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电解毁损杏仁基底外侧核或杏仁中央核对大鼠摄食和体质量的影响 目的: 研究杏仁基底外侧核(BLA)及杏仁中央核(CeA)对大鼠摄食行为及体质量调控的影响. 方法: 采用电解毁损方法对成年雌性大鼠分别行BLA双侧毁损或CeA双侧毁损,对照组行假毁损手术,术后连续10 d记录摄食量及体质量变化,实验结束后灌流动物,取脑组织,切片染色,对毁损部位进行定位. 结果: 对照组大鼠施行假手术后体质量略有下降,之后呈现缓慢上升趋势,动物摄食量呈增大趋势,日平均摄食量13 d为(17.90.8)g,410 d为(22.00.3)g. 毁损BLA组术后体质量呈明显上升趋势,平均增长(24.41.4)g (P杏仁中央核;杏仁基底外侧核;电解毁损;摄食行为;体重;大鼠AIM: To investigate the roles of basolateral amygdala (BLA) and central amygdala (CeA) in feeding behavior and body weight control of rats.METHODS: Electrolytic lesions were made bilaterally at BLA or CeA respectively in the mature female rats, while sham lesions were made in the rats of the control group. Food intake and body weight were measured daily for 10 d after the surgery. At the end of the experiments, rats were transcardially perfused, and the brain tissues were fixed, frozen, cut into 40m serial sections and stained with neutral red. The sites of the lesions were reconstructed. RESULTS: The body weight of the rats in the control group decreased slightly after the shamlesion surgery, then showed a slow increasing trend; the food consumption also presented a rising trend with the mean food consumption at 13 das (17.90.8) g, and at 410 das (22.00.3) g. The body weight of the rats in BLAlesioned group showed an obvious increasing trend after the surgery. The mean weight change was (24.41.4) g (P central nucleus of amygdala; basolateral amygdala; electrolytic lesion; feeding behavior; body weight; rats 0引言杏仁核是由多个解剖和功能不尽相同的亚核组成的复合结构,参与机体多种功能的行使和调节. 其中与摄食和体质量调控功能关系较为密切的是杏仁基底外侧核(basolateral amygdala, BLA)和杏仁中央核(central amygdala, CeA). 以往有关BLA和CeA的研究提示杏仁核的这两个重要亚核在摄食及味觉功能的调控中起着不同的作用1,但迄今的研究结果却不尽一致,甚至相互矛盾2- 3. 为进一步研究BLA及CeA在摄食及体质量调控中的作用,本研究拟对这两个亚核分别行小范围双侧电毁损,以明确BLA及CeA的功能,为阐明杏仁核不同亚核调控摄食的功能及机制提供依据.1材料和方法1.1材料成年SD雌性大鼠60只,体质量220260 g (西安交通大学医学院实验动物中心提供),分笼喂养,光暗周期12 h12 h,室温2125. 实验期间所有动物均自由进食(普通混合饲料)并自由饮水.1.2方法1.2.1动物分组实验动物随机分为BLA毁损组,CeA毁损组及假手术对照组. 戊巴比妥钠(20 mg/mL,50 mg/kg)腹腔注射麻醉动物,固定大鼠头部于脑立体定位仪上,使前囟和后囟处于同一平面. 根据大鼠脑图谱确定BLA及CeA的位置(BLA: 前囟后1.82.2 mm, 中缝旁开4.65.0 mm, 脑表面下7.27.6 mm;CeA相应为: 1.82.2 mm, 4.24.5 mm, 6.87.2 mm). 电极阳极(直径0.4 mm,不绝缘尖端0.4 mm)缓慢插入脑组织,定位于核团所在坐标位置;阴极固定于皮肤,通电对核团行电毁损(BLA:电流500 A, 持续45 s;CeA:电流500 A, 持续45 s);对照组行假手术,电极定位后(前囟后2.0 mm,中缝旁开4.8 mm,脑表面下6.2 mm),不通电毁损. 缝合手术切口,伤口涂抹红霉素,术后连续3 d腹腔注射青霉素20万u/d抗感染. 各组大鼠术后自由进食饮水,每日9:009:30记录摄食量及体质量,连续10 d.1.2.2组织学鉴定实验结束后,所有动物经致死剂量戊巴比妥钠腹腔注射麻醉(20 mg/mL,100 mg/kg),并相继用100 mL生理盐水及200 mL 40 g/L甲醛经左心室灌流固定,剥离脑组织,置入同一固定液中后固定46 h,再置入250 g/L蔗糖溶液中直至组织沉底,对脑组织做冠状冰冻切片(片厚40 m),中性红染色,光镜下参照大鼠PaxinosWatson脑立体定位图谱对毁损部位进行定位,并判断核团毁损范围. 结果判定:定位不准确、单侧毁损及毁损范围小于2/3核团的数据均不予采用.统计学处理:实验数据以xsx表示,采用SPSS 10.0软件进行统计学分析,组内前后比较采用随机分组方差分析,毁损组与对照组分别进行组间比较,采用完全随机分组方差分析及两两比较.2结果2.1组织学定位光镜下毁损部位呈圆形或椭圆形组织缺损. 参考脑图谱重建毁损部位后,确认60只大鼠中有13只大鼠双侧定位于BLA,13只双侧定位于CeA,毁损范围大于2/3核团,对照组9只,脑组织无明显缺损(图1).2.2术后摄食量及体质量变化对照组9只动物中,8只大鼠术后第3日的平均体质量均低于术前水平(-6.31.7) g;术后第6日平均体质量即恢复至术前水平,术后第10日均超过术前平均体质量值. 实验结束时体质量变化为(7.50.9 )g,最大增加幅度为10.7 g. 术后日平均摄食量13 d为(17.90.8)g,410 d为(22.00.3)g.BLA毁损组所有大鼠在术后第3日平均体质量即已恢复至术前水平,其中5只大鼠于术后24 h内日平均体质量已超过了术前值. 术后第3日平均体质量为(2.41.9)g ,与对照组相比较差异具有统计学意义(P
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