 百 米 ， 柱 效很 高 (理 论 塔 板 数 N=104106)。 HPLC柱 较 短 ， 一 般 为 1525 cm， 柱 效 (理 论 塔 板 数 N=103104)， 低 于 GC柱 。 检 测 器 与 GC相 比 ， HPLC检 测 器 种 类 较 多 。 制 备 色 谱 GC难 以 制 备 样 品 ， 因 为 进 样 量 小 ， 难 以 收 集 或 被 破 坏 。HPLC可 进 行 制 备 ， 即 制 备 色 谱 。 一 高 效 液 相 色 谱 仪 的 结 构 4.2 高 效 液 相 色 谱 仪 一 般 分 为 4个 主 要 部 分 ： 高 压 输 液 系 统 、 进 样 系 统 、 分离 系 统 和 检 测 系 统 。 此 外 还 配 有 辅 助 装 置 ： 如 梯 度 洗脱 、 自 动 进 样 及 数 据 处 理 等 。工 作 过 程 如 下 ： 首 先 高 压 泵 将 贮 液 器 中 流 动 相 溶 剂 经 过 进 样 器 送 入色 谱 柱 ， 然 后 从 控 制 器 的 出 口 流 出 。 当 注 入 欲 分 离 的 样品 时 ， 流 经 进 样 器 贮 液 器 的 流 动 相 将 样 品 同 时 带 入 色 谱柱 进 行 分 离 ， 然 后 依 先 后 顺 序 进 入 检 测 器 ， 记 录 仪 将 检测 器 送 出 的 信 号 记 录 下 来 ， 由 此 得 到 液 相 色 谱 图 。 数 据 分 析系 统输 液 系 统 进 样 系 统 分 离 系 统检 测 系 统HPLC的 系 统 组 成 数 据 处 理 系 统 1. 高 压 输 液 系 统 ： 一 般 由 储 液 罐 、 高 压 输 液 泵 、 过 滤 器 、 压 力 脉 动 阻 力 器 等 组成 ， 其 中 高 压 输 液 泵 是 核 心 部 件 。高 压 泵 应 满 足 如 下 要 求 ： 流 量 恒 定 ， 无 脉 动 ， 并 有 较 大 的 调 节 范 围 。 能 抗 溶 剂 的 腐 蚀 ， 耐 酸 、 耐 碱 。 有 较 高 的 输 送 压 力 。 一 般 分 离 ， 6.0 10 4 Pa压 力 ； 高 效 分离 ， 要 求 达 到 1.53.0 107 Pa的 压 力 或 更 高 。 泵 的 死 体 积 要 小 ， 便 于 迅 速 更 换 溶 剂 和 进 行 梯 度 淋 洗 。 常 用 的 输 液 泵 分 为 恒 流 泵 和 恒 压 泵 两 种 : 恒 流 泵 是 在 一 定 操 作 条 件 下 ， 输 出 流 量 恒 定 ， 与色 谱 柱 引 起 阻 力 变 化 无 关 。 恒 压 泵 能 保 持 输 出 压 力 恒 定 ， 其 流 量 随 色 谱 系 统阻 力 而 变 化 ， 保 留 时 间 的 重 现 性 差 。 目 前 恒 流 泵 正 逐 渐 取 代 恒 压 泵 ， 恒 流 泵 又 称 机 械泵 ， 又 分 机 械 注 射 泵 和 机 械 往 复 泵 两 种 ， 应 用 最 多的 是 机 械 往 复 泵 。 在 分 离 过 程 中 ， 使 流 动 相 的 组 成 、 极 性 、 pH 等按 一 定 程 序 连 续 变 化 ， 使 样 品 中 各 组 分 能 在 最佳 条 件 下 出 峰 ， 保 留 时 间 短 、 拥 挤 不 堪 甚 至 重叠 的 组 分 和 保 留 时 间 过 长 而 峰 形 扁 平 的 组 分 获得 很 好 的 分 离 。通 过 逐 渐 改 变 流 动 相 的 组 成 增 加 洗 脱 能 力 ， 梯度 洗 脱 装 置 将 两 种 或 三 种 、 四 种 溶 剂 按 一 定 比例 混 合 进 行 二 元 或 三 元 、 四 元 梯 度 洗 脱 。 梯 度 洗 脱 的 优 点 ： 改 善 峰 形 ； 提 高 柱 效 ； 减 少 分 析 时 间 ； 使 强 烈 滞 留 的 组 分 不 容 易 残 留 在 柱 上 ， 保 持 良 好 的 柱 性 能（ 但 进 行 下 次 分 析 时 ， 更 换 流 动 相 达 到 平 衡 时 间 长 ） 。 梯 度 洗 脱 与 气 相 色 谱 的 程 序 升 温 十 分 类 似 ， 两 者 的 目 的 相同 ， 不 同 的 是 程 序 升 温 是 通 过 改 变 柱 温 ， 而 液 相 色 谱 的 梯度 洗 脱 是 通 过 改 变 流 动 相 的 组 成 、 极 性 、 pH 来 达 到 改 变 k的 目 的 。 在 高 效 液 相 色 谱 中 ， 常 用 的 进 样 方 式 ：高 压 阀 进 样 ： 优 点 是 能 用 于 高 压 ， 适 于 大 体 积 进 样 ， 重 现 性好 ； 缺 点 是 进 样 阀 进 样 时 需 排 掉 一 部 分 试 样 ， 不 同 的 进 样量 需 用 不 同 的 定 量 管 ， 同 时 峰 的 扩 展 也 比 注 射 进 样 大 。微 量 注 射 器 进 样 ： 也 可 由 微 量 注 射 器 注 入 取 样 环 少 量 样 品 ，即 采 用 较 大 体 积 取 样 环 而 进 少 量 试 样 ， 进 样 量 由 注 射 器 控制 ， 试 样 不 充 满 取 样 环 ， 只 填 充 一 部 分 体 积 。2. 进 样 系 统 3. 分 离 系 统 -色 谱 柱 色 谱 柱 是 液 相 色 谱 的 心 脏 部 件 ， 它 包 括 柱 管 与 固定 相 两 部 分 。 柱 管 材 料 有 玻 璃 、 不 锈 钢 、 铝 、 铜 及内 衬 光 滑 的 聚 合 材 料 的 其 它 金 属 。 玻 璃 管 耐 压 有 限 ，故 金 属 管 用 得 较 多 。 一 般 色 谱 柱 长 1530 cm， 内 径为 45 mm， 凝 胶 色 谱 柱 内 径 312 mm， 制 备 柱 内 径较 大 ， 可 达 25 mm 以 上 。 固 定 相 表 面 多 孔 固 定 相 全 多 孔 微 粒 固 定 相直径210 m，孔径2100 nm， 比表面积x00 x0m 2/g。现 在 最 广 泛 采 用 的 填 料 是 全 多 孔 微 粒 硅 胶12 m直径1025 m 化 学 键 合 固 定 相 化 学 键 合 相 色 谱 柱 虽 然 可 将 固 定 液 机 械 地 涂 附 在 上 述 表 面 多 孔 硅 胶 或全 多 孔 硅 胶 上 作 固 定 相 ， 但 有 许 多 缺 点 ， 因 此 现 在 多采 用 化 学 键 合 固 定 相 。 化 学 键 合 固 定 相 是 在 表 面 多 孔或 全 多 孔 硅 胶 表 面 上 利 用 化 学 反 应 法 通 过 化 学 键 把 有机 分 子 结 合 在 载 体 表 面 。 键 合 类 型 ： 疏 水 基 团 ： 如 C8、 C18； 极 性 基 团 ： 如 丙 氨 基 (-C 3H6NH2)、 氰 乙 基 (-C2H4CN)； 离 子 交 换 基 团 ， 如 阴 离 子 交 换 （ -NR3Cl） 、 阳 离 子（ -SO3H） ； 键 合 途 径 ： SiOC 键 型 SiOSiC 键 型 (最 常 用 ) SiC 键 型 Si-OH ROH Si-O-R H2O Si-OH R3SiCl Si-O-SiR3 HCl Si-OHSOCl2 Si-Cl(+SO2+HCl) Si-R(+MgCl2)RMgCl o 煤油H 2OCH 3CNCH 3OH 流 动 相 正 相 色 谱 极 性 ： 流 动 相 固 定 相 反 相 色 谱 极 性 ： 流 动 相 固 定 相a 流 动 相 纯 度 要 高 ， 与 固 定 相 不 相 溶 ， 不 发 生 化 学 反 应b 价 格 便 宜 ， 毒 性 小 ， 易 于 纯 化c 对 试 样 溶 解 度 适 宜 ， 不 发 生 沉 淀d 粘 度 小e 与 检 测 器 匹 配极 性 顺 序 ： 水 乙 腈 甲 醇 四 氢 呋 喃 环 己 烷 煤 油 4. 检 测 系 统 在 液 相 色 谱 中 ， 有 两 种 基 本 类 型 的 检 测 器 : 溶 质 性 检 测 器 ： 仅 对 被 分 离 组 分 的 物 理 或 化 学 特 性有 响 应 ， 有 紫 外 UVD、 荧 光 FD、 二 极 管 阵 列 检 测 器DAD等 。 总 体 检 测 器 ： 对 试 样 和 洗 脱 液 总 的 物 理 或 化 学 性 质有 响 应 ， 有 示 差 折 光 检 测 器 RID、 电 化 学 检 测 器 ECD、蒸 发 光 散 射 检 测 器 ELSD和 质 谱 检 测 器 MSD等 。 P65， 表 4-3 药 典 中 的 液 相 色 谱 检 测 器 常 用 的 检 测 器 :(1) 紫 外 光 度 检 测 器 ： 是 一 种 选 择 性 浓 度 检 测 器 ， 仅对 那 些 在 紫 外 波 长 有 吸 收 的 物 质 有 响 应 。 作 用 原 理 ： 基 于 待 测 试 样 对 特 定 波 长 的 紫 外 光 有 选 择性 的 吸 收 ， 试 样 浓 度 与 吸 光 度 的 关 系 服 从 比 尔 定 律 。 结 构 ：1 低 压 汞 灯 2 透 镜 3 遮 光 板 4 测 量 池 5 参 比 池 6 紫 外 滤 光 片 7 双 紫 外 光 敏 电 阻 现 在 多 数 采 用 氘 灯 作 为 紫 外 光 源 灯 流 动 池 光 电 二 极 管RS 样 品 入 口Hg 254Zn 214Cd 229D2 可 变 UV 检 测 器 To amplifier 优 点 ： 灵 敏 度 高 （ 最 小 检 测 度 109 g/mL） ， 对 温 度 和流 速 不 敏 感 ， 可 用 于 梯 度 洗 脱 ；缺 点 ： 只 能 用 于 对 紫 外 光 有 吸 收 组 分 的 测 定 ， 溶 剂 的 选择 受 限 制 。 在 高 效 液 相 色 谱 中 应 用 最 广 ， 约 占 70%。 适 于 梯 度洗 脱 ， 对 流 动 相 速 度 变 化 不 敏 感 ， 流 动 相 组 成 的 变 化 对检 测 器 响 应 几 乎 无 影 响 。 对 于 在 紫 外 -可 见 光 区 无 强 吸 收 的 组 分 ， 需 要 经 过衍 生 化 ， 才 可 以 用 紫 外 检 测 器 ， 如 糖 类 、 氨 基 酸 、 类 脂化 物 。 不 能 用 在 紫 外 -可 见 光 有 吸 收 的 溶 剂 作 流 动 相 。 溶 剂 透 过 波 长 下 限 溶 剂 透 过 波 长 下 限水 180 n-庚 烷 197甲 醇 210 环 乙 胺 200n-丙 醇 二 酸 205 四 氯 化 碳 265乙 腈 190 氯 仿 245THF 230 苯 280丙 酮 330 甲 苯 285乙 酸 甲 酯 260 二 氯 甲 烷 232乙 酸 乙 酯 260 四 氯 乙 烯 280硝 基 甲 烷 380 1,2-二 氯 乙 烷 225常 用 溶 剂 透 过 波 长 限 ： (2) 光 二 极 管 阵 列 检 测 器 ： 是 一 种 更 为 先 进 的 检 测 器 。 从 氘 灯 辐 射 通 过 移 动部 件 （ 光 闸 ） ， 直 接 通 过 吸 收 池 、 狭 缝 、 光 栅 ， 分光 后 分 别 照 射 约 千 个 二 极 管 阵 列 检 测 器 上 ， 约 10 ms给 出 一 次 信 号 ， 保 证 保 留 时 间 极 短 的 色 谱 组 分 的光 谱 图 不 失 真 。 因 此 数 据 重 现 性 好 ， 灵 敏 度 高 ， 适于 痕 量 分 析 。 P66 图 4.10所 示 光 电 二 极 管 阵 列 检 测 器 氘 灯 棱 镜 池 子 全 息 光 栅 二 极 管 阵 列512 Diodes190 - 950 nm 优 点 ： 获 得 吸 收 值 是 保 留 时 间 和 波 长 函 数 的 类 似 于 等高 线 的 三 维 图 ； 由 于 获 得 多 种 信 息 ， 使 每 一 个 组 分 在整 个 波 长 范 围 内 的 光 谱 信 息 大 大 增 加 ， 及 时 得 出 每 一组 分 的 色 谱 图 相 应 的 光 谱 数 据 ， 确 定 最 佳 选 择 性 和 灵敏 度 的 波 长 ； 可 以 与 色 谱 工 作 站 联 用 ， 对 每 一 个 峰 从程 序 库 中 进 行 检 索 来 确 定 该 化 合 物 。 例 如 ： 菲 的 三 维 谱 图 如 下 荧 光 检 测 器 ：是 利 用 某 些 试 样 具 有 荧 光 特 性 来 检 验 的 。 许 多 有 机 化 合 物具 有 天 然 荧 光 活 性 ， 其 中 带 有 芳 香 基 团 的 化 合 物 具 有 荧光 活 性 很 强 。 一 定 条 件 下 ， 荧 光 强 度 与 物 质 浓 度 成 正 比 。荧 光 检 测 器 是 一 种 选 择 性 检 测 器 ， 适 合 于 含 有 -共 轭 体 系的 大 分 子 、 结 构 复 杂 的 化 合 物 ， 如 稠 环 芳 烃 、 甾 族 化 合物 、 酶 、 氨 基 酸 、 维 生 素 、 色 素 、 蛋 白 质 等 物 质 的 测 定 。最 小 检 测 限 可 达 10-11 10-13 g， 可 以 用 梯 度 洗 脱 。 (4) 示 差 折 光 检 测 器 ： 是 一 种 中 等 灵 敏 度 (106 g /mL)的 通 用 型 检 测 器 。是 利 用 纯 流 动 相 和 含 有 待 测 组 分 的 流 动 相 之 间 折 射 率 的差 别 进 行 检 测 的 。可 分 为 三 类 ： 反 射 式 ； 折 射 式 （ 偏 振 式 ） 和 干 涉 式 。 常用 前 两 种 。优 点 ： 灵 敏 度 适 宜 ， 操 作 简 便 是 一 种 通 用 型 的 检 测 器 ；缺 点 ： 对 温 度 变 化 敏 感 ， 不 能 用 于 梯 度 洗 脱 。应 用 范 围 ： 聚 合 物 , 糖 。 还 用 于 分 析 以 紫 外 检 测 和 荧 光检 测 器 无 法 检 测 的 样 品 。 (5) 蒸 发 光 散 射 检 测 器 （ ELSD） 结 构 光源检测器 雾化 散射光 蒸发 柱 检测 H PLCN2 ELSD是 90年 代 研 制 的 ， 是 利 用 在 一 定 条 件 下 粒 子 的 数 量 不 变 ，光 散 射 强 度 正 比 于 由 溶 质 浓 度 决 定 的 粒 子 的 大 小 而 进 行 测 量 的 。 ELSD原 理 是 基 于 光 线 通 过 微 小 的 粒 子 时 产 生 光 散 射 现 象 。 由 色谱 柱 分 离 的 组 分 随 流 动 相 进 入 雾 化 器 中 被 高 速 的 载 气 流 （ 氮 气 或 空气 ） 喷 成 一 种 薄 雾 ， 进 入 蒸 发 器 后 蒸 发 成 蒸 气 ， 再 被 光 阱 捕 集 ， 以防 止 反 射 。 蒸 气 态 的 溶 剂 通 过 光 路 后 ， 光 线 反 射 到 检 测 器 后 被 记 录成 基 线 。 云 雾 状 溶 质 颗 粒 通 过 光 路 时 ， 使 光 线 散 射 后 被 光 电 倍 增 管收 集 得 到 样 品 信 号 。 ELSD是 示 差 折 光 检 测 器 的 新 型 替 代 品 ， 样 品 主 要 用 于 不 产 生 荧光 和 又 无 紫 外 吸 收 的 有 机 物 如 糖 类 、 高 级 脂 肪 酸 、 磷 脂 、 甘 油 三 酯 、维 生 素 、 甾 类 皂 苷 等 物 质 的 测 定 。 对 梯 度 洗 脱 和 流 动 相 系 统 温 度 变化 不 敏 感 ； 可 用 于 梯 度 洗 脱 。 ELSD的 优 缺 点 ： 通 用 性 强 ， 灵 敏 度 高 。 对 流 动 相 系 统 温 度 变 化 不 敏 感 ， 可 进 行 梯 度 洗 脱 。 响 应 因 子 具 有 一 致 性 。 响 应 值 仅 取 决 于 光 束 中 溶 质 颗 粒 的 大 小和 数 量 ， 检 测 器 对 有 的 物 质 几 乎 具 有 相 同 的 响 应 因 子 。 可 消 除 流 动 相 和 杂 质 的 干 扰 ， 提 高 分 辩 率 。 用 于 磷 脂 、 皂 甙 、糖 、 聚 合 物 、 树 脂 等 无 紫 外 吸 收 或 紫 外 吸 收 系 数 小 的 化 合 物 检 测 。 便 于 应 用 质 谱 分 析 。 因 为 蒸 发 光 散 射 质 量 检 测 器 与 质 谱 条 件 的要 求 是 一 致 的 。 受 样 品 组 分 和 流 动 相 挥 发 性 因 素 限 制 。 要 求 样 品 组 分 应 是 非 挥发 性 或 半 挥 发 性 的 ， 而 流 动 相 应 是 挥 发 性 溶 剂 。 对 某 些 样 品 线 性 范 围 窄 ， 有 时 不 呈 现 线 性 关 系 ， 定 量 分 析 复 杂 。 电 化 学 检 测 器 ：安 培 检 测 器 ： 由 三 电 极 系 统 与 恒 电 位 仪 相 连 接 。 工 作 电 极 为 玻 璃 或 石 墨 电 极 ，辅 助 电 极 是 铂 丝 ； 从 柱 后 流 出 物 进 入 反 应 池 ， 在 工 作 电 极 表 面 发 生 氧 化或 还 原 反 应 ， 两 电 极 之 间 有 电 流 通 过 ， 电 流 大 小 与 被 测 物 浓 度 成 正 比 。只 能 检 测 电 化 学 活 性 物 质 。 该 检 测 器 选 择 性 好 ， 灵 敏 度 高 。 如 ： 对 肾 上腺 素 和 去 甲 肾 上 腺 素 ， 检 测 限 达 10-12g。极 谱 检 测 器 ： 基 于 被 测 组 分 可 在 电 极 上 发 生 氧 化 还 原 反 应 而 设 计 的 一 种 检 测 器 。 可 用于 测 定 具 有 极 谱 活 性 的 物 质 ， 如 药 物 、 维 生 素 、 有 机 酸 、 苯 胺 等 。 它 的灵 敏 度 高 ， 适 于 痕 量 分 析 。电 导 检 测 器 ： 主 要 用 于 离 子 色 谱 。 原 理 是 基 于 物 质 在 某 些 介 质 中 电 离 后 所 产生 电 导 变 化 来 测 定 电 离 物 质 的 含 量 。 电 导 检 测 器 对 pH 7时 不 够 灵 敏 ， 受 温 度 影 响 较 大 。 P65表 6-3 5. 附 属 系 统 包 括 脱 气 、 梯 度 洗 脱 、 恒 温 、 自 动 进 样 、 馏 分 收 集 以及 数 据 处 理 等 装 置 。 其 中 脱 气 和 梯 度 洗 脱 装 置 是 高 压液 相 色 谱 仪 中 尤 为 重 要 的 附 属 装 置 。 脱 气 的 目 的 ： 是 为 了 防 止 流 动 相 从 高 压 柱 内 流 出 ， 释放 出 气 泡 进 入 检 测 器 而 使 噪 声 剧 增 ， 甚 至 不 能 正 常 检测 ； 溶 解 在 溶 剂 中 的 气 体 进 入 色 谱 柱 时 ， 可 能 与 流 动相 或 固 定 相 发 生 化 学 反 应 ； 溶 解 气 体 还 会 引 起 某 样 品的 氧 化 降 解 ， 带 来 误 差 。 通 常 办 法 是 把 气 泡 排 出 。 常 用 方 法 ： 低 压 脱 气 ， 电 磁 搅 拌 ， 水 泵 抽 真 空 ， 加 热 。 以 He脱 气 ， He在 液 体 中 溶 解 度 最 小 。 超 声 波 脱 气 。 在 线 真 空 脱 气 。 由 于 塑 料 膜 管 线的 膜 可 让 气 体 透 过 液体 无 法 透 过 ， 所 以 通过 真 空 泵 脱 气 降 压 实 现 在 线 脱 气 。 4.3 高 效 液 相 色 谱 的 应 用定 性 应 用 ： 保 留 时 间 、 相 对 保 留 值 、 保 留 指 数定 量 应 用 ： 外 标 法 、 内 标 法 、 归 一 化 法联 用 技 术 ： HPLC-MS HPLC-MS-MSHPLC-PDADHPLC-IRHPLC-NMR 离 子 色 谱 法 是 色 谱 法 的 一 个 分 支 ， 是 一 种 比 较 常 用 的 分 析 技 术 。 它将 色 谱 的 “ 高 效 ” 分 离 技 术 和 离 子 的 自 动 检 测 技 术 相 结 合 的 一 种 分析 技 术 。 通 常 从 离 子 交 换 柱 中 流 出 的 各 种 离 子 可 用 电 导 检 测 器 直 接检 测 离 子 含 量 。以 双 柱 型 离 子 色 谱 仪 测 定 水 中 F -为 例 ： 分 离 柱 ： 低 容 量 阴 离 子 交 换 树 脂 ； 抑 制 柱 ： 强 酸 型 阳 离 子 交 换 树 脂 ； 淋 洗 液 ： Na2CO3 NaHCO3或 (NaOH)离 子 色 谱 法 原 理 试 样 溶 液 与 强 电 解 质 淋 洗 液 一 起 ， 流 经 低 容 量 离 子 交 换 柱 ， 待测 离 子 顺 次 流 入 抑 制 柱 ， 以 中 和 淋 洗 液 ， 电 导 显 著 降 低 ， 并 使 阴 离子 转 变 为 强 电 离 的 酸 ， 进 入 电 导 检 测 器 进 行 检 测 。 此 时 ， 待 测 离 子的 浓 度 在 一 定 范 围 内 与 溶 液 的 电 导 率 成 线 性 关 系 ， 可 以 定 量 分 析 。 离 子 色 谱 计 算 机积 分 仪记 录 仪 贮 液 器样 品 注 入泵分 离 柱抑 制 柱电 导 池 用 电 导 检 测 器 分 析 阴 离 子 本 章 要 求 了 解 高 效 液 相 色 谱 法 的 优 缺 点 了 解 高 效 液 相 色 谱 仪 的 结 构 掌 握 常 用 检 测 器 的 原 理 及 应 用 范 围