传染病的检测技术进展及质量控制演示课件

传染病的检测技术传染病的检测技术进展及质量控制进展及质量控制.伴随医疗卫生事业的开展，人们对传染病的防治也越来越重视。在医院中大量传染病标本的检测工作也变得十分重要。.传统的检测方法多种多样，对于很多疾病的诊断有相当大的辅助作用，传染病病原体的准确检测是传染病有效防控的前提，也是合理用药的根底。然而，传统的病原体别离、培养等诊断方法不能完全满足临床治疗和疾病控制的需要。新开展的传染病诊断技术可有效弥补传统方法的缺乏。.传统检测方法.乙型病毒性肝炎的病原学检查及其意义 .电镜下，HBV感染者血清中存在三种形式的颗粒：1.小球形颗粒：直径15-25nm，数量最多 2.管形颗粒：直径22nm，长50-230nm 3.大球形颗粒：直径42nm，量少，完整颗粒，有传染性仅由HBsAg构成的空心颗粒，无核酸、无传染性生物学特征.大球形颗粒是完整的乙型肝炎病毒HBV颗粒，又称Dane颗粒，分为包膜和核心两局部包膜：含HBsAg、糖蛋白与细胞脂质核心：含环状双股DNA、DNAP、HBcAg和HBeAg，是病毒复制的主体HBsAgHBeAgDNADNA-PHBcAgDane颗粒生物学特征.HBV基因组又称HBV DNA环状局部双股DNA全长2182bp 长的负链L 分S、C、P、X区 重叠，高利用率短的正链S长度可变50-80%生物学特征.HBV基因组结构 编码 pre-S1 pre-S1蛋白 pre-S2 pre-S2蛋白S HBsAgpre-C HBeAgC HBcAgP DNAPX HBxAg生物学特征.生物学特征.生物学特征.生物学特征.开放读码框架ORF及编码蛋白S区 前S1区：前S1蛋白pre-S1 阳性提示HBV存在和复制，慢性化 前S2区：前S2蛋白pre-S2 阳性提示HBV复制 S区：HBsAg：感染标志 属决定簇“a亚型决定簇“d/y和“w/rC区 前C基因：HBeAg：阳性提示患者高感染低应答率 C基因：HBcAg：免疫原性强生物学特征.开放读码框架ORF及编码蛋白P区 最长，编码多种功能蛋白，参与HBV复制 DNA多聚酶：复制的主要酶体，有逆转录功能 RNA酶HX区 HBxAg：具反式激活作用，在HCC发生中起重 要作用生物学特征.乙肝五项检查是用来判断是否感染乙肝，粗略估计病毒复制水平的初步检查，虽然工程少，检查简单，但是意义非常重要。乙肝五项检查分别是：1.外表抗原(HBsAg)2.外表抗体(抗抗原抗体(抗HBe)5.核心抗体(抗HBc 乙肝五项又叫乙肝两对半。病原学检查.乙型肝炎病毒血清学检测临床意义.乙肝五项的检测包括定性检测和定量检测；定量检测方法包括：化学发光免疫分析法CLIA、电化学发光免疫分析法、时间分辨荧光分析法TRFIA、放射免疫分析法RIA、微粒子酶免分析MEIA等定性检测包括酶联免疫分析法ELISA、乳胶分析法、金标快速法等。病原学检查.1.乙肝五项定量检查可以动态观察疗效和对乙肝病情进行监测。乙肝五项定量检查分析HBSAg和HBsAb浓度的变化，可以预见急性乙肝是不是处在恢复期。乙肝五项定量检查分析HBeAg和HBeAb浓度的变化，可以反映病情变化和治疗作用。HBcAb浓度的上下能够反映病毒感染的状况，高浓度的HBcAb提示乙肝急性感染;低浓度通常为恢复期或既往感染，有利于对慢性肝炎活动性和非活动性的判断，可以用于慢性乙肝的分类。病原学检查.2.乙肝五项定量检查分析能够对抗体是不是真正具有中和HBV的免疫力作出正确评价，对乙肝的预防起到监督作用。HBsAb的含量在10 mIU/ml以上的患者在用酶联免疫吸附剂ELISA检测查就可呈HBsAb阳性结果，但并不提示机体都一定具有免疫力，而HBsAb的含量在 10 mIU/ml-100 mIU/ml之间的样本，定性虽为阳性，但此时机体对乙肝病毒的免疫能力较弱，甚至不能预防HBV感染，仍然有感染HBV的危险。作为定量检查，依据 HBsAb的含量能够判断机体对HBV的免疫状态及乙肝疫苗的免疫效果。病原学检查.放射免疫技术优点：1.是一项较为成熟的诊断技术，其夹心法、竞争法的标记原理为以后的检测技术的开展奠定了根底。2.其精度可达10-12mol/L。缺点：1.使用的放射性物质125I对环境造成了污染 2.对操作者的身体健康造成了危害；3.试剂有效期短，试剂盒的批间、批内变异较大，标准曲线有效期短，必须每次定标，造成浪费；4.该法操作繁琐，出报告时间长。病原学检查.优点：1.在于该法防止对环境和人体的危害；2.操作简便并且有效期较长。缺点：1.由于该法酶的纯度和反响过程容易受环境因素影像，导致其稳定性不好；2.该法灵敏度、重复性不及放射免疫技术，精度为10-9mol/L，易造成漏检和假阳性。酶联免疫分析法ELISA病原学检查.化学发光法优点：1.单个样本检测速度快，适合做急诊；2.灵敏度较高，精度可达10-15mol/L3.自动化程度高。缺点：1.该法发光过程短，样品不能重复检测2.本底较高，在超微量分析及早期诊断方面能力缺乏3.试剂价格较高病原学检查.时间分辨荧光免疫法技术特异性高，线性范围更宽；可以反复检测，并且其重复性、稳定性好，试剂保质期至少1a，标准曲线保存时间长，同一批次试剂只需做一条标准曲线即可，其精度可达10-18mol/L，其定量结果更是肝移植、乙肝疫苗接种疗效观察等临床必须的检查。病原学检查.临床上采用定量测定乙肝五项指标更能准确的反响乙型肝炎临床变化，以及乙肝患者的治疗，预后情况。现在临床医生对乙肝五项定量测定已经有了普遍的认识，也越来越被患者接受。病原学检查.HBV DNA 是病毒复制和传染性的直接标志。目前常用聚合酶链反响PCR。聚合酶链式反响PCR是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR的最大特点，是能将微量的DNA大幅增加。病原学检查.HBV-DNA定量检查就是检验乙肝病毒在血液中的含量。通过乙肝病毒含量的检测，可以了解患者体内的病毒含量，病情开展状况，对患者的治疗有很好的指导作用。病原学检查.HBV-DNA定量检查的正常值是1000cps/ml。当HBV-DNA定量检查值小于1000cps/ml时，说明体内HBV-DNA为阴性，传染力弱。当HBV-DNA定量检查值大于1000cps/ml时，说明体内HBV-DNA为阳性，病毒仍然较多，传染力强。病毒的数量与某些药物的疗效相关。例如，干扰素治疗对肝炎病毒高拷贝者不敏感，低拷贝者敏感；而有些药物那么具有显著降低病毒高拷贝的作用。病原学检查.乙型肝炎病毒前1抗原乙型肝炎病毒前1抗原PreS1-Ag是存在于均有传染性的完整Dane颗粒和管型颗粒上最外端的外膜蛋白，前S1蛋白抗原在病毒侵入肝细胞过程中起重要作用。国内报道局部HBeAg阴性患者仍有病毒复制，而前S1抗原可作为HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者肝细胞损害的一项指标。作为HBV感染、复制和乙肝患者诊断、治疗和预后的一个重要标志，在多数医院广泛开展，但其临床价值仍没有被充分认识。病原学检查.国内外对前蛋白/抗前蛋白临床意义的根本共识一前蛋白前1病毒蛋白出现在急性 HBV 感染的最早期，是病毒去除的最早迹象。前 1 病毒蛋白持续存在者将开展至慢性肝炎。前1 病毒蛋白与HBV-DNA,HBeAg 高度相关。与肝内HBV-DNA,HBcAg 检出高度相关。在抗HBe(+)的HBV感染者中，检出前1蛋白可说明病毒的复制。病原学检查.病毒附着于肝细胞膜上，最重要的介导部位是前1 蛋白的 氨基酸(AA)21-47片段。变异的病毒只要这 一区段完好就有传染性。仅仅是对(AA)21-47 肽的 前1抗体才能中和病毒。前 S1 蛋白颗粒外表具有高度的免疫原性，常作为 乙肝疫苗的主要成分。前 S1 抗原主要存在于血清中完整 HBV 外表。病原学检查.PreS1抗原试剂盒的临床应用1.1.对拟查对拟查“二对半的患者，同时加查二对半的患者，同时加查PreS1PreS1，可起到确诊与补充的作用，如感染与复制、可起到确诊与补充的作用，如感染与复制、急性与慢性、预后与疗效等；急性与慢性、预后与疗效等；2.2.非肝炎住院病人常规检测，非肝炎住院病人常规检测，PreS1 PreS1 比比“二对二对 半半 更有意义；更有意义；3.3.献血员筛查，检测前献血员筛查，检测前S1S1可减少乙肝病毒感染可减少乙肝病毒感染 者漏检；者漏检；4.4.创伤性检查病员应检测创伤性检查病员应检测PreS1PreS1，如内窥镜检，如内窥镜检 查、查、牙科手术等。牙科手术等。病原学检查.乙型肝炎病毒血清学检测的临床意义.乙肝大蛋白HBV 外表抗原通过启动子表达后，会产生大蛋白HBV-LP、中蛋白HBV-MP以及小蛋白HBV-SP三类产物;HBV-LP氨基酸序列中包括Pre-S1、Pre-S2和S局部；产物中蛋白和产物小蛋白形式主要为小球型病毒颗粒，其余两种病毒颗粒管形颗粒、Dane颗粒那么是由三类产物共同组成，且Dane颗粒的组成取决于HBV-LP。因此HBV-LP被认为是一种能反映HBV 复制和Dane颗粒存在的标记物。病原学检查.病原学检查.HBV-LP有直接的肝细胞毒性，致使肝细胞凋亡而快速死亡。HBV-LP对HBV复制过程有反式激活作用，并与病毒颗粒从细胞内释放调节有关。所以，检测HBV-LP用于临床判断体内HBV 复制和治疗预后有一定意义。病原学检查.病毒性肝炎丙肝 丙型肝炎HC是一种对人类危害重大的疾病，HCV感染的慢性化发生率明显高于乙型肝炎，较乙型肝炎易早期出现肝硬化、HCC，因此，HCV的检测对丙型肝炎病毒感染的早期诊断和指导临床治疗有重大的意义。到目前为止,丙型肝炎检测技术主要有抗-HCV检测、HCV-RNA核酸扩增检测、HCV基因分型、HCV核心抗原的检测以及同时检测抗-HCV和 HCV核心抗原等。.抗抗-HCV的检测的检测 抗抗-HCV的检测化学发光免疫分析法的检测化学发光免疫分析法CIA，或者酶免疫法，或者酶免疫法EIA是最早出现的是最早出现的 HCV检测技术检测技术,可用于可用于HCV感染者的筛查。感染者的筛查。快速诊断测试快速诊断测试(RDTs)可以被用来初步筛查抗可以被用来初步筛查抗 HCV，对于抗体阳性者，应进一步进行，对于抗体阳性者，应进一步进行HCV RNA检测。检测。然而，对于免疫功能不正常的然而，对于免疫功能不正常的 HCV感染感染者者,那么不能检出抗那么不能检出抗-HCV。另外。另外,由于由于“窗窗口期口期 的存在的存在,仍有一定的漏检率仍有一定的漏检率。对于抗。对于抗-HCV的检测的检测,目前仍有改进的潜力。目前仍有改进的潜力。HCV抗原的检测抗原的检测 在缺乏在缺乏HCV RNA检测条件时，可考虑进行检测条件时，可考虑进行HCV核心抗原的检测，用于慢性核心抗原的检测，用于慢性HCV感染者感染者的实验室诊断。的实验室诊断。.HCV-RNA核酸扩增检测技术核酸扩增检测技术(NAT)HCV-RNA是HCV感染、传染性和病毒复制的标志 HCV-RNA水平直接代表患者病毒血症水平 HCV-RNA检测可将窗口期由6-8周缩短至12天 HCV-RNA检测是丙肝早期筛查、诊断和治疗管理最关键的指标 准确的HCV-RNA检测是应答指导治疗策略的保障，可以帮助医生确定停药终点，进而提高治愈率.HCV基基因因分分型型 HCV基因分型的方法有分子生物学和血清学两大类，前者包括DNA测序法、特异型引物扩增法、基因芯片、探针杂交等，后者是合成HCV特异性多肽来检测其特异性的抗体从而区分基因型，HCV基因分型应当在抗病毒治疗前进行。HCV基因型与肝病严重程度有着密切关系，并且对抗病毒治疗产生很大影响。因此，HCV基因分型检测可为HCV感染者的诊断和治疗提供重要的科学依据。HCV1b和2a在中国各地较为常见。.肝纤维化非侵袭性诊断肝纤维化非侵袭性诊断 目前常用的无创诊断方法包括血清学和目前常用的无创诊断方法包括血清学和影像学两大类。血清学方法通常是指包括影像学两大类。血清学方法通常是指包括多种临床指标的模型。其中多种临床指标的模型。其中APRI和和FIB-4简简单易行，但敏感性和特异性不强。单易行，但敏感性和特异性不强。影像学主要是瞬时弹性成像影像学主要是瞬时弹性成像TE，TE是近年开始广泛使用的一种新的影像学无是近年开始广泛使用的一种新的影像学无创诊断方法，对创诊断方法，对HCV肝纤维化分期的诊断肝纤维化分期的诊断较为可靠，对肝硬化的诊断更准确。较为可靠，对肝硬化的诊断更准确。血清学和血清学和TE等影像学无创指标联合应用，等影像学无创指标联合应用，可显著提高纤维化的诊断准确率。当两者可显著提高纤维化的诊断准确率。当两者结果不一致时，建议进行肝活检明确真确。结果不一致时，建议进行肝活检明确真确。.艾滋病 人类免疫缺陷病毒HIV，即艾滋病AIDS病毒，是造成人类免疫系统缺陷的一种病毒。人类免疫缺陷病毒是一种感染人类免疫系统细胞的慢病毒Lentivirus，属逆转录病毒的一种。HIV通过破坏人体的CD4T淋巴细胞，进而阻断细胞免疫和体液免疫过程，导致免疫系统瘫痪，从而致使各种疾病在人体内蔓延，最终导致艾滋病。.病毒复制过程.HIV 感染过程中 HIV 抗原和相关抗体及 CD4+细胞的变化.实验室免疫学检查 1.主要是中度以上细胞免疫缺陷包括：CD4+T 淋巴细胞耗竭：T淋巴细胞功能下降，外周血淋巴细胞显著减少，CD4200/l，正常人为，迟发型变态反响皮试阴性，有丝分裂原刺激反响低下。淋巴细胞功能失调：多克隆性高球蛋白血症，循环免疫复合物形成和自身抗体形成。细胞活性下降.检测HIV感染者体液中病毒抗原和抗体的方法，操作方便，易于普及应用，其中抗体检测尤普通。但HIv P24抗原和病毒基因的测定，在HIV感染检测中的地位和重要性也日益受到重视。抗体检测 血清中HIV抗体是判断HIV感染的间接指标。根据其主要的适用范围，可将现有HIV抗体检测方法分为筛检试验和确证试验。HIV-1抗体的检测，ELISA测定法结果连续两次为阳性者，再行WB法进行确诊确证试验。.HIV P24抗原 HIV-1P24抗原检测可用于HIV-1抗体不确定或窗口期的辅助诊断；HIV-1抗体阳性母亲所生婴儿早期的辅助鉴别诊断。病毒基因 通过检测HIV基因型和表型的变异了解药物变异情况。目前主要采用基因型检测。在抗病毒治疗前进行基因检测，有助于选择适宜的抗病毒药物。.蛋白质芯片蛋白质芯片 蛋白芯片在人的传染病检测方面主要研究对象是较为严重的传染病病原，能同时检测HIV、HBV、HCV联合感染患者血中HIV、HBV、HCV核酸和相应的抗体，有较好的应用前景。.流行性出血热 出血热即流行性出血热又称肾综合征出血热，是由流行性出血热病毒汉坦病毒引起的，以鼠类为主要传染源的自然疫源性疾病。以发热、出血、充血、低血压休克及肾脏损害为主要临床表现。，其病理变化为全身小血管和毛细血管损伤。流行性出血热的病毒具有多嗜性的特点，可以导致患者体内多个脏器官的损伤，临床表现较为复杂，时常出现并发症和不典型病例。.出血热潜伏期一般为23周。典型临床经过分为五期：发热期、低血压休克期、少尿期、多尿期及恢复期。1.发热期 主要表现为感染性病毒血症和全身毛细血管损害引起的病症。起病急,有发热3840、三痛头痛、腰痛、眼眶痛以及恶心、呕吐、胸闷、腹痛、腹泻、全身关节痛等病症，皮肤黏膜三红脸、颈和上胸部发红，眼结膜充血，重者似酒醉貌。口腔黏膜、胸背、腋下出现大小不等的出血点或淤斑，或呈条索状、抓痕样的出血点。2.低血压休克期 多在发热46日，体温开始下降时或退热后不久，主要为失血浆性低血容量休克的表现。患者出现低血压，重者发生休克。.3.少尿期 24小时尿量少于400ml，少尿期与低血压期常无明显界限。4.多尿期 肾脏组织损害逐渐修复，但由于肾小管回吸收功能尚未完全恢复，以致尿量显著增多。第812日多见，持续714天，尿量每天40006000ml左右，极易造成脱水及电解质紊乱。5.恢复期 随着肾功能的逐渐恢复，尿量减至3000ml以下时，即进入恢复期。尿量、病症逐渐恢复正常，复原需数月。.诊诊断断:出出血血热热病病死死率率与与临临床床类类型、型、治治疗疗迟迟早早及及措措施施是是否否正正确确相相关。关。早早期期的的诊诊断断和和治治疗疗措措施施的的改改进进可可有有效效降降低低病病死死率。率。通通常常诊诊断断依依据据主主要要依依靠靠临临床床特特征征病病症症和和体体征，征，结结合合实实验验室室检检查，查，参参考考流流行行病病学学资资料料进进行行诊诊断。断。.1.常规检查常规检查 1血常规早期白细胞总数正常或偏低，血常规早期白细胞总数正常或偏低，34日后即明显增高，多在日后即明显增高，多在1530109/L，异型淋巴细胞在，异型淋巴细胞在12病日即可出病日即可出现，且逐日增多，一般为现，且逐日增多，一般为1020%，局部，局部达达30%以上；血小板明显减少，低血压及以上；血小板明显减少，低血压及少尿期最低，并有异型、巨核血小板出现，少尿期最低，并有异型、巨核血小板出现，多尿后期始恢复。红细胞和血红蛋白在发多尿后期始恢复。红细胞和血红蛋白在发热期开始上升，低血压期逐渐增高，休克热期开始上升，低血压期逐渐增高，休克期患者明显上升，至少尿期下降，其动态期患者明显上升，至少尿期下降，其动态变化可作为判断血液浓缩与血液稀释的重变化可作为判断血液浓缩与血液稀释的重要指标。要指标。2尿常规显著的尿蛋白是本病的重要尿常规显著的尿蛋白是本病的重要特点，也是肾损害的最早表现。尿中还可特点，也是肾损害的最早表现。尿中还可有红细胞、管型或膜状物是凝血块、蛋有红细胞、管型或膜状物是凝血块、蛋白质与坏死脱落上皮细胞的混合凝聚物。白质与坏死脱落上皮细胞的混合凝聚物。.2.血液生化检查血液生化检查 1尿素氮及肌酐低血压休克期轻、中度尿素氮及肌酐低血压休克期轻、中度增高。少尿期至多尿期达顶峰，以后逐渐增高。少尿期至多尿期达顶峰，以后逐渐下降，升高程度及幅度与病情成正比。下降，升高程度及幅度与病情成正比。2电解质血钾在发热期可有降低，休克电解质血钾在发热期可有降低，休克期仍低，少尿期上升为高血钾，多尿期又期仍低，少尿期上升为高血钾，多尿期又降低。但少尿期亦有呈低血钾者。血钠及降低。但少尿期亦有呈低血钾者。血钠及氯在全病程均降低，以休克及少尿期最显氯在全病程均降低，以休克及少尿期最显著。血钙在全病程中亦多降低。著。血钙在全病程中亦多降低。3二氧化碳结合力发热后期即下降，低二氧化碳结合力发热后期即下降，低血压休克期明显，少尿期亦有下降，多尿血压休克期明显，少尿期亦有下降，多尿期逐渐恢复至正常。期逐渐恢复至正常。.3.凝血功能检查凝血功能检查 凝血因子大量消耗，血小板下降，凝血凝血因子大量消耗，血小板下降，凝血酶原和局部凝血活酶时间延长，纤维蛋白酶原和局部凝血活酶时间延长，纤维蛋白原降低。继发性纤溶亢进表现为凝血酶凝原降低。继发性纤溶亢进表现为凝血酶凝固时间延长，纤维蛋白降解物增加及优球固时间延长，纤维蛋白降解物增加及优球蛋白溶解时间缩短。血浆鱼精蛋白副凝试蛋白溶解时间缩短。血浆鱼精蛋白副凝试验验3P试验阳性。试验阳性。.4.特特异异性性抗抗原、原、抗抗体体和和病病原原学学检检查查 早早期期用用免免疫疫荧荧光光试试验、验、酶酶联联免免疫疫吸吸附附试试验验ELISA、胶胶体体金金法法在在血血清、清、尿尿沉沉渣渣细细胞胞可可查查特特异异性性抗抗原。原。检检测测血血清清特特异异性性抗抗体体IgM1：20以以上上和和IgG抗抗体体1：40为为阳阳性，性，恢恢复复期期血血清清特特异异性性IgG抗抗体体比比急急性性期期有有4倍倍以以上上增增高高者者也也可可诊诊断。断。RT-PCR法法检检测测血血清清中中病病毒毒RNA，可可用用于于早早期期的的诊诊断断和和非非典典型型患患者者的的诊诊断。断。.布鲁菌病布鲁菌病 为人畜共患病，以畜传染人为主，人传人的实例少见。1.传播途径 主要为接触性传播，包括饮食、接触患病动物皮毛 2.病症 急性的病人会发高热、关节炎、出汗、另有一些病人会出现肌肉痛等病症 3.危害 可侵犯中枢神经系统，以及引起脑膜炎等并发症，侵蚀骨骼，引起骨骼损伤，甚至让患者丧失劳动能力。.成年人发病男性多于女性，且多集中在 岁。另外，分布于中国北部的病患以农牧民居多，而在中国南方那么主要集中于餐饮效劳者，工人及退休人员，城市地区发病率有所上升。面临如此严峻的形势，加强临床实验室的检测力度并形成统一的筛选及确诊检验模式是十分重要的。.细细菌菌学学培培养养技技术术 细细菌菌学学培培养养技技术术是是临临床床实实验验室室最最常常用用的的别别离离方方法法，是是布布鲁鲁菌菌病病疫疫情情判判定定，临临床床诊诊断断中中最最直直接接的的证证据据。目目前前血血液液中中布布鲁鲁氏氏菌菌的的别别离离率率呈呈上上升升趋趋势。势。临临床床医医生生如如遇遇诊诊断断不不明明的的脑脑膜膜炎炎患患者者，应应考考虑虑脑脑脊脊液液的的细细菌菌培培养养，以以排排除除布布鲁鲁菌菌性性脑脑膜膜炎炎。目目前前细细菌菌学学培培养养是是别别离离布布鲁鲁氏氏菌菌的的“金金标标准准，但但由由于于其其培培养养周周期期长长，别别离离鉴鉴定定困困难难，因因此此易易造造成成漏漏诊诊误误诊诊。.免免疫疫学学检检测测技技术术1.特特异异性性血血清清凝凝集集性性试试验验 目目前前国国内内外外用用于于检检测测诊诊断断布布鲁鲁菌菌病病的的特特异异性性血血清清凝凝集集性性试试验验方方法法主主要要有有平平板板凝凝集集试试验验PA T 、虎虎红红平平板板凝凝集集试试验验 RBPT 试试管管凝凝集集试试验验 SAT 。PA T 和和 RBPT 在在临临床床上上主主要要用用于于早早期期大大面面积积快快速速筛筛查查。2.酶酶联联免免疫疫吸吸附附试试验验ELISA 酶酶的的催催化化效效率率很很高高，可可使使测测定定到到达达很很高高的的灵灵敏敏度度，同同时时优优化化检检测测靶靶点点，大大大大提提高高了了检检测测的的特特异异。3.其其他他血血清清学学检检测测方方法法 补补体体结结合合实实验验CFT 和和抗抗人人球球蛋蛋白白试试验验Coomb s此此外外，荧荧光光偏偏振振技技术术FPA被被认认为为是是检检测测牛牛布布鲁鲁菌菌病病抗抗体体最最稳稳定定的的血血清清学学 方方法法，FPA 技技术术可可以以进进行行人人类类感感染染布布鲁鲁菌菌病病的的快快速速检检测测，且且可可以以对对治治疗疗过过程程及及预预后后复复发发进进行行实实时时监监控控。.分子生物学技术分子生物学技术PCR 技术技术)实时荧光定量实时荧光定量 PCRReal time PCR Real time PCR 技术实现了技术实现了 PCR 技术中技术中定性到定量的飞跃定性到定量的飞跃，具有更强的特异度，具有更强的特异度，更高的自动化程度更高的自动化程度，并且有效地解决了，并且有效地解决了 PCR 的污染问题，的污染问题，Real timePCR 技术技术具有较好的稳定性具有较好的稳定性，特异度和灵敏度，特异度和灵敏度，检，检测时间小于测时间小于 h，重现性好，重现性好，易于标准化，易于标准化，且能对临床治疗的效果进行监测和评估且能对临床治疗的效果进行监测和评估，可作为人类布鲁菌病快速诊断的实用方法可作为人类布鲁菌病快速诊断的实用方法。.真菌新型隐球菌病.梅毒 梅毒syphilis是由梅毒螺旋体Treponema pallidum，TP引起的一种慢性传染病，主要通过性接触和血液传播。TP几乎可侵犯人体所有器官，因此梅毒的临床表现极为复杂，并可通过胎盘传播引起流产、早产、死产和胎传梅毒，危害性极大。由于梅毒的临床表现复杂多样，因此必须仔细询问病史、认真体格检查和反复实验室检查方可及早明确诊断。.当前，梅毒的流行率和发病率在全球范围内均呈现上升趋势。由于梅毒在早期阶段可实现治愈，尽早进行梅毒筛查和诊断，及早预防和治疗，对尽早切断传染源，有效控制梅毒的传播意义重大。实验室中常用的梅毒检测主要分为病原体检测与血清学检测。由于大多数梅毒感染者早期无病症，使得梅毒的病原体检测无从实施；血清学检测成为实验室诊断梅毒的主要手段。.梅毒血清学检测分为：梅毒螺旋体非特异性抗体检测和梅毒螺旋体特异性抗体检测。.检测对象的不同使得临床应用也不同：非特异性试验主要用来监测病情，初筛等，在早期梅毒和梅毒的治疗有较好的应用价值。特异性试验主要用于梅毒确实诊，可以提示感染或既往感染。.筛选试验和确诊试验实验结果解释如下：只有根据实验特点、临床需要来选择试验方法，才能充分发挥其优势。为临床诊断提供有力证据。.梅毒螺旋体IgM抗体检测：感染梅毒后，首先出现IgM抗体，随着疾病开展，IgG抗体随后才出现并慢慢上升。经有效治疗后IgM抗体消失，IgG抗体那么持续存在。TP-IgM抗体不能通过胎盘，如果婴儿TP-IgM阳性那么表示婴儿已被感染，因此，TP-IgM抗体检测对诊断婴儿的胎传梅毒意义很大。.脑脊液检查 脑脊液白细胞计数和总蛋白量的增加属非特异性变化，脑脊液VDRL试验是神经梅毒的可靠诊断依据。病情活动时脑脊液白细胞计数常增高5个/L，因此脑脊液白细胞计数也常作为判断疗效的敏感指标。暗视野显微镜检查 取患者的可疑皮损如硬下疳、扁平湿疣、湿丘疹等，在暗视野显微镜下检查，见到可运动的梅毒螺旋体，可作为梅毒确实诊依据。.根据流行病学病史、临床表现以及实验室检查提高梅毒检测质量，尽早进行梅毒筛查和诊断，及早预防和治疗，尽早切断传染源，控制梅毒疾病传播。.