资源描述
核磁应用培训笔记一、一维H谱实验操作流程1、新建一个实验，可以直接输入New命令，name :样品名称；PROCNO:处 理号；Solvent :不代表锁场的溶剂，只影响最后打印谱图参数中溶剂项的显 示；Expenriment Dirs :标准实验，不代表脉冲系列；User下，可以建立自己的标准实验；H谱的标准实验名称是：proton2、getprosol :把相关的脉冲参数保存在Acqupars表中:AcquparsPL13、锁场，可以直接点击Lock图表选择溶剂后锁场，或者输入命令LOCK空格 溶剂名称直接锁场；锁场的目的4、atma : topshim5、NS输入数值6、rga7、za即zero go的简写Notice :(1) 调谐：做同一样品的不同谱图时需要重新做一次调谐。(2 )当第一次匀场不好的时候，可以输入命令topshim+空格+tunea进行二 次匀场，若多次匀场后仍然不能达到好的状态则需要做三维匀场。(3) 同一溶剂的样品，建议在同一时段做谱，有利于匀场。(4) 匀场不好的原因有以下几个方面：样品中含有顺磁性金属离子高粘度 样品溶液高度太低。8、部分参数的设置(1) eda采样参数设置：可以输入命令ased进入参数设置界面； PULPROG :脉冲系列名称，zg30:30度角激发，zg:90度角激发； AQ-mod :采样模式 TD:采样点数 NS:采样次数 DS:空扫：真正开始采样前先采集的次数，做一维谱时可设为0，二维谱空扫的次数设置非常重要。 TD0，真正采样次数，NS*TD0，如TD0设为10，NS为1024，则总采样次数为 1024*10 SW谱宽，用默认的谱宽即可，其中SW与AQ成反比 O1P，O1，中心频率，其中前者是以ppm为单位，后者是以HZ为单位。最右边：谱宽/2+O1P（2）和脉冲系列有关的参数 DE值，采样结束后等待衰减的时间。做杂核时需要更改。 D1 :弛豫延迟，做定量H谱时需要更改 P1激发脉宽；PL1（dB）:激发功率；9、谱图处理（1）Procpars :窗口函数 efp :指数函数，em、ft、pk三个命令的组合 gfp :高窗函数：gm、ft、pk三个命令的组合 apk :根据当前的样品来调PHC,PHC1，当谱峰有很多鼓包时使用效果不好。Notice : LB值越大信噪比越好，分辨率越差，LB值越小，分辨率越好。LB0是相对于efp函数而言的，当调节LB值为负，信噪比仍然不好时，可用gfp 函数，先更改GB值，再输入GFP命令冲零也可以提高分辨率。（2）定标（3）直接输入plot命令，进入打印界面。（4）如何创建模板C:BrukerTopspinPlotLayouts,先另取名字创建模板，再将模板文件夹下的 默认模板删除，如H谱的默认模板是：1D-Hxwp，先删除该模板，再将 自己创建的模板改为默认模板的名字。二、如何做H谱的定量与标准一维氢谱相比，需要做一下变换1、将脉冲系列zg30改为zg，2、找内标，两个峰挨的很近且基线分离，一般很难找到合适的内标物。3、调整O1R使得O1P在两个峰之间4、NS要足够大，为了保证较好的信噪比，定量最起码要做半个小时以上。5、D15T1,D1要大于5倍的T1，首先要找最大的T1，D1的时间要足够长。三、碳谱：碳谱的标准实验为C13CPD1、getprosol2、atma3、采样参数的设置：谱宽sw 一般设置为250Q1P，NS，TD0,4、rga5、zg6、tr命令：保存数据，继续采样；如tr4,保存最近4次的2倍。7、efp : apk8、ppf :对碳谱的全谱进行标峰。9、Mi+数字+PPF :表示强度低于该数值的不标峰。10、go命令，样品浓度太低的情况下，过夜采集仍然不能得到理想的谱图，第 二天白天需做其他谱图，可在第二天晚上将前一天晚上采集的谱图拖动到当前窗 口，重新放入样品锁场调节后可以输入GO命令进行累加采集。11、和脉冲相关的参数CPDPRG2，通常情况下用Waltz16，做氢谱、碳谱的90度脉冲没有问题， 做杂核时需要更改。Notice :看到碳谱有裂分，首先要考虑是否有同分异构体，再考虑更改 CPDPRG2，选择带bi的参数。四、碳谱定量实验(实验时间相对很长，需要加弛豫试剂以减短实验时间。)1、标准实验选择CBIG , new-ok2、将 zgig30 改为 zgig3、DS:0加弛豫试剂后会影响锁场和匀场。五、DEPT 实验(45、90、135)1、New-C13DEPT90-OK2、getprosol3、修改参数：(1) 改动参数NS，采样次数是普通碳谱采样次数的1/4.(2) Pulseprog查看与脉冲相关的参数，其中NS是4的倍数。DS=8 , NS=4 , SW:谱宽，O1P.4、rga : zgNotice :(1) DEPT45，只出现季碳；DEPT135 :只出现CH(2 ) HALT空格数字(3) SR值，从校正后的普通碳谱的处理参数中copy SR值，复制到DEPT谱 图中，可将DEPT谱图中的化学位移与普通C谱的化学位移对齐。六、如何将多种谱图打印在同一张图上方法一：1、先将全谱图调出并标好化学位移。2、选择1D+1D+1Dxwp打印模板3、在data中，点击ADD，选择实验数据现在的位置，将需要的数据拖入，点 击Apply，确定。此方法的优点是可以对每一张谱图进行修改。、方法二：1、随意拖入一张谱图，输入plot2、全选中，并删除原有谱图3、在DATA里面选谱图，APPLYOK;4、在右侧选择多个谱图叠加的图标，三条重叠的折线；5、在空白处拖动鼠标，出现第一张谱图6、右击选择Edit，选择steaked，输入谱图张数。Spectra : 0*5,0表示左右偏移量，5表示上下偏移量。此方法的缺点是不能单独修改每一张谱图。七、一些补充注意事项1、BBf，探头。2、新安装仪器可以做的核有H、C、P、F、N,可以直接选择标准实验，直接调 用标准模板。P31CPD,全去偶，zgpg30 ; P31 : zg。LOCK之后可以直接输入一系列命令，点击ENTER直接完成。3、做杂核前要先确认两件事情：（1）有无脉宽和功率（2 ）有无标准实验；4、P的化学位移的标定：外标法。把标准品（查找网上文献）放到P样品中测定核磁，将标准品的化学位移定 位为0后看SR值，再将SR值复制粘贴到后续做的P谱图上，再标定化学位移。标准品：85%磷酸溶液。不锁场、不匀场，直接调谐、prosol。不锁场实验：（1）打开BSMS键盘，将lock变成灰色。（2 ） sweep要变成 灰色（即将（1）（2 ）的0N-OFF都OFF掉）（3）atma ; rga ; zg ;八、对于没有标准实验、没有脉宽和功率的杂核如何入手做以B11为例。1、首先查询该杂核的旋磁比、天然丰度，对于天然丰度太低的要求浓度高些， 或者很难做出来。Help NMR GuideNMR Encyclopedia NMR Application NMR penddic Table-点击要做的元素查看旋磁比和天然丰度。2、先借用C谱的标准实验，新建一个实验，当旋磁比为正时标准实验选择 C13CPD，当旋磁比为负时标准实验选择C13IG。点ok。3、更改参数查看Acqpar参数（都是C13的参数）-getprosol （读取C的脉宽和功率） 输入edsp命令-把F1维中的C13改为B11,F2维不变-Default-Save-再 次回到Acqupars参数中-NS （扫描次数X SW（谱宽，尽量设宽些400） ,O1P （先赋予0 ） +-200位置找峰，D1（经验值）2S,对0也适合，（事先查D1值， 太大可加弛豫试剂）-lock , topshim-输入atmm （不能用atma，手动调谐， 第一次做核时必须用手动调谐。）-出现Tuning对话框，若点找不到会动的 倒峰，则点击图标，放大范围，都调好后点FileSave positionExit-输 入atma ; rga ; zg，弹出rga对话框，点01256)SW,O1P;D9 ：自旋锁定 时间，默认值为，即混合时间（设短的话可能会无法调整相位）2、lock3、atma ； topshim ； getprosol ；4、谱图处理（1）输入命令xfb变换谱图（2）调等高线（3）调相位，先调0级相位，再调1级相位。（4）校准（三）实验三1、New-NOESYPHSW-适用于大分子2、NS : 8*N; DS:16*N;D8混合时间，空间v 5a，峰的强度与距离的六次 方成正比。对于大分子，D8= ；对于小分子：D8=。Notice :分子量越大，弛豫时间越短，分子量越小，弛豫时间越长，温度越高 弛豫时间越短。3、lock4、getprosol5、atma ； topshim ； rga ； zg（四）实验四1、new，标准实验选择ROESYPHSW,PH :通过相位循环可以减掉一些峰。2、具体实验步骤与前面的实验步骤大致相同，通过查看与脉冲系列相关的参数 对参数进行设置。接着 LOCK,getprosol ； atma ； topshim ； rga ； zg3、Notice :输入 Set 命令，选中 Enable automatic command spooling 方 框内打钩。可以针对一个样品的自动排列做多个实验。（五）实验五：J-Resolved同核实验。1、newcosy45sw （先借用）2、Pulprog : jresqf（消除化学位移，保留耦合常数）3、NS:4*N ；DS：16；4、F2维（化学位移）；F1维（耦合常数）SW=20，SWH = 50HZ，O1P只针对F2设定值，F1不用设。5、getprosol6、lock7、atma ； topshim ； rga ； zg ；（六）实验六H-C相关的二维谱1、New，选择标准实验：HSQCETGPSISFJET表示采样模式为回波反回波采样; GP梯度；SI灵敏度增强；SP形状脉冲，让激发更均匀。2、输入命令eda，进行采样参数设置：NS=1*N,DS216,TD,SW谱宽（F2为H 谱谱宽，F1为C谱谱宽）；输入命令ased可进行与脉冲系列有关的参数设置，CNST2 :单位为H乙C 和H直接耦合常数的平均值。GPZ2 , C:% ,N15,%，若有些杂核没有显 示，则改核后可以输入命令gradratio查看3、lock4、getprosol；atma；topshim5、rga；zg（七）实验七1、New-HMBCGPND, ND表示在采样时间内不进行去耦。2、（1）采样参数设置 NS=2 , DS=16,O1P=,SW=（2 ）与脉冲系列相关的参数设置，CNST13，远程耦合常数，系统默认一般 为8H乙可以适当地减小，当看不到交叉峰时，可能该值设大了，也可能是因 为二面角的原因。，通过耦合常数可以计算二面角的大小。3、lock4、atma；topshim；rga；zgNotice : HMBC谱图中可能存在HSQC的残余峰。（八）实验八，在HMBC二维谱中去除HSQC的残余峰。1、newHMBCGPND,Ttitle : J-Filter HMBC2、更改脉冲系列及参数将 PulprogHMBCGPL2ndqf（1 ）输入命令 eda，更改采样参数，NS=2*N,DS=16 , QF , TD（分 F1, F2）, O1P（2 ）输入命令ased ,更改与脉冲系列相关的参数， CNST6:120HZ;CNST7180H乙在该区间内HSQC残余峰去除。CNST13，百 分比根据右侧提示填写。3、getprosol4、lock5、atma ; topshim ; rga ; zg十、完整的二维谱图处理过程1、输入xfb，谱图变换；2、调入一维谱，选择F1+F2 ,-ok3、clev32，修改等高线。4、校正相位（NOESY、ROESY、TOCSY、HSQC需要校正相位，其他的不需 要）点相位校正图标，选几个点，ADD，先校正红线所在的位置。5、定标：先定好一维谱，读出化学位移，再点击定标图标，找出中心位置进行 定标。6、去除噪音，（T1噪音的去处），左边没有信号的投影。Projeditupdateok第一个正峰第二个负峰，输入sub2。7、可以通过选择性预测提高F1的分辨率,edpprocparsfounerME_mod选择LPfr（ LP表示线性预测，fr表示向前的）NCOEF（ HH相关选100 , HC相关选32 ）。此处理的缺点是可能产生鬼峰。十一、核磁的维护(一)硬件维护1、机柜里面的滤网一般一年清洗一次2、建议每周重启电脑一次3、打开机柜需要带放静电手环4、每次严格开关机，关机开机后要做一次CF。5、90度脉冲校准正常情况下半年做一次，对新仪器可能需要三个月做一次。6、field的校准，正常情况下半年一次，对于新仪器三个月做一次。(二)磁体及软件维护1、1H 90度脉冲的校准,标样：%EB in CDCL3J(1) new，建立实验，选择PROTON标准实验，title : 1H90cal(2 ) lock(3 ) getprosol ; atma ; topshim(4) 更改参数 输入命令eda更改采样参数，将zg30-zg ;NS=1, DS=0;O1P=(即设定在乙基的四重峰中央)。 输入命令ased更改与脉冲系列相关的参数，D1=20S,RG=16; P1=记录下来(脉冲作用时间)改为2;PLW1机PL1保持不变。Notice :先把原来的P1值，再将P1赋予一个比较小的时间，eg , 1us先试做 谱看看。(5) rga;zg(6) efp; apk，处理谱图，并找到四重峰，使当前窗口只出现四重峰。(7 )输入命令dpl ,定义打印区间。(8 )回到处理参数procpars，将PH_mod中的模式改为PK(9 )输入命令POPT，脉冲的功率为脉宽的优化模式。勾选第三个选项即perform automatic baseline(PARAMETER写上 P1QPTMUM 中选zero , STARTVAL开始值：比原有值的三倍大一些即大于3*； ENDVAL结束值：比 原来的四倍大一些，即大于4*+4； INC步长一般定为2，36、38等等)，填 好以上各参数后，点击StaroptimlzeiSaveTokT开始做实验若出现负 值的峰，说明已经越过180度得电，点击skip current optim_停止实验。结果存在TITLE里面，不用记录。在Acquars中的Pl(us)得到值/4, 得到的值其实是零点的值，即360度得值，除4即可得到90度的值。(10 )更改prosol表，输入命令edprosol，将左右通道的pulse值改过来 Saveselect all relevant ok输入密码okyesokyesok，关闭窗 口。2、C13的90度脉冲，标样：ASTM。(参考讲义P48 )(1) newPROCNO(处理号一定为1)C13CPD(标准实验名称)(2 ) getprosollock 溶剂名称atma ; topshim(3 )修改参数，输入命令eda修改采样参数：将zgpg30改为zgpg ;NS=1;DS=0 ,O1P=67 ,O2P=输入命令ased修改与脉冲系列相关的参 数：RG = 32 或 64;D1(S)=20; P1先记录下原始数值如，先赋予小点的值如2us(4 )输入zg命令直接采样(5) efp; apk让窗口只出C的信号，输入dpl ,以下步骤与H的90度脉冲一 致，可参考H的90度脉冲。Notice :测完后要到prosol表中进行更新。3、如何计算当前样品的90度脉冲值(1) new设定好参数之后做pulsecal(2 )输入命令pulsecal , enter后可以计算当前样品的90度脉宽，测完后点 击close。第一次做pulsecal命令时会弹出对话框该命令正在编译直 接close掉就可以了。4、3D匀场，标样：90%水+10%重水。(2 ) lock H20+D2O(3 ) atma ; topshim gui (可以去除Y方向的匀场梯度)(4) 选 3D-After : ZX-Y-XZ-YZ-Z (不做 Before )Star结束后点 close。(5) 选一 常做的样品，做一个维 H 谱,lockgetprosol ;atma ;topshim(6 )输入wshi在filename中输入文件夹名称writecloseNotice :怎样判断匀场好不好看DMSO、甲醇、丙酮的多重峰看TMS的 卫星峰看溶剂本身的峰信号，越窄越好。5、lock field 的校准方法一：锁场锁氘信号，标样用10%的EB in CDCl3(1) 进样(2 ) lock CDCl3(3) 进入BSMS键盘Tocklevelfieldi读取field值并记录下来()点 ON-OFF脱锁输入命令lopo , enter进行锁场参数的优化选溶剂，点ok 输入(锁场后的值)。Notice :红线和绿线的交叉点在锁场的最中间，蝴蝶线完全对称，通过更改 phase值可以使其变得对称，从交叉点出来的第一个峰都是向上的。(4 )点击stanby，命令行中输入edlock，点折线图标进行保存。方法二：什么溶剂都锁不上的情况下使用该方法(1) 放H20+D2O的标样进去(2) 将 sweep 的 ON-OFF 关掉(3) 修改采样参数，建立一个H 谱 zg30 , NS=1, DS=0 ,O1P=, SW=30 40ppm(4) atma ; rga ; zg ;(5 ) efp ; apk(6 )找到水峰，看水峰与偏离了多少HZ，在procpars中将PH_mod改为pk ;(7 )输入命令gs，点实时变化谱图，打开BSMS键盘，进入locklevel里面， 调节filed值，使水峰到达的位置，到达后点Standby，输入命令edlock , 点折线图标，保存。(8) 将6，界面stop掉(9) 用CDCl3样品做校准。十二、一维选择性激发实验1、实验一：针对分的比较开的峰(1) 新建一个实验，做一个一维谱。(2) 点击积分符号，在自己想要的信号上，对其进行积分。(3) “Save as veg”右击保存图标，保存。(4) 输入 buttonnmr，选择 select.(5) 点击set Gr ROESY-OK-输入实验名称后点OK-OK:不能再更改参 数，直接采样;cancel只是建立实验还可以修改参数。本例中选cancel。(6) 修改 NS=8%N , DS=4*N(7) rga;zg(8 ) ef-相位校正，一般会出现三种信号：相关信号、吸收型信号、色散信号。2、实验二：针对重叠比较严重的多重峰。CSSF:chemical shift 化学位移，selective filter。(1) 进样，采集一个一维谱(2) 找到重叠峰，拷贝其中的一个化学位移：所关心的峰的中间位置。(3) 新建一个实验，修改O1P为前一步骤的化学位移值。(4 )更改脉冲系列(pulprog )，选择sel -ok(5) 查看参数，修改NS=2*N,DS=16 , TD0=816，部分参数根据右侧提示 修改。CNST2=4(此值取决于峰的重叠程度)(6) rga;zg3、实验三(1) 在实验二的基础上，输入命令i,I命令表示做同样的实验。(2) 更改脉冲系列，将-(2表示第二个版本，为了选择峰；带zs表示能量子 激发；di自旋锁定，cosy峰为了找相关谱)(3) 更改参数D9 (混合时间X NS、DS、TD0等参数。(4) rga;zgNotice : cosys tocsy、noesy、roesy 对角峰、交叉峰都有；hsqc、hmbc 没 有对角峰，只有交叉峰。十三、溶剂峰的压制1、只压制一个峰(1)做一个一维谱，找到要压制的峰，复制化学位移。(2 ) new-标准实验名称为：WATERSUP对应的脉冲系列为NOESYGPPRId -ok(3) 设置实验参数，D1 :低功率、长时间的功率，关键设置参数D1和PL9。 对于NS、DS无严格要求；PL9=60dB (该值越大，实际功率越大)； D1=2s(时间越长，频率覆盖范围越窄)；O1P的值直接粘贴步骤一复制的 化学位移值，谱宽要足够大。(4 ) getprosol ；2、压制两个峰(1) edc-标准实验名称：LC1D12-OK(2 ) O1P:压制峰1的中间位置的化学位移值(谱图的中间)O2P :压制峰2的中间位置的化学位移值。(3 ) getprosol(4) NS=8*N,DS=4,PL9=60(5) rga；zg3、如何压制多个峰(1) new-LC1DCWPS(标准实验名称)(2) 修改参数NS、DS、SW(3 ) getprosol(4) 输入命令L30(即压制峰的个数，如N)(5) 输入命令xaua (自动采集一个一维谱)，压制N个最强的峰4、水峰的压制(与压制一个峰的步骤是一样的)(1) newWATERSUBNOESGPPR1d(2) O1P 的确定，NS、DS、D1、PL9(3) getprosol(4) lock(5 ) atma ; topshim ;(6 ) RGA-RG，记录 RG 值(7) rga; zgfpallapk(8) 更改O1值(9) rga;zg(多次循环，直到水峰的压制达到好的状态)5、实验五(1)edc( new )-NOESYPR1D(标准实验名称)(2 ) D8=;NS、DS(根据提示确定)；O1(O1P=、D11=30ms=, D1=2S;PL9=5060Db(不宜给太大的值)(3) getprosol(4) lock(5) atma;topshim;rga;zg拓展实验：输入I命令-NOESYGPPR1d (加梯度场实验)，更改梯度参数。Notice :加梯度场对锁场相位要求比较高。十四、Topspin软件介绍1、通过命令re、rep、rel、repl+空格+数字打开文件2、rel:打开最后一个实验名称下的实验号。Repl:实验号下面的某一处理号。3、命令expl :按照或者版本的统一存放数据。4、命令.all5、E命令，选择要看的区域6、批处理:processingisenal processingFind 找到实验名称next;efp ; apk ; ppf （标峰）（输入一系列命令符）iexcuteiclose。Notice : LB增宽因子指数窗函数。7、批处理积分（intser批处理积分命令）（1）先对第一张谱图进行积分并保存（2 ）输入命令intser（3）选择第几个实验inext（4 ） options （ calibrate :选定某一个位置；Normalize sum of integrals 归 化法）i第几个峰i定义几个iok，归一化值加和多少，可以自己增。8、增加一个处理号（wrp命令）Corl dram预测化学位移9、去卷积（去卷积的峰保留在999的处理号上面）AnalysisiDeconvolutioniokioption（用什么函数（use lorent zian shape ）选择区域（阈值）iok10、进入topspin用户名和密码的设置Set 命令 ioptionsiadmmistrationilock topspin user interface11、电子签名：Electromic signature creation，输入命令 esign12、audit跟踪文档，可以看到所有的操作13、更改layout的三种途径输入命令layoutcontrl + P处理参数中的 Automationilayout14、模板保存的路径，C:Brukerplotlayouts15、stack1d多个谱图叠加16、parplot参数修改17、输入命令almana。打印化学位移18、利用NMR Guide自学：NMR Guide-输入关键词一搜索19、Helpmanuals1D2D step-by-step basic 多利用资源自学。十五、T1、T2的测定1、1H的T1的测定(做二维时也需要控温)(1)做一个一维H谱(目的是看看匀场好不好有没有合适的谱宽和O1P )Newgetprosollockatma ;topshim ;NS=1;DS=0 ;rga ;zg-efp ; apk(2 )输入命令Iexpno :完全拷贝当前实验的所有参数，只是实验号加1,目的 是为了谱宽和O1P都不变。，一一r(3) 进入采样参数栏，将zg30改为t1ir (实际是假二维)一点图标(目的是将其改为二维)，弹出对话框，点OK到脉冲参数里面看采样参 数：NS=8*N(此参数设置是实验的关键)，DS=4 , FnMODE选undefined TD(f1:变换等待时间，一般给10即可；f265536 ) ,SW(F2:氢谱的谱宽， 不变；F1不用管)一点击左侧LIST，找到VDLIST,自己定义一个VDLIST,edit (填十个点，这是个点必须包含在弛豫时间内，前面的点密集些，后面的点系数 些，如,，,135,10 )其中最大值的确定是关键，要保证做出来的曲线变化要么 是向上的一个平台，要么是向下的一个平台。设置好后保存一回到与脉冲相关的 参数上，D1(S) = 10 , D1值必须要大于或者等于VDLIST中设置的最大值，设置 好 VDLIST 后rga ; zg(4) 数据处理更改处理参数(procpars ) SIF1的一定是偶数，如16,其中SI(F1) TD(F1); SI(F2) TD(F2);输入命令xf2 (表示只对f2做傅里叶变换)一点击 相位调节图标，将十字线放在最下方，点鼠标右键选ADD (只需选一个点) 点R图标：出现氢谱，只需调节好氢谱的相位一保存，退出一返回处理参数 propars中，将F2维中的PH_mod改为PK一点Analysis中的T1/T2”图标， 进入右侧界面一点第一个图标折线FID”，弹出对话框，选spectrum，弹出下 个对话框，slice , number=1, ok点第二个图标peaks ranges :弹出对话 框，选manual integration，弹出另一对话框，点ok，进入积分模式，选择峰 并进行积分一积分后点击带A的保存”图标，选第三个选项Export regions to relaxation module and ret点第三个图标：relaxtion , widowsfiting funtion uxnmrtllistfile name : vdlist点数是前面设置的点数10，检查以 上三项无误后输入ok，点击沥”图标，全部点拟合曲线一查看拟合曲线一输 入plot命令一点击T1/T2，拉动左键。2、1H的T2的测定(自选回波)(1)做一个一维H谱(目的是看看匀场好不好有没有合适的谱宽和O1P )Newgetprosollockatma ;topshim ;NS=1;DS=0 ;rga ;zgefp ; apk(2 )输入命令Iexpno :完全拷贝当前实验的所有参数，只是实验号加1,目的 是为了谱宽和O1P都不变121(3) 修改脉冲程序，改为cpmg，将一维模式改为二维模式。(4) 在与脉冲相关的参数里面查看NS、DS、Fnmode的定义(5) 修改 NS=8*N,DS=16,TD(F2=65536 , F1=10), Fnmode:Nodefined , SW不变。(6 )在LIST中，编辑VIDLIST (表示的是循环次数)表，如： 2,10,20,50,100,200,300,500,750 ,(最后一个值的确定根据 D2O 来计算， 是关键)，单个循环时间=2D2O+P180保存。(7 )回到采样参数中，查看和脉冲系列相关的参数，D2O稍微大于50*P2 (注 意单位换算),D1值的设定，表示弛豫的恢复时间，与T1有关，D15T1, 本例中D1=10s ;测T2实验中的关键参数有：D2ONS、DSTDS1 维VVLIST的设定，最后一个循环次数由D2O决定。(8) rga;zg(9 )谱图处理(与T1的处理过程类似，唯一区别是拟合出来的是循环的次数)更改处理参数(procpars ) SIF1的一定是偶数，如16,其中SI(F1) TD(F1); SI(F2) TD(F2);t输入命令xf2 (表示只对f2做傅里叶变换)-点击 相位调节图标，将十字线放在最下方，点鼠标右键选ADD (只需选一个点)- 点堂图标：出现氢谱，只需调节好氢谱的相位-保存，退出-返回处理参数 propars中，将F2维中的PH_mod改为PK-点Analysis中的T1/T2”图标， 进入右侧界面-点第一个图标“折线FID”，弹出对话框，选spectrum，弹出下 一个对话框，slice , number=1, ok-点第二个图标peaks ranges :弹出对话 框，选manual integration，弹出另一对话框，点ok，进入积分模式，选择峰 并进行积分积分后点击带A的保存”图标，选第三个选项Export regions to relaxation module and ret-点第三个图标：relaxtion , widowsfiting funtion uxnmrtllistfile name : vclist点数是前面设置的点数10，检查以 上三项无误后输入ok，点击沥”图标，全部点拟合曲线-查看拟合曲线-输 入plot命令-点击T1/T2，拉动左键。Notice :此时得到的T2不是真正意义上的T2，而是循环次数，因此T2 的实际值计算公式为：如本例中得到的值为，则T2的实际值=* ( 2D2O+P180 ) =* ( 2D2O+P2 ) =* ( 2*+*10-6S ) =151ms，注意单位换算，P180 即为 P2。C的T1的测定：脉冲系列选择tlirpg。十六、如何设置命令的自动排列(1 )输入 set 命令-Adiministration，勾上 Enable automatic command sppoling-ok(2 )set-more preferences -status bar prefrences -change 勾选需要显 示的栏目-Apply-ok-最下方空白处右击并将Acquisition bar on/off 关掉状态栏，关掉后再打开。十七、如何建立宏命令的图标(1 )输入edmac命令，edmc编辑宏命令，edmac+空格+宏命令名称输入 efpapk.AllAbSNppf-点file工具栏保存关闭(2 )在菜单栏(目标栏)点右键，选择Add user defined button 出现对 话框Add/modify a button with text label(文本)Add/modify a button with an anicon (图标)(3) Abs :自动积分；AbSn基线调整。十八、H-P相关谱(1) new Acetone，标准实验名称：hmbcgpnd ( nd表示在采样过程中对 C13不去偶)(2 )更改参数：输入命令 EDSP,将 13C 改为 31PDefaultSaveCloseo(3 ) getprosol(4 )更改采样参数sw (f1) =400 :ns=2*n , DS=16 :NUC1, f1 改为 31P : O1RO2P=-50;更改与脉冲系列相关的参数：CNST13 : (BC,关键参数)凡是带梯度的 实验，异核相关相关要设好核的梯度场，输入gradratio (改核后再修改)单 出对话框，显示三个数值，依次填入梯度场中的参数设置中。(5 ) lock : acetone(6 ) atma ; topshim ; rga ; zg(7)输入乂化处理，dev32(8 )当右侧谱宽出现几万的值的时候，输入sref,回车，close , close。(9) 定标Notice : Nucleus1中的nucl的OFF改为所要做的杂核。十九、变温实验(1) 50C以下，用塑料转子即可，若大于50C时，要用陶瓷转子，做高温变 温实验时，气流量要设置的大一些，并用惰性气体保护线圈。气流量要大陶 瓷转子用惰性气体保护线圈。(若气流量太小，会导致样品管底部温度与上部 温度不一致，导致梯度气流量大，等待时间也短。)放样品先锁场，锁好场后调大气流量，调到气流量脱锁时，再将气流量调 小到能锁场即可。高温实验：温度不能达到或者超过溶剂的沸点，最高温度要低于溶剂沸点的 10 20C，加热功率值建议调到7%左右。(2) 低温实验在将铜管插入低温杜瓦之前，先将铜管连接探头与高纯氦，要 用高纯氦吹十分钟左右，再迅速将铜管插入液氮杜瓦瓶中。夏天的时候需要把气流量开大些。(3) 输入命令edte (温度控制),probuheater加热功率值建议3% 5%。高 温和低温实验都要求气流量大及加热功率要大Gas flow :常温控温，建议400 ； 其他控温，建议500 ；BCU:低温附近；self tune :温度设好加热功率设好。二十、锁场锁不上的原因 选错溶剂 锁线很粗：溶剂高度太低或者正常关机开机一次。 弛豫试剂加多了。下方状态栏，POWCHK:自检功能；spooler :命令的自动排列；BSMST匀场线 圈温度。二十一：如何开关POECHK ：(做cf的时候可以打开或者关闭)二十二、cf计算机与机柜之间的通讯是否顺畅(关机后开机需要做一次CF)输入命令Cf输入密码brukereditnext (有异常情况可以拷贝给工程师) next ； security , enable peak power check ( POWCHK )后的方框打钩。 next restore , save , next amplifier 功放，对应三块， X150W,H60W,2H20W检查连线是否正确，savenextexpinstall :安装标 准实验，标准脉冲系列edsolv :编辑溶剂后saveedhead更换探头后要做， 保证连线正常。edprosoledlockedscon不能更改。finish二十三、添加溶剂(1 )输入命令edsolv编辑溶剂信息ok(2 ) edlock，找一个最接近的选中，点击new solven图标，选(1)中所填 的溶剂，ok。(3)添加distance，在其他溶剂中加所要添加的溶剂，读取化学位移，适当地 增大 lock power。二十四、icon的使用1、输入icon命令：routine spectroscopy :可以进行一步一步的操作； Automation :自动进样器；ToolBox生物大分子；configuration设置Configuration : user settings :设定新用户，可进行权限的设置，如可以进行 哪些实验，能改哪些参数。Automation自动进样器相关的。Accounting :统计实验数目及实验时间。（1）建立新用户：在Additional users中建立，建立好后再退出，重新打开后 点save即可激活，将鼠标放在用户上即可对其进行设置。右边列表即可限定用 户可以做哪些实验、修改、删除、更改顺序。N :单一实验；C :组合实验。 Experiment list（组合实验要针对二维实验，若有活泼H尽量避免做组合实验， 适合做单一实验。输入命令wpar可以建立标准实验，存在user的路径下。（2）permissions用户权限设置：将priotity（优先权）打钩即可插队。Archive Data数据备份；Exit（ Icon NMR）退出并输入密码；Originator :对 用户进行分类。Manual lock/shim:是否可以手动操作；print spectrum（3）Data set Names，data Directorise（4）othersettings（5）AutomationMaster switches :manunal Inject/Eject，手动自动进样，holder 设为 1 ；Enject last sample in queue :是否弹出最后一个样品。（6）lock/shim options,solvent/probe dependcies:每一次用 ICON之前需要用匀场文件，直接拷贝。（7）在parameters中可以更改所有参数，ICON界面（8）批处理
展开阅读全文